Name: germ cell transplantation and testis tissue xenografting in mice
Uploaded: 2012-02-06T12:00:00
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著者の研究室からの作業はUSDA / CSREES / NRICGP（2007-35203-18213）によってサポートされている。NIH / NCRR（2 R01 RR17359-06）、NIH / NIEHS（1 R21 ES014856-01A2）とアルバータ州革新 - 健康ソリューション。

マウスではPART Aの生殖細胞移植 1。レシピエントマウスの準備<ol><li>受信者はドナー精巣細胞に（いずれかの遺伝的にドナーにマッチした、または免疫不全）、免疫学的に寛容でなければなりません。 </li><li>受信者のいずれか自然に精子を欠いている（例えば、W / W Vマウス）または内因性の生殖細胞が枯渇しなければなりません。生殖細胞の枯渇は、照射?...

<ol>
	<li>Brinster, R. L., Avarbock, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Germline+transmission+of+donor+haplotype+following+spermatogonial+transplantation.">Germline transmission of donor haplotype following spermatogonial transplantation.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 91 (24), 11303-11303 (1994).</li><li>Brinster, R. L., Zimmermann, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spermatogenesis+following+male+germ-cell+transplantation.">Spermatogenesis following male germ-cell transplantation.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 91 (24), 11298-11298 (1994).</li><li>Nagano, M., Avarbock, M. R., Brinster, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pattern+and+kinetics+of+mouse+donor+spermatogonial+stem+cell+colonization+in+recipient+testes.">Pattern and kinetics of mouse donor spermatogonial stem cell colonization in recipient testes.</a> Biology of Reproduction. 60 (6), 1429-1429 (1999).</li><li>Nagano, M., Brinster, C. J., Orwig, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+mice+produced+by+retroviral+transduction+of+male+germ-line+stem+cells.">Transgenic mice produced by retroviral transduction of male germ-line stem cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 98 (23), 13090-13090 (2001).</li><li>Ryu, B. Y., Orwig, K. E., Oatley, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+generation+of+transgenic+rats+through+the+male+germline+using+lentiviral+transduction+and+transplantation+of+spermatogonial+stem+cells.">Efficient generation of transgenic rats through the male germline using lentiviral transduction and transplantation of spermatogonial stem cells.</a> Journal of Andrology. 28 (2), 353-353 (2007).</li><li>Hess, R. A., Cooke, P. S., Hofmann, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanistic+insights+into+the+regulation+of+the+spermatogonial+stem+cell+niche.">Mechanistic insights into the regulation of the spermatogonial stem cell niche.</a> Cell Cycle. 5 (11), 1164-1164 (2006).</li><li>Oatley, M. J., Racicot, K. E., Oatley, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sertoli+cells+dictate+spermatogonial+stem+cell+niches+in+the+mouse+testis.">Sertoli cells dictate spermatogonial stem cell niches in the mouse testis.</a> Biology of Reproduction. 84 (4), 639-639 (2011).</li><li>Nagano, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homing+efficiency+and+proliferation+kinetics+of+male+germ+line+stem+cells+following+transplantation+in+mice.">Homing efficiency and proliferation kinetics of male germ line stem cells following transplantation in mice.</a> Biology of Reproduction. 69 (2), 701-701 (2003).</li><li>Kubota, H., Avarbock, M. R., Brinster, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+factors+essential+for+self-renewal+and+expansion+of+mouse+spermatogonial+stem+cells.">Growth factors essential for self-renewal and expansion of mouse spermatogonial stem cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 101 (47), 16489-16489 (2004).</li><li>Oatley, J. M., Avarbock, M. R., Telaranta, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identifying+genes+important+for+spermatogonial+stem+cell+self-renewal+and+survival.">Identifying genes important for spermatogonial stem cell self-renewal and survival.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 103 (25), 9524-9524 (2006).</li><li>Dobrinski, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Germ+cell+transplantation+and+testis+tissue+xenografting+in+domestic+animals.">Germ cell transplantation and testis tissue xenografting in domestic animals.</a> Animal Reproduction Science. 89 (1-4), 137-137 (2005).</li><li>Dobrinski, I., Avarbock, M. R., Brinster, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+germ+cells+from+rabbits+and+dogs+into+mouse+testes.">Transplantation of germ cells from rabbits and dogs into mouse testes.</a> Biology of Reproduction. 61 (5), 1331-1331 (1999).</li><li>Honaramooz, A., Snedaker, A., Boiani, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+from+neonatal+mammalian+testes+grafted+in+mice.">Sperm from neonatal mammalian testes grafted in mice.</a> Nature. 418 (6899), 778-778 (2002).</li><li>Rodriguez-Sosa, J. R., Dobrinski, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+developments+in+testis+tissue+xenografting.">Recent developments in testis tissue xenografting.</a> Reproduction. 138 (2), 187-187 (2009).</li><li>Dobrinski, I., Rathi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ectopic+grafting+of+mammalian+testis+tissue+into+mouse+hosts.">Ectopic grafting of mammalian testis tissue into mouse hosts.</a> Methods in Molecular Biology. 139, 450-450 (2008).</li><li>Rodriguez-Sosa, J. R., Schlatt, S., Dobrinski, I., Seli, E., Agarwal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testicular+tissue+transplantation+for+fertility+preservation.">Testicular tissue transplantation for fertility preservation.</a> Fertility Preservation: Emerging Technologies and Clinical Applications. , 331-331 (2011).</li><li>Rathi, R., Honaramooz, A., Zeng, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Germ+cell+fate+and+seminiferous+tubule+development+in+bovine+testis+xenografts.">Germ cell fate and seminiferous tubule development in bovine testis xenografts.</a> Reproduction. 130 (6), 923-923 (2005).</li><li>Rathi, R., Honaramooz, A., Zeng, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Germ+cell+development+in+equine+testis+tissue+xenografted+into+mice.">Germ cell development in equine testis tissue xenografted into mice.</a> Reproduction. 131 (6), 1091-1091 (2006).</li><li>Kim, Y., Selvaraj, V., Pukazhenthi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+donor+age+on+success+of+spermatogenesis+in+feline+testis+xenografts.">Effect of donor age on success of spermatogenesis in feline testis xenografts.</a> Reproduction, Fertility, and Development. 19 (7), 869-869 (2007).</li><li>Arregui, L., Rathi, R., Zeng, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenografting+of+adult+mammalian+testis+tissue.">Xenografting of adult mammalian testis tissue.</a> Animal Reproduction Science. 106 (1-2), 65-65 (2008).</li><li>Schlatt, S., Honaramooz, A., Ehmcke, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limited+survival+of+adult+human+testicular+tissue+as+ectopic+xenograft.">Limited survival of adult human testicular tissue as ectopic xenograft.</a> Human Reproduction. 21 (2), 384-384 (2006).</li><li>Shinohara, T., Avarbock, M. R., Brinster, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=beta1-+and+alpha6-integrin+are+surface+markers+on+mouse+spermatogonial+stem+cells.">beta1- and alpha6-integrin are surface markers on mouse spermatogonial stem cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 96 (10), 5504-5504 (1999).</li><li>Kanatsu-Shinohara, M., Toyokuni, S., Shinohara, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD9+is+a+surface+marker+on+mouse+and+rat+male+germline+stem+cells.">CD9 is a surface marker on mouse and rat male germline stem cells.</a> Biology of Reproduction. 70 (1), 70-70 (2004).</li><li>Ryu, B. Y., Orwig, K. E., Oatley, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+aging+and+niche+microenvironment+on+spermatogonial+stem+cell+self-renewal.">Effects of aging and niche microenvironment on spermatogonial stem cell self-renewal.</a> Stem Cells. 24 (6), 1505-1505 (2006).</li><li>Costoya, J. A., Hobbs, R. M., Barna, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Essential+role+of+Plzf+in+maintenance+of+spermatogonial+stem+cells.">Essential role of Plzf in maintenance of spermatogonial stem cells.</a> Nature Genetics. 36 (6), 653-653 (2004).</li><li>Morrow, C. M., Hostetler, C. E., Griswold, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ETV5+is+required+for+continuous+spermatogenesis+in+adult+mice+and+may+mediate+blood+testes+barrier+function+and+testicular+immune+privilege.">ETV5 is required for continuous spermatogenesis in adult mice and may mediate blood testes barrier function and testicular immune privilege.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1120, 144-144 (2007).</li><li>Zeng, W., Snedaker, A. K., Megee, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preservation+and+transplantation+of+porcine+testis+tissue.">Preservation and transplantation of porcine testis tissue.</a> Reproduction, Fertility and Development. 21 (3), 489-489 (2009).</li><li>Jahnukainen, K., Ehmcke, J., Hergenrother, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+cold+storage+and+cryopreservation+of+immature+non-human+primate+testicular+tissue+on+spermatogonial+stem+cell+potential+in+xenografts.">Effect of cold storage and cryopreservation of immature non-human primate testicular tissue on spermatogonial stem cell potential in xenografts.</a> Human Reproduction. 22 (4), 1060-1060 (2007).</li><li>Rathi, R., Zeng, W., Megee, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maturation+of+testicular+tissue+from+infant+monkeys+after+xenografting+into+mice.">Maturation of testicular tissue from infant monkeys after xenografting into mice.</a> Endocrinology. 149 (10), 5288-5288 (2008).</li><li>Honaramooz, A., Li, M. W., Penedo, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accelerated+maturation+of+primate+testis+by+xenografting+into+mice.">Accelerated maturation of primate testis by xenografting into mice.</a> Biology of Reproduction. 70 (5), 1500-1500 (2004).</li></ol>

1。生殖細胞移植生殖細胞移植は、細胞集団中の精子幹細胞の存在（SSCS）の明確な確認のための唯一の機能的アッセイを提供しています。唯一のSSCはに家庭や基底膜でのSSCのニッチを植民地化とドナー由来の精子形成を開始することができます。生殖細胞移植は、前例のない形でSSCを勉強して操作することが可能になりました。技術は、SSCの4の遺伝子操作を介し?...

<table border="1"><tbody><tr><td> 試薬の名前 </td><td> 会社 </td><td> カタログ番号 </td></tr><tr><td>コラゲナーゼ（タイプIV） </td><td>シグマ</td><td> C5138 </td></tr><tr><td>トリプシン-EDTA </td><td>インビトロジェン</td><td> 25200-056 </td></tr><tr><td> DNaseIを</td><td>シグマ</td><td> DN25 </td></tr><tr><td> DMEM </td><td>インビトロジェン</td><td> 31053-028 </td></tr><tr><td>トリパンブルー染色</td><td>インビトロジェン</td><td> 15250-061 </td></tr><tr><td>ナイロンメッシュのセルストレーナー</td><td> BDバイオサイエンス</td><td> 352340（40μmの） 352350（70μm） </td></tr><tr><td>ブスルファン</td><td>シグマ</td><td> B2635 </td></tr><tr><td>薄い壁ガラスキャピラリー</td><td>世界の精密機器</td><td> TW 100から3 </td></tr><tr><td> BD intramedic plyethyleneチューブ（PE100） </td><td> BD </td><td> CA-63018-725 </td></tr><tr><td>エチコン6から0シルク縫合糸</td><td>エチコン</td><td> 706G </td></tr><tr><td>創傷クリップ</td><td> BD </td><td> 427631 </td></tr><tr><td> Sigmacote </td><td>シグマ</td><td> SL2 </td></tr><tr><td> X-galを</td><td>シグマ</td><td> B4252 </td></tr><tr><td>フェロシアン化カリウム</td><td>シグマ</td><td> P9387 </td></tr><tr><td>フェリシアン化カリウム</td><td>シグマ</td><td> P3667 </td></tr><tr><td>塩化マグネシウム</td><td>シグマ</td><td> 208337 </td></tr><tr><td>デオキシコール酸ナトリウム</td><td>シグマ</td><td> D6750 </td></tr><tr><td> N、N-ジメチルホルムアミド</td><td>シグマ</td><td> D4551 </td></tr><tr><td> IGEPAL CA-630 </td><td>シグマ</td><td> 18896 </td></tr></tbody></table>

germ cell transplantation and testis tissue xenografting in mice

生殖細胞移植は、1994年1,2ペンシルベニア大学で博士ラルフBrinsterらによって開発されました。これらの画期的な研究では、レシピエント動物2でドナー由来の精子形成と精子の生産に不妊のレシピエントマウスの結果の精細管に肥沃なドナーマウスから生殖細胞のマイクロインジェクションを示した。レシピエント動物を1つ子孫にドナーハプロタイプのドナー由来の精子形成とトランスミッションの同定を可能に細菌性β-ガラクトシダーゼ遺伝子を有するドナーの男性の使用。驚くべきことに、精細管の内腔に移植後、移植した生殖細胞は精原細胞が3に位置している基底膜に内腔の区画から移動することができました。それは一般のみのSSCは、受信者の精巣におけるニッチと再確立する精子形成コロニーを形成することができることを受け入れられている。したがって、生殖細胞移植は、精巣の幹細胞ニッチを勉強すると推定される精原幹細胞を特徴づけるために機能的なアプローチを提供しています。現在までに、生殖細胞の移植は、基本的な幹細胞生物学を解明するために移植前4,5に生殖細胞の遺伝子操作を介してトランスジェニック動物を生成するために、セルトリ細胞の生殖細胞の相互作用6,7、SSCホーミングと植民地3を勉強するために使用されます8と同様に、SSCの自己複製と分化9,10。 生殖細胞の移植は大種11にも可能である。これらは、メインアプリケーションでは、妊孕性の保全、動物の個体数のエリート遺伝学の普及と、この手法で精子形成およびSSC生物学の研究で​​は、ロジスティックげっ歯類ではより困難かつ高価であるとしてトランスジェニック動物の世代です。 colonizatのマウスの結果の精細管に大きな種から生殖細胞の移植ドナー細胞と精子の拡大ではなく、系統的に遠い種12からの生殖細胞とレシピエントの体細胞コンパートメントの非互換性によるものであろう彼らの完全に分化におけるイオン。代替的アプローチは、その周囲の体細胞コンパートメントと一緒に大規模な種から生殖細胞の移植である。まず、免疫不全マウスの背部皮膚の下に移植した未熟な雄の精巣組織の小さな断片が受精有能な精子13の生産に完全に開発を生き残るためには、受けることができていることを、2002年に報告した。それ以来xenografting精巣組織は、多くの種で成功するために示されており、マウス14の大型動物の精巣発達と精子形成を研究する貴重な代替手段として浮上した。

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Germ Cell Transplantation and Testis Tissue Xenografting in Mice

xenografting生殖細胞移植と精巣組織のためのプロトコルが記述されています。生殖細胞移植レシピエント精巣におけるドナー由来の精子形成の結果、精原幹細胞（SSCS）を同定するための機能の再構成アッセイを表しています。 xenografting精巣組織は、レシピエントマウスの様々なドナー種の精巣発達と精子形成を再現します。

マウスでXenografting胚細胞移植と精巣組織

Germ cell transplantation was developed by Dr. Ralph Brinster and colleagues at the University of Pennsylvania in 19941,2. These ground-breaking studies ...

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation and Transplantation of Hematopoietic Stem Cells (HSCs)

Isolation and Transplantation of Hematopoietic Stem Cells HSCs

造血幹細胞の分離と移植（造血幹細胞）

Transplantation of Whole Kidney Marrow in Adult Zebrafish

アダルトゼブラフィッシュの全腎骨髄の移植

Hematopoietic stem cells (HSC) are a rare population of pluripotent cells that maintain all the differentiated blood lineages throughout the life of an ...

Heterotopic Heart Transplantation in Mice

マウスにおける異所心臓移植

The mouse heterotopic heart transplantation has been used widely since it was introduced by Drs. Corry and Russell in 1973. It is particularly valuable ...

Small Bowel Transplantation In Mice

マウスにおける小腸移植

Since 1990, the development of tacrolimus-based immunosuppression and improved surgical techniques, the increased array of potent immunosuppressive ...

Actin Co-Sedimentation Assay; for the Analysis of Protein Binding to F-Actin

アクチン共沈降アッセイ、F -アクチンへの結合タンパク質の解析のための

The actin cytoskeleton within the cell is a network of actin filaments that allows the movement of cells and cellular processes, and that generates ...

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ヒトCD40活性化B細胞の生成

CD40-activated B cells (CD40-B cells) have been identified as an alternative source of immuno-stimulatory antigen-presenting cells (APC) for cancer ...

Tissue Targeted Embryonic Chimeras: Zebrafish Gastrula Cell Transplantation

組織標的胚キメラ：ゼブラフィッシュの原腸胚細胞移植

Certain fundamental questions in the field of developmental biology can only be answered when cells are placed in novel environments or when small groups ...

Heterotopic and Orthotopic Tracheal Transplantation in Mice used as Models to Study the Development of  Obliterative Airway Disease

閉塞性気道疾患の発生研究のモデルとして使用されるマウスにおける異所性と同所性気管移植

Obliterative airway disease (OAD) is the major complication after lung transplantations that limits long term survival (1-7).
To study the ...

Planarian Immobilization, Partial Irradiation, and Tissue Transplantation

プラナリアの固定化、部分照射し、組織移植

The planarian, a freshwater flatworm, has proven to be a powerful system for dissecting metazoan regeneration and stem cell biology1,2. Planarian ...

Studying Proteolysis of Cyclin B at the Single Cell Level in Whole Cell Populations

全細胞集団の単一細胞レベルでサイクリンBの分解を勉強

Equal distribution of chromosomes between the two daughter cells during cell division is a prerequisite for guaranteeing genetic stability 1. Inaccuracies ...