Name: phenotypic and functional characterization of endothelial colony forming cells derived from human umbilical cord blood
Uploaded: 2012-04-13T13:00:00
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Dr. Yoder ist Berater für EndGenitor Technologies, Inc. und Mitglied des Board of Rimedion Technologies, Inc.

Reagenzien und Lösungen EMG-2-Medien (Lonza, Cat. No CC-3162 mit EBM-2 Basalmedium und EGM-2 SingleQuot Kit Ergänzungen, und Wachstumsfaktoren) EBM-2 (Lonza, Cat No. Cc-3156) mit dem gesamten SingleQuot Kit ergänzt und Wachstumsfaktoren ergänzt (Lonza, Cat No. Cc-4176), 10% (v / v) fötales Rinderserum (FBS) und 1% (v / v) Penicillin (10000 U / ml) / Streptomycin (10.000 g / ml) / Amphotericin (25 ug / ml). Speichern Sie bis zu 1 Monat bei 4 ° C Empfohlen EGM-2 B...

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	<li>Carmeliet, P., Jain, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+and+clinical+applications+of+angiogenesis.">Molecular mechanisms and clinical applications of angiogenesis.</a> Nature. 473, 298-307 (2011).</li><li>Asahara, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+putative+progenitor+endothelial+cells+for+angiogenesis.">Isolation of putative progenitor endothelial cells for angiogenesis.</a> Science. 275, 964-967 (1997).</li><li>Urbich, C., Dimmeler, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+progenitor+cells:+characterization+and+role+in+vascular+biology.">Endothelial progenitor cells: characterization and role in vascular biology.</a> Circ. Res. 95, 343-353 (2004).</li><li>Critser, P. J., Voytik-Harbin, S. L., Yoder, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolating+and+defining+cells+to+engineer+human+blood+vessels.">Isolating and defining cells to engineer human blood vessels.</a> Cell. Prolif. 44, 15-21 (2011).</li><li>Matthias, M., David, N., Josef, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+bench+to+bedside:+what+physicians+need+to+know+about+endothelial+progenitor+cells.">From bench to bedside: what physicians need to know about endothelial progenitor cells.</a> Am. J. Med. 124, 489-4897 (2011).</li><li>Ingram, D. 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C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Redefining+endothelial+progenitor+cells+via+clonal+analysis+and+hematopoietic+stem/progenitor+cell+principals.">Redefining endothelial progenitor cells via clonal analysis and hematopoietic stem/progenitor cell principals.</a> Blood. 109, 1801-1809 (2007).</li><li>Reinisch, A., Strunk, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+Animal+Serum+Free+Expansion+of+Human+Umbilical+Cord+Derived+Mesenchymal+Stromal+Cells+(MSCs)+and+Endothelial+Colony+Forming+Progenitor+Cells+(ECFCs.">Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells (ECFCs.</a> J. Vis. Exp. (32), e1525 (2009).</li><li>Au, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+in+vivo+potential+of+endothelial+progenitor+cells+from+human+umbilical+cord+blood+and+adult+peripheral+blood+to+form+functional+long-lasting+vessels.">Differential in vivo potential of endothelial progenitor cells from human umbilical cord blood and adult peripheral blood to form functional long-lasting vessels.</a> Blood. 111, 1302-135 (2008).</li><li>Critser, P. J., Kreger, S. T., Voytik-Harbin, S. L., Yoder, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collagen+matrix+physical+properties+modulate+endothelial+colony+forming+cell-derived+vessels+in+vivo.">Collagen matrix physical properties modulate endothelial colony forming cell-derived vessels in vivo.</a> Microvasc. Res. 80, 23-30 (2010).</li><li>Melero-Martin, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+robust+and+functional+vascular+networks+in+vivo+with+human+adult+and+cord+blood-derived+progenitor+cells.">Engineering robust and functional vascular networks in vivo with human adult and cord blood-derived progenitor cells.</a> Circ. Res. 103, 194-202 (2008).</li><li>Melero-Martin, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+vasculogenic+potential+of+human+blood-derived+endothelial+progenitor+cells.">In vivo vasculogenic potential of human blood-derived endothelial progenitor cells.</a> Blood. 109, 4761-4768 (2007).</li><li>Hofmann, N. A., Reinisch, A., Strunk, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+Large+Scale+Expansion+of+Adult+Human+Endothelial+Colony+Forming+Progenitor+Cells.">Isolation and Large Scale Expansion of Adult Human Endothelial Colony Forming Progenitor Cells.</a> J. Vis. Exp. (32), e1524 (2009).</li><li>Lin, Y., Weisdorf, D. J., Solovey, A., Hebbel, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Origins+of+circulating+endothelial+cells+and+endothelial+outgrowth+from+blood.">Origins of circulating endothelial cells and endothelial outgrowth from blood.</a> J. Clin. Invest. 105, 71-77 (2000).</li><li>Witting, S. 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Phänotypische und funktionelle Charakterisierung von putativen endothelialen Vorläuferzellen ist wichtig, die bona fide ECFCs die in der Lage klonal und seriell Re-Beschichtung in der Kultur zu identifizieren sind und führen zu langlebigen und funktionellen implantierbare Blutgefäße in vivo. Menschlichem Nabelschnurblut ist mit ECFCs und der Konzentration dieser zirkulierenden Zellen sinkt mit dem Altern oder Krankheiten 10 angereichert. Neuere Studien legen nahe, dass ECFC kann eine wi...

<table border="1"><tbody><tr><td> Name des Reagenzes </td><td> Firma </td><td> Katalog-Nummer </td></tr><tr><td> Heparin-Natrium zur Injektion, USP </td><td> APP Pharmaceuticals </td><td> 504031 </td></tr><tr><td> Ficoll-Pague </td><td> Amersham Biosciences </td><td> 17-1440-03 </td></tr><tr><td> Mischkanüle </td><td> Maersk Medical </td><td> 500.11.012 </td></tr><tr><td> EGM-2 </td><td> Lonza </td><td> CC-3162 </td></tr><tr><td> Definierte FBS </td><td> Hyclone </td><td> SH30070.03 </td></tr><tr><td> TrypLE Express </td><td> Gibco </td><td> 12605 </td></tr><tr><td> Ratten-Kollagen Typ I </td><td> BD Biosciences </td><td> 354236 </td></tr><tr><td> Matrigel </td><td> BD Biosciences </td><td> 356234 </td></tr><tr><td> FcR-Block </td><td> Miltenyi Biotech </td><td> 130-059-901 </td></tr><tr><td> hCD31, FITC conjugaTed </td><td> BD Pharmingen </td><td> 555445 </td></tr><tr><td> hCD45, FITC-konjugierten </td><td> BD Pharmingen </td><td> 555482 </td></tr><tr><td> hCD14, FITC-konjugierten </td><td> BD Pharmingen </td><td> 555397 </td></tr><tr><td> hCD144, PE-konjugiertem </td><td> eBioscience </td><td> 12-1449-80 </td></tr><tr><td> hCD146, PE-konjugiertem </td><td> BD Pharmingen </td><td> 550315 </td></tr><tr><td> hCD105, PE-konjugiertem </td><td> Invitrogen </td><td> MHCD10504 </td></tr><tr><td> Ms IgG 1, k Antikörper, FITC-konjugierten </td><td> BD Pharmingen </td><td> 555748 </td></tr><tr><td> Fr. IgG 1, k-Antikörper, PE-konjugiertem </td><td> BD Pharmingen </td><td> 559320 </td></tr><tr><td> Ms IgG 2a, k Antikörper, FITC-konjugierten </td><td> BD Pharmingen </td><td> 555573 </td></tr><tr><td> Anti-Human-CD31 </td><td> Dako </td><td> Klon JC70 / A </td></tr><tr><td> Anti-mouse CD31 </td><td> BD Pharmingen </td><td> 553370 </td></tr><tr><td> 0,22-um-Vakuum-Filtration Systems </td><td> Millipore </td><td> SCGPU05RE </td></tr><tr><td> Eisessig, 17.4N </td><td> Fischer </td><td> A38-500 </td></tr><tr><td> Antibiotika-Antimykotika </td><td> Invitrogen </td><td> 15240-062 </td></tr><tr><td> Fötales Rinderserum (FBS) </td><td> Hyclone </td><td> SH30070.03 </td></tr><tr><td> IHC Zink Fixativ </td><td> BD Biosciences </td><td> 550523 </td></tr><tr><td> SYTOX Green Reagenz </td><td> Invitrogen </td><td> S33025 </td></tr><tr><td> Cloning Zylinder, steril </td><td> Fisher Scientific </td><td> 07-907-10 </td></tr></tbody></table>

phenotypic and functional characterization of endothelial colony forming cells derived from human umbilical cord blood

Langjährige Blick auf die Bildung neuer Blutgefäße durch Angiogenese, Vaskulogenese und Arteriogenese wurden vor kurzem 1 bewertet. Die Anwesenheit von zirkulierenden endothelialen Vorläuferzellen (EPCs) wurden erstmals im erwachsenen menschlichen peripheren Blut von Asahara et al. In 1997 2 bringt eine Infusion von neuen Hypothesen und Strategien für die vaskuläre Regeneration und Reparatur. EPCs sind selten, aber normale Bestandteile des zirkulierenden Blutes, dass die Heimat von Seiten der Bildung von Blutgefäßen oder vaskuläre Remodeling, und erleichtern Sie entweder postnatalen Vaskulogenese, Angiogenese, Arteriogenese oder zum größten Teil über parakrine Stimulation der bestehenden Gefäßwand-Zellen abgeleitet sind 3. Keine spezifische Marker zu identifizieren, einen EPC identifiziert wurde, und zur Zeit der Zustand des Feldes ist es, dass zahlreiche Zelltypen, einschließlich proangiogenen hämatopoetischen Stamm-und Vorläuferzellen zu verstehen, zirkulierenden angiogenen Zellen, Tie2 + Monozyten, myeloischen Vorläuferzellen cells, Tumor-assoziierte Makrophagen und aktivierten Makrophagen M2 bei der Stimulierung der angiogenen Prozess in verschiedenen präklinischen Tiermodellsystemen und beim Menschen in zahlreichen Erkrankungen 4, 5 teilnehmen. Endothelial Kolonie-bildenden Zellen (ECFCs) sind selten zirkulierenden lebensfähigen Endothelzellen durch robuste klonale Proliferationspotential, sekundäre und tertiäre Koloniebildungsfähigkeit auf Wiederplattieren und Fähigkeit zur Bildung von Gefäßen in vivo nach der Transplantation intrinsischen in immundefizienten Mäusen 6-8, dadurch gekennzeichnet. Während ECFCs wurden erfolgreich aus dem peripheren Blut von gesunden erwachsenen Probanden, Nabelschnurblut (CB) von gesunden Neugeborenen und Gefäßwand von zahlreichen menschlichen arteriellen und venösen Gefäße 6-9 isoliert, besitzt CB die höchste Frequenz von 7 ECFCs dass Display die robusteste klonale proliferative Potenzial und Form robuste und funktionelle Blutgefäße in vivo 8, 10-13. Während die AbleitungECFC aus adulten peripheren Blut wurde 14, 15 vorgestellt, hier haben wir die Methoden für die Ableitung beschreiben, Klonen, Expansion und in vitro sowie in vivo Charakterisierung ECFCs aus der humanen Nabelschnur CB.

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Phenotypic and Functional Characterization of Endothelial Colony Forming Cells Derived from Human Umbilical Cord Blood

Endothelial Kolonie-bildenden Zellen (ECFCs) im Umlauf Endothelzellen mit robusten klonale proliferative Potential zeigen, dass intrinsische<em&gt; In-vivo-</em&gt; Gefäß bildet Fähigkeit. Phänotypische und funktionelle Charakterisierung von Auswuchs Endothelzellen aus CB abgeleitet sind wichtig zur Identifizierung und Isolierung<em&gt; Bona fide</em&gt; ECFCs für mögliche klinische Anwendung bei der Reparatur von beschädigtem Gewebe.

Phänotypische und funktionelle Charakterisierung von Endothelial Kolonie-bildenden Zellen aus humanem Nabelschnurblut

Longstanding views of new blood vessel formation via angiogenesis, vasculogenesis, and arteriogenesis have been recently reviewed1. The presence of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVEC)

Isolation of Human Umbilical Vein Endothelial Cells HUVEC

Isolierung humaner Nabelschnur-Endothelzellen (HUVEC)

Angiogenesis is a complex multi-step process, where in response to angiogenic stimuli, new vessels are created from the existing vasculature. These steps ...

Forschung

Biologie

Isolation and Large Scale Expansion of Adult Human Endothelial Colony Forming Progenitor Cells

Isolation und großräumige Ausdehnung der erwachsenen Menschen Endothelial Colony Forming Progenitorzellen

This paper introduces a novel recovery strategy for endothelial colony forming progenitor cells (ECFCs) from heparinized but otherwise unmanipulated adult ...

Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells (ECFCs)

Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells MSCs and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells ECFCs

Isolation und tierisches Serum Freie Expansion der menschlichen Nabelschnur Derived mesenchymale Stromazellen (MSCs) und Endothelial Colony Forming Progenitorzellen (ECFCs)

The umbilical cord is a rich source for progenitor cells with high proliferative potential including mesenchymal stromal cells (also termed mesenchymal ...

Isolation and Enrichment of Rat Mesenchymal Stem Cells (MSCs) and Separation of Single-colony Derived MSCs

Isolation and Enrichment of Rat Mesenchymal Stem Cells MSCs and Separation of Single-colony Derived MSCs

Isolierung und Anreicherung von Rat mesenchymalen Stammzellen (MSCs) und Separation von Single-Kolonie Derived MSCs

MSCs are a population of adult stem cells that is a promising source for therapeutic applications. These cells can be isolated from the bone marrow and ...

Isolation and Culture of Pulmonary Endothelial Cells from Neonatal Mice

Isolierung und Kultivierung von pulmonaler Endothelzellen aus neugeborenen Mäusen

Endothelial cells provide a useful research model in many areas of vascular biology. Since its first isolation 1, human umbilical vein endothelial cells ...

A Quantitative Assay for Insulin-expressing Colony-forming Progenitors

A Quantitative Assay für Insulin-exprimierenden Koloniebildende Vorläufern

The field of pancreatic stem and progenitor cell biology has been hampered by a lack of in vitro functional and quantitative assays that allow for the ...

Manual Isolation of Adipose-derived Stem Cells from Human Lipoaspirates

Manuelle Isolierung von Fettgewebe gewonnene Stammzellen aus menschlichen Lipoaspirates

In 2001, researchers at the University of  California, Los Angeles, described the isolation of a new population of adult  stem cells from liposuctioned ...

Isolation of Blood-vessel-derived Multipotent Precursors from Human Skeletal Muscle

Isolierung von Blutgefäß abgeleiteten multi Vorläufer von menschlichen Skelettmuskel

Since the discovery of mesenchymal stem/stromal cells (MSCs), the native identity and localization&#160;of MSCs have been obscured by their retrospective ...

Two-photon Imaging of Intracellular Ca2+ Handling and Nitric Oxide Production in Endothelial and Smooth Muscle Cells of an Isolated Rat Aorta

Two-photon Imaging of Intracellular Ca2+ Handling and Nitric Oxide Production in Endothelial and Smooth Muscle Cells of an Isolated Rat Aorta

Zwei-Photonen-Imaging von intrazellulären Ca<sup&gt; 2+</sup&gt; Transport- und Stickoxid-Produktion in Endothelzellen und glatte Muskelzellen eines isolierten Rattenaorta

Calcium is a very important regulator of many physiological processes in vascular tissues. Most endothelial and smooth muscle functions highly depend on ...

Generation and Culture of Blood Outgrowth Endothelial Cells from Human Peripheral Blood

Generation und Kultur der Blut Outgrowth Endothelzellen aus menschlichen peripheren Blut-

Historically, the limited availability of primary endothelial cells from patients with vascular disorders has hindered the study of the molecular ...