Name: in ovo electroporation in embryonic chick retina
Uploaded: 2012-02-05T13:00:00
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우리는 그의의 HD 카메라 이용 (캐논 VIXIA HFS100) 동안 집게 Maaz Enver 감사드립니다. 이 작품은 NIH (EY018738), 척수 연구에서 뉴저지위원회 (08-3074-SCR-e-0과 10-3091-SCR-E-0) 및 부시 바이오 메디컬 연구 대상에서 교부금에 의해 부분적으로 지원되었다.

이전에 사소한 수정과 함께 다른 주피터 동영상 2, 서류 3 설명된대로 프로토콜의 일부 지역이 수행되므로 우리는 여기에 자세히들을 논의하지 않습니다. 1. 에그 처리 및 니들 준비 <ol><li> 계란이 최대 1 일주일 동안 약 13도 ° C에서 쿨러 와인에 저장할 수 있습니다. 온도가 너무 높은 경우에는 낮은 온도가 높은 사망률을 초래하면서, 태아는 비정상적으로 ?...

<ol>
	<li>Doh, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+retinal+cell+development+in+chick+embryo+by+immunohistochemistry+and+in+ovo+electroporation+techniques.">Analysis of retinal cell development in chick embryo by immunohistochemistry and in ovo electroporation techniques.</a> BMC. Dev. Biol. 10, (2010).</li><li>Blank, M. C., Chizhikov, V., Millen, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Ovo+Electroporations+of+HH+Stage+10+Chicken+Embryos.">In Ovo Electroporations of HH Stage 10 Chicken Embryos.</a> J. Vis. Exp. (9), e408-e408 (2007).</li><li>Nakamura, H., Funahashi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Introduction+of+DNA+into+chick+embryos+by+in+ovo+electroporation.">Introduction of DNA into chick embryos by in ovo electroporation.</a> Methods. 24, 43-48 (2001).</li><li>Hamburger, V., Hamilton, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+series+of+normal+stages+in+the+development+of+the+chick+embryo.+1951.">A series of normal stages in the development of the chick embryo. 1951.</a> Dev. Dyn.. 195, 231-272 (1992).</li><li>Hamburger, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+stage+series+of+the+chick+embryo.">The stage series of the chick embryo.</a> Dev. Dyn. 195, 273-275 (1992).</li></ol>

망막 주사를 타겟 및 E4 단계에서 배아 망막에서 비켜 electroporation에 특별히 단일 세포 수준에서 모두 6 개 주요 망막 세포 유형을 시각화하는 능력의 결과로 망막 전구 세포를 타겟팅할 수 있습니다. HH10에서 비켜 electroporation에서 (~ E1.5)을 대상으로 광 소포는 눈을 형성 발전 전지를 transfect 수 있습니다. 그러나 이러한 세포는 현재 매우 높은 매출액을 가지고 있으며이 방법은 망막 세...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> 수정된 병원체 프리 (SPF) 흰색 레그혼종 닭고기 달걀 </td><td> 일출 농장 (Catskill, NY) </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 치킨 계란 인큐베이터 </td><td> GQF 제조, 사바나, 조지아 </td><td> 모델-1550 </td><td> 60 %의 습도와 37.5 ° C.로 설정 </td></tr><tr><td> 유리 모세관 튜브 </td><td> 세계 정밀 악기 주식 회사 </td><td> TW150F-4 </td><td></td></tr><tr><td> 0.1 ML의 주사기 </td><td> 해밀턴 (주) 리노, 네바다 </td><td> Gastight 1710 </td><td> 또는 1ml 주사기 잘으로 사용할 수 있습니다 </td></tr><tr><td> Masterflex 실리콘 (과산화수소) 튜브 </td><td> 콜 - Parmer </td><td> HV-96400-13 </td&gt; <td> 주사기로 유리 바늘을 부착을위한 작은 조각 (1 센티미터) 잘라내기 </td></tr><tr><td> 족집게 </td><td> 뒤몽 </td><td> AA </td><td></td></tr><tr><td> Micromanipulator </td><td> 세계 정밀 악기 주식 회사 </td><td> M3301-M3 </td><td></td></tr><tr><td> 플라스미드 DNA와 </td><td></td><td></td><td> pCAG-GFP는 박사 코니 Cepko로부터 차용되었다 </td></tr><tr><td> 빠른 그린 FCF </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> F7252 </td><td> PBS와 0.025 %로 희석 </td></tr><tr><td> 펄스 발생기 </td><td> 하버드 장치, MA </td><td> BTX ECM 830 </td><td> 스퀘어 웨이브 제너레이터 </td></tr><tr><td> 전극 </td><td> 하버드 장치, MA </td><td> BTX 모델 514 </td><td> 우리 전극은 3-5mm 떨어져 잊어버리고 있었다 </td></tr><tr><td> 흑백 디지털 카메라 </td><td> 자이스 혈구, 독일 </td><td>xiocam MRM </td><td></td></tr><tr><td> 형광등 해부 현미경 </td><td> Leica 이크로 시스템즈, 독일 </td><td> Leica MZ16FA </td><td></td></tr><tr><td> 입식 형광 현미경 </td><td> 자이스 혈구, 독일 </td><td> 자이스 혈구 Axio 영상기 A1 </td><td></td></tr></tbody></table>

in ovo electroporation in embryonic chick retina

닭 배아 망막 높은 척추 동물의 망막 개발을 공부하는 훌륭한 도구입니다. 때문에 대형 및 외부 발전으로 인해, 그것은 재조합 DNA / RNA 기술을 사용하여 병아리 배아 망막를 조작하는 비교적 매우 쉽습니다. 태아의 망막에 DNA / RNA 구조의 Electroporation은 망막 개발하는 동안 망막 줄기 / 전구 세포에서의 유전자 조절을 연구하는 큰 잇점을 가지고있다. 이러한 리포터 유전자 분석, 표현을 통해, 유전자 등 (shRNA) 허물고 유전자 등 assays의 다른 유형은 electroporation 기술을 사용하여 수행할 수 있습니다. 이 비디오는 타겟 망막 주사를 보여주고 배아 일 4 (E4)에 관한 햄버거와 해밀턴 무대 22-23,에서 배아 여자의 망막에 비켜 electroporation 인치 마커로 녹색 형광 단백질 (GFP)을 표현하는 플라스미드 DNA를 직접으로 전달됩니다 의하여 여기 비켜 electroporation 기술에 신속하고 편리하게 보여줄병아리 배아 subretinal 공간과 망막 줄기 / 전구 세포로 DNA의 이해를 촉진하기 위해 전기 펄스에 의해 따라갔다. E4에서 망막 주입과 electroporation의 새로운 방법은 E1.5 2 시에 주입과 electroporation의 전통적인 방법으로 어렵게되었습니다 후반 태생의 뉴런 1을 포함한 모든 망막 세포 유형의 시각화 수 있습니다.

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In Ovo Electroporation in Embryonic Chick Retina

이 비디오의 전반적인 목표는 타겟 망막 주사를 수행하는 방법을 보여주기입니다<em&gt; 비켜에서</em배아 일 4 (E4)에 관한 햄버거와 해밀턴 단계 22-23,에서 병아리 배아 망막으로의 DNA / RNA 구조의&gt; electroporation. 이 기술은 유전자 발현, 유전자 조절, 그리고 여자의 망막 개발에 형태학의 변화를 연구하는 것은 매우 유용합니다.

배아 칙의 망막에서 비켜 Electroporation에

Chicken embryonic retina is an excellent tool to study retinal development in higher vertebrates. Because of large size and external development, it is ...

Research

JoVE Journal

Biology

In Ovo Electroporation in Embryonic Chick Retina

In Ovo Electroporations of HH Stage 10 Chicken Embryos

HH 스테이지 10 치킨 태아의 비켜 Electroporations에서

Large size and external development of the chicken embryo have long made it a valuable tool in the study of developmental biology.  With the advent of ...

연구

생물학

Method for Whole Mount Antibody Staining in Chick

칙의 전체 마운트 항체 스테 이닝을위한 방법

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Chick ex ovo Culture and ex ovo CAM Assay: How it Really Works

Chick ex ovo Culture and ex ovo CAM Assay: How it Really Works

병아리 예 비켜 문화와 예 비켜 CAM 어세이 : 그게 정말로 작동하는 방법

Chicken eggs in the early phase of breeding are between in vitro and in vivo systems and provide a vascular test environment not only to study ...

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

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의 전자 현미경을위한 배아의 준비 Drosophila 태아의 심장 관

The morphogenesis of the Drosophila  embryonic heart tube has emerged as a valuable model system for studying cell migration, cell-cell adhesion and cell ...

Primary Culture and Plasmid Electroporation of the Murine Organ of Corti. 

차 문화와 Corti의 Murine 오르간의 플라스미드 Electroporation.

In all mammals, the sensory epithelium for audition is located along the spiraling organ of Corti that resides within the conch shaped cochlea of the ...

Deciphering Axonal Pathways of Genetically Defined Groups of Neurons in the Chick Neural Tube Utilizing in ovo Electroporation

Deciphering Axonal Pathways of Genetically Defined Groups of Neurons in the Chick Neural Tube Utilizing in ovo Electroporation

활용 칙 신경 튜브에서 뉴런의 유전 정의된 그룹 Axonal 경로를 벗기기 비켜에서 Electroporation

Employment of enhancer elements to drive expression of reporter genes in neurons is a widely used paradigm for tracking axonal projection. For tracking ...

Video Bioinformatics Analysis of Human Embryonic Stem Cell Colony Growth

비디오 생물 정보학 인간의 배아 줄기 세포 콜로니 성장 분석

Because video data are complex and are comprised of many images, mining information from video material is difficult to do without the aid of computer ...

Single Cell Transfection in Chick Embryos

칙 태아의 단일 세포 Transfection

A central theme in developmental biology is the diversification of lineages and the elucidation of underlying molecular mechanisms. This entails a ...

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

이온 채널 유학을위한 패치 클램프 및 재관류 기법으로 표현 Xenopus oocytes

The protocol presented here is designed to study the activation of the large conductance, voltage- and Ca2+-activated K+ (BK) channels. The protocol may ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

Morpholinos의 생체내의 Electroporation에서 성인 Zebrafish의 망막에

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...