Name: in ovo electroporation in embryonic chick retina
Uploaded: 2012-02-05T13:00:00
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हम अपने HD कैमरा का उपयोग (तोप VIXIA HFS100) के लिए श्री Maaz Enver धन्यवाद देना चाहूंगा. इस काम के भाग में (EY018738) एनआईएच, स्पाइनल कॉर्ड अनुसंधान पर न्यू जर्सी आयोग (08-3074-SCR ई 0 और 10-3091-SCR-ई 0), और Busch जैव चिकित्सा अनुसंधान पुरस्कार से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया.

के बाद से प्रोटोकॉल के कुछ भागों के रूप में मामूली संशोधन के साथ पहले से अन्य जौव 2 वीडियो और 3 कागजात में वर्णित प्रदर्शन कर रहे हैं हम यहाँ विस्तार में उन पर चर्चा करेंगे. 1. अंडा हैंडलि...

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	<li>Doh, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+retinal+cell+development+in+chick+embryo+by+immunohistochemistry+and+in+ovo+electroporation+techniques.">Analysis of retinal cell development in chick embryo by immunohistochemistry and in ovo electroporation techniques.</a> BMC. Dev. Biol. 10, (2010).</li><li>Blank, M. C., Chizhikov, V., Millen, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Ovo+Electroporations+of+HH+Stage+10+Chicken+Embryos.">In Ovo Electroporations of HH Stage 10 Chicken Embryos.</a> J. Vis. Exp. (9), e408-e408 (2007).</li><li>Nakamura, H., Funahashi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Introduction+of+DNA+into+chick+embryos+by+in+ovo+electroporation.">Introduction of DNA into chick embryos by in ovo electroporation.</a> Methods. 24, 43-48 (2001).</li><li>Hamburger, V., Hamilton, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+series+of+normal+stages+in+the+development+of+the+chick+embryo.+1951.">A series of normal stages in the development of the chick embryo. 1951.</a> Dev. Dyn.. 195, 231-272 (1992).</li><li>Hamburger, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+stage+series+of+the+chick+embryo.">The stage series of the chick embryo.</a> Dev. Dyn. 195, 273-275 (1992).</li></ol>

रेटिना इंजेक्शन लक्षित और E4 के स्तर पर भ्रूण रेटिना में ओवो electroporation में विशेष रूप से एकल कोशिका के स्तर पर सभी छह प्रमुख रेटिना सेल प्रकार की कल्पना करने की क्षमता में जिसके परिणामस्वरूप रेटिनल पू...

<table border="1"><tbody><tr><td> अभिकर्मक का नाम </td><td> कंपनी </td><td> सूचीपत्र संख्या </td><td> टिप्पणियाँ </td></tr><tr><td> निषेचित रोगज़नक़ मुक्त (एसपीएफ़) सफेद लेग्गोर्न चिकन अंडे </td><td> सूर्योदय फार्म (Catskill, न्यूयॉर्क) </td><td></td><td></td></tr><tr><td> चिकन अंडे इनक्यूबेटर </td><td> GQF विनिर्माण, Savannah, GA </td><td> मॉडल 1550 </td><td> 60% आर्द्रता और 37.5 डिग्री सेल्सियस पर सेट करें </td></tr><tr><td> कांच की केशिका ट्यूब </td><td> दुनिया प्रेसिजन उपकरण इंक </td><td> TW150F - 4 </td><td></td></tr><tr><td> 0.1 मिलीलीटर सिरिंज </td><td> हैमिल्टन कंपनी रेनो, नेवादा </td><td> 1710 gastight </td><td> वैकल्पिक रूप से 1ml सिरिंज के रूप में अच्छी तरह से इस्तेमाल किया जा सकता है </td></tr><tr><td> Masterflex पेरोक्साइड () सिलिकॉन टयूबिंग </td><td> कोल - परमार </td><td> HV-९६,४००-13 </td&gt; <td> सिरिंज गिलास सुई संलग्न करने के लिए एक छोटा सा टुकड़ा (1 सेमी) कट </td></tr><tr><td> चिमटी </td><td> डुमोंट </td><td> ए.ए. </td><td></td></tr><tr><td> Micromanipulator </td><td> दुनिया प्रेसिजन उपकरण इंक </td><td> M3301 - एम 3 </td><td></td></tr><tr><td> प्लास्मिड डीएनए </td><td></td><td></td><td> pCAG के GFP डा. कोनी Cepko से उधार लिया था </td></tr><tr><td> फास्ट ग्रीन FCF </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> F7252 </td><td> यह पीबीएस के साथ 0.025% के लिए पतला </td></tr><tr><td> स्पंद जनित्र </td><td> हार्वर्ड उपकरण, एमए </td><td> BTX 830 ईसीएम </td><td> वर्ग तरंग जनरेटर </td></tr><tr><td> इलेक्ट्रोड </td><td> हार्वर्ड उपकरण, एमए </td><td> BTX 514 मॉडल </td><td> हमारे इलेक्ट्रोड 3-5 मिमी के अलावा स्थान दिया गया </td></tr><tr><td> मोनोक्रोम डिजिटल कैमरा </td><td> Zeiss, जर्मनी </td><td> एकxiocam MRM </td><td></td></tr><tr><td> प्रतिदीप्त विच्छेदन माइक्रोस्कोप </td><td> Leica माइक्रोसिस्टम्स, जर्मनी </td><td> Leica MZ16FA </td><td></td></tr><tr><td> ईमानदार प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी </td><td> Zeiss, जर्मनी </td><td> Zeiss Axio Imager A1 </td><td></td></tr></tbody></table>

in ovo electroporation in embryonic chick retina

चिकन भ्रूण रेटिना उच्च रीढ़ में रेटिना विकास का अध्ययन करने के लिए एक उत्कृष्ट उपकरण है. बड़े आकार और बाहरी विकास की वजह से, यह अपेक्षाकृत बहुत आसान है लड़की भ्रूण पुनः संयोजक डीएनए / आरएनए प्रौद्योगिकी का उपयोग रेटिना में हेरफेर. डीएनए / आरएनए constructs के भ्रूण रेटिना में electroporation स्टेम / पूर्वपुस्र्ष कोशिकाओं रेटिना के में रेटिनल विकास के दौरान जीन विनियमन का अध्ययन करने के लिए एक महान लाभ है. रिपोर्टर जीन परख, अभिव्यक्ति से अधिक जीन, जीन नीचे दस्तक (shRNA) आदि के रूप में assays के विभिन्न प्रकार electroporation तकनीक का उपयोग किया जा सकता है. इस वीडियो लक्षित रेटिना इंजेक्शन को दर्शाता है और भ्रूण लड़की रेटिना में ओवो electroporation में हैम्बर्गर और हैमिल्टन 22-23 मंच, जो भ्रूण 4 दिन (E4) के बारे में है. यहाँ हम ओवो electroporation तकनीक में तेजी और सुविधाजनक शो जिससे एक प्लास्मिड डीएनए है कि एक मार्कर के रूप में हरी फ्लोरोसेंट प्रोटीन (GFP) व्यक्त सीधे में कर दिया हैलड़की भ्रूण subretinal अंतरिक्ष और बिजली दालों के बाद रेटिना स्टेम / पूर्वपुस्र्ष कोशिकाओं के डीएनए तेज की सुविधा. रेटिना और E4 पर इंजेक्शन electroporation की नई विधि देर जन्मे 1 न्यूरॉन्स, जो इंजेक्शन और electroporation की पारंपरिक विधि के साथ मुश्किल 2 E1.5 पर किया गया है सहित सभी रेटिना सेल प्रकार, दृश्य की अनुमति देता है.

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In Ovo Electroporation in Embryonic Chick Retina

इस वीडियो के समग्र लक्ष्य को दिखाने के लिए कैसे लक्षित रेटिना इंजेक्शन के प्रदर्शन करने के लिए है और<em&gt; ओवो में</emहैम्बर्गर और हैमिल्टन 22-23 मंच है, जो भ्रूण 4 दिन (E4) के बारे में है पर लड़की भ्रूण रेटिना में डीएनए / आरएनए constructs electroporation. यह तकनीक बहुत जीन अभिव्यक्ति जीन विनियमन, और लड़की रेटिना के विकास में रूपात्मक बदलाव का अध्ययन करने के लिए उपयोगी है.

भ्रूण चिकी रेटिना में ओवो electroporation में

Chicken embryonic retina is an excellent tool to study retinal development in higher vertebrates. Because of large size and external development, it is ...

Research

JoVE Journal

Biology

In Ovo Electroporation in Embryonic Chick Retina

In Ovo Electroporations of HH Stage 10 Chicken Embryos

एचएच स्टेज 10 चिकन भ्रूण के ओवो Electroporations में

Large size and external development of the chicken embryo have long made it a valuable tool in the study of developmental biology.  With the advent of ...

Method for Whole Mount Antibody Staining in Chick

चिकी में पूरे माउंट एंटीबॉडी धुंधला के लिए विधि

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Chick ex ovo Culture and ex ovo CAM Assay: How it Really Works

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चिकी पूर्व ओवो संस्कृति और पूर्व ओवो सीएएम परख: यह कैसे सच में काम करता

Chicken eggs in the early phase of breeding are between in vitro and in vivo systems and provide a vascular test environment not only to study ...

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

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भ्रूण की इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के लिए तैयार ड्रोसोफिला भ्रूण दिल ट्यूब

The morphogenesis of the Drosophila  embryonic heart tube has emerged as a valuable model system for studying cell migration, cell-cell adhesion and cell ...

Primary Culture and Plasmid Electroporation of the Murine Organ of Corti. 

प्राथमिक संस्कृति और Corti के murine अंग के प्लाज्मिड electroporation.

In all mammals, the sensory epithelium for audition is located along the spiraling organ of Corti that resides within the conch shaped cochlea of the ...

Deciphering Axonal Pathways of Genetically Defined Groups of Neurons in the Chick Neural Tube Utilizing in ovo Electroporation

Deciphering Axonal Pathways of Genetically Defined Groups of Neurons in the Chick Neural Tube Utilizing in ovo Electroporation

चिकी तंत्रिका ट्यूब उपयोग में न्यूरॉन्स की आनुवंशिक निर्धारित समूह की axonal रास्ते के गूढ़ रहस्य ओवो में Electroporation

Employment of enhancer elements to drive expression of reporter genes in neurons is a widely used paradigm for tracking axonal projection. For tracking ...

Video Bioinformatics Analysis of Human Embryonic Stem Cell Colony Growth

वीडियो मानव भ्रूण स्टेम सेल कॉलोनी विकास के विश्लेषण बायोइनफॉरमैटिक्स

Because video data are complex and are comprised of many images, mining information from video material is difficult to do without the aid of computer ...

Single Cell Transfection in Chick Embryos

चिकी भ्रूण में एकल सेल अभिकर्मक

A central theme in developmental biology is the diversification of lineages and the elucidation of underlying molecular mechanisms. This entails a ...

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

पैच और आयन चैनल के अध्ययन के लिए दबाना छिड़काव तकनीक में व्यक्त Xenopus Oocytes

The protocol presented here is designed to study the activation of the large conductance, voltage- and Ca2+-activated K+ (BK) channels. The protocol may ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

Morpholinos के vivo electroporation में वयस्क Zebrafish रेटिना में

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...