Name: stereotaxic surgery for excitotoxic lesion of specific brain areas in the adult rat
Uploaded: 2012-07-19T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Stereotaxic Surgery for Excitotoxic Lesion of Specific Brain Areas in the Adult Rat at JoVE.com

Dit werk werd ondersteund ya Cirm predoctorale gemeenschap (EDK), NARSAD Young Investigator Award (DK) en het NIMH BRAINS Award (R01MH087495) (DK).

Anesthesie en analgesie: Dertig minuten voor anesthesie, injecteren de rat met 0,05 mg / kg subcutaan buprenorfine voor pijnstilling. Start anesthesie met 30-40 mg / kg intraperitoneaal natriumpentobarbital. Op dit punt ook injecteren atropine de ademhaling (0,4 mg / kg, subcutaan) en meloxicam voorkomen verdere analgetica (2 mg / kg subcutaan). Als na 5 minuten, de rat is nog steeds mobiel of reageren op teen knijpen, geven volgende doses van natrium-pentobarbital bij 5 mg / kg (intraperitoneaal) totdat de rat niet rea...

<ol>
	<li>Kirby, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basolateral+amygdala+regulation+of+adult+hippocampal+neurogenesis+and+fear-related+activation+of+newborn+neurons.">Basolateral amygdala regulation of adult hippocampal neurogenesis and fear-related activation of newborn neurons.</a> Mol. Psychiatry. , (2011).</li><li>Goosens, K. A., Maren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contextual+and+auditory+fear+conditioning+are+mediated+by+the+lateral,+basal,+and+central+amygdaloid+nuclei+in+rats.">Contextual and auditory fear conditioning are mediated by the lateral, basal, and central amygdaloid nuclei in rats.</a> Learn Mem. 8, 148-155 (2001).</li><li>Korz, V., Frey, J. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bidirectional+modulation+of+hippocampal+long-term+potentiation+under+stress+and+no-stress+conditions+in+basolateral+amygdala-lesioned+and+intact+rats.">Bidirectional modulation of hippocampal long-term potentiation under stress and no-stress conditions in basolateral amygdala-lesioned and intact rats.</a> J. Neurosci. 25, 7393-7400 (2005).</li><li>Bhatnagar, S., Vining, C., Denski, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+chronic+stress-induced+changes+in+hypothalamic-pituitary-adrenal+activity+by+basolateral+amygdala.">Regulation of chronic stress-induced changes in hypothalamic-pituitary-adrenal activity by basolateral amygdala.</a> Ann. N.Y. Acad. Sci. 1032, 315-319 (2004).</li><li>Ikegaya, Y., Saito, H., Abe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Attenuated+hippocampal+long-term+potentiation+in+basolateral+amygdala-lesioned+rats.">Attenuated hippocampal long-term potentiation in basolateral amygdala-lesioned rats.</a> Brain Res. 656, 157-164 (1994).</li><li>Ikegaya, Y., Saito, H., Abe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+basomedial+and+basolateral+amygdaloid+nuclei+contribute+to+the+induction+of+long-term+potentiation+in+the+dentate+gyrus+in+vivo.">The basomedial and basolateral amygdaloid nuclei contribute to the induction of long-term potentiation in the dentate gyrus in vivo.</a> Eur. J. Neurosci. 8, 1833-1839 (1996).</li><li>Carter, R. N., Pinnock, S. B., Herbert, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+the+amygdala+modulate+adaptation+to+repeated+stress.">Does the amygdala modulate adaptation to repeated stress.</a> Neurosciene. 126, 9-19 (2004).</li><li>Roozendaal, B., McGaugh, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basolateral+amygdala+lesions+block+the+memory-enhancing+effects+of+glucocorticoid+administration+in+the+dorsal+hippocampus+of+rats.">Basolateral amygdala lesions block the memory-enhancing effects of glucocorticoid administration in the dorsal hippocampus of rats.</a> Eur. J. Neurosci. 9, 76-83 (1997).</li><li>Roesler, R., Roozendaal, B., McGaugh, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basolateral+amgdala+lesions+block+the+memory-enhancing+effect+of+8-Br-cAMP+infused+into+the+entorhinal+cortex+of+rats+after+training.">Basolateral amgdala lesions block the memory-enhancing effect of 8-Br-cAMP infused into the entorhinal cortex of rats after training.</a> Eur. J. Neurosci. 15, 905-910 (2002).</li><li>Roozendaal, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucocorticoid+effects+on+memory+consolidation+depend+on+functional+interactions+between+the+medial+prefrontal+cortex+and+basolateral+amygdala.">Glucocorticoid effects on memory consolidation depend on functional interactions between the medial prefrontal cortex and basolateral amygdala.</a> J. Neurosci. 29, 14299-14308 (2009).</li><li>Kaufer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restructuring+the+neuronal+stress+response+with+anti-glucocorticoid+gene+delivery.">Restructuring the neuronal stress response with anti-glucocorticoid gene delivery.</a> Nat. Neurosci. 7, 947-953 (2004).</li><li>Paxinos, G., Watson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The rat brain: in stereotaxic coordinates-the new coronal set. , (2004).</li><li>Geiger, B. M., Frank, L. E., Caldera-Siu, A. D., Pothos, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survivable+Stereotaxic+Surgery+in+Rodents.">Survivable Stereotaxic Surgery in Rodents.</a> J. Vis. Exp. (20), e880 (2008).</li></ol>

De stereotaxische methode hier gepresenteerde maakt excitotoxische laesie van specifieke hersengebieden via infusie van NMDA. De basis stereotaxisch methoden kunnen worden aangepast aan diverse farmacologische en biologische agentia trekken in een plaatsspecifieke wijze. Het kan ook worden aangepast aan verschillende hersengebieden, gedefinieerd door hun stereotaxisch coördinaten in de hersenen Atlas 12 gericht. Aanpassing aan andere soorten, zoals muizen zijn met soortgelijke apparatuur gebouwd kleinere die...

<table border="1"><tbody><tr><td> Naam van het serum </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogusnummer </td><td> Reacties </td></tr><tr><td> N-Methyl-D-aspartaat 98% </td><td> Fisher Scientific </td><td> AC32919-0500 </td><td></td></tr><tr><td> Dual Lab Standaard stereotaxische w/45 graden. Oor Bars </td><td> Stoelting </td><td> 51653 </td><td> Alternatieve leveranciers: Kopf * nota van voorzichtigheid: verzekeren compatibiliteit van stereotaxische accessoires als de aankoop van meerdere leveranciers </td></tr><tr><td> 10μl SYR SPECIAL (* / * / *) </td><td> Hamilton </td><td> 701SN </td><td></td></tr><tr><td> Dremel Moto-Tool </td><td> Stoelting </td><td> 58600 </td><td> Alternatieve leveranciers: Kopf </td></tr><tr><td> Carbide boren, handstuk HP, maat 2 </td><td> Schein Dental </td><td> 2284578 </td><td></td></tr><tr><td> Stoelting 6 Spuit Programmaprogrammeerbare pomp </td><td> Stoelting </td><td> 53140 </td><td> Alternatieve leveranciers: Kopf </td></tr><tr><td> RVS 316 Hypodermic Regelmatig wanddikte 30 Gauge 0,0123 &quot;OD x 0,00625&quot; ID x 0.003 &quot;Wall (infuusnaald) </td><td> Kleine onderdelen </td><td> HTXX-30R-06-05 </td><td></td></tr><tr><td> Intramedic PE 20 buizen (infuus slang) </td><td> VWR </td><td> 63019-025 </td><td></td></tr><tr><td> Reflex Clips, 9mm, niet-steriele </td><td> Kent Scientific Corp </td><td> INS500346 </td><td> Alternatieve leveranciers: Fine Science Tools </td></tr><tr><td> Reflex Clip Applier voor 9mm clips </td><td> Kent Scientific Corp </td><td> 12031-09 </td><td> Alternatieve leveranciers: Fine Science Tools </td></tr><tr><td> Gebogen Hartman hemostat </td><td> Fine Science Tools </td><td> 13003-10 </td><td></td></tr><tr><td> Londen tang </td><td> Fijn Sceince Gereedschap </td><td> 11080-02 </td><td></td> &lt;/ Tr&gt; <tr><td> 2% chloorhexidine oplossing </td><td> Allivet </td><td> 30159 </td><td> Alternatieve leveranciers: PetSolutions </td></tr><tr><td> 10% povidon-jood oplossing </td><td> CVS </td><td> SKU # 739575 </td><td></td></tr><tr><td> Hot kraal sterilisator </td><td> Harvard Apparatuur </td><td> 610183 </td><td></td></tr></tbody></table> Tabel 1. Tabel specifieke reagentia en materialen.

stereotaxic surgery for excitotoxic lesion of specific brain areas in the adult rat

Veel gedrags-functies in zoogdieren, waaronder knaagdieren en mensen, worden hoofdzakelijk gemedieerd door discrete gebieden van de hersenen. Een veelgebruikte methode voor het onderscheiden van de functie van verschillende hersengebieden voor het gedrag of andere experimentele resultaten is het implementeren van een gelokaliseerde ablatie van de functie. Bij de mens zijn patiëntenpopulaties met gelokaliseerde laesies in de hersenen vaak bestudeerd van tekorten, in de hoop van het openbaren van de onderliggende functie van het beschadigde gebied. Bij knaagdieren, kan men experimenteel veroorzaken laesies van specifieke hersengebieden. Laesie kan op verschillende manieren. Elektrolytische laesies kunnen leiden tot lokale schade, maar zal een groot aantal celtypen en doorkruisen van vezels van andere hersengebieden die toevallig in de buurt van de laesie zullen beschadigen. Induceerbaar genetische technieken met behulp van cel-type-specifieke promotors kunnen ook in staat stellen site-specifieke targeting. Deze technieken zijn complex en niet praktisch afhankelijk van het doel hersengebied. Excitotoxische laesie met behulp van stereotaxische chirurgie, daarentegen, is een van de meest betrouwbare en praktische methoden van lesionele excitatoire neuronen zonder beschadiging van de lokale gliacellen of doorkruisen van vezels. Hier presenteren we een protocol voor stereotaxische infusie van de excitotoxinen, N-methyl-D-aspartaat (NMDA), in de basolaterale amygdala complex. Met behulp van anatomische aanwijzingen, passen we stereotaxische coördinaten van de locatie van onze doelgroep gebied van de hersenen vast te stellen en laat een injectienaald in de plaats net boven het doel. Vervolgens hebben we trekken onze excitotoxin in de hersenen, wat resulteert in excitotoxische dood van de nabijgelegen neuronen. Terwijl onze proefpersoon keuze een rat, kan dezelfde methoden worden toegepast op andere zoogdieren, met de noodzakelijke aanpassingen apparatuur en coördinaten. Deze methode kan worden toegepast op verschillende hersenen, waaronder de basolaterale amygdala 1-6 andere amygdala kernen 6, 7, 8 hippocampus, entorhinal cortex 9 en prefrontale cortex 10. Het kan ook worden gebruikt om biologische verbindingen zoals virale vectoren 1, 11 trekken. De basis stereotaxisch techniek kan worden aangepast voor implantatie van meer permanente osmotische pompen, waardoor meer langdurige blootstelling aan een verbinding van belang.

Watch this Scientific Journal Video about Stereotaxic Surgery for Excitotoxic Lesion of Specific Brain Areas in the Adult Rat at JoVE.com

Stereotaxic Surgery for Excitotoxic Lesion of Specific Brain Areas in the Adult Rat

Gerichte ablatie van specifieke gebied van de hersenen (en) via een infuus van een excitotoxin gebruik van stereotaxische coördinaten beschreven. Deze techniek kan ook worden aangepast voor infusie van andere stoffen in de rat.

Stereotaxische Chirurgie voor excitotoxische laesie van specifieke hersengebieden in de Adult Rat

Many behavioral functions in mammals, including rodents and humans, are mediated principally by discrete brain regions. A common method for discerning the ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Rodent Stereotaxic Surgery and Animal Welfare Outcome Improvements for Behavioral Neuroscience

Knaagdier stereotaxische Chirurgie en Dierenwelzijn Outcome Verbeteringen voor Behavioral Neuroscience

Stereotaxic surgery for the implantation of cannulae into specific brain regions has for many decades been a very successful experimental technique to ...

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Uitbreiding van embryonale en adulte neurale stamcellen door<em&gt; In Utero</em&gt; Electroporation of Viral stereotactische injectie

Somatic stem cells can divide to generate additional stem cells (expansion) or more differentiated cell types (differentiation), which is fundamental for ...

Micromanipulation of Gene Expression in the Adult Zebrafish Brain Using Cerebroventricular Microinjection of Morpholino Oligonucleotides

Micromanipulatie van genexpressie in de Adult zebravis hersenen met behulp Cerebroventricular Micro-injectie van Morfolino Oligonucleotides

Manipulation of gene expression in tissues is  required to perform functional studies. In this paper, we demonstrate the  cerebroventricular ...

Brain Slice Biotinylation: An Ex Vivo Approach to Measure Region-specific Plasma Membrane Protein Trafficking in Adult Neurons

Brain Slice Biotinylation: An Ex Vivo Approach to Measure Region-specific Plasma Membrane Protein Trafficking in Adult Neurons

Brain Slice Biotinylatie: An<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Aanpak Regiospecifieke van plasma membraaneiwit Trafficking Meet in Adult Neuronen

Regulated endocytic trafficking is the central mechanism facilitating a variety of neuromodulatory events, by dynamically controlling receptor, ion ...

Using Fluorescence Activated Cell Sorting to Examine Cell-Type-Specific Gene Expression in Rat Brain Tissue

Met behulp van fluorescentie-geactiveerde Cell Sorting voor Onderzoek Cell-type-specifieke genexpressie in Rat Brain Tissue

The brain is comprised of four primary cell types including neurons, astrocytes, microglia and oligodendrocytes. Though they are not the most abundant ...

Stereotaxic Infusion of Oligomeric Amyloid-beta into the Mouse Hippocampus

Stereotaxische Infusion van Oligomere amyloid-beta in de Mouse Hippocampus

Alzheimer&#8217;s disease is a neurodegenerative disease affecting the aging population. A key neuropathological feature of the disease is the ...

Stereotaxic Surgery for Genetic Manipulation in Striatal Cells of Neonatal Mouse Brains

Stereotaxic chirurgie voor genetische manipulatie van striatale cellen van neonatale muis hersenen

Many genes are expressed in embryonic brains, and some of them are continuously expressed in the brain after birth. For such persistently expressed genes, ...

Assessment of Long-term Depression Induction in Adult Cerebellar Slices

Beoordeling van langdurige depressie inductie in volwassen cerebellaire schijfjes

Synaptic plasticity provides a mechanism for learning and memory. For cerebellar motor learning, long-term depression (LTD) of synaptic transmissions from ...

Stereotaxic Surgery for Implantation of Microelectrode Arrays in the Common Marmoset (Callithrix jacchus)

Stereotaxic Surgery for Implantation of Microelectrode Arrays in the Common Marmoset Callithrix jacchus

Stereotaxic chirurgie voor implantatie van micro-elektrode arrays in de gewone marmoset (Callithrix jacchus)

Marmosets (Callithrix jacchus) are small non-human primates that are gaining popularity in biomedical and preclinical research, including the ...

Unraveling the Role of Discrete Areas of the Rat Brain in the Regulation of Ovulation through Reversible Inactivation by Tetrodotoxin Microinjections

Ontrafeling van de rol van discrete gebieden van het rattenbrein in de regulatie van ovulatie door omkeerbare inactivatie door tetrodotoxine micro-injecteringen

Many experimental approaches have been used for studying the role of the brain in the regulation of ovulation. Examples include the lesion and ...