Name: isolation of cd4+ t cells from mouse lymph nodes using miltenyi macs purification
Uploaded: 2007-11-01T00:34:55
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of CD4+ T cells from Mouse Lymph Nodes Using Miltenyi MACS Purification at JoVE.com

<p> Rebecca Paquett MACS tamponunun hazırlanması için teşekkür etmek istiyorum. </p>

<p> Lütfen okuyun ve uygulayın Miltenyi kiti veya çevrimiçi dahil protokol <a href="http://www.miltenyibiotec.com/">http://www.miltenyibiotec.com/</a> . </p>

<ol>
	<li>Miller, M. J., Hejazi, A. S., Wei, S. H., Cahalan, M. D., Parker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+cell+repertoire+scanning+is+promoted+by+dynamic+dendritic+cell+behavior+and+random+T+cell+motility+in+the+lymph+node.">T cell repertoire scanning is promoted by dynamic dendritic cell behavior and random T cell motility in the lymph node.</a> <em style='font-style: italic'>Proc Natl Acad Sci U S A</em>. <b>101</b>, 998-1003 (2004).</li><li>Matheu, M. P., Deane, J. A., Parker, I., Fruman, D. A., Cahalan, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Class+IA+phosphoinositide+3-kinase+modulates+basal+lymphocyte+motility+in+the+lymph+node.">Class IA phosphoinositide 3-kinase modulates basal lymphocyte motility in the lymph node.</a> <em style='font-style: italic'>J Immunol</em>. <b>179</b>, 2261-2269 (2007).</li></ol>

<p> Birincil kaynak hücrelerin izolasyonu çok daha karmaşık protokoller gerekli bir adımdır. Miltenyi, insanlar, insan olmayan primatlardan, sıçan ve biz burada açıklamak gibi, fare dahil olmak üzere çeşitli organizmalar hücreleri izole etmek için kitleri sunmaktadır. Pozitif seçimi (veya hücre kaybı) yanı sıra olumsuz seçim ya boncuk tabanlı Manyetik hücre ayırma sağlar. Burada, biz, bakir ya da na ve CD4 + yardımcı T hücreleri olumsuz seçim göstermektedir. Biz genellikle ≥% 96 saf CD4 + / CD3 + hücrelerden ar...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>MACS Buffer</td>
<td>Reagent</td>
<td>None</td>
<td>None </td>
<td>Prepare as described by Miltenyi. 

</td>
</tr>
<tr>
<td>CD4+ T cell Isolation Kit: Untouched Isolation </td>
<td>Reagent</td>
<td>Miltenyi</td>
<td>130-090-860</td>
<td>For use with the Miltenyi system. </td>
</tr>
<tr>
<td>Sterile Phosphate-Buffered Saline (PBS)</td>
<td>Reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>For use in the preparation of MACS buffer.</td>
</tr>
<tr>
<td>Corning 35mm Not TC-Treated Culture Dish</td>
<td>Other</td>
<td>Corning Cell Culture Surfaces</td>
<td>430588</td>
<td>Used in the preparation of a single cell suspension.</td>
</tr>
<tr>
<td>70 micron Cell Strainer </td>
<td>Tool </td>
<td>BD Falcon</td>
<td>352350</td>
<td>Used in the preparation of a single cell suspension.</td>
</tr>
<tr>
<td>6 mL Syringe </td>
<td>Tool</td>
<td>Tyco Healthcare</td>
<td>8881516051</td>
<td>Used in the preparation of a single cell suspension.</td>
</tr>
<tr>
<td>10x Dulbecco's Phosphate Buffered Saline (DPBS)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>14200-075</td>
<td>For use in RBC lysis.</td>
</tr>
<tr>
<td>Sterile Water </td>
<td>Reagent </td>
<td>Sigma</td>
<td>W4502</td>
<td>For use in RBC lysis.</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

isolation of cd4+ t cells from mouse lymph nodes using miltenyi macs purification

<p class="jove_content"> Birincil kaynak hücrelerin izolasyonu çok daha karmaşık protokoller gerekli bir adımdır. Miltenyi, insanlar, insan olmayan primatlardan, sıçan ve biz burada açıklamak gibi, fare dahil olmak üzere çeşitli organizmalar hücreleri izole etmek için kitleri sunmaktadır. Pozitif seçimi (veya hücre kaybı) yanı sıra olumsuz seçim ya boncuk tabanlı Manyetik hücre ayırma sağlar. Burada, biz, bakir ya da na ve CD4 + yardımcı T hücreleri olumsuz seçim göstermektedir. Biz genellikle ≥% 96 saf CD4 + / CD3 + hücrelerden arındırmak bu standart protokolü kullanarak. Bu protokol, protokol Diseksiyon ve T hücreleri ve diğer hücre tipleri adoptively görüntüleme amaçlı transfer saflaştırılması, Jüpiter 7. sorunu yayınlanan Fare Periferik lenf düğümleri, 2-Foton Görüntüleme ile birlikte kullanılır. Bu protokol video FACS analiz göstermek olmasa da, son derece izole hücrelerinin FACS üzerinden uygun antikorları kullanarak genel saflığını kontrol etmek için tavsiye edilir. Buna ek olarak, T hücre izolasyonu steril olmayan bir yöntem gösterilmektedir. Eğer steril hücreleri belirli bir son kullanıcı uygulaması için gerekli olan, tüm doku kültürü kaputu göstermiştir prosedürleri standart steril koşullar altında yapmak istediğinizden emin olun. Kendi deneyleri ile izlemek ve iyi şans için teşekkür ederiz! </p>

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of CD4+ T cells from Mouse Lymph Nodes Using Miltenyi MACS Purification at JoVE.com

Isolation of CD4+ T cells from Mouse Lymph Nodes Using Miltenyi MACS Purification

<p class="jove_content">Miltenyi MAC kiti kullanılarak lenfositlerin İzolasyon tüm lenfoid doku homojenatlarında hücreleri arındırmak için güvenilir bir yol. Miltenyi sistemini kullanarak saflaştırılmış Hücreler genellikle ≥% 96 saf. Burada, CD4 + T hücreleri, Miltenyi tarafından sunulan birçok kitleri biri izole etmek için atılan adımları göstermektedir.</p>

CD4 İzolasyon Miltenyi MACS Arıtma Fare lenf düğümleri + T hücreleri

Isolation of cells from the primary source is a necessary step in many more complex protocols. Miltenyi offers kits to isolate cells from several ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection and 2-Photon Imaging of Peripheral Lymph Nodes in Mice

Farelerde Periferik lenf nodu diseksiyonu ve 2-Foton Görüntüleme

Two-photon imaging has revealed an elegant choreography of motility and cellular interactions within the lymph node under basal conditions and at the ...

Biyoloji

CD4+ T-Lymphocyte Capture Using a Disposable Microfluidic Chip for HIV

CD4 + T-Lenfosit Yakalama HIV için Disposable mikroakışkan Chip

Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Spleen with the gentleMACS Dissociator

Fare Dalak gentleMACS Dissociator Tek Hücreli Cezalar hazırlanması

Single-cell suspensions are a prerequisite for experiments in cell separation, cell analysis and cell culture.  To avoid tedious and often painful manual ...

Detection and Isolation of Viable Mouse IL-17-Secreting T Cells

Canlı Fare IL-17 salgılayan T Hücreler Algılama ve İzolasyonu

The MACS Cytokine Secretion Assay technology allows detection of secreted cytokines on the single cell level and sensitive isolation of viable ...

Visualizing Antigen Specific CD4+ T Cells using MHC Class II Tetramers

Görselleştirme Antijen spesifik CD4 + T hücreleri MHC Sınıf II Tetramers kullanarak

Major histocompatibility complex (MHC) class II tetramers allow the direct visualization of antigen specific CD4+ T cells by flow cytometry.  This method ...

Standardized Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Lung Tissue using the gentleMACS Dissociator

Standardize Hazırlık gentleMACS Dissociator kullanarak Fare Akciğer Doku Tek Hücre Cezalar

The preparation of single-cell suspensions from tissues is an important prerequisite for many experiments in cellular research. The process of ...

Generation of Single-Cell Suspensions from Mouse Neural Tissue

Fare Sinir Doku Hücre Tek Cezalar Üretimi

Within the nervous system, hundreds of neuronal and glial cell types have been described. Each specific cell type in the brain or spinal cord has a ...

Purification of Mitochondria from Yeast Cells

Maya hücreleri Mitokondri saflaştırılması

Mitochondria are the main site of ATP production during aerobic metabolism in eukaryotic non-photosynthetic cells1. These complex organelles also play ...

Isolation of Valvular Endothelial Cells

Kapak Endotel Hücreleri İzolasyon

Heart valves are solely responsible for maintaining unidirectional blood flow through the cardiovascular system.  These thin, fibrous tissues are ...

Isolation of Retinal Stem Cells from the Mouse Eye

Fare Göz Retina Kök Hücre İzolasyonu

The adult mouse retinal stem cell (RSC) is a rare quiescent cell found within the ciliary epithelium (CE) of the mammalian eye1,2,3. The CE is made up of ...