Name: do-it-yourself device for recovery of cryopreserved samples accidentally dropped into cryogenic storage tanks
Uploaded: 2012-05-11T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks at JoVE.com

DIY kryogene udtagningsindretningen var blevet testet i løbet af de projekter, &quot;Modeling bakterielt protein prenylering i eukaryote celler ved hjælp af bioinformatik og molekylære metoder&quot; sponsoreret af Mary Louise Andrews Award for Cancer Research program, Virginia Academy of Science, &quot;fysiologisk Betydning af RNA redigering i Plasma dendritiske celler &quot;sponsoreret af The Thomas F. Jeffress og Kate Miller Jeffress Memorial Trust og stat Kontrakt 16.740.11.0364 (Ministeriet for videnskab og uddannelse, Rusland). Vi vil gerne takke Beth Eom for at få hjælp med RNA integritet eksperimentet.

1. Montering af Cryotolerant Anordning til hentning af Cryoboxes <ol><li> Hjælp af en tang, udjævne den ene side af tre sider Strong-Tie (figur 1A) til at foretage en L-formet Strong-Tie vist i figur 1B. Bemærk: Dimensionerne af Strong-Tie kan vælges afhængigt af diameteren af halsen af Dewar . </li><li> Fastgør to så stærke-bånd med en Strong-Tie T-rem (fig. 2) ved hjælp Crown møtrik, skive og skrue til at danne Cryoscoop basen, som vist i figur 3 ...

<ol>
	<li>Kittel, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Advances in Cryogenic Engineering. , 41 (1996).</li><li>Edeskuty, F. J., Walter, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Stewart Safety in the handling of cryogenic fluids. , (1996).</li><li>Council, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Prudent Practices in the Laboratory: Handling and Management of Chemical Hazards. , (2011).</li><li>Muyal, J., Muyal, V., Kaistha, B., Seifart, C., Fehrenbach, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+comparison+of+RNA+extraction+techniques+from+frozen+and+fresh+lung+tissues:+checkpoint+towards+gene+expression+studies.">Systematic comparison of RNA extraction techniques from frozen and fresh lung tissues: checkpoint towards gene expression studies.</a> Diagnostic Pathology. 4, 9 (2009).</li><li>Sambrook, J., Russell, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Molecular cloning: a laboratory manual. , (2001).</li><li>Holland, N. T., Smith, M. T., Eskenazi, B., Bastaki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+sample+collection+and+processing+for+molecular+epidemiological+studies.">Biological sample collection and processing for molecular epidemiological studies.</a> Mutation Research/Reviews in Mutation Research. 543, 217-234 (2003).</li><li>Lynch, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CELL,+TISSUE+AND+ORGAN+CULTURE+|+Storage+and+Cryopreservation.">CELL, TISSUE AND ORGAN CULTURE | Storage and Cryopreservation.</a> Encyclopedia of Rose Science. , 106-111 (2003).</li><li>Crawford, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Plastics Engineering. , (1998).</li><li>Gorenc, B., Tinyou, R., Syam, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Steel designers' handbook. , (1996).</li><li>Harper, C. A., Petrie, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plastics+materials+and+processes:+a+concise+encyclopedia.">Plastics materials and processes: a concise encyclopedia.</a> Wiley-Interscience. , (2003).</li></ol>

En af de mest almindelige metoder til hentning cryoboxes og kryoglas fra bunden af ​​Dewar tanken er at dekantere flydende nitrogen i en ekstra beholder og træk prøverne tilbage i kolben eller flydende i den dekanterede væske nitrogen. Dette er dog en usikker praksis, der kan forårsage kryogeniske forbrændinger eller kvælningsrisiko som følge af langvarig udsættelse for flydende nitrogen dampe 2. Andre almindelige måde at hente de faldne kryohætteglas indebærer brug af cryovial tænger 3.<...

<table border="1"><tbody><tr><td> Navn på reagenset </td><td> Firma </td><td> Katalog nummer </td><td> Kommentarer </td></tr><tr><td> Hillman Group Plated Gaffelformede Flade 1-3/8 x 4 meter, 14 gauge </td><td> Lokale hardware butik </td><td> N / A </td><td> En enhed, som kræves </td></tr><tr><td> Crown Bolt rustfrit stål # 6 - 32 x 3/8 in ovalt hoved Phillips Drive Maskinskrue </td><td> Lokale hardware butik </td><td> Model # 42.281 </td><td> 4 krævede enheder </td></tr><tr><td> Crown Bolt 3/8 in x 1-1/2 i. Forzinket stål Fender Spændskiver </td><td> Lokale hardware butik </td><td> Model # 20.122 </td><td> 4 krævede enheder </td></tr><tr><td> Crown Bolt Forzinket # 8-32 Maskinskrue Nut </td><td> Lokale hardware butik </td><td> Model # 18.512 </td><td> 4 krævede enheder </td></tr><tr><td> Simpson Strong-Tie BC40Z 4 In.x4 i. Half Base </td><td> Lokal Hardwareshoppe </td><td> Model # BC40Z </td><td> 2 krævede enheder </td></tr><tr><td> Simpson Strong-Tie 6 in x 6 in T Strap </td><td> Lokale hardware butik </td><td> Model # 66T </td><td> En enhed, som kræves </td></tr><tr><td> Oneida 6 &quot;Mesh Strainer </td><td> Lokal Købmand </td><td> Model # 7859W </td><td> En enhed, som kræves </td></tr><tr><td> Den Hillman Koncernen Galvaniseret sekskantmøtrikkerne 3/8-16 </td><td> Lokale hardware butik </td><td> Model #: 810.509 </td><td> 6 kræves enheder </td></tr><tr><td> Den Hillman Koncernen Galvaniseret Hex Bolte 3/8- 16 </td><td> Lokale hardware butik </td><td></td><td> 4 krævede enheder </td></tr><tr><td> Skum til isolering </td><td> Lokale hardware butik </td><td></td><td> En enhed, som kræves </td></tr><tr><td> Skruetrækker </td><td> Lokale hardware butik </td><td></td><td> En enhed, som kræves </td></tr><tr><td> Tænger </td><td> Lokale hardware butik </td><td></td><td> En enhed, som kræves </td></tr></tbody></table>

do-it-yourself device for recovery of cryopreserved samples accidentally dropped into cryogenic storage tanks

Flydende nitrogen er farveløs, lugtfri, ekstremt koldt (-196 ° C) væske holdes under tryk. Det er almindeligt anvendt som et kryogent fluid til langtidsopbevaring af biologiske materialer, såsom blod, celler og væv 1,2. Den kryogene karakter af flydende nitrogen, mens ideel til prøve konservering, kan forårsage hurtig nedfrysning af levende væv på kontakt - kendt som &#39;kryogene brænde &quot;2, hvilket kan føre til alvorlige forfrysninger i personer, der er tæt involveret i lagring og fremfinding af prøver fra dewarkar. Derudover, som flydende kvælstof fordamper det reducerer iltindholdet i luften og kan forårsage asfyksi, især i lukkede rum 2. I laboratorier, er biologiske prøver opbevares ofte i kryoglas eller cryoboxes stablet i rustfrit stål stativer i dewar-karret tankene 1. Disse lagerreoler er forsynet med et langt skaft for at forhindre kasser i at glide ud fra stativerne og ind i bunden afDewarkar under rutinemæssig håndtering. Alt for ofte, dog kasser eller hætteglas med værdifulde prøver glider ud og synke til bunds i flydende nitrogen fyldt tank. I sådanne tilfælde kunne prøverne kedelig hentet efter overførsel af det flydende nitrogen ind i et ekstra beholder eller kassere den. De bokse og hætteglas kan derefter være relativt sikkert inddrives fra tømmes Dewar. Imidlertid kryogene arten af ​​flydende nitrogen og ekspansionshastigheden gør forsænket sample-hentning farligt. Det er almindeligt anbefalet af Safety Kontorer at prøve hentning aldrig skal udføres af en enkelt person. Et andet alternativ er at bruge kommercielt tilgængelige kølige grabbers eller tænger at trække sig ud hætteglassene 3. Dog begrænset synlighed inden for de mørke væskefyldte dewarkar udgør en væsentlig begrænsning i deres anvendelse. I denne artikel beskriver vi konstruktionen af ​​en Cryotolerant DIY udtagningsindretningen, hvilket gør prøven hentning fra Dewar indeholder kryogene væsker både sikker ennd nemme.

Watch this Scientific Journal Video about Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks at JoVE.com

Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks

Her præsenterer vi en lav pris, holdbar cryotolerant enhed til prøve hentning fra Dewar tanke fyldt med flydende nitrogen. Den lette konstruktion og modulopbygning af enheden gør processen med at prøve hentning fra kryogene tanke sikkert og nemt.

Gør-det-selv enhed for inddrivelse af Kryopræserverede Prøver uheld faldt i Kryogene lagertanke

Liquid nitrogen is colorless, odorless, extremely cold (-196 &deg;C) liquid kept under pressure. It is commonly used as a cryogenic fluid for long term ...

Research

JoVE Journal

Biology

Fabrication of a Microfluidic Device for the Compartmentalization of Neuron Soma and Axons

In this video, we demonstrate the technique of soft lithography with polydimethyl siloxane (PDMS) which we use to fabricate a microfluidic device for ...

A Gradient-generating Microfluidic Device for Cell Biology

 The fabrication and operation of a gradient-generating microfluidic device for studying cellular behavior is described.  A microfluidic platform is an ...

Transplantation of Cells Directly into the Kidney of Adult Zebrafish

Regenerative medicine based on the transplantation of stem or progenitor cells into damaged tissues has the potential to treat a wide range of chronic ...

Test Samples for Optimizing STORM Super-Resolution Microscopy

Prøverne, til Optimering STORM Super-opløsning Microscopy

STORM is a recently developed super-resolution microscopy technique with up to 10 times better resolution than standard fluorescence microscopy ...

Recovery of Adult Zebrafish Hearts for High-throughput Applications

Inddrivelse af voksne zebrafisk Hearts for high-throughput applikationer

Use of the zebrafish model system for studying development, regeneration, and disease is expanding toward use of adult hearts for cell dissociation and ...

Quasi-metagenomic Analysis of Salmonella from Food and Environmental Samples

Quasi-metagenomic Analysis of Salmonella from Food and Environmental Samples

Kvasi-metagenomic analyse af Salmonella fra mad og miljøprøver

Quasi-metagenomics sequencing refers to the sequencing-based analysis of modified microbiomes of food and environmental samples. In this protocol, ...

Reproductive Techniques for Ovarian Monitoring and Control in Amphibians

Reproduktive teknikker til overvågning og kontrol af æggestokkene i padde

Ovarian control and monitoring in amphibians require a multi-faceted approach. There are several applications that can successfully induce reproductive ...

Cryogenic Sample Loading into a Magic Angle Spinning Nuclear Magnetic Resonance Spectrometer that Preserves Cellular Viability

Kryogen prøvebelastning i en magisk vinkel spinning nuklear magnetisk resonansspektrometer, der bevarer cellulær levedygtighed

Dynamic nuclear polarization (DNP) can dramatically increase the sensitivity of magic angle spinning (MAS) nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy. ...

Label-Free Imaging of Lipid Storage Dynamics in Caenorhabditis elegans using Stimulated Raman Scattering Microscopy

Label-Free Imaging of Lipid Storage Dynamics in Caenorhabditis elegans using Stimulated Raman Scattering Microscopy

Label-Free Imaging af Lipid Storage Dynamics i Caenorhabditis elegans ved hjælp af stimuleret Raman Scattering Mikroskopi

Lipid metabolism is a fundamental physiological process necessary for cellular and organism health. Dysregulation of lipid metabolism often elicits ...

Strategies for Optimization of Cryogenic Electron Tomography Data Acquisition

Strategier for optimering af kryogene Electron Tomography Data Acquisition

Cryogenic electron tomography (cryoET) is a powerful method to study the 3D structure of biological samples in a close-to-native state. Current ...