Name: stereotaxic surgery for excitotoxic lesion of specific brain areas in the adult rat
Uploaded: 2012-07-19T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Stereotaxic Surgery for Excitotoxic Lesion of Specific Brain Areas in the Adult Rat at JoVE.com

Este trabajo fue apoyado ya CIRM beca predoctoral (EDK), Premio Joven Investigador NARSAD (DK) y el premio NIMH CEREBROS (R01MH087495) (DK).

Anestesia y analgesia: Treinta minutos antes de la anestesia, inyectar a la rata con 0,05 mg de buprenorfina / kg por vía subcutánea para la analgesia. Iniciar la anestesia con 30-40 mg / kg de sodio pentobarbital intraperitoneal. En este punto, también se inyecta atropina para prevenir la insuficiencia respiratoria (0,4 mg / kg, por vía subcutánea) y meloxicam como analgésico adicional (2 mg / kg por vía subcutánea). Si después de 5 minutos, la rata es todavía móvil o sensible a pellizco dedo del pie, admini...

<ol>
	<li>Kirby, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basolateral+amygdala+regulation+of+adult+hippocampal+neurogenesis+and+fear-related+activation+of+newborn+neurons.">Basolateral amygdala regulation of adult hippocampal neurogenesis and fear-related activation of newborn neurons.</a> Mol. Psychiatry. , (2011).</li><li>Goosens, K. A., Maren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contextual+and+auditory+fear+conditioning+are+mediated+by+the+lateral,+basal,+and+central+amygdaloid+nuclei+in+rats.">Contextual and auditory fear conditioning are mediated by the lateral, basal, and central amygdaloid nuclei in rats.</a> Learn Mem. 8, 148-155 (2001).</li><li>Korz, V., Frey, J. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bidirectional+modulation+of+hippocampal+long-term+potentiation+under+stress+and+no-stress+conditions+in+basolateral+amygdala-lesioned+and+intact+rats.">Bidirectional modulation of hippocampal long-term potentiation under stress and no-stress conditions in basolateral amygdala-lesioned and intact rats.</a> J. Neurosci. 25, 7393-7400 (2005).</li><li>Bhatnagar, S., Vining, C., Denski, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+chronic+stress-induced+changes+in+hypothalamic-pituitary-adrenal+activity+by+basolateral+amygdala.">Regulation of chronic stress-induced changes in hypothalamic-pituitary-adrenal activity by basolateral amygdala.</a> Ann. N.Y. Acad. Sci. 1032, 315-319 (2004).</li><li>Ikegaya, Y., Saito, H., Abe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Attenuated+hippocampal+long-term+potentiation+in+basolateral+amygdala-lesioned+rats.">Attenuated hippocampal long-term potentiation in basolateral amygdala-lesioned rats.</a> Brain Res. 656, 157-164 (1994).</li><li>Ikegaya, Y., Saito, H., Abe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+basomedial+and+basolateral+amygdaloid+nuclei+contribute+to+the+induction+of+long-term+potentiation+in+the+dentate+gyrus+in+vivo.">The basomedial and basolateral amygdaloid nuclei contribute to the induction of long-term potentiation in the dentate gyrus in vivo.</a> Eur. J. Neurosci. 8, 1833-1839 (1996).</li><li>Carter, R. N., Pinnock, S. B., Herbert, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+the+amygdala+modulate+adaptation+to+repeated+stress.">Does the amygdala modulate adaptation to repeated stress.</a> Neurosciene. 126, 9-19 (2004).</li><li>Roozendaal, B., McGaugh, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basolateral+amygdala+lesions+block+the+memory-enhancing+effects+of+glucocorticoid+administration+in+the+dorsal+hippocampus+of+rats.">Basolateral amygdala lesions block the memory-enhancing effects of glucocorticoid administration in the dorsal hippocampus of rats.</a> Eur. J. Neurosci. 9, 76-83 (1997).</li><li>Roesler, R., Roozendaal, B., McGaugh, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basolateral+amgdala+lesions+block+the+memory-enhancing+effect+of+8-Br-cAMP+infused+into+the+entorhinal+cortex+of+rats+after+training.">Basolateral amgdala lesions block the memory-enhancing effect of 8-Br-cAMP infused into the entorhinal cortex of rats after training.</a> Eur. J. Neurosci. 15, 905-910 (2002).</li><li>Roozendaal, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucocorticoid+effects+on+memory+consolidation+depend+on+functional+interactions+between+the+medial+prefrontal+cortex+and+basolateral+amygdala.">Glucocorticoid effects on memory consolidation depend on functional interactions between the medial prefrontal cortex and basolateral amygdala.</a> J. Neurosci. 29, 14299-14308 (2009).</li><li>Kaufer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restructuring+the+neuronal+stress+response+with+anti-glucocorticoid+gene+delivery.">Restructuring the neuronal stress response with anti-glucocorticoid gene delivery.</a> Nat. Neurosci. 7, 947-953 (2004).</li><li>Paxinos, G., Watson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The rat brain: in stereotaxic coordinates-the new coronal set. , (2004).</li><li>Geiger, B. M., Frank, L. E., Caldera-Siu, A. D., Pothos, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survivable+Stereotaxic+Surgery+in+Rodents.">Survivable Stereotaxic Surgery in Rodents.</a> J. Vis. Exp. (20), e880 (2008).</li></ol>

El método que aquí se presenta estereotáxica permite la lesión excitotóxica de áreas específicas del cerebro a través de la infusión de NMDA. Los métodos estereotáxicas básicos pueden ser adaptados para infundir una variedad de agentes farmacológicos y biológicos de una manera específica del sitio. También puede ser adaptado para apuntar a una variedad de áreas del cerebro, que se define por sus coordenadas estereotáxicas en un atlas cerebral 12. La adaptación a otras especies tales como ra...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nombre del reactivo </td><td> Empresa </td><td> Número de catálogo </td><td> Comentarios </td></tr><tr><td> N-metil-D-aspártico Acido 98% </td><td> Fisher Scientific </td><td> AC32919-0500 </td><td></td></tr><tr><td> Doble estándar de laboratorio estereotáxica w/45 grados. Bares del oído </td><td> Stoelting </td><td> 51653 </td><td> Alternativa proveedor: Kopf * nota de precaución: asegurar la compatibilidad de los accesorios estereotáxicas si la compra de varios proveedores </td></tr><tr><td> 10ul SYR ESPECIAL (* / * / *) </td><td> Hamilton </td><td> 701SN </td><td></td></tr><tr><td> Dremel Moto-Tool </td><td> Stoelting </td><td> 58600 </td><td> Alternativa proveedor: Kopf </td></tr><tr><td> Fresas de metal duro, pieza de mano de HP, tamaño 2 </td><td> Schein Dental </td><td> 2284578 </td><td></td></tr><tr><td> Stoelting 6 Programa de JeringaLa bomba programable </td><td> Stoelting </td><td> 53140 </td><td> Alternativa proveedor: Kopf </td></tr><tr><td> Tubos de acero inoxidable 316 hipodérmica pared regular calibre 30 .0123 &quot;OD x .00625&quot; x 0.003 &quot;de la pared (aguja de infusión) </td><td> Piezas pequeñas </td><td> HTXX-30R-06-05 </td><td></td></tr><tr><td> Intramedic PE 20 tubos (tubo de infusión) </td><td> VWR </td><td> 63019-025 </td><td></td></tr><tr><td> Clips Reflex, 9 mm, no estéril </td><td> Kent Scientific Corp. </td><td> INS500346 </td><td> Alternativa proveedor: Herramientas de Bellas Ciencia </td></tr><tr><td> Aplicador de clips Reflex para los clips de 9mm </td><td> Kent Scientific Corp. </td><td> 12031-09 </td><td> Alternativa proveedor: Herramientas de Bellas Ciencia </td></tr><tr><td> Curva pinza hemostática Hartman </td><td> Herramientas de Bellas Ciencia </td><td> 13003-10 </td><td></td></tr><tr><td> Londres pinza </td><td> Herramientas de Bellas Sceince </td><td> 11080-02 </td><td></td> &lt;/ Tr&gt; <tr><td> 2% de clorhexidina solución </td><td> Allivet </td><td> 30159 </td><td> Alternativa proveedor: PetSolutions </td></tr><tr><td> 10% de povidona solución de yodo </td><td> CVS </td><td> SKU # 739575 </td><td></td></tr><tr><td> Hot cordón esterilizador </td><td> Aparato de Harvard </td><td> 610183 </td><td></td></tr></tbody></table> Tabla 1. Tabla de reactivos y equipos específicos.

stereotaxic surgery for excitotoxic lesion of specific brain areas in the adult rat

Muchas de las funciones de comportamiento en los mamíferos, incluyendo roedores y seres humanos, están mediadas principalmente por las regiones cerebrales discretas. Un método común para discernir la función de diversas regiones del cerebro de comportamiento u otros resultados experimentales es la implementación de una ablación localizada de la función. En los seres humanos, las poblaciones de pacientes con lesiones cerebrales localizadas se estudian a menudo los déficits, con la esperanza de revelar la función subyacente de la zona dañada. En los roedores, uno experimental puede provocar lesiones de regiones específicas del cerebro. Lesión se puede lograr de varias maneras. Lesiones electrolíticas pueden causar daños localizados pero dañará una variedad de tipos de células, así como fibras que atraviesan de otras regiones del cerebro que pasan a estar cerca del sitio de la lesión. Inducible utilizando técnicas de genética de células de tipo promotores específicos también puede permitir que el sitio específico de la orientación. Estas técnicas son complejas y no siempre prácticos, dependiendo del área cerebral de destino. Excitotlesión óxico usando cirugía estereotáxica, por el contrario, es uno de los métodos más fiables y prácticos de lesioning neuronas excitadoras sin dañar las células gliales locales o atravesando las fibras. Aquí, se presenta un protocolo para la infusión estereotáxica de la excitotoxina, N-metil-D-aspartato (NMDA), en el complejo basolateral amígdala. Utilizando indicaciones anatómicas, aplicamos las coordenadas estereotáxicas para determinar la ubicación de nuestra región del cerebro de destino y bajar una aguja de inyección en el lugar justo encima de la meta. A continuación, infundir nuestro excitotoxina en el cerebro, resultando en la muerte excitotóxica de neuronas cercanas. Si bien nuestro sujeto experimental de elección es una rata, los mismos métodos se pueden aplicar a otros mamíferos, con los ajustes apropiados en el equipo y las coordenadas. Este método se puede utilizar en una variedad de regiones del cerebro, incluyendo la amígdala basolateral 1-6, otro núcleos amígdala 6, 7, 8 hipocampo, entorhinal 9 y la corteza prefrontal 10. También se puede utilizar para infundir compuestos biológicos tales como vectores virales 1, 11. La técnica estereotáxica básico podría adaptarse también para la implantación de más bombas osmóticas permanentes, permitiendo la exposición más prolongada a un compuesto de interés.

Watch this Scientific Journal Video about Stereotaxic Surgery for Excitotoxic Lesion of Specific Brain Areas in the Adult Rat at JoVE.com

Stereotaxic Surgery for Excitotoxic Lesion of Specific Brain Areas in the Adult Rat

La ablación selectiva de la región específica del cerebro (s) mediante la infusión de una excitotoxina utilizando las coordenadas estereotáxicas se describe. Esta técnica también se podría adaptar para la infusión de otros productos químicos en el cerebro de rata.

La cirugía estereotáxica para la lesión excitotóxica de áreas específicas del cerebro en la rata adulta

Many behavioral functions in mammals, including rodents and humans, are mediated principally by discrete brain regions. A common method for discerning the ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Rodent Stereotaxic Surgery and Animal Welfare Outcome Improvements for Behavioral Neuroscience

Cirugía estereotáctica de roedores y mejoras del bienestar de los animales de resultados para la revista Behavioral Neuroscience

Stereotaxic surgery for the implantation of cannulae into specific brain regions has for many decades been a very successful experimental technique to ...

Investigación

Neurociencias

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

La expansión de las células madre embrionarias y adultas neurales por<em&gt; In Utero</em&gt; La electroporación o inyección estereotáxica Viral

Somatic stem cells can divide to generate additional stem cells (expansion) or more differentiated cell types (differentiation), which is fundamental for ...

Micromanipulation of Gene Expression in the Adult Zebrafish Brain Using Cerebroventricular Microinjection of Morpholino Oligonucleotides

Micromanipulación de la expresión génica en el cerebro de pez cebra adulto Uso Microinyección cerebroventricular de oligonucleótidos Morpholino

Manipulation of gene expression in tissues is  required to perform functional studies. In this paper, we demonstrate the  cerebroventricular ...

Brain Slice Biotinylation: An Ex Vivo Approach to Measure Region-specific Plasma Membrane Protein Trafficking in Adult Neurons

Brain Slice Biotinylation: An Ex Vivo Approach to Measure Region-specific Plasma Membrane Protein Trafficking in Adult Neurons

Cerebro Slice Biotinilación: Una<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Enfoque medir tráfico de proteínas específicas Región membrana plasmática en adultos las neuronas

Regulated endocytic trafficking is the central mechanism facilitating a variety of neuromodulatory events, by dynamically controlling receptor, ion ...

Using Fluorescence Activated Cell Sorting to Examine Cell-Type-Specific Gene Expression in Rat Brain Tissue

Utilizando fluorescencia clasificación de células activadas para examinar Cell-tipo-específica la expresión génica en el tejido de cerebro de rata

The brain is comprised of four primary cell types including neurons, astrocytes, microglia and oligodendrocytes. Though they are not the most abundant ...

Stereotaxic Infusion of Oligomeric Amyloid-beta into the Mouse Hippocampus

Infusión estereotáxica de Oligomeric beta-amiloide en el hipocampo del ratón

Alzheimer&#8217;s disease is a neurodegenerative disease affecting the aging population. A key neuropathological feature of the disease is the ...

Stereotaxic Surgery for Genetic Manipulation in Striatal Cells of Neonatal Mouse Brains

Cirugía estereotáctica para manipulación genética en las células estriatales de cerebro de ratón Neonatal

Many genes are expressed in embryonic brains, and some of them are continuously expressed in the brain after birth. For such persistently expressed genes, ...

Assessment of Long-term Depression Induction in Adult Cerebellar Slices

Evaluación de la inducción a largo plazo de la depresión en rodajas de cerebelosores adultos

Synaptic plasticity provides a mechanism for learning and memory. For cerebellar motor learning, long-term depression (LTD) of synaptic transmissions from ...

Stereotaxic Surgery for Implantation of Microelectrode Arrays in the Common Marmoset (Callithrix jacchus)

Stereotaxic Surgery for Implantation of Microelectrode Arrays in the Common Marmoset Callithrix jacchus

Cirugía estereotaxia para la implantación de matrices de microelectrodos en el Marmoset común (Jacchus Callithrix)

Marmosets (Callithrix jacchus) are small non-human primates that are gaining popularity in biomedical and preclinical research, including the ...

Unraveling the Role of Discrete Areas of the Rat Brain in the Regulation of Ovulation through Reversible Inactivation by Tetrodotoxin Microinjections

Desentrañando el papel de las áreas discretas del cerebro de la rata en la regulación de la ovulación a través de la inactivación reversible por microinyecciones de tetrodotoxina

Many experimental approaches have been used for studying the role of the brain in the regulation of ovulation. Examples include the lesion and ...