Name: progenitor-derived oligodendrocyte culture system from human fetal brain
Uploaded: 2012-12-20T11:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Progenitor-derived Oligodendrocyte Culture System from Human Fetal Brain at JoVE.com

وأيد هذا البحث من قبل برنامج بحوث ضمن الجدران في المعاهد الوطنية للصحة، NINDS. فإن الكتاب أود أن أشكر جميع أعضاء مختبر الطب الجزيئي وعلم الأعصاب، ريك درايفوس لمساعدة مع المجهري وباميلا النخل C. لمساعدة مع التحرير.

ملاحظة: للحصول على زراعة الروتيني للسلف العصبية والخلايا النسب oligodendrocytic، ويتم حضانة في 37 ° C في مرطب الجو 2 5٪ CO. كل يوم 2، يتم استبدال المتوسطة باستخدام 50 إلى 100٪ من متوسط ​​جديدة اذا الثقافة هي متموجة 40-70٪. في وقت confluency القريب، وpassaged الثقافات في قارورة 2-...

<ol>
	<li>Messam, C. A., Hou, J., Gronostajski, R. M., Major, E. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lineage+pathway+of+human+brain+progenitor+cells+identified+by+JC+virus+susceptibility.">Lineage pathway of human brain progenitor cells identified by JC virus susceptibility.</a> Ann. Neurol. 53, 636-646 (2003).</li><li>Vescovi, A. L., Reynolds, B. A., Fraser, D. D., Weiss, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=bFGF+regulates+the+proliferative+fate+of+unipotent+(neuronal)+and+bipotent+(neuronal/astroglial)+EGF-generated+CNS+progenitor+cells.">bFGF regulates the proliferative fate of unipotent (neuronal) and bipotent (neuronal/astroglial) EGF-generated CNS progenitor cells.</a> Neuron. 11, 951-966 (1993).</li><li>Johe, K. K., Hazel, T. G., Muller, T., Dugich-Djordjevic, M. M., McKay, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+factors+direct+the+differentiation+of+stem+cells+from+the+fetal+and+adult+central+nervous+system.">Single factors direct the differentiation of stem cells from the fetal and adult central nervous system.</a> Genes Dev. 10, 3129-3140 (1996).</li><li>McKay, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cells+in+the+central+nervous+system.">Stem cells in the central nervous system.</a> Science. 276, 66-71 (1997).</li><li>Belachew, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postnatal+NG2+proteoglycan-expressing+progenitor+cells+are+intrinsically+multipotent+and+generate+functional+neurons.">Postnatal NG2 proteoglycan-expressing progenitor cells are intrinsically multipotent and generate functional neurons.</a> J. Cell Biol. 161, 169-186 (2003).</li><li>Almazan, G., McKay, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+oligodendrocyte+precursor+cell+line+from+rat+optic+nerve.">An oligodendrocyte precursor cell line from rat optic nerve.</a> Brain Res. 579, 234-245 (1992).</li><li>Filipovic, R., Zecevic, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+role+of+minocycline+in+co-cultures+of+human+fetal+neurons+and+microglia.">Neuroprotective role of minocycline in co-cultures of human fetal neurons and microglia.</a> Exp. Neurol. 211, 41-51 (2008).</li><li>Goldman, S. A., Natesan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+niche-defying+feat:+induced+oligoneogenesis+in+the+adult+dentate+gyrus.">A niche-defying feat: induced oligoneogenesis in the adult dentate gyrus.</a> Cell Stem Cell. 3, 125-126 (2008).</li><li>Nunes, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+isolation+of+multipotential+neural+progenitor+cells+from+the+subcortical+white+matter+of+the+adult+human+brain.">Identification and isolation of multipotential neural progenitor cells from the subcortical white matter of the adult human brain.</a> Nat. Med. 9, 439-447 (2003).</li><li>Lyssiotis, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+histone+deacetylase+activity+induces+developmental+plasticity+in+oligodendrocyte+precursor+cells.">Inhibition of histone deacetylase activity induces developmental plasticity in oligodendrocyte precursor cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 104, 14982-14987 (2007).</li><li>Sim, F. J., Goldman, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=White+matter+progenitor+cells+reside+in+an+oligodendrogenic+niche.">White matter progenitor cells reside in an oligodendrogenic niche.</a> Ernst Schering Res. Found Workshop. , 61-81 (2005).</li><li>Raff, M. C., Miller, R. H., Noble, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+glial+progenitor+cell+that+develops+in+vitro+into+an+astrocyte+or+an+oligodendrocyte+depending+on+culture+medium.">A glial progenitor cell that develops in vitro into an astrocyte or an oligodendrocyte depending on culture medium.</a> Nature. 303, 390-396 (1983).</li><li>Windrem, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progenitor+cells+derived+from+the+adult+human+subcortical+white+matter+disperse+and+differentiate+as+oligodendrocytes+within+demyelinated+lesions+of+the+rat+brain.">Progenitor cells derived from the adult human subcortical white matter disperse and differentiate as oligodendrocytes within demyelinated lesions of the rat brain.</a> J. Neurosci. Res. 69, 966-975 (2002).</li><li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+rat+and+mouse+oligodendrocyte+precursor+cells.">Isolation and culture of rat and mouse oligodendrocyte precursor cells.</a> Nat. Protoc. 2, 1044-1051 (2007).</li><li>Armstrong, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+immature+oligodendrocyte+lineage+cells.">Isolation and characterization of immature oligodendrocyte lineage cells.</a> Methods. 16, 282-292 (1998).</li><li>Hu, B. Y., Du, Z. W., Li, X. J., Ayala, M., Zhang, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+oligodendrocytes+from+embryonic+stem+cells:+conserved+SHH+signaling+networks+and+divergent+FGF+effects.">Human oligodendrocytes from embryonic stem cells: conserved SHH signaling networks and divergent FGF effects.</a> Development. 136, 1443-1452 (2009).</li><li>Gard, A. L., Williams, W. C., Burrell, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligodendroblasts+distinguished+from+O-2A+glial+progenitors+by+surface+phenotype+(O4+GalC-)+and+response+to+cytokines+using+signal+transducer+LIFR+beta.">Oligodendroblasts distinguished from O-2A glial progenitors by surface phenotype (O4+GalC-) and response to cytokines using signal transducer LIFR beta.</a> Dev. Biol. 167, 596-608 (1995).</li><li>Hu, B. Y., Du, Z. W., Zhang, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiation+of+human+oligodendrocytes+from+pluripotent+stem+cells.">Differentiation of human oligodendrocytes from pluripotent stem cells.</a> Nat. Protoc. 4, 1614-1622 (2009).</li><li>Reubinoff, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+progenitors+from+human+embryonic+stem+cells.">Neural progenitors from human embryonic stem cells.</a> Nat. Biotechnol. 19, 1134-1140 (2001).</li><li>Pfeiffer, S. E., Warrington, A. E., Bansal, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+oligodendrocyte+and+its+many+cellular+processes.">The oligodendrocyte and its many cellular processes.</a> Trends Cell Biol. 3, 191-197 (1993).</li><li>Zhang, S. C., Ge, B., Duncan, I. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracing+human+oligodendroglial+development+in+vitro.">Tracing human oligodendroglial development in vitro.</a> J. Neurosci. Res. 59, 421-429 (2000).</li><li>Bradl, M., Lassmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligodendrocytes:+biology+and+pathology.">Oligodendrocytes: biology and pathology.</a> Acta Neuropathol. 119, 37-53 (2010).</li><li>Chong, S. Y., Chan, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tapping+into+the+glial+reservoir:+cells+committed+to+remaining+uncommitted.">Tapping into the glial reservoir: cells committed to remaining uncommitted.</a> J. Cell Biol. 188, 305-312 (2010).</li><li>Jakovcevski, I., Filipovic, R., Mo, Z., Rakic, S., Zecevic, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligodendrocyte+development+and+the+onset+of+myelination+in+the+human+fetal+brain.">Oligodendrocyte development and the onset of myelination in the human fetal brain.</a> Front Neuroanat. 3, 5 (2009).</li><li>Rao, R. C., Boyd, J., Padmanabhan, R., Chenoweth, J. G., McKay, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+serum-free+derivation+of+oligodendrocyte+precursors+from+neural+stem+cell-enriched+cultures.">Efficient serum-free derivation of oligodendrocyte precursors from neural stem cell-enriched cultures.</a> Stem Cells. 27, 116-125 (2009).</li><li>D'Intino, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Triiodothyronine+administration+ameliorates+the+demyelination/remyelination+ratio+in+a+non-human+primate+model+of+multiple+sclerosis+by+correcting+tissue+hypothyroidism.">Triiodothyronine administration ameliorates the demyelination/remyelination ratio in a non-human primate model of multiple sclerosis by correcting tissue hypothyroidism.</a> J. Neuroendocrinol. 23, 778-790 (2011).</li><li>Cui, Q. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+fetal+oligodendrocyte+progenitor+cells+from+different+gestational+stages+exhibit+substantially+different+potential+to+myelinate.">Human fetal oligodendrocyte progenitor cells from different gestational stages exhibit substantially different potential to myelinate.</a> Stem Cells Dev. , (2012).</li><li>Messam, C. A., Hou, J., Major, E. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coexpression+of+nestin+in+neural+and+glial+cells+in+the+developing+human+CNS+defined+by+a+human-specific+anti-nestin+antibody.">Coexpression of nestin in neural and glial cells in the developing human CNS defined by a human-specific anti-nestin antibody.</a> Exp. Neurol. 161, 585-596 (2000).</li></ol>

هذا البروتوكول يصف كيفية اشتقاق oligodendrocytes قد الجنين من المرحلة الابتدائية خلايا العصبية السلف وتميز النمط الظاهري وذلك باستخدام كل من التدفق الخلوي المناعي وتلطيخ. وقد تم توسيع ونمو الأسلاف العصبية من الجهاز العصبي المركزي الجنين بشكل جيد للغاية ووصف 1-4. ومع ذ?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> تركيز النهائي </td></tr><tr><td> بورصة دبي للطاقة / HAMS F12 01:01 </td><td> أوميغا عالم </td><td> DM-251 </td><td> 1X </td></tr><tr><td> الأبقار الزلال </td><td> سيجما </td><td> A9418 </td><td> 1٪ </td></tr><tr><td> جنتاميسين </td><td> الجودة البيولوجية </td><td> 120-098-031 </td><td> 50 ميكروغرام / مل </td></tr><tr><td> الجلوتامين L- </td><td> الجودة البيولوجية </td><td> 118-084-061 </td><td> 2 مم </td></tr><tr><td> T3 </td><td> سيجما </td><td> T2877 </td><td> 3 نانومتر </td></tr><tr><td> مكونات N2 </td><td> Gibco BRL </td><td> 17502 </td><td> 1:100 </td></tr><tr><td> NT-3 </td><td> شركة PeproTech </td><td> 450-03 </td><td> 2 نانوغرام / مل </td></tr><tr><td> SHH </td><td> R &amp; D النظام </td><td> 1314-SH/CF </td><td> 2 نانوغرام / مل </td></tr><tr><td> bFGF </td><td> شركة PeproTech </td><td> 100-18B </td><td> 20 نانوغرام / مل </td></tr><tr><td> PDGF-AA </td><td> شركة PeproTech </td><td> 100-13A </td><td> 10 نانوغرام / مل </td></tr><tr><td> PDL </td><td> سيجما </td><td> P6407 </td><td> 50 ميكروغرام / م </td></tr><tr><td> PFA </td><td> علوم المجهر الإلكتروني </td><td> 15712 </td><td> 2٪ </td></tr><tr><td> التربسين </td><td> الجودة البيولوجية </td><td> 118-087-721 </td><td></td></tr><tr><td> غراء </td><td> ورثينجتون </td><td> LK003178 </td><td> 20 سنة FIFA / مل </td></tr><tr><td> الدناز قارورة </td><td> ورثينجتون </td><td> LK003172 </td><td> 0.005٪ </td></tr><tr><td> EBSS </td><td> ورثينجتون </td><td> LK003188 </td><td></td></tr><tr><td> إطالة الذهب معدابي </td><td> إينفيتروجن </td><td> P36931 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> الجدول 1. الكواشف. </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> الرئيسية ABS (كل في 1 ميكروغرام / مل) </td><td></td><td> الأنواع نمط إسوي </td><td> مصدر </td><td> الثانوية عبس </td></tr><tr><td colspan="5"> تدفق الخلوي </td></tr><tr><td> A2B5-البيوتين </td><td> فأر </td><td> الغلوبولين المناعي </td><td> هدية J. نيلسون </td><td> Streptavidin PETR، إينفيتروجن، CA </td></tr><tr><td> O4FITC </td><td> فأر </td><td> الغلوبولين المناعي </td><td> هدية من نيلسون J. </td><td></td></tr><tr><td> A2B5 </td><td> فأر </td><td> الغلوبولين المناعي </td><td> ميليبور، MA </td><td> gαm الغلوبولين المناعي-FITC، إينفيتروجن، CA </td></tr><tr><td> O4 </td><td> فأر </td><td> الغلوبولين المناعي </td><td> ميليبور، MA </td><td> gαm الغلوبولين المناعي-FITC، إينفيتروجن، CA </td></tr><tr><td> GalC </td><td> فأر </td><td> مفتش 3 </td><td> ميليبور، MA </td><td> gαm مفتش 3-PE، جنوب الحيوية، AL </td></tr><tr><td> MBP </td><td> دجاج </td><td> IGY </td><td> ميليبور، MA </td><td> dαck IGY-AMCA، جاكسون اللقاحات.، PA </td></tr><tr><td> Nestin </td><td> فأر </td><td> مفتش 1 </td><td> Messam وآخرون 2000 28 </td><td> gαm مفتش 1-PECy5، إينفيتروجن، CA </td></tr><tr><td> GFAP </td><td> أرنب </td><td> مفتش الحكومة </td><td> ميليبور، MA </td><td> gαrb مفتش-PE، جاكسون اللقاحات، PA </td></tr><tr><td> βIII تويولين </td><td> فأر </td><td> مفتش 2 </td><td> كوفانس، CA </td><td> gαm مفتش 2 A-PETR، إينفيتروجن، CA </td></tr><tr><td colspan="6"> كيمياء سيتولوجية مناعية </td></tr><tr><td> βIII تويولين (1:1،500) </td><td> فأر </td><td> مفتش 2A </td><td> كوفانس، CA </td><td> gαm مفتش 2A-FITC، إينفيتروجن، CA (1:1،000) </td></tr><tr><td> GFAP (1:1،000) </td><td> أرنب </td><td> مفتش الحكومة </td><td> ميليبور، MA </td><td> gαrb مفتش-FITC، جاكسون اللقاحات، PA (1:500) </td></tr><tr><td> MBP (1:50) </td><td> دجاج </td><td> IGY </td><td> ميليبور، MA </td><td> dαck IGY-FITC، جاكسون اللقاحات، PA (1:100) </td></tr><tr><td> O4 (1:100) </td><td> فأر </td><td> الغلوبولين المناعي </td><td> ميليبور، MA </td><td> gαm الغلوبولين المناعي-AF546، إينفيتروجن، CA (1: 100) </td></tr><tr><td> GalC (1:10) </td><td> أرنب </td><td> مفتش الحكومة </td><td> ميليبور، MA </td><td> gαm الغلوبولين المناعي-AF750، إينفيتروجن، CA (1:100) </td></tr></tbody></table> الجدول 2 الأجسام المضادة (ABS) المستخدمة في التدفق الخلوي وفحوصات الأجسام المضادة كيمياء سيتولوجية مناعية تقارن: PE، فيكوإيريترين؛ PETR، فيكوإيريترين تكساس الأحمر؛ AMCA، ميثيل الأمينية الكومارين-خلات؛ قبرصي، cyanine؛ FITC، فلوريسئين ايزوثيوسيانيت صك الحكم:. المناعي. . AF: اليكسا فلور؛ gαm: الماعز المضادة للماوس؛ gαrb: الماعز المضادة للأرنب؛ dαck: حمار مكافحة الدجاج. </td></tr></tbody></table>

progenitor-derived oligodendrocyte culture system from human fetal brain

التفريق بين الأسلاف العصبية الإنسان في أنواع الخلايا العصبية والدبقية تقدم نموذجا للدراسة والمقارنة بينها تنظيم الخلية العصبية الجزيئية للتنمية النسب. في توسيع المختبر من الأسلاف العصبية من الأنسجة الجنينية CNS اتسمت أيضا. على الرغم من تحديد وعزل الأسلاف الدبقية من الكبار المسألة الفرعية القشرية الإنسان الأبيض وتطور الأوضاع المختلفة لثقافة التمييز المباشر من الأسلاف العصبية الجنينية في إنتاج oligodendrocytes قد المايلين، والحصول على oligodendrocytes قد البشرية الكافية لفي المختبر التجريب لا يزال صعبا. التفريق بين غالاكتوسيريبروزيد + (GalC) وO4 + تم الإبلاغ عن السلائف دبقية قليلة التغصن أو الخلايا الاصلية (OPC) من الخلايا العصبية باستخدام السلائف 2 الثلث الدماغ الجنين. ومع ذلك، فإن هذه الخلايا لا تتكاثر في غياب الخلايا النجمية بما في ذلك دعم والخلايا العصبية، وسرعان ما فقدت مع مرور الوقت في الثقافة. لا تزال الحاجة لنظام الثقافة لإنتاج خلايا دبقية قليلة التغصن من سلالة مناسبة لفي التجريب المختبر. يمكن أن ثقافة الإنسان oligodendrocytes قد الابتدائي، على سبيل المثال، تكون نموذجا مفيدا لدراسة العوامل المعدية التسبب في الموجهات العصبية مثل الفيروسة التورامية الإنسان، JCV، في الجسم الحي أن يصيب تلك الخلايا. يمكن لهذه الخلايا المستزرعة توفر أيضا نماذج من الأمراض الأخرى المزيل من الجهاز العصبي المركزي (CNS). الأولية، والجنين البشري الدماغ المستمدة، multipotential تتكاثر الخلايا الاصلية العصبية في المختبر مع الحفاظ على القدرة على التمايز إلى خلايا عصبية (عصبونات السلف المستمدة، PDN) والخلايا النجمية (المشتقة من الخلايا النجمية السلف، PDA) تظهر هذه الدراسة أن يمكن أن يتسبب الأسلاف العصبية للتميز من خلال العديد من مراحل التنمية النسب oligodendrocytic (السلف المستمدة من oligodendrocytes قد، PDO). نحن الخلايا العصبية الثقافة السلف في وسائل الإعلام المصل خالية DMEM-F12 سوبplemented مع عامل نمو الخلايا الليفية الأساسية (bFGF)، الصفائح الدموية المستمدة عامل النمو (PDGF-AA)، القنفذ الصوتي (SHH)، وعامل التغذية العصبية 3 (NT-3)، N-2 و triiodothyronine (T3). وpassaged في الخلايا المستزرعة في خلايا 2.5e6 في قوارير 75CM تقريبا كل سبعة أيام. باستخدام هذه الشروط، فإن غالبية الخلايا في الثقافة حفاظ على مورفولوجيا تتميز بعض العمليات وعلامات صريحة من قبل خلايا دبقية قليلة التغصن، مثل A2B5 وO-4. عندما كنا إزالة عوامل النمو الأربعة (GF) (bFGF، PDGF-AA، SHH، NT-3) وإضافة وسائط مكيفة من PDN، تبدأ الخلايا للحصول على مزيد من العمليات وعلامات صريحة محددة من التمايز دبقية قليلة التغصن، مثل GalC والمايلين الأساسية البروتين (MBP). أجرينا توصيف المظهري باستخدام متعدد الألوان التدفق الخلوي لتحديد علامات فريدة من دبقية قليلة التغصن.

من المهم جدا لبدء عملية التمايز من -80٪ 70٪ متموجة العصبية السلف زراعة الخلايا (الشكل 1A). سوف تنقرض العديد من الخلايا بعد تغيير ثقافة المتوسط ​​من السلف والمتوسطة بنسبة ضئيلة نظرا لأنه يتضمن عوامل نمو محددة. هذا يدل على أن لن نمو الخلايا العصبية السلف لم يرتكب ...

Watch this Scientific Journal Video about Progenitor-derived Oligodendrocyte Culture System from Human Fetal Brain at JoVE.com

Progenitor-derived Oligodendrocyte Culture System from Human Fetal Brain

الأولية، والإنسان الجنين الدماغ المستمدة، تتكاثر الخلايا الاصلية multipotential<em&gt; في المختبر</em&gt; مع الحفاظ على القدرة على التمايز إلى خلايا عصبية والخلايا النجمية. هذا العمل يدل على أن يمكن أن يتسبب الأسلاف العصبية للتميز من خلال مراحل النسب oligodendrocytic من تكييف عوامل النمو مختارة.

السلف المستمدة من نظام الثقافة دبقية قليلة التغصن من دماغ الجنين البشري

Differentiation of human neural progenitors into neuronal and glial cell types offers a model to study and compare molecular regulation of neural cell ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Generation of Neural Stem Cells from Discarded Human Fetal Cortical Tissue

جيل من الخلايا الجذعية العصبية من الأنسجة الجنينية البشرية المهملة القشرية

Neural stem cells (NSCs) reside along the ventricular zone neuroepithelium during the development of the cortical plate. These early progenitors ...

Derivation of Enriched Oligodendrocyte Cultures and Oligodendrocyte/Neuron Myelinating Co-cultures from Post-natal Murine Tissues

الاشتقاق الثقافات Oligodendrocyte المخصب وOligodendrocyte نيورون / Myelinating المشارك من الثقافات في مرحلة ما بعد الولادة مناديل الفئران

Identifying the molecular mechanisms underlying OL development is not only critical to furthering our knowledge of OL biology, but also has implications ...

Isolation and Culture of Endothelial Cells from the Embryonic Forebrain

العزلة والثقافة من الخلايا البطانية من الجنينية الدماغ المقدم

Embryonic brain endothelial cells can serve as an important tool in the study of angiogenesis and neurovascular development and interactions. The two ...

A cGMP-applicable Expansion Method for Aggregates of Human Neural Stem and Progenitor Cells Derived From Pluripotent Stem Cells or Fetal Brain Tissue

وهناك طريقة توسيع المركب-ينطبق على مجاميع من العصبية الجذعية البشرية والخلايا المشتقة من الخلايا السلف الجذعية المحفزة أو الجنين أنسجة المخ

A cell expansion technique to amass large numbers of cells from a single specimen for research experiments and clinical trials would greatly benefit the ...

Live Imaging of Primary Cerebral Cortex Cells Using a 2D Culture System

يعيش تصوير خلايا قشرة الدماغ الأولية باستخدام نظام ثقافة 2D

During cerebral cortex development, progenitor cells undergo several rounds of symmetric and asymmetric cell divisions to generate new progenitors or ...

Simple Generation of a High Yield Culture of Induced Neurons from Human Adult Skin Fibroblasts

جيل بسيطة من ثقافة عالية الغلة المستحث الخلايا العصبية من الخلايا الليفية الجلد الكبار البشرية

Induced neurons (iNs), the product of somatic cells directly converted to neurons, are a way to obtain patient-derived neurons from tissue that is easily ...

Isolation of Cerebral Capillaries from Fresh Human Brain Tissue

عزل من الشعيرات الدموية الدماغية من أنسجة المخ البشري الطازج

Understanding blood-brain barrier function under physiological and pathophysiological conditions is critical for the development of new therapeutic ...

Migration, Chemo-Attraction, and Co-Culture Assays for Human Stem Cell-Derived Endothelial Cells and GABAergic Neurons

الهجرة، والجذب الكيميائي، ومقالات الثقافة المشتركة للخلايا الأنبوسلية المشتقة من الخلايا الجذعية البشرية والخلايا العصبية GABAergic

Role of brain vasculature in nervous system development and etiology of brain disorders is increasingly gaining attention. Our recent studies have ...

Measuring and Manipulating Functionally Specific Neural Pathways in the Human Motor System with Transcranial Magnetic Stimulation

قياس ومعالجة المسارات العصبية المحددة وظيفيا في نظام المحرك البشري مع التحفيز المغناطيسي عبر الجمجمة

Understanding interactions between brain areas is important for the study of goal-directed behavior. Functional neuroimaging of brain connectivity has ...

Generation of Oligodendrocytes and Oligodendrocyte-Conditioned Medium for Co-Culture Experiments

جيل من Oligodendrocytes وOligodendrocyte- متوسطة مكيفة للتجارب الثقافة المشتركة

In the central nervous system, oligodendrocytes are well-known for their role in axon myelination, that accelerates the propagation of action potentials ...