Name: isolation of cd4+ t cells from mouse lymph nodes using miltenyi macs purification
Uploaded: 2007-11-01T00:34:55
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of CD4+ T cells from Mouse Lymph Nodes Using Miltenyi MACS Purification at JoVE.com

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> نود أن نشكر ريبيكا Paquett لإعداد MACS العازلة. </p>

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> يرجى قراءة واتباع البروتوكول تدرج في عدة Miltenyi أو عبر الإنترنت في <a href="http://www.miltenyibiotec.com/">http://www.miltenyibiotec.com/</a> . </p>

<ol>
	<li>Miller, M. J., Hejazi, A. S., Wei, S. H., Cahalan, M. D., Parker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+cell+repertoire+scanning+is+promoted+by+dynamic+dendritic+cell+behavior+and+random+T+cell+motility+in+the+lymph+node.">T cell repertoire scanning is promoted by dynamic dendritic cell behavior and random T cell motility in the lymph node.</a> <em style='font-style: italic'>Proc Natl Acad Sci U S A</em>. <b>101</b>, 998-1003 (2004).</li><li>Matheu, M. P., Deane, J. A., Parker, I., Fruman, D. A., Cahalan, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Class+IA+phosphoinositide+3-kinase+modulates+basal+lymphocyte+motility+in+the+lymph+node.">Class IA phosphoinositide 3-kinase modulates basal lymphocyte motility in the lymph node.</a> <em style='font-style: italic'>J Immunol</em>. <b>179</b>, 2261-2269 (2007).</li></ol>

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> عزل الخلايا من المصدر الأساسي هو خطوة ضرورية في العديد من البروتوكولات أكثر تعقيدا. Miltenyi تقدم مجموعات لعزل الخلايا من الكائنات الحية بما في ذلك العديد من البشر ، والرئيسات غير البشرية ، والجرذان ، كما وصفنا هنا الفئران. الفصل المغناطيسي خلية حبة المستندة يسمح لاختيار إما إيجاب?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>MACS Buffer</td>
<td>Reagent</td>
<td>None</td>
<td>None </td>
<td>Prepare as described by Miltenyi. 

</td>
</tr>
<tr>
<td>CD4+ T cell Isolation Kit: Untouched Isolation </td>
<td>Reagent</td>
<td>Miltenyi</td>
<td>130-090-860</td>
<td>For use with the Miltenyi system. </td>
</tr>
<tr>
<td>Sterile Phosphate-Buffered Saline (PBS)</td>
<td>Reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>For use in the preparation of MACS buffer.</td>
</tr>
<tr>
<td>Corning 35mm Not TC-Treated Culture Dish</td>
<td>Other</td>
<td>Corning Cell Culture Surfaces</td>
<td>430588</td>
<td>Used in the preparation of a single cell suspension.</td>
</tr>
<tr>
<td>70 micron Cell Strainer </td>
<td>Tool </td>
<td>BD Falcon</td>
<td>352350</td>
<td>Used in the preparation of a single cell suspension.</td>
</tr>
<tr>
<td>6 mL Syringe </td>
<td>Tool</td>
<td>Tyco Healthcare</td>
<td>8881516051</td>
<td>Used in the preparation of a single cell suspension.</td>
</tr>
<tr>
<td>10x Dulbecco's Phosphate Buffered Saline (DPBS)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>14200-075</td>
<td>For use in RBC lysis.</td>
</tr>
<tr>
<td>Sterile Water </td>
<td>Reagent </td>
<td>Sigma</td>
<td>W4502</td>
<td>For use in RBC lysis.</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

isolation of cd4+ t cells from mouse lymph nodes using miltenyi macs purification

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> عزل الخلايا من المصدر الأساسي هو خطوة ضرورية في العديد من البروتوكولات أكثر تعقيدا. Miltenyi تقدم مجموعات لعزل الخلايا من الكائنات الحية بما في ذلك العديد من البشر ، والرئيسات غير البشرية ، والجرذان ، كما وصفنا هنا الفئران. الفصل المغناطيسي خلية حبة المستندة يسمح لاختيار إما إيجابية (أو نضوب الخلية) ، وكذلك اختيار سلبية. هنا ، علينا أن نظهر التحديد السلبي للCD4 لقد يمسها أو غ + خلايا T المساعدة. باستخدام هذا البروتوكول القياسي نحن عادة تنقية الخلايا التي يتم CD4 ≥ النقي بنسبة 96 ٪ + / + CD3. ويستخدم هذا البروتوكول بالاقتران مع بروتوكول تشريح و 2 الفوتون التصوير من العقد الليمفاوية الطرفية في الفئران التي نشرت في العدد 7 من إن الرب ، لتنقية الخلايا T وغيرها من أنواع الخلايا لنقل adoptively لأغراض التصوير. على الرغم من أننا لم تثبت FACS التحليل في هذا الفيديو البروتوكول ، فإنه يوصى بشدة للتأكد من نقاء الشاملة للخلايا معزولة باستخدام الأجسام المضادة المناسبة عبر نظام مراقبة الأصول الميدانية. بالإضافة إلى ذلك ، علينا أن نظهر الأسلوب غير معقمة من العزلة الخلايا التائية. إذا كانت هناك حاجة الخلايا العقيمة للتطبيق نهاية مستخدم معين ، يجب التأكد من القيام بكل الإجراءات التي تجلت في نسيج الثقافة غطاء تحت ظروف معقمة القياسية. أشكركم على مشاهدة ونتمنى لك التوفيق في التجارب الخاصة بك! </p>

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of CD4+ T cells from Mouse Lymph Nodes Using Miltenyi MACS Purification at JoVE.com

Isolation of CD4+ T cells from Mouse Lymph Nodes Using Miltenyi MACS Purification

<p class="jove_content">عزل الخلايا الليمفاوية باستخدام بالاعمال Miltenyi المجموعة هو وسيلة موثوق بها لتنقية الخلايا من الأنسجة اللمفاوية الخليط كله. تنقية الخلايا باستخدام نظام Miltenyi عادة ≥ 96 ٪ نقية. هنا ، ونحن لشرح الخطوات التي اتخذت لعزل خلايا CD4 + T ، واحدة من مجموعات كثيرة تقدمها Miltenyi.</p>

عزل خلايا CD4 + T من الغدد الليمفاوية باستخدام الماوس Miltenyi MACS تنقية

Isolation of cells from the primary source is a necessary step in many more complex protocols. Miltenyi offers kits to isolate cells from several ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection and 2-Photon Imaging of Peripheral Lymph Nodes in Mice

تشريح و 2 الفوتون التصوير من العقد الليمفاوية الطرفية في الفئران

Two-photon imaging has revealed an elegant choreography of motility and cellular interactions within the lymph node under basal conditions and at the ...

CD4+ T-Lymphocyte Capture Using a Disposable Microfluidic Chip for HIV

CD4 + T - اللمفاويات التقاط باستخدام رقاقة ميكروفلويديك المتاح لفيروس نقص المناعة البشرية

Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Spleen with the gentleMACS Dissociator

إعداد وحيدة الخلية معلقات من الطحال ماوس مع Dissociator gentleMACS

Single-cell suspensions are a prerequisite for experiments in cell separation, cell analysis and cell culture.  To avoid tedious and often painful manual ...

Detection and Isolation of Viable Mouse IL-17-Secreting T Cells

كشف وعزل خلايا T ماوس قابلة للحياة IL - 17 - الإخفاء

The MACS Cytokine Secretion Assay technology allows detection of secreted cytokines on the single cell level and sensitive isolation of viable ...

Visualizing Antigen Specific CD4+ T Cells using MHC Class II Tetramers

المستضد CD4 + تصور معين باستخدام خلايا T MHC الدرجة الثانية Tetramers

Major histocompatibility complex (MHC) class II tetramers allow the direct visualization of antigen specific CD4+ T cells by flow cytometry.  This method ...

Standardized Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Lung Tissue using the gentleMACS Dissociator

إعداد موحدة وحيدة الخلية معلقات من أنسجة الرئة باستخدام الماوس Dissociator gentleMACS

The preparation of single-cell suspensions from tissues is an important prerequisite for many experiments in cellular research. The process of ...

Generation of Single-Cell Suspensions from Mouse Neural Tissue

جيل وحيدة الخلية معلقات من الأنسجة العصبية ماوس

Within the nervous system, hundreds of neuronal and glial cell types have been described. Each specific cell type in the brain or spinal cord has a ...

Purification of Mitochondria from Yeast Cells

تنقية الميتوكوندريا من خلايا الخميرة

Mitochondria are the main site of ATP production during aerobic metabolism in eukaryotic non-photosynthetic cells1. These complex organelles also play ...

Isolation of Valvular Endothelial Cells

عزل الخلايا البطانية صمامي

Heart valves are solely responsible for maintaining unidirectional blood flow through the cardiovascular system.  These thin, fibrous tissues are ...

Isolation of Retinal Stem Cells from the Mouse Eye

عزل الخلايا الجذعية من شبكية العين بالعين ماوس

The adult mouse retinal stem cell (RSC) is a rare quiescent cell found within the ciliary epithelium (CE) of the mammalian eye1,2,3. The CE is made up of ...