Name: isolation of cd4+ t cells from mouse lymph nodes using miltenyi macs purification
Uploaded: 2007-11-01T00:34:55
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of CD4+ T cells from Mouse Lymph Nodes Using Miltenyi MACS Purification at JoVE.com

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> אנו מבקשים להודות רבקה Paquett להכנת חיץ MACS. </p>

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> אנא קרא ופעל על פי פרוטוקול כלול בערכה Miltenyi או באופן מקוון <a href="http://www.miltenyibiotec.com/">http://www.miltenyibiotec.com/</a> . </p>

<ol>
	<li>Miller, M. J., Hejazi, A. S., Wei, S. H., Cahalan, M. D., Parker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+cell+repertoire+scanning+is+promoted+by+dynamic+dendritic+cell+behavior+and+random+T+cell+motility+in+the+lymph+node.">T cell repertoire scanning is promoted by dynamic dendritic cell behavior and random T cell motility in the lymph node.</a> <em style='font-style: italic'>Proc Natl Acad Sci U S A</em>. <b>101</b>, 998-1003 (2004).</li><li>Matheu, M. P., Deane, J. A., Parker, I., Fruman, D. A., Cahalan, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Class+IA+phosphoinositide+3-kinase+modulates+basal+lymphocyte+motility+in+the+lymph+node.">Class IA phosphoinositide 3-kinase modulates basal lymphocyte motility in the lymph node.</a> <em style='font-style: italic'>J Immunol</em>. <b>179</b>, 2261-2269 (2007).</li></ol>

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> בידוד של תאים ממקור העיקרית היא צעד הכרחי פרוטוקולים מורכבים הרבה יותר. Miltenyi מציעה ערכות לבודד תאים ואורגניזמים מספר כולל בני אדם, שאינם בני אדם וקופים, חולדות, כפי המתואר כאן, בעכברים. הפרדה מגנטית חרוז מבוססי תאים מאפשר בחירה או חיובי (או דלדול התא), כמו גם סלקציה שלילית. הנה, אנ?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>MACS Buffer</td>
<td>Reagent</td>
<td>None</td>
<td>None </td>
<td>Prepare as described by Miltenyi. 

</td>
</tr>
<tr>
<td>CD4+ T cell Isolation Kit: Untouched Isolation </td>
<td>Reagent</td>
<td>Miltenyi</td>
<td>130-090-860</td>
<td>For use with the Miltenyi system. </td>
</tr>
<tr>
<td>Sterile Phosphate-Buffered Saline (PBS)</td>
<td>Reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>For use in the preparation of MACS buffer.</td>
</tr>
<tr>
<td>Corning 35mm Not TC-Treated Culture Dish</td>
<td>Other</td>
<td>Corning Cell Culture Surfaces</td>
<td>430588</td>
<td>Used in the preparation of a single cell suspension.</td>
</tr>
<tr>
<td>70 micron Cell Strainer </td>
<td>Tool </td>
<td>BD Falcon</td>
<td>352350</td>
<td>Used in the preparation of a single cell suspension.</td>
</tr>
<tr>
<td>6 mL Syringe </td>
<td>Tool</td>
<td>Tyco Healthcare</td>
<td>8881516051</td>
<td>Used in the preparation of a single cell suspension.</td>
</tr>
<tr>
<td>10x Dulbecco's Phosphate Buffered Saline (DPBS)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>14200-075</td>
<td>For use in RBC lysis.</td>
</tr>
<tr>
<td>Sterile Water </td>
<td>Reagent </td>
<td>Sigma</td>
<td>W4502</td>
<td>For use in RBC lysis.</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

isolation of cd4+ t cells from mouse lymph nodes using miltenyi macs purification

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> בידוד של תאים ממקור העיקרית היא צעד הכרחי פרוטוקולים מורכבים הרבה יותר. Miltenyi מציעה ערכות לבודד תאים ואורגניזמים מספר כולל בני אדם, שאינם בני אדם וקופים, חולדות, כפי המתואר כאן, בעכברים. הפרדה מגנטית חרוז מבוססי תאים מאפשר בחירה או חיובי (או דלדול התא), כמו גם סלקציה שלילית. הנה, אנחנו מדגימים סלקציה שלילית של CD4 יש נגעה או Na + עוזר ותאי T. שימוש זה הפרוטוקול הסטנדרטי שאנחנו בדרך כלל לטהר את התאים CD4 ≥ טהור 96% + / CD3 +. פרוטוקול זה נמצא בשימוש בשילוב עם Dissection הפרוטוקול 2-Photon הדמיה של בלוטות לימפה הפריפריה עכברים שפורסם בגיליון 7 של יופיטר, לטיהור בתאי T סוגי תאים אחרים adoptively להעביר למטרות הדמיה. למרות שאנו לא להפגין ניתוח FACS וידאו בפרוטוקול זה, מומלץ מאוד לבדוק את טוהר הכולל של תאים בודדים באמצעות נוגדנים מתאימים באמצעות FACS. בנוסף, אנחנו מדגימים את השיטה הלא סטרילית של בידוד תא T. אם התאים סטרילי נחוצות עבור יישום מסוים של משתמש הקצה שלך, הקפד לעשות את כל ההליכים הפגינו למכסה המנוע בתרבית רקמה בתנאים סטריליים סטנדרטי. אנו מודים לך על צפייה ובהצלחה עם הניסויים שלך! </p>

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of CD4+ T cells from Mouse Lymph Nodes Using Miltenyi MACS Purification at JoVE.com

Isolation of CD4+ T cells from Mouse Lymph Nodes Using Miltenyi MACS Purification

<p class="jove_content">בידוד של לימפוציטים באמצעות MACS Miltenyi ערכת מהווה דרך אמינה לטהר תאים שלמים homogenates רקמת הלימפה. תאים מטוהרים באמצעות מערכת Miltenyi הם בדרך כלל ≥ 96% טהור. הנה, אנחנו מדגימים את הצעדים שננקטו כדי לבודד תאים מסוג CD4 + T, אחת ערכות רבים המוצעים על ידי Miltenyi.</p>

בידוד של תאים מסוג CD4 + T מ בלוטות לימפה עכבר באמצעות טיהור Miltenyi MACS

Isolation of cells from the primary source is a necessary step in many more complex protocols. Miltenyi offers kits to isolate cells from several ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection and 2-Photon Imaging of Peripheral Lymph Nodes in Mice

Dissection ו 2-Photon הדמיה של בלוטות לימפה הפריפריה עכברים

Two-photon imaging has revealed an elegant choreography of motility and cellular interactions within the lymph node under basal conditions and at the ...

CD4+ T-Lymphocyte Capture Using a Disposable Microfluidic Chip for HIV

CD4 + T-לימפוציטים לכידת באמצעות שבב Microfluidic פנויה ל-HIV

Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Spleen with the gentleMACS Dissociator

הכנת תא בודד השעיות מן הטחול עכבר עם Dissociator gentleMACS

Single-cell suspensions are a prerequisite for experiments in cell separation, cell analysis and cell culture.  To avoid tedious and often painful manual ...

Detection and Isolation of Viable Mouse IL-17-Secreting T Cells

זיהוי ובידוד של Viable IL-17-מפריש תאים עכבר T

The MACS Cytokine Secretion Assay technology allows detection of secreted cytokines on the single cell level and sensitive isolation of viable ...

Visualizing Antigen Specific CD4+ T Cells using MHC Class II Tetramers

Antigen CD4 + הדמיה ספציפיות תאים T באמצעות MHC Class II Tetramers

Major histocompatibility complex (MHC) class II tetramers allow the direct visualization of antigen specific CD4+ T cells by flow cytometry.  This method ...

Standardized Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Lung Tissue using the gentleMACS Dissociator

הכנה סטנדרטית של תא בודד השעיות מתוך רקמת הריאה באמצעות עכבר Dissociator gentleMACS

The preparation of single-cell suspensions from tissues is an important prerequisite for many experiments in cellular research. The process of ...

Generation of Single-Cell Suspensions from Mouse Neural Tissue

הדור של תא בודד מרקמת השעיות עכבר עצבית

Within the nervous system, hundreds of neuronal and glial cell types have been described. Each specific cell type in the brain or spinal cord has a ...

Purification of Mitochondria from Yeast Cells

טיהור של המיטוכונדריה מתאי שמרים

Mitochondria are the main site of ATP production during aerobic metabolism in eukaryotic non-photosynthetic cells1. These complex organelles also play ...

Isolation of Valvular Endothelial Cells

בידוד של תאים אנדותל valvular

Heart valves are solely responsible for maintaining unidirectional blood flow through the cardiovascular system.  These thin, fibrous tissues are ...

Isolation of Retinal Stem Cells from the Mouse Eye

בידוד של גזע תאים רשתית העין של העכבר

The adult mouse retinal stem cell (RSC) is a rare quiescent cell found within the ciliary epithelium (CE) of the mammalian eye1,2,3. The CE is made up of ...