Name: non-invasive imaging of disseminated candidiasis in zebrafish larvae
Uploaded: 2012-07-30T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Non-invasive Imaging of Disseminated Candidiasis in Zebrafish Larvae at JoVE.com

فإن الكتاب أود أن أشكر مختبر الدكتور كارول كيم للتدريب microinjection، كلاريسا هنري لتقديم المشورة بشأن تسريع تطور الجنين واستخدام المعدات، وناثان لوسون للمساهمة fli1: EGFP الأسماك. ونحن نشكر أعضاء المختبر ويلر والحوائط شون لقراءة نقدية للمخطوطة. ونود أيضا أن نشكر مارك Nilan للرعاية الأسماك والمشورة، وريان Phennicie وجابور كريستين لتقديم المشورة الفنية في هذا المشروع. وقد تم تمويل هذا العمل من خلال مساعدة مالية البحوث MAFES إلى الإخوة ك، وهي هاتش MAFES منحة E08913-08، وجائزة NCRR المعاهد الوطنية للصحة P20RR016463 إلى يلر ر.

تم تنفيذ جميع البروتوكولات رعاية الزرد والتجارب تحت رعاية الحيوان المؤسسية واللجنة الاستخدام (IACUC) بروتوكول A2009-11-01. 1. Morpholino وصحون حقن اليرقات تجريبية مدتها: * (10-15 دقيقة) <p class="jove_content...

طريقة microinjection الزرد المقدمة هنا يختلف عن Gutzman وآخرون (34). في ذلك هنا علينا أن نبرهن عن طريق حقن الحويصلة الأذنية إلى البطين الدماغ المؤخر من اليرقات HPF 36-48. الأسلوب وصفنا يسمح للحقن متسق من 10-15 الخميرة إلى البطين الدماغ المؤخر مع انخفاض تلف الأنسجة. هذا البروت...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td><td> تعليق (اختياري) </td></tr><tr><td> التفريخ الدبابات </td><td> الموائل المائية </td><td> 2L </td><td></td></tr><tr><td> 1.7 مل من أنابيب </td><td> Axygen </td><td> MCT-175-C </td><td></td></tr><tr><td> لحظة المحيط </td><td> فيشر العلمية </td><td> S17957C </td><td></td></tr><tr><td> إضافي عميق أطباق بتري </td><td> فيشر العلمية </td><td> 08-757-11Z </td><td></td></tr><tr><td> معيار أطباق بتري </td><td> VWR العلمية </td><td> 25384-302 </td><td></td></tr><tr><td> نقل ماصات </td><td> فيشر العلمية </td><td> 13-711-7M </td><td></td></tr><tr><td> خلاصة الخميرة </td><td> VWR ScientiFIC </td><td> 90000-726 </td><td></td></tr><tr><td> الببتون مادة تنشأ عن البروتينات </td><td> VWR العلمية </td><td> 90000-264 </td><td></td></tr><tr><td> سكر العنب </td><td> فيشر العلمية </td><td> D16-1 </td><td></td></tr><tr><td> أجار </td><td> VWR العلمية </td><td> 90000-760 </td><td></td></tr><tr><td> يمكن التخلص منها عدادة الكريات </td><td> VWR العلمية </td><td> 82030-468 </td><td></td></tr><tr><td> التخزين المؤقت فوسفات المالحة </td><td> VWR العلمية </td><td> 12001-986 </td><td></td></tr><tr><td> دومون Dumoxel الملقط </td><td> VWR العلمية </td><td> 100501-806 </td><td></td></tr><tr><td> خشبية المسامير </td><td> VWR العلمية </td><td> 10805-018 </td><td></td></tr><tr><td> KimWipes </td><td> VWR العلمية </td><td> 300053-964 </td><td></td></tr><tr><td> انخفاض تذوبالاغاروز </td><td> VWR العلمية </td><td> 12001-722 </td><td></td></tr><tr><td> الاغاروز للأطباق حقن </td><td> VWR العلمية </td><td> 12002-102 </td><td></td></tr><tr><td> المشتعلة براون Micropipette بولير </td><td> سوتر الآلات </td><td> P-97 </td><td></td></tr><tr><td> قضبان الزجاج المجوف </td><td> سوتر الآلات </td><td> BF120-69-10 </td><td> لقضبان زجاج أملس عن طريق التسخين فوق الموقد بنسن </td></tr><tr><td> ماصة صندوق التخزين </td><td> سوتر الآلات </td><td> BX10 </td><td></td></tr><tr><td> MPPI-3 نظام حقن </td><td> الأجهزة العلمية التطبيقية </td><td> MPPI-3 </td><td></td></tr><tr><td> عودة وحدة الضغط </td><td> الأجهزة العلمية التطبيقية </td><td> حدة حراسة الحدود </td><td></td></tr><tr><td> Micropipette حامل عدة </td><td> تطبيق صحيفةإد الأجهزة العلمية </td><td> MPIP </td><td></td></tr><tr><td> قدم تبديل </td><td> الأجهزة العلمية التطبيقية </td><td> FSW </td><td></td></tr><tr><td> Micromanipulator </td><td> الأجهزة العلمية التطبيقية </td><td> MM33 </td><td></td></tr><tr><td> المغناطيسي قاعدة </td><td> الأجهزة العلمية التطبيقية </td><td> المغناطيسي قاعدة </td><td></td></tr><tr><td> Tricaine الميثان سلفونات </td><td> الغربي الكيميائية المؤتمر الوطني العراقي. </td><td> MS-222 </td><td></td></tr><tr><td> تشريح نطاق </td><td> أوليمبوس </td><td> SZ61 أعلى SZX-ILLB2-100 قاعدة </td><td></td></tr><tr><td> متحد البؤر المجهر </td><td> أوليمبوس </td><td> تاسعا-81-1000 FV مع نظام المسح الضوئي ليزر متحد البؤر </td><td></td></tr><tr><td> TC-7 أسطوانة الثقافة طبلة نسيج مع 14 بوصة عجلة أنبوب اختبار </td><td> نيو برونزويك العلمي </td><td> TC-7 </td><td></td></tr><tr><td> التصوير صحون </td><td> شركة ماتيك </td><td> P24G-1.0-10-F </td><td></td></tr><tr><td> نصائح ماصة للتحميل الإبر </td><td> إيبندورف </td><td> 930001007 </td><td></td></tr><tr><td> شبكات لوحة سكب </td><td> التكيف أدوات العلم </td><td> TU-1 </td><td></td></tr><tr><td> المرحلة الساخنة </td><td> Bioptechs المؤتمر الوطني العراقي. </td><td> دلتا T-5 </td><td></td></tr><tr><td> شقة أداة البسط </td><td> VWR العلمية </td><td> 82027-486 </td><td></td></tr><tr><td> البلاستيك المناخل </td><td> الأواني أون لاين Knutsford </td><td> 12 سم </td><td></td></tr><tr><td> Parafilm </td><td> VWR العلمية </td><td> 52858-000 </td><td></td></tr><tr><td> دوامة جيني </td><td> VWR العلمية </td><td> 14216-184 </td><td></td></tr><tr><td> 16 × 150 مم الثقافة أنابيب </td><td> VWR العلمية </td><td> 60825-435 </td><td></td></tr><tr><td> Nanodrop </td><td> الحرارية العلمية </td><td> ND 2000 </td><td></td></tr><tr><td> الفينول الأحمر </td><td> VWR العلمية </td><td> 97062-478 </td><td></td></tr><tr><td> حمض الهيدروكلوريك </td><td> VWR العلمية </td><td> 87003-216 </td><td></td></tr><tr><td> كلوريد الصوديوم </td><td> VWR العلمية </td><td> BDH4534-500GP </td><td></td></tr><tr><td> بوكل </td><td> VWR العلمية </td><td> BDH4532-500GP </td><td></td></tr><tr><td> MgSO 4 </td><td> VWR العلمية </td><td> BDH0246-500GP </td><td></td></tr><tr><td> كاليفورنيا (NO 3) 2 </td><td> VWR العلمية </td><td> BDH0226-500GP </td><td></td></tr><tr><td> HEPES </td><td> VWR العلمية </td><td> BDH4520-500GP </td><td></td></tص&gt; <tr><td> Morpholinos </td><td> GeneTools، ذ م م </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

non-invasive imaging of disseminated candidiasis in zebrafish larvae

المبيضات نشر الناجمة عن المبيضات البيض الممرض هي مشكلة هامة سريريا في المستشفى الأفراد ويترافق مع معدل وفيات 1 تعزى 30 إلى 40٪ 6. ويتم التحكم عادة المبيضات الأجهزة عن طريق المناعة الفطرية، والأفراد ذوي العيوب الوراثية في الخلايا المناعية الفطرية مكونات مثل NADPH أوكسيديز بلعمية هم اكثر عرضة لالمبيضات 7-9. ولا يعرف سوى القليل جدا عن القوى المحركة للC. وقد أنشأت المبيضة البيضاء التفاعل مع الخلايا المناعية الفطرية في الجسم الحي. واسعة في الدراسات المختبرية التي من خارج جيم المضيفة المبيضة البيضاء تنبت داخل الضامة، ويتم تدمير بسرعة من قبل العدلات 10-14. الدراسات في المختبر، على الرغم من المفيد، لا يمكن أن ألخص المجمع في بيئة الجسم الحي، والذي يتضمن الساعة التي تعتمد على ديناميات مستويات خلوى، التجهيزات المصفوفة خارج الخلية، والاتصالات بين الخلايا 10، 15-18 </sup&gt;. للبحث في مساهمة هذه العوامل في المضيف الممرض التفاعل، من المهم جدا للعثور على كائن نموذج لتصور هذه الجوانب من عدوى غير جراحية في المضيف سليمة حية. اليرقة الزرد توفر مجموعة الفقاريات وتنوعا فريدا لدراسة العدوى. عن ال 30 يوما الأولى من يرقات اسماك الزرد تنمية لديها دفاعات المناعة الفطرية فقط 2، 19-21، وتبسيط دراسة الأمراض مثل داء المبيضات نشر التي تعتمد اعتمادا كبيرا على الحصانة الفطرية. حجم صغير والشفافية من يرقات اسماك الزرد تمكين التصوير ديناميات العدوى على المستوى الخلوي لكل من المضيف والممرض. ويمكن استخدام اليرقات المعدلة وراثيا مع الاستشعاع خلايا المناعة الفطرية للتعرف على أنواع معينة الخلايا المشاركة في عدوى 22-24. ويمكن استخدام تعديل المضادة للإحساس [أليغنوكليوتيد] (Morpholinos) لاسقاط المكونات المناعية المختلفة مثل NADPH أوكسيديز بلعمية ودراسة التغيرات في الاستجابة لfungaل إصابة 5. بالإضافة إلى المزايا الأخلاقية والعملية لاستخدام أقل الفقاريات الصغيرة، ويرقات اسماك الزرد توفر إمكانية فريدة من نوعها لصورة معركة ضارية بين الممرض والمضيف على حد سواء وintravitally في اللون. وقد استخدم الزرد إلى عدوى نموذج لعدد من البكتيريا المسببة للأمراض البشرية، وقامت بدور فعال في تقدم كبير في فهمنا للعدوى المتفطرات 3 و 25. ومع ذلك، إلا في الآونة الأخيرة أن العوامل الممرضة أكبر من ذلك بكثير مثل الفطريات قد استخدمت لنقل العدوى يرقة 5، 23، 26، وحتى الآن لم يكن هناك وصفا تفصيليا للمنهجية البصرية عدوى. هنا نقدم تقنيات لدينا microinjection بطين الدماغ المؤخر من الزرد 25 متزمت، بما في ذلك التعديلات التي نبذلها لالبروتوكولات السابقة. النتائج التي توصلنا إليها باستخدام نموذج الزرد اليرقات للعدوى فطرية تختلف من الدراسات في المختبر، وتعزيز الحاجة لدراسة intera المضيف الممرضction في البيئة المعقدة للمضيف بدلا من نظام مبسط للطبق بيتري 5.

Watch this Scientific Journal Video about Non-invasive Imaging of Disseminated Candidiasis in Zebrafish Larvae at JoVE.com

Non-invasive Imaging of Disseminated Candidiasis in Zebrafish Larvae

والتطوير السريع، وصغر حجمها والشفافية من الزرد هي مزايا هائلة لدراسة سيطرة المناعة الفطرية للعدوى<sup&gt; 1-4</sup&gt;. هنا علينا أن نبرهن تقنيات لاصابة يرقات اسماك الزرد باستخدام العوامل المسببة للأمراض الفطرية<em&gt; المبيضات البيض</em&gt; من جانب microinjection، المنهجية المتبعة في الآونة الأخيرة لتوريط بلعمية النشاط أوكسيديز NADPH في السيطرة على إزدواج الشكل الفطرية<sup&gt; 5</sup&gt;.

غير الغازية التصوير من المبيضات المنتشر في يرقات اسماك الزرد

Disseminated candidiasis caused by the pathogen Candida albicans is a clinically important problem in hospitalized individuals and is associated with a 30 ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

غير الغازية تصوير الزاجل كريات بيضاء والهجرة في الجسم الحي</em

Two-photon (2P) microscopy is a high resolution imaging technique that has been broadly adapted by biologists.  The value of 2P microscopy is that it ...

Non-invasive Optical Imaging of the Lymphatic Vasculature of a Mouse

غير الغازية التصوير الضوئي من الأوعية الدموية اللمفية على فأرة الحاسوب

The lymphatic  vascular system is an important component of the circulatory system that  maintains fluid homeostasis, provides immune surveillance, and ...

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

نموذج غير الغازية من ممرض للأعصاب<em&gt; الإشريكية القولونية</em&gt; العدوى في الأطفال حديثي الولادة الجرذ

Investigation of the interactions between animal host and bacterial pathogen is only meaningful if the infection model employed replicates the principal ...

Complete Thymectomy in Adult Rats with Non-invasive Endotracheal Intubation

التيموس كاملة في الجرذان الكبار مع غير الغازية التنبيب الرغامي

Thymectomy in neonatal rodents is an established and reliable procedure for immunological studies. However, in adult rats, complications of hemorrhage and ...

Modeling Mucosal Candidiasis in Larval Zebrafish by Swimbladder Injection

نمذجة الأغشية المخاطية المبيضات في اليرقات الزرد عن طريق الحقن Swimbladder

Early defense against mucosal pathogens consists of both an epithelial barrier and innate immune cells. The immunocompetency of both, and their ...

Non-invasive Imaging of the Innate Immune Response in a Zebrafish Larval Model of Streptococcus iniae Infection

Non-invasive Imaging of the Innate Immune Response in a Zebrafish Larval Model of Streptococcus iniae Infection

التصوير غير الغازية من الاستجابة المناعية الفطرية في نموذج الزرد يرقات<em&gt; العقدية iniae</em&gt; العدوى

The aquatic pathogen, Streptococcus iniae, is responsible for over 100 million dollars in annual losses for the aquaculture industry and is capable of ...

A Non-invasive and Technically Non-intensive Method for Induction and Phenotyping of Experimental Bacterial Pneumonia in Mice

والطريقة غير الغازية ومن الناحية الفنية غير كثيفة للتحريض وPhenotyping التجريبية البكتيرية والالتهاب الرئوي في الفئران

Although community-acquired pneumonia remains a major public health problem, murine models of bacterial pneumonia have recently facilitated significant ...

Non-invasive In Vivo Fluorescence Optical Imaging of Inflammatory MMP Activity Using an Activatable Fluorescent Imaging Agent

Non-invasive In Vivo Fluorescence Optical Imaging of Inflammatory MMP Activity Using an Activatable Fluorescent Imaging Agent

غير الغازية<em&gt; في فيفو</em&gt; الإسفار التصوير البصري من مب النشاط التهابات باستخدام عامل التصوير الفلورسنت أكتيفاتابل

This paper describes a non-invasive method for imaging matrix metalloproteinases (MMP)-activity by an activatable fluorescent probe, via in vivo ...

A Non-invasive Way to Isolate and Phenotype Cells from the Conjunctiva

وهناك طريقة غير الغازية لعزل والنمط الظاهري الخلايا من الملتحمة

Traditionally, ocular surface cytology is studied with techniques such as spatula technology and brush technology. The problem with these techniques is ...

Detection of Enterohemorrhagic Escherichia Coli Colonization in Murine Host by Non-invasive In Vivo Bioluminescence System

Detection of Enterohemorrhagic Escherichia Coli Colonization in Murine Host by Non-invasive In Vivo Bioluminescence System

الكشف عن استعمار الإشريكيّة القولونية Enterohemorrhagic موريني واستضافة بنظام الإضاءة الحيوية غير الغازية في فيفو

Enterohemorrhagic E. coli (EHEC) O157:H7, which is a foodborne pathogen that causesdiarrhea, hemorrhagic colitis (HS), and hemolytic uremic syndrome ...