Name: retrograde perfusion and filling of mouse coronary vasculature as preparation for micro computed tomography imaging
Uploaded: 2012-02-10T13:00:00
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我々は、一般的な議論のための博士マイケルシモンズ、博士キープハウク、そのラボの両方のメンバーが、プロトコルの初期の試験のためにケリー博士スティーブンに感謝します。 この作品は、NIHの助成金HL087513とP01 HL094374によってサポートされています。

1。出発前の準備<ol><li>それぞれ、血管拡張バッファー（PBS中4mgの/ Lのパパベリン+ 1グラム/ Lアデノシン）、またはPBS中4％パラホルムアルデヒド（PFA）で圧力灌流装置の各側面を埋める。 </li><li> 1:100ヘパリン（5000U/mlストック）の0.1ミリリットルでそれを充填し、上ベベルと〜120度の角度に針を曲げて1/2ccインスリンシリンジ（恒久的に接続されている29Gと½ &quot;針）を準備が増加します。 ...

<ol>
	<li>Couffinhal, T., Dufourcq, P., Barandon, L., Leroux, L., Duplaa, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+to+study+angiogenesis+in+the+context+of+cardiovascular+diseases.">Mouse models to study angiogenesis in the context of cardiovascular diseases.</a> Front. Biosci. 14, 3310-3325 (2009).</li><li>Zagorchev, L., Mulligan-Kehoe, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+imaging+of+vessels+in+mouse+models+of+disease.">Molecular imaging of vessels in mouse models of disease.</a> Eur. J. Radiol. 70, 305-311 (2009).</li><li>Krucker, T., Lang, A., Meyer, E. 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Cardiol. 47, 1067-1075 (2006).</li><li>Lametschwandtner, A., Lametschwandtner, U., Weiger, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scanning+electron+microscopy+of+vascular+corrosion+casts--technique+and+applications:+updated+review.">Scanning electron microscopy of vascular corrosion casts--technique and applications: updated review.</a> Scanning Microsc. 4, 889-941 (1990).</li><li>Schneider, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+3D+visualization+and+quantification+of+murine+bone+and+bone+vasculature+using+micro-computed+tomography+and+vascular+replica.">Simultaneous 3D visualization and quantification of murine bone and bone vasculature using micro-computed tomography and vascular replica.</a> Microsc. Res. 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Meth. 4, 31-33 (2007).</li><li>Quintana, L., Sharpe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Optical projection tomography of vertebrate embryo development. , 586-594 (2011).</li><li>Walls, J. R., Coultas, L., Rossant, J., Henkelman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-Dimensional+Analysis+of+Vascular+Development+in+the+Mouse+Embryo.">Three-Dimensional Analysis of Vascular Development in the Mouse Embryo.</a> PLoS ONE. 3, e2853-e2853 (2008).</li><li>Chalothorn, D., Clayton, J. A., Zhang, H., Pomp, D., Faber, J. 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Reson. Med. 55, 858-864 (2006).</li><li>Wagner, S., Helisch, A., Ziegelhoeffer, T., Bachmann, G., Schaper, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+resonance+angiography+of+collateral+vessels+in+a+murine+femoral+artery+ligation+model.">Magnetic resonance angiography of collateral vessels in a murine femoral artery ligation model.</a> NMR in Biomedicine. 17, 21-27 (2004).</li><li>Cochet, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+MR+angiography+and+velocity+measurement+in+mice+coronary+arteries+at+9.4+T:+assessment+of+coronary+flow+velocity+reserve.">In vivo MR angiography and velocity measurement in mice coronary arteries at 9.4 T: assessment of coronary flow velocity reserve.</a> Radiology. , 254-441 (2010).</li></ol>

心臓組織は非常に高い代謝需要を持っているため、冠状血管系によって提供される血液から栄養と酸素の安定供給を必要とします。血管の狭窄や閉塞が原因で冠状動脈の機能を低下させる冠状血管の疾患は、組織低酸素および虚血につながると、心筋梗塞や心臓の筋肉への取り返しのつかない損傷の危険性が影響を受けた患者を置くことができます。これらの血管の病気の状態の理解が必要?...

<html><table border="1"><tbody><tr><td> 試薬の名前 </td><td> 会社 </td><td> カタログ番号 </td><td> コメント </td></tr><tr><td> 1 mlのシリンジ</td><td> <a href="http://www.bd.com/" target="_blank">ベクトン·ディッキンソン</a> </td><td> BD-309602 </td><td></td></tr><tr><td>恒久的に接続されている29G½ &#39;針1/2ccインスリンシリンジ</td><td> <a href="http://www.bd.com/" target="_blank">ベクトン·ディッキンソン</a> </td><td> BD-309306 </td><td></td></tr><tr><td> 2 &quot;×2&quot;ガーゼパッド</td><td> Med101store.com </td><td> SKU 2208 </td><td></td></tr><tr><td> 24G¾ &quot;Angiocath IVカテーテル</td><td> <a href="http://www.bd.com/" target="_blank">ベクトン·ディッキンソン</a> </td><td> BD-381112 </td><td></td></tr><tr><td> 26G½ &quot;ゲージの針</td><td>痩せ細った &quot;&gt;ベクトン·ディッキンソン</td><td> BD-305111 </td><td></td></tr><tr><td>アデノシン</td><td> <a href="http://www.sigmaaldrich.com/" target="_blank">シグマ</a> </td><td> A9251 </td><td>血管拡張バッファのPBSで1グラム/ L（パパベリン付） </td></tr><tr><td>斜めグレーフェ鉗子</td><td> <a href="http://www.finescience.com/" target="_blank">ファイン科学ツール</a> </td><td> 11052から10 </td><td></td></tr><tr><td>綿棒のアプリケーター：6 &quot;非滅菌</td><td> <a href="http://www.cardinal.com/" target="_blank">カーディナルヘルス</a> </td><td> C15055-006 </td><td></td></tr><tr><td>湾曲した外科用はさみ</td><td> <a href="http://www.finescience.com/" target="_blank">ファイン科学ツール</a> </td><td> 14085から09 </td><td></td></tr><tr><td>解剖立体と光源</td><td> <a href="http://www.nikon.com/" target="_blank">ニコン</a> </td><td> NA </td><td> NA </td></tr><tr><td>解剖トレイ、29.2 x 7.5インチ</td><td> <a href="http://www.coleparmer.com/" target="_blank">コール·パーマー</a> </td><td> YO-10915から12 </td><td>マウスを下に固定するためのタールで満たされた</td></tr><tr><td>ファイン曲がり鉗子</td><td> <a href="http://www.aesculapusa.com/" target="_blank">Aesculap</a> </td><td> FD281R </td><td>必要がある2つの</td></tr><tr><td>ヘパリン、5000 U / mlストック</td><td> <a href="http://www.apppharma.com/" target="_blank">APPファーマシューティカルLLC</a> </td><td> NDC 63323-047-10 </td><td>水で100倍希釈</td></tr><tr><td>塩化カリウム</td><td> <a href="http://www.fishersci.com/" target="_blank">フィッシャー</a> </td><td> P217 </td><td> H2Oの飽和溶液</td></tr><tr><td>ケタミン（Ketaset）、100 mg / mlストック</td><td>フォートドッジ、オーバーランドパーク、カンザス州、アメリカ合衆国</td><td> NDC 0856-2013-01 </td><td> 0.9パーセントsのキシラジンで、130 mg / kg体重のように混合アリーン</td></tr><tr><td> Microfil </td><td> <a href="http://www.flowtech-inc.com/" target="_blank">フローテック</a> </td><td> MV-122（黄色）。他のカラーオプションも用意されています。 </td><td>硬化剤の体積10％、重量比で1:1に混合します。それが十分に混合であることを確認するためだけに注入し、渦の前準備</td></tr><tr><td>非滅菌縫合糸：6-0、編んだシルク</td><td> <a href="http://www.harvardapparatus.com/" target="_blank">ハーバード装置</a> </td><td> 723287 </td><td></td></tr><tr><td>パパベリン</td><td> <a href="http://www.americanregent.com/" target="_blank">アメリカのリージェント株式会社</a> </td><td> NDC 0517-4010-01 </td><td>血管拡張バッファのPBS中4mgの/ L（アデノシン付） </td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド</td><td> <a href="http://www.sigmaaldrich.com/" target="_blank">シグマ</a> </td><td> P6148 </td><td> 4％の溶液として調製し</td></tr><tr><td>灌流装置</td><td></td><td></td><td>図2を参照してください。 </td></tr><tr><td>春のはさみ</td><td> <a href="http://www.finescience.com/" target="_blank">ファイン科学ツール</a> </td><td> 15018から10 </td><td></td></tr><tr><td>キシラジン（Anased）に20 mg / GL株式</td><td> <a href="http://www.lloydlab.com/" target="_blank">ロイドラボ</a> </td><td> NADA＃139から236 </td><td> 0.9％生理食塩水のケタミンで、8.8 mg / kg体重のように混合</td></tr></tbody></table>

retrograde perfusion and filling of mouse coronary vasculature as preparation for micro computed tomography imaging

血管系の可視化は、さまざまな病気の状態を理解するためにますます重要になっています。いくつかの技術は、撮像血管系に存在するが、いくつかは、小型船1,2が含まれています解像度を拡張しながら全体としての血管網を可視化することができます。さらに、多くの血管の鋳造技術は、サンプル3-5のさらなる解析を防ぐために、周囲の組織を破壊する。これらの問題を回避する一つの方法は、マイクロコンピューター断層撮影​​（μCT）です。 μCTイメージングは、解像度が&lt;10ミクロンでスキャンすることができます血管網の3次元再構成を作り出すことができるであり、その後の分析（例えば、組織学および形態計測）6月11日のために無傷の組織を残します。しかし、ex vivoで μCT法によるイメージング血管は血管が放射線不透過性化合物で満たされている必要があります。このように、μCT画像によって生成された脈管構造の正確な表現は時に​​偶発的です。信頼性の高い容器の充填が完了しました。このプロトコルでは、我々は、μCT画像の準備のためにマウス冠状血管を充填するためのテクニックについて説明します。 二つの支配的なテクニックは、冠状動脈血管を埋めるために存在する：in vivoでの挿管とランゲンドルフ灌流システム15から17を経由して大動脈（または大動脈弓から分岐）12から14、またはex vivoでの逆行性血流を介して。ここでは、特にすべての船舶の充填を確認するように設計されている生体大動脈カニュレーション法で説明しています。我々は、すべての毛細血管だけでなく、血管網の動脈および静脈の両側を埋めるために、最小血管を灌流することができますMicrofilと呼ばれる低粘度の放射線不透過性化合物を使用しています。血管は加圧された灌流システムを用いた緩衝液で灌流し、Microfilで満たされている。そのMicrofilが小さい高抵抗血管を埋めるようにするために、我々は、大規模なブランチemanatinを連結coronariesにMicrofilをそらして大動脈からグラム。一度の充填には、いくつかの船のMicrofilを絞り出しから心臓組織の弾性の性質を防止するために、完了したら、我々はすぐに充填した後にアクセス可能な主要な血管の出口点を連結。動脈、毛細血管、静脈同様に - したがって、我々の手法は、完全な冠状血管網の可視化を可能にする、完全な充填および充填剤の最大保持のために最適化されています。

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Retrograde Perfusion and Filling of Mouse Coronary Vasculature as Preparation for Micro Computed Tomography Imaging

冠状血管の可視化は、心血管疾患の我々の理解を進めることが重要です。ここでは、マイクロコンピューター断層撮影​​（μCT）イメージングの準備のために、放射線不透過性シリコーンゴム（Microfil）とマウス冠状動脈血管を灌流する方法を説明します。

マイクロCTイメージングのための準備として、逆行性灌流およびマウスの冠動脈血管系の充填

Visualization of the vasculature is becoming increasingly important for understanding many different disease states. While several techniques exist for ...

Research

JoVE Journal

Medicine

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Osmotic Drug Delivery to Ischemic Hindlimbs and Perfusion of Vasculature with Microfil for Micro-Computed Tomography Imaging

マイクロコンピュータ断層撮影イメージング用Microfilで虚血後肢と血管系の灌流に浸透ドラッグデリバリー

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腫瘍の開発の評価のためのマイクロコンピュータ断層撮影を使用し、肺癌のマウスモデルでの治療に対する応答のフォローアップ

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Combined Near-infrared Fluorescent Imaging and Micro-computed Tomography for Directly Visualizing Cerebral Thromboemboli

直接脳血栓塞栓を可視化するための複合近赤外蛍光イメージングおよびマイクロコンピュータ断層撮影

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Identifying Coronary Artery Calcification on Non-gated Computed Tomography Scans

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Coronary artery calcification (CAC) provides an objective measure of coronary artery disease and can readily be identified on non-gated computed ...

Continuous Blood Sampling in Small Animal Positron Emission Tomography/Computed Tomography Enables the Measurement of the Arterial Input Function

小動物陽電子放出断層撮影/コンピュータ断層撮影における連続的な血液サンプリングにより、動脈入力機能の測定が可能

For quantitative analysis and bio-kinetic modeling of positron emission tomography/computed tomography (PET/CT) data, the determination of the temporal ...

Tissue Preparation Techniques for Contrast-Enhanced Micro Computed Tomography Imaging of Large Mammalian Cardiac Models with Chronic Disease

慢性疾患を有する大型哺乳類心臓モデルのコントラスト増強マイクロコンピュータ断層撮影イメージングのための組織調製技術

Structural remodeling is a common consequence of chronic pathological stresses imposed on the heart. Understanding the architectural and compositional ...

DUCT: Double Resin Casting followed by Micro-Computed Tomography for 3D Liver Analysis

ダクト:3D肝臓解析のためのマイクロコンピュータ断層撮影に続く二重樹脂鋳造

The liver is the biggest internal organ in humans and mice, and high auto-fluorescence presents a significant challenge for assessing the ...

Sample Preparation for Computed Tomography-based Three-dimensional Visualization of Murine Hind-limb Vessels

コンピューター断層撮影ベースの3次元可視化のサンプル調製

Blood vessels are complex networks with tree-like structures, and vascular networks are essential for maintaining both circulation and maintaining organ ...