Name: isolation of cd4+ t cells from mouse lymph nodes using miltenyi macs purification
Uploaded: 2007-11-01T00:34:55
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of CD4+ T cells from Mouse Lymph Nodes Using Miltenyi MACS Purification at JoVE.com

<p> हम रेबेका Paquett एमएसीएस बफर की तैयारी के लिए धन्यवाद करना चाहता हूँ. </p>

<p> पढ़ने के लिए और Miltenyi या किट ऑनलाइन में शामिल प्रोटोकॉल का पालन करें <a href="http://www.miltenyibiotec.com/">http://www.miltenyibiotec.com/</a> . </p>

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	<li>Miller, M. J., Hejazi, A. S., Wei, S. H., Cahalan, M. D., Parker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+cell+repertoire+scanning+is+promoted+by+dynamic+dendritic+cell+behavior+and+random+T+cell+motility+in+the+lymph+node.">T cell repertoire scanning is promoted by dynamic dendritic cell behavior and random T cell motility in the lymph node.</a> <em style='font-style: italic'>Proc Natl Acad Sci U S A</em>. <b>101</b>, 998-1003 (2004).</li><li>Matheu, M. P., Deane, J. A., Parker, I., Fruman, D. A., Cahalan, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Class+IA+phosphoinositide+3-kinase+modulates+basal+lymphocyte+motility+in+the+lymph+node.">Class IA phosphoinositide 3-kinase modulates basal lymphocyte motility in the lymph node.</a> <em style='font-style: italic'>J Immunol</em>. <b>179</b>, 2261-2269 (2007).</li></ol>

<p> प्राथमिक स्रोत से कोशिकाओं के अलगाव कई और अधिक जटिल प्रोटोकॉल में एक आवश्यक कदम है. Miltenyi किट प्रदान करता है मनुष्य, गैर मानव प्राइमेट, चूहे और, के रूप में हम यहाँ वर्णन चूहों, सहित कई जीवों से कोशिकाओं को अलग. चुंब?...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>MACS Buffer</td>
<td>Reagent</td>
<td>None</td>
<td>None </td>
<td>Prepare as described by Miltenyi. 

</td>
</tr>
<tr>
<td>CD4+ T cell Isolation Kit: Untouched Isolation </td>
<td>Reagent</td>
<td>Miltenyi</td>
<td>130-090-860</td>
<td>For use with the Miltenyi system. </td>
</tr>
<tr>
<td>Sterile Phosphate-Buffered Saline (PBS)</td>
<td>Reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>For use in the preparation of MACS buffer.</td>
</tr>
<tr>
<td>Corning 35mm Not TC-Treated Culture Dish</td>
<td>Other</td>
<td>Corning Cell Culture Surfaces</td>
<td>430588</td>
<td>Used in the preparation of a single cell suspension.</td>
</tr>
<tr>
<td>70 micron Cell Strainer </td>
<td>Tool </td>
<td>BD Falcon</td>
<td>352350</td>
<td>Used in the preparation of a single cell suspension.</td>
</tr>
<tr>
<td>6 mL Syringe </td>
<td>Tool</td>
<td>Tyco Healthcare</td>
<td>8881516051</td>
<td>Used in the preparation of a single cell suspension.</td>
</tr>
<tr>
<td>10x Dulbecco's Phosphate Buffered Saline (DPBS)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>14200-075</td>
<td>For use in RBC lysis.</td>
</tr>
<tr>
<td>Sterile Water </td>
<td>Reagent </td>
<td>Sigma</td>
<td>W4502</td>
<td>For use in RBC lysis.</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

isolation of cd4+ t cells from mouse lymph nodes using miltenyi macs purification

<p class="jove_content"> प्राथमिक स्रोत से कोशिकाओं के अलगाव कई और अधिक जटिल प्रोटोकॉल में एक आवश्यक कदम है. Miltenyi किट प्रदान करता है मनुष्य, गैर मानव प्राइमेट, चूहे और, के रूप में हम यहाँ वर्णन चूहों, सहित कई जीवों से कोशिकाओं को अलग. चुंबकीय मनका आधारित सेल जुदाई या तो सकारात्मक (या सेल रिक्तीकरण) चयन के रूप में अच्छी तरह से नकारात्मक चयन के लिए अनुमति देता है. यहाँ, हम अछूता या ना किया है सीडी 4 + सहायक टी कोशिकाओं की नकारात्मक चयन प्रदर्शित करता है. इस मानक प्रोटोकॉल का प्रयोग हम आम तौर पर कोशिकाओं है कि ≥ 96% शुद्ध + / CD3 सीडी 4 + शुद्ध. इस प्रोटोकॉल प्रोटोकॉल विच्छेदन और टी कोशिकाओं और अन्य प्रकार की कोशिकाओं की शुद्धि adoptively इमेजिंग प्रयोजनों के लिए स्थानांतरण के लिए, जौव के 7 अंक में प्रकाशित चूहे में परिधीय लिम्फ नोड्स के 2 फोटॉन इमेजिंग के साथ संयोजन के रूप में प्रयोग किया जाता है. हालांकि हम इस प्रोटोकॉल वीडियो में FACS विश्लेषण का प्रदर्शन नहीं किया, यह अत्यधिक पृथक FACS के माध्यम से उचित एंटीबॉडी का उपयोग कोशिकाओं के समग्र शुद्धता की जांच की सिफारिश की है. इसके अलावा, हम गैर बाँझ टी सेल अलगाव की विधि प्रदर्शित करता है. यदि बाँझ कोशिकाओं अपने विशेष आवेदन अंत उपयोगकर्ता के लिए आवश्यक हैं, मानक बाँझ शर्तों के तहत टिशू कल्चर हुड में प्रदर्शन प्रक्रियाओं के सभी सुनिश्चित कर लें कि हो. आप देख रहा है और अपने खुद के प्रयोगों के साथ अच्छे भाग्य के लिए धन्यवाद! </p>

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Isolation of CD4+ T cells from Mouse Lymph Nodes Using Miltenyi MACS Purification

<p class="jove_content">Miltenyi एमएसीएस किट का उपयोग कर लिम्फोसाइटों के अलगाव पूरे lymphoid ऊतक homogenates से कोशिकाओं को शुद्ध करने के लिए एक विश्वसनीय तरीका है. Miltenyi प्रणाली का उपयोग कर शुद्ध कक्ष आम तौर पर कर रहे हैं ≥ 96% शुद्ध है. यहाँ, हम सीडी 4 + टी कोशिकाओं है, कई Miltenyi द्वारा की पेशकश की किट के एक अलग करने के लिए उठाए गए कदमों का प्रदर्शन.</p>

CD4 के अलगाव + माउस लसीका Miltenyi एमएसीएस शोधन का उपयोग नोड्स से टी कोशिकाओं

Isolation of cells from the primary source is a necessary step in many more complex protocols. Miltenyi offers kits to isolate cells from several ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection and 2-Photon Imaging of Peripheral Lymph Nodes in Mice

विच्छेदन और चूहे में परिधीय लिम्फ नोड्स के 2 फोटॉन इमेजिंग

Two-photon imaging has revealed an elegant choreography of motility and cellular interactions within the lymph node under basal conditions and at the ...

CD4+ T-Lymphocyte Capture Using a Disposable Microfluidic Chip for HIV

+ टी lymphocyte कैद CD4 एचआईवी के लिए एक डिस्पोजेबल microfluidic चिप का उपयोग

Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Spleen with the gentleMACS Dissociator

GentleMACS Dissociator के साथ सिंगल सेल माउस प्लीहा से निलंबन की तैयारी

Single-cell suspensions are a prerequisite for experiments in cell separation, cell analysis and cell culture.  To avoid tedious and often painful manual ...

Detection and Isolation of Viable Mouse IL-17-Secreting T Cells

और व्यवहार्य माउस आईएल 17-स्रावित टी कोशिकाओं की जांच अलगाव

The MACS Cytokine Secretion Assay technology allows detection of secreted cytokines on the single cell level and sensitive isolation of viable ...

Visualizing Antigen Specific CD4+ T Cells using MHC Class II Tetramers

Visualizing एंटीजन विशिष्ट सीडी 4 + टी कोशिकाओं का उपयोग MHC कक्षा द्वितीय tetramers

Major histocompatibility complex (MHC) class II tetramers allow the direct visualization of antigen specific CD4+ T cells by flow cytometry.  This method ...

Standardized Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Lung Tissue using the gentleMACS Dissociator

माउस फेफड़े के ऊतकों से सिंगल सेल निलंबन gentleMACS Dissociator का उपयोग मानकीकृत तैयार

The preparation of single-cell suspensions from tissues is an important prerequisite for many experiments in cellular research. The process of ...

Generation of Single-Cell Suspensions from Mouse Neural Tissue

माउस तंत्रिका ऊतक से सिंगल सेल निलंबन का सृजन

Within the nervous system, hundreds of neuronal and glial cell types have been described. Each specific cell type in the brain or spinal cord has a ...

Purification of Mitochondria from Yeast Cells

Mitochondria के खमीर कक्ष से शोधन

Mitochondria are the main site of ATP production during aerobic metabolism in eukaryotic non-photosynthetic cells1. These complex organelles also play ...

Isolation of Valvular Endothelial Cells

वाल्वुलर endothelial कोशिकाओं के अलगाव

Heart valves are solely responsible for maintaining unidirectional blood flow through the cardiovascular system.  These thin, fibrous tissues are ...

Isolation of Retinal Stem Cells from the Mouse Eye

माउस आँखों से रेटिना स्टेम सेल के अलगाव

The adult mouse retinal stem cell (RSC) is a rare quiescent cell found within the ciliary epithelium (CE) of the mammalian eye1,2,3. The CE is made up of ...