Name: using eggs from schistosoma mansoni as an in vivo model of helminth-induced lung inflammation
Uploaded: 2012-06-05T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Eggs from Schistosoma mansoni as an In vivo Model of Helminth-induced Lung Inflammation at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי המכון הלאומי לבריאות בארה&quot;ב (NIH) AI091759 ו קרוהן קוליטיס קרן של ויליאם של אמריקה ואת שלבי Modell משפחה פרס קרן מחקר (ל MN). Schistosome נגועים עכברים סופקו על ידי מרכז המשאבים NIAID Schistosome (חוזה NIAID N01 A130026).

1. טיהור Schistosoma mansoni ביצים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להדביק שוויצרי-Webster עכברים עם cercariae schistosome, המהווה את הבמה זיהומיות במחזור החיים Schistosoma 8. לחלופין, לקבל schistosome נגועים עכברים ממשאב NIAID Schistosomiasis מרכז ( <a href="http://www.schisto-resource.org/" target="_b...

<ol>
	<li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+and+control+of+schistosomiasis+and+soil-transmitted+helminthiasis:+report+of+a+WHO+expert+committee.">Prevention and control of schistosomiasis and soil-transmitted helminthiasis: report of a WHO expert committee.</a> WHO Technical Report Series 912. , (2002).</li><li>Pearce, E. J., MacDonald, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+immunobiology+of+schistosomiasis.">The immunobiology of schistosomiasis.</a> Nat. Rev. Immunol. 2, 499-511 (2002).</li><li>Sandler, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+gene+expression+profiles+during+acute+pathogen-induced+pulmonary+inflammation+reveal+divergent+roles+for+Th1+and+th2+responses+in+tissue+repair.">Global gene expression profiles during acute pathogen-induced pulmonary inflammation reveal divergent roles for Th1 and th2 responses in tissue repair.</a> J. Immunol. 171, 3655-3667 (2003).</li><li>Perrigoue, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IL-31-IL-31R+interactions+negatively+regulate+type+2+inflammation+in+the+lung.">IL-31-IL-31R interactions negatively regulate type 2 inflammation in the lung.</a> J. Exp. Med. 204, 481-487 (2007).</li><li>Sandor, M., Weinstock, J. V., Wynn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Granulomas+in+schistosome+and+mycobacterial+infections:+a+model+of+local+immune+responses.">Granulomas in schistosome and mycobacterial infections: a model of local immune responses.</a> Trends Immunol. 24, 44-52 (2003).</li><li>Nair, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alternatively+activated+macrophage-derived+RELM-{alpha}+is+a+negative+regulator+of+type+2+inflammation+in+the+lung.">Alternatively activated macrophage-derived RELM-{alpha} is a negative regulator of type 2 inflammation in the lung.</a> J. Exp. Med. 206, 937-952 (2009).</li><li>Dalton, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+the+isolation+of+schistosome+eggs+and+miracidia+free+of+contaminating+host+tissues.">A method for the isolation of schistosome eggs and miracidia free of contaminating host tissues.</a> Parasitology. 115, 29-32 (1997).</li><li>Lewis, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large-scale+laboratory+maintenance+of+Schistosoma+mansoni,+with+observations+on+three+schistosome/snail+host+combinations.">Large-scale laboratory maintenance of Schistosoma mansoni, with observations on three schistosome/snail host combinations.</a> J. Parasitol. 72, 813-829 (1986).</li><li>Tilney, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterns+of+lymphatic+drainage+in+the+adult+laboratory+rat.">Patterns of lymphatic drainage in the adult laboratory rat.</a> J. Anat. 109 (Pt. 3), 369-383 (1971).</li><li>Lewis, F., Coligan, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Schistosomiasis.">Schistosomiasis.</a> Current protocols in immunology. Chapter 19, Unit 19 (2001).</li><li>Kaplan, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Th2+cells+are+required+for+the+Schistosoma+mansoni+egg-induced+granulomatous+response.">Th2 cells are required for the Schistosoma mansoni egg-induced granulomatous response.</a> J. Immunol. 160, 1850-1856 (1998).</li><li>Wynn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrotic+disease+and+the+T(H)1/T(H)2+paradigm.">Fibrotic disease and the T(H)1/T(H)2 paradigm.</a> Nat. Rev. Immunol. 4, 583-594 (2004).</li><li>Cheever, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variation+of+hepatic+fibrosis+and+granuloma+size+among+mouse+strains+infected+with+Schistosoma+mansoni.">Variation of hepatic fibrosis and granuloma size among mouse strains infected with Schistosoma mansoni.</a> Am. J. Trop. Med. Hyg. 37, 85-97 (1987).</li></ol>

כאן, מודל העסקת Schistosoma ביצים mansoni לגרום לדלקת ריאות מסוג 2 מתואר. התכונות האופייניות של הדגם הזה כוללות את התגובה החיסונית חזקה Th2, דלקת דרכי הנשימה היווצרות גרנולומה ריאתי. מאז פרמטרים אלה נשענים על תגובות מסוג CD4 סלולריים Th2 11, זהו מודל שימושי כדי לחקור ...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> מגיב </td><td> גודל / תיאור </td><td> חברה </td><td> קטלוג # </td></tr><tr><td> Collagenase / Dispase </td><td> 500 מ&quot;ג </td><td> רוש ומדע יישומי </td><td> 11 097 113 001 </td></tr><tr><td> הבדל במרכול המה 3 כתמים </td><td> לארוז </td><td> פישר סיינטיפיק ושות LLC </td><td> 122-911 </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> נוזל </td><td> Gibco </td><td> 11965 </td></tr><tr><td> פלקון 50 מ&quot;ל </td><td> לארוז </td><td> בז </td><td> 352070 </td></tr><tr><td> Intramedic Tubing PE </td><td> 0.58 מ&quot;מ </td><td> בקטון דיקינסון ושות&#39; </td><td> 427410 </td></tr><tr><td> Isoflurane </td><td> 250 מ&quot;ל </td><td> אבוט לבריאות בעלי חיים </td><td> 52600405 </td></tr><tr><td> קטמין </td><td> 100 מ&quot;ג / מ&quot;ל </td><td> Fort Dodge, לבריאות בעלי חיים </TD&gt; <td> N / A </td></tr><tr><td> הקולטן נוגדנים מנוז </td><td> ביוטין </td><td> עבד Serotec </td><td> MCA2235B </td></tr><tr><td> מסננת מתכת </td><td> מטבח רגיל מסננת </td><td> יעד </td><td> לורנטיס </td></tr><tr><td> Paraformaldehyde </td><td> 16% </td><td> אלקטרונים Microsc. מדעי </td><td> 15710 </td></tr><tr><td> פניצילין / סטרפטומיצין </td><td> 100x </td><td> Gibco </td><td> 15070 </td></tr><tr><td> Percoll </td><td> 1 ליטר </td><td> GE Healthcare Biosciences </td><td> 0891 17 01 </td></tr><tr><td> RELMα נוגדן </td><td> 50 מיקרוגרם </td><td> Peprotech </td><td> 500-P214 </td></tr><tr><td> כירורגי נושא </td><td> 2.0 USP 100 yds </td><td> כירורגי Specialties קורפ </td><td> SP118 </td></tr><tr><td> מחט המזרק </td><td> 23g, 3/4 אינץ&#39; </td><td> BD Vacutainer מעבדה. מד. </td><td>305143 </td></tr><tr><td> ארה&quot;ב תקני בדיקה Sieve </td><td> 150 מיקרומטר, 0.0059 &quot; </td><td> WS טיילר, Inc </td><td> ASTME-11, Spec. מס &#39;100 </td></tr><tr><td> Xylazine </td><td> 20 מ&quot;ג / מ&quot;ל </td><td> שר המשקים </td><td> N / A </td></tr></tbody></table>

using eggs from schistosoma mansoni as an in vivo model of helminth-induced lung inflammation

טפילים Schistosoma הם תולעים דם להדביק כ 200 מיליון אנשים ברחבי העולם 1. זיהום כרוני עם Schistosoma, פתולוגיה חמורה, לרבות סיסטיק הכבד splenomegaly, נגרמת על ידי התגובה החיסונית את הביצים טפיל ולא הטפיל עצמו 2. ביצי הטפיל לגרום תגובה Th2 מאופיינת בייצור IL-4, IL-5 ו-IL-13, הפעלה חלופית של מקרופאגים ועל גיוס של אאוזינופילים. כאן אנו מתארים זריקת ביצים Schistosoma mansoni כמודל לבחון טפיל ספציפיים תגובות ציטוקינים Th2 בריאה ובלוטות לימפה וניקוז, היווצרות של גרנולומות ריאתי המקיפים את הביצה, ודלקות בדרכי הנשימה. בעקבות רגישות intraperitoneal ואתגר תוך ורידי, ש &#39; ביצים mansoni מועברים אל הריאות באמצעות עורקי הריאה שם הם כלואים בתוך parenchyma ריאותגרנולומות על ידי המורכבות של לימפוציטים, אאוזינופילים ומקרופגים מופעל לחילופין 3-6. קשורה להיווצרות דלקת, גרנולומה של broncho-מכתשיים מקומות, הרחבת קשרי הלימפה מסוג CD4 ו מרוקנים הפעלת תא T ניתן לצפות. כאן בפירוט את הפרוטוקול לבידוד Schistosoma ביצים mansoni מ כבדי נגועים (שונה מ 7), רגישות ומאתגרת עכברים, לשחזר את אברי (broncho-מכתשיים שטיפה (BAL), ריאות ובלוטות לימפה וניקוז) לניתוח. אנו גם נציג היסטולוגית ונתונים חיסוניות והצעות חיסוניות ניתוח נוסף. באופן כללי, שיטה זו מספקת במודל vivo לחקור helminth המושרה תגובות חיסוניות בריאה, שהוא החלים רחב המחקר של מחלות דלקתיות, כולל דלקת Th2 helminth, מחלות fibrotic, דלקת אלרגית ואסטמה. היתרונות של מודל זה לחקר typה 2 דלקת ריאות כוללים שחזור של תגובה דלקתית חזקה Th2 בריאה ובלוטות לימפה וניקוז, להקל על הערכה של דלקת בבדיקה היסטולוגית של גרנולומות המקיפים את הביצה, והוא חסר יכולת אחסון לטווח ארוך של הטפיל ביצים.

Watch this Scientific Journal Video about Using Eggs from Schistosoma mansoni as an In vivo Model of Helminth-induced Lung Inflammation at JoVE.com

Using Eggs from Schistosoma mansoni as an In vivo Model of Helminth-induced Lung Inflammation

Schistosoma ביצים mansoni הם לגירוי חזק מסוג T helper 2 (Th2) בתגובה החיסונית, מאפיין של דלקת טפיל, אסטמה ודלקת אלרגית. פרוטוקול זה מנצל ס mansoni ביצה הזרקת ליצור CD4 תגובה ציטוקינים Th2-Induced דלקת בריאה, המאופיינת היווצרות גרנולומה ריאות סביב הביצה, eosinophilia והפעלה מקרופאג חלופי.

שימוש ביצים מ<em&gt; Schistosoma mansoni</em&gt; כמו<em&gt; ב-vivo</em&gt; דגם של דלקת ריאות הנגרמת helminth

Schistosoma parasites are blood flukes that infect an estimated 200 million people worldwide 1. In chronic infection with Schistosoma, the severe ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Using Eggs from Schistosoma mansoni as an In vivo Model of Helminth-induced Lung Inflammation

Cercarial Transformation and in vitro Cultivation of Schistosoma mansoni Schistosomules

Cercarial Transformation and in vitro Cultivation of Schistosoma mansoni Schistosomules

טרנספורמציה Cercarial ו במבחנה טיפוח Schistosoma mansoni Schistosomules

Schistosome parasites are the causative agents of schistosomiasis, a chronically debilitating disease that affects over 200 million people globally and ...

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

היכרות עם מתח שאר בחקר הדבקה חיידקית

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

Facilitating Drug Discovery: An Automated High-content Inflammation Assay in Zebrafish

גילוי תרופות בהנחיית: Assay אוטומטי גבוהים תוכן דלקת דג הזברה

Zebrafish larvae are particularly amenable to whole animal small molecule screens1,2 due to their small size and relative ease of manipulation and ...

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

בשיטת ההדמיה vivo להבחין דלקת אקוטית וכרונית

Inflammation is a fundamental aspect of many human diseases. In this video report, we demonstrate non-invasive bioluminescence imaging techniques that ...

Influenza Virus Propagation in Embryonated Chicken Eggs

רביה וירוס השפעת בembryonated עוף ביצים

Influenza infection is associated with about 36,000 deaths and more than 200,000 hospitalizations every year in the United States. The continuous ...

An Optimized Method for Isolating and Expanding Invariant Natural Killer T Cells from Mouse Spleen

שיטה אופטימלית עבור בידוד והרחבת תאי Invariant הטבעי רוצח T מטחול העכבר

The ability to rapidly secrete cytokines upon stimulation is a functional characteristic of the invariant natural killer T (iNKT) cell lineage. iNKT cells ...

Precision-cut Mouse Lung Slices to Visualize Live Pulmonary Dendritic Cells

Precision-לחתוך פרוסות ריאת עכבר לדמיין תאי דנדריטים ריאה חיים

Inhalation of allergens and pathogens elicits multiple changes in a variety of immune cell types in the lung. Flow cytometry is a powerful technique for ...

Optical Screening of Novel Bacteria-specific Probes on Ex Vivo Human Lung Tissue by Confocal Laser Endomicroscopy

Optical Screening of Novel Bacteria-specific Probes on Ex Vivo Human Lung Tissue by Confocal Laser Endomicroscopy

הקרנת אופטי של הרומן חיידקים ספציפיים רגשים על לשעבר Vivo רקמת הריאה האנושית על ידי לייזר קונפוקלי Endomicroscopy

Improving the speed and accuracy of bacterial detection is important for patient stratification and to ensure the appropriate use of antimicrobials. To ...

Assessment of the Cytotoxic and Immunomodulatory Effects of Substances in Human Precision-cut Lung Slices

הערכת ציטוטוקסיות ואפקטים Immunomodulatory של חומרים אמבריולוגיה דיוק-לחתוך פרוסות

Respiratory diseases in their broad diversity need appropriate model systems to understand the underlying mechanisms and enable development of new ...

Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles from Adult Schistosoma japonicum

Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles from Adult Schistosoma japonicum

בידוד ושלפוחיות אפיון של חוץ-תאית מן הבוגרים עלקת הבילהרציה japonicum

Extracellular vesicles (EVs) are membranous vesicles released by a variety of cells into the extracellular microenvironment. EVs represent a population of ...