Name: using eggs from schistosoma mansoni as an in vivo model of helminth-induced lung inflammation
Uploaded: 2012-06-05T13:00:00
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Ce travail a été soutenu par le National Institutes of Health (NIH) AI091759 et la maladie de Crohn et la colite Fondation de William de l&#39;Amérique et Shelby Modell famille Bourse de recherche Fondation (à MN). Schistosome-souris infectées ont été fournis par le Centre de ressources Schistosome NIAID (NIAID contrat N01 A130026).

1. Purifiant œufs de Schistosoma mansoni <ol><li> Infect suisse-Webster souris avec des cercaires de schistosomes, qui est le stade infectieux dans le cycle de vie Schistosoma 8. Sinon, procurez-schistosome-souris infectées par le NIAID ressources schistosomiase Centre ( <a href="http://www.schisto-resource.org/" target="_blank">http://www.schisto-resource.org/~~V</a> ). Laissez la souris pour 6-7 semaines après l&#39;infection, par lequel point dans le temps, les oeufs sont présents d...

<ol>
	<li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+and+control+of+schistosomiasis+and+soil-transmitted+helminthiasis:+report+of+a+WHO+expert+committee.">Prevention and control of schistosomiasis and soil-transmitted helminthiasis: report of a WHO expert committee.</a> WHO Technical Report Series 912. , (2002).</li><li>Pearce, E. J., MacDonald, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+immunobiology+of+schistosomiasis.">The immunobiology of schistosomiasis.</a> Nat. Rev. Immunol. 2, 499-511 (2002).</li><li>Sandler, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+gene+expression+profiles+during+acute+pathogen-induced+pulmonary+inflammation+reveal+divergent+roles+for+Th1+and+th2+responses+in+tissue+repair.">Global gene expression profiles during acute pathogen-induced pulmonary inflammation reveal divergent roles for Th1 and th2 responses in tissue repair.</a> J. Immunol. 171, 3655-3667 (2003).</li><li>Perrigoue, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IL-31-IL-31R+interactions+negatively+regulate+type+2+inflammation+in+the+lung.">IL-31-IL-31R interactions negatively regulate type 2 inflammation in the lung.</a> J. Exp. Med. 204, 481-487 (2007).</li><li>Sandor, M., Weinstock, J. V., Wynn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Granulomas+in+schistosome+and+mycobacterial+infections:+a+model+of+local+immune+responses.">Granulomas in schistosome and mycobacterial infections: a model of local immune responses.</a> Trends Immunol. 24, 44-52 (2003).</li><li>Nair, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alternatively+activated+macrophage-derived+RELM-{alpha}+is+a+negative+regulator+of+type+2+inflammation+in+the+lung.">Alternatively activated macrophage-derived RELM-{alpha} is a negative regulator of type 2 inflammation in the lung.</a> J. Exp. Med. 206, 937-952 (2009).</li><li>Dalton, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+the+isolation+of+schistosome+eggs+and+miracidia+free+of+contaminating+host+tissues.">A method for the isolation of schistosome eggs and miracidia free of contaminating host tissues.</a> Parasitology. 115, 29-32 (1997).</li><li>Lewis, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large-scale+laboratory+maintenance+of+Schistosoma+mansoni,+with+observations+on+three+schistosome/snail+host+combinations.">Large-scale laboratory maintenance of Schistosoma mansoni, with observations on three schistosome/snail host combinations.</a> J. Parasitol. 72, 813-829 (1986).</li><li>Tilney, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterns+of+lymphatic+drainage+in+the+adult+laboratory+rat.">Patterns of lymphatic drainage in the adult laboratory rat.</a> J. Anat. 109 (Pt. 3), 369-383 (1971).</li><li>Lewis, F., Coligan, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Schistosomiasis.">Schistosomiasis.</a> Current protocols in immunology. Chapter 19, Unit 19 (2001).</li><li>Kaplan, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Th2+cells+are+required+for+the+Schistosoma+mansoni+egg-induced+granulomatous+response.">Th2 cells are required for the Schistosoma mansoni egg-induced granulomatous response.</a> J. Immunol. 160, 1850-1856 (1998).</li><li>Wynn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrotic+disease+and+the+T(H)1/T(H)2+paradigm.">Fibrotic disease and the T(H)1/T(H)2 paradigm.</a> Nat. Rev. Immunol. 4, 583-594 (2004).</li><li>Cheever, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variation+of+hepatic+fibrosis+and+granuloma+size+among+mouse+strains+infected+with+Schistosoma+mansoni.">Variation of hepatic fibrosis and granuloma size among mouse strains infected with Schistosoma mansoni.</a> Am. J. Trop. Med. Hyg. 37, 85-97 (1987).</li></ol>

Ici, un modèle utilisant de Schistosoma mansoni oeufs à induire une inflammation du poumon de type 2 est décrite. Les traits caractéristiques de ce modèle incluent le puissant réponse immunitaire de type Th2, inflammation des voies respiratoires et la formation de granulomes pulmonaires. Étant donné que ces paramètres dépendent des réponses des lymphocytes CD4 Th2 11, il s&#39;agit d&#39;un modèle utile pour étudier les effets des suppressions de protéines spécifiques ou de la lignée ...

<table border="1"><tbody><tr><td> Réactif </td><td> Taille / Description </td><td> Entreprise </td><td> Catalogue # </td></tr><tr><td> Collagénase / dispase </td><td> 500 mg </td><td> Roche Applied Science </td><td> 11 097 113 001 </td></tr><tr><td> Diff Quik Hema 3 Stain </td><td> Emballer </td><td> Fisher Scientific Co. LLC </td><td> 122-911 </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> Liquide </td><td> Gibco </td><td> 11965 </td></tr><tr><td> Falcon de 50 ml </td><td> Emballer </td><td> Faucon </td><td> 352070 </td></tr><tr><td> Intramedic PE tubes </td><td> 0,58 mm </td><td> Becton Dickinson and Co. </td><td> 427410 </td></tr><tr><td> L&#39;isoflurane </td><td> 250 ml </td><td> De la santé animale abbé </td><td> 52600405 </td></tr><tr><td> La kétamine </td><td> 100 mg / ml </td><td> Fort Dodge, la santé animale </td&gt; <td> N / A </td></tr><tr><td> Anticorps anti-récepteur du mannose </td><td> La biotine </td><td> AbD Serotec </td><td> MCA2235B </td></tr><tr><td> Metallic Crépine </td><td> Passoire de cuisine standard </td><td> Cible </td><td> Laurentiis </td></tr><tr><td> Paraformaldéhyde </td><td> 16% </td><td> Electron Microsc. Sciences </td><td> 15710 </td></tr><tr><td> Pénicilline / streptomycine </td><td> 100x </td><td> Gibco </td><td> 15070 </td></tr><tr><td> Percoll </td><td> 1 Litre </td><td> GE Healthcare Biosciences </td><td> 17 0891 01 </td></tr><tr><td> Anticorps RELMα </td><td> 50 pg </td><td> Peprotech </td><td> 500-P214 </td></tr><tr><td> Fil chirurgical </td><td> 2,0 USP 100 yds </td><td> Spécialités chirurgicales Corp </td><td> SP118 </td></tr><tr><td> Aiguille de la seringue </td><td> 23g, 3/4 pouce </td><td> BD Vacutainer Lab. Med. </td><td>305143 </td></tr><tr><td> Normes pour les essais aux Etats-Unis Sieve </td><td> 150 um, 0,0059 &quot; </td><td> WS Tyler, Inc </td><td> ASTME-11, Spec. N ° 100 </td></tr><tr><td> La xylazine </td><td> 20 mg / ml </td><td> Majordome </td><td> N / A </td></tr></tbody></table>

using eggs from schistosoma mansoni as an in vivo model of helminth-induced lung inflammation

Schistosomes sont schistosomes qui infectent environ 200 millions de personnes dans le monde 1. Dans l&#39;infection chronique à Schistosoma, l&#39;une pathologie grave, y compris la fibrose du foie et de la splénomégalie, est causée par la réponse immunitaire à des œufs de parasites plutôt que le parasite lui-même 2. Œufs de parasites induisent une réponse Th2 caractérisée par la production d&#39;IL-4, IL-5 et IL-13, l&#39;activation alternative des macrophages et le recrutement des éosinophiles. Ici, nous décrivons l&#39;injection d&#39;œufs de Schistosoma mansoni en tant que modèle pour examiner les réponses spécifiques du parasite cytokines Th2 dans les poumons et les ganglions lymphatiques drainant, la formation de granulomes pulmonaires entourant l&#39;oeuf et l&#39;inflammation des voies respiratoires. Après une sensibilisation par voie intrapéritonéale et intraveineuse défi, S. oeufs mansoni sont transportés à travers le poumon des artères pulmonaires où ils sont piégés dans le parenchyme du poumonpar les granulomes composés de lymphocytes, les éosinophiles et les macrophages activés alternativement 3-6. Associé à la formation de granulomes, de l&#39;inflammation dans les espaces broncho-alvéolaires, l&#39;expansion des ganglions lymphatiques drainant et l&#39;activation des cellules CD4 T peut être observée. Ici, nous détaillons le protocole pour isoler Schistosoma mansoni oeufs à partir de foies infectés (modifié à partir de 7), la sensibilisation et difficile souris, et la récupération des organes (lavage broncho-alvéolaire (LBA), du poumon et les ganglions lymphatiques drainant) pour l&#39;analyse. Nous incluons également histologique des données représentatives et immunologiques et des suggestions pour l&#39;analyse immunologique supplémentaire. Dans l&#39;ensemble, cette méthode fournit un modèle in vivo pour étudier les réponses immunologiques induites par les helminthes dans le poumon, qui est largement applicable à l&#39;étude des maladies inflammatoires, y compris Th2 infestation par les helminthes, les maladies fibrotiques, l&#39;inflammation allergique et l&#39;asthme. Avantages de ce modèle pour l&#39;étude de type 2 l&#39;inflammation dans les poumons comprennent la reproductibilité d&#39;une puissante réponse inflammatoire Th2 dans les poumons et les ganglions lymphatiques drainant, la facilité de l&#39;évaluation de l&#39;inflammation par l&#39;examen histologique des granulomes entourant l&#39;œuf, et le potentiel de stockage à long terme du parasite oeufs.

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Using Eggs from Schistosoma mansoni as an In vivo Model of Helminth-induced Lung Inflammation

Schistosoma mansoni oeufs sont des stimulateurs efficaces du type T auxiliaire 2 (Th2) la réponse immunitaire, caractéristique d&#39;une infection parasitaire, l&#39;asthme et l&#39;inflammation allergique. Ce protocole utilise S. mansoni œuf d&#39;injection afin de générer un taux de CD4 Th2 induite par les cytokines réponse inflammatoire dans les poumons, caractérisée par la formation de granulomes pulmonaires autour de l&#39;oeuf, l&#39;éosinophilie et l&#39;activation des macrophages alternative.

En utilisant des oeufs de<em&gt; Schistosoma mansoni</em&gt; En tant que<em&gt; In vivo</em&gt; Modèle de l&#39;inflammation pulmonaire induite par les helminthes

Schistosoma parasites are blood flukes that infect an estimated 200 million people worldwide 1. In chronic infection with Schistosoma, the severe ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Using Eggs from Schistosoma mansoni as an In vivo Model of Helminth-induced Lung Inflammation

Cercarial Transformation and in vitro Cultivation of Schistosoma mansoni Schistosomules

Cercarial Transformation and in vitro Cultivation of Schistosoma mansoni Schistosomules

Transformation des cercaires et<em&gt; In vitro</em&gt; Culture de<em&gt; Schistosoma mansoni</em&gt; Schistosomules

Schistosome parasites are the causative agents of schistosomiasis, a chronically debilitating disease that affects over 200 million people globally and ...

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