Name: progenitor-derived oligodendrocyte culture system from human fetal brain
Uploaded: 2012-12-20T11:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Progenitor-derived Oligodendrocyte Culture System from Human Fetal Brain at JoVE.com

Denna forskning stöds av Interna forskningsprogram vid National Institutes of Health, NINDS. Författarna vill tacka alla medlemmar i laboratoriet för molekylär medicin och neurovetenskap, Rick Dreyfuss för att hjälpa till med mikroskopi och Pamela C. Siktning för att hjälpa till med redigering.

Anmärkning: För rutinmässig odling av neurala stamceller och oligodendrocytic celler härstamning, är inkubering sker vid 37 ° C i en fuktad 5% CO 2 atmosfär. Varje 2 dagar, ersätts mediet med användning av 50 till 100% av färskt medium om kultur är 40-70% sammanflytande. Vid tidpunkten för nära konfluens är kulturerna passeras vid 2-2.5e6/T75 kolv oftast på ett veckoschema. 1. Förbereda Coated Flask <ol><li> För att framställa belagda kolvar sp...

<ol>
	<li>Messam, C. A., Hou, J., Gronostajski, R. M., Major, E. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lineage+pathway+of+human+brain+progenitor+cells+identified+by+JC+virus+susceptibility.">Lineage pathway of human brain progenitor cells identified by JC virus susceptibility.</a> Ann. Neurol. 53, 636-646 (2003).</li><li>Vescovi, A. L., Reynolds, B. A., Fraser, D. D., Weiss, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=bFGF+regulates+the+proliferative+fate+of+unipotent+(neuronal)+and+bipotent+(neuronal/astroglial)+EGF-generated+CNS+progenitor+cells.">bFGF regulates the proliferative fate of unipotent (neuronal) and bipotent (neuronal/astroglial) EGF-generated CNS progenitor cells.</a> Neuron. 11, 951-966 (1993).</li><li>Johe, K. K., Hazel, T. G., Muller, T., Dugich-Djordjevic, M. M., McKay, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+factors+direct+the+differentiation+of+stem+cells+from+the+fetal+and+adult+central+nervous+system.">Single factors direct the differentiation of stem cells from the fetal and adult central nervous system.</a> Genes Dev. 10, 3129-3140 (1996).</li><li>McKay, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cells+in+the+central+nervous+system.">Stem cells in the central nervous system.</a> Science. 276, 66-71 (1997).</li><li>Belachew, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postnatal+NG2+proteoglycan-expressing+progenitor+cells+are+intrinsically+multipotent+and+generate+functional+neurons.">Postnatal NG2 proteoglycan-expressing progenitor cells are intrinsically multipotent and generate functional neurons.</a> J. Cell Biol. 161, 169-186 (2003).</li><li>Almazan, G., McKay, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+oligodendrocyte+precursor+cell+line+from+rat+optic+nerve.">An oligodendrocyte precursor cell line from rat optic nerve.</a> Brain Res. 579, 234-245 (1992).</li><li>Filipovic, R., Zecevic, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+role+of+minocycline+in+co-cultures+of+human+fetal+neurons+and+microglia.">Neuroprotective role of minocycline in co-cultures of human fetal neurons and microglia.</a> Exp. Neurol. 211, 41-51 (2008).</li><li>Goldman, S. A., Natesan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+niche-defying+feat:+induced+oligoneogenesis+in+the+adult+dentate+gyrus.">A niche-defying feat: induced oligoneogenesis in the adult dentate gyrus.</a> Cell Stem Cell. 3, 125-126 (2008).</li><li>Nunes, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+isolation+of+multipotential+neural+progenitor+cells+from+the+subcortical+white+matter+of+the+adult+human+brain.">Identification and isolation of multipotential neural progenitor cells from the subcortical white matter of the adult human brain.</a> Nat. Med. 9, 439-447 (2003).</li><li>Lyssiotis, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+histone+deacetylase+activity+induces+developmental+plasticity+in+oligodendrocyte+precursor+cells.">Inhibition of histone deacetylase activity induces developmental plasticity in oligodendrocyte precursor cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 104, 14982-14987 (2007).</li><li>Sim, F. J., Goldman, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=White+matter+progenitor+cells+reside+in+an+oligodendrogenic+niche.">White matter progenitor cells reside in an oligodendrogenic niche.</a> Ernst Schering Res. Found Workshop. , 61-81 (2005).</li><li>Raff, M. C., Miller, R. H., Noble, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+glial+progenitor+cell+that+develops+in+vitro+into+an+astrocyte+or+an+oligodendrocyte+depending+on+culture+medium.">A glial progenitor cell that develops in vitro into an astrocyte or an oligodendrocyte depending on culture medium.</a> Nature. 303, 390-396 (1983).</li><li>Windrem, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progenitor+cells+derived+from+the+adult+human+subcortical+white+matter+disperse+and+differentiate+as+oligodendrocytes+within+demyelinated+lesions+of+the+rat+brain.">Progenitor cells derived from the adult human subcortical white matter disperse and differentiate as oligodendrocytes within demyelinated lesions of the rat brain.</a> J. Neurosci. Res. 69, 966-975 (2002).</li><li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+rat+and+mouse+oligodendrocyte+precursor+cells.">Isolation and culture of rat and mouse oligodendrocyte precursor cells.</a> Nat. Protoc. 2, 1044-1051 (2007).</li><li>Armstrong, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+immature+oligodendrocyte+lineage+cells.">Isolation and characterization of immature oligodendrocyte lineage cells.</a> Methods. 16, 282-292 (1998).</li><li>Hu, B. Y., Du, Z. W., Li, X. J., Ayala, M., Zhang, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+oligodendrocytes+from+embryonic+stem+cells:+conserved+SHH+signaling+networks+and+divergent+FGF+effects.">Human oligodendrocytes from embryonic stem cells: conserved SHH signaling networks and divergent FGF effects.</a> Development. 136, 1443-1452 (2009).</li><li>Gard, A. L., Williams, W. C., Burrell, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligodendroblasts+distinguished+from+O-2A+glial+progenitors+by+surface+phenotype+(O4+GalC-)+and+response+to+cytokines+using+signal+transducer+LIFR+beta.">Oligodendroblasts distinguished from O-2A glial progenitors by surface phenotype (O4+GalC-) and response to cytokines using signal transducer LIFR beta.</a> Dev. Biol. 167, 596-608 (1995).</li><li>Hu, B. Y., Du, Z. W., Zhang, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiation+of+human+oligodendrocytes+from+pluripotent+stem+cells.">Differentiation of human oligodendrocytes from pluripotent stem cells.</a> Nat. Protoc. 4, 1614-1622 (2009).</li><li>Reubinoff, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+progenitors+from+human+embryonic+stem+cells.">Neural progenitors from human embryonic stem cells.</a> Nat. Biotechnol. 19, 1134-1140 (2001).</li><li>Pfeiffer, S. E., Warrington, A. E., Bansal, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+oligodendrocyte+and+its+many+cellular+processes.">The oligodendrocyte and its many cellular processes.</a> Trends Cell Biol. 3, 191-197 (1993).</li><li>Zhang, S. C., Ge, B., Duncan, I. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracing+human+oligodendroglial+development+in+vitro.">Tracing human oligodendroglial development in vitro.</a> J. Neurosci. Res. 59, 421-429 (2000).</li><li>Bradl, M., Lassmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligodendrocytes:+biology+and+pathology.">Oligodendrocytes: biology and pathology.</a> Acta Neuropathol. 119, 37-53 (2010).</li><li>Chong, S. Y., Chan, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tapping+into+the+glial+reservoir:+cells+committed+to+remaining+uncommitted.">Tapping into the glial reservoir: cells committed to remaining uncommitted.</a> J. Cell Biol. 188, 305-312 (2010).</li><li>Jakovcevski, I., Filipovic, R., Mo, Z., Rakic, S., Zecevic, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligodendrocyte+development+and+the+onset+of+myelination+in+the+human+fetal+brain.">Oligodendrocyte development and the onset of myelination in the human fetal brain.</a> Front Neuroanat. 3, 5 (2009).</li><li>Rao, R. C., Boyd, J., Padmanabhan, R., Chenoweth, J. G., McKay, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+serum-free+derivation+of+oligodendrocyte+precursors+from+neural+stem+cell-enriched+cultures.">Efficient serum-free derivation of oligodendrocyte precursors from neural stem cell-enriched cultures.</a> Stem Cells. 27, 116-125 (2009).</li><li>D'Intino, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Triiodothyronine+administration+ameliorates+the+demyelination/remyelination+ratio+in+a+non-human+primate+model+of+multiple+sclerosis+by+correcting+tissue+hypothyroidism.">Triiodothyronine administration ameliorates the demyelination/remyelination ratio in a non-human primate model of multiple sclerosis by correcting tissue hypothyroidism.</a> J. Neuroendocrinol. 23, 778-790 (2011).</li><li>Cui, Q. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+fetal+oligodendrocyte+progenitor+cells+from+different+gestational+stages+exhibit+substantially+different+potential+to+myelinate.">Human fetal oligodendrocyte progenitor cells from different gestational stages exhibit substantially different potential to myelinate.</a> Stem Cells Dev. , (2012).</li><li>Messam, C. A., Hou, J., Major, E. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coexpression+of+nestin+in+neural+and+glial+cells+in+the+developing+human+CNS+defined+by+a+human-specific+anti-nestin+antibody.">Coexpression of nestin in neural and glial cells in the developing human CNS defined by a human-specific anti-nestin antibody.</a> Exp. Neurol. 161, 585-596 (2000).</li></ol>

Detta protokoll beskriver hur man härleda foster oligodendrocyter från primära humana neurala stamceller och karakterisera deras fenotyp med både flödescytometri och immunofluorescensfärgning. Expansion och tillväxt av neurala stamceller från foster CNS har mycket väl beskriven 1-4. Men få tillräckliga personalresurser oligodendrocyter för in vitro experiment fortfarande svårt, även om det är möjligt att identifiera och isolera gliaceller prekursorer från vuxen människa vita substan...

<table border="1"><tbody><tr><td> Namnet av reagenset </td><td> Företag </td><td> Katalognummer </td><td> Slutlig koncentration </td></tr><tr><td> DME / Hams F12 01:01 </td><td> Omega Forskare </td><td> DM-251 </td><td> 1X </td></tr><tr><td> Bovint albumin </td><td> Sigma </td><td> A9418 </td><td> 1% </td></tr><tr><td> Gentamicin </td><td> Kvalitet Biologicals </td><td> 120-098-031 </td><td> 50 pg / ml </td></tr><tr><td> L-glutamin </td><td> Kvalitet Biologicals </td><td> 118-084-061 </td><td> 2 mM </td></tr><tr><td> T3 </td><td> Sigma </td><td> T2877 </td><td> 3 nM </td></tr><tr><td> N2 Components </td><td> Gibco BRL </td><td> 17.502 </td><td> 1:100 </td></tr><tr><td> NT-3 </td><td> PeproTech Inc </td><td> 450-03 </td><td> 2 ng / ml </td></tr><tr><td> Shh </td><td> FoU-systemet </td><td> 1314-SH/CF </td><td> 2 ng / ml </td></tr><tr><td> bFGF </td><td> PeproTech Inc </td><td> 100-18B </td><td> 20 ng / ml </td></tr><tr><td> PDGF-AA </td><td> PeproTech Inc </td><td> 100-13A </td><td> 10 ng / ml </td></tr><tr><td> PDL </td><td> Sigma </td><td> P6407 </td><td> 50 g / m </td></tr><tr><td> PFA </td><td> Electron Microscopy Sciences </td><td> 15.712 </td><td> 2% </td></tr><tr><td> Trypsin </td><td> Kvalitet Biologicals </td><td> 118-087-721 </td><td></td></tr><tr><td> Papain </td><td> Worthington </td><td> LK003178 </td><td> 20 U / ml </td></tr><tr><td> DNas injektionsflaskor </td><td> Worthington </td><td> LK003172 </td><td> 0,005% </td></tr><tr><td> EBSS </td><td> Worthington </td><td> LK003188 </td><td></td></tr><tr><td> Förläng Guld medDAPI </td><td> Invitrogen </td><td> P36931 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Tabell 1. Reagenser. </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td><table border="1"><tbody><tr><td> Primär Abs (alla vid 1 pg / ml) </td><td></td><td> Arter Isotyp </td><td> Källa </td><td> Sekundär Abs </td></tr><tr><td colspan="5"> Flödescytometri </td></tr><tr><td> A2B5-biotin </td><td> Mus </td><td> IgM </td><td> Gåva J. Nielson </td><td> Streptavidin Petr, Invitrogen, CA </td></tr><tr><td> O4FITC </td><td> Mus </td><td> IgM </td><td> Gåva från J. Nielson </td><td></td></tr><tr><td> A2B5 </td><td> Mus </td><td> IgM </td><td> Millipore, MA </td><td> GaM IgM-FITC, Invitrogen, Kalifornien </td></tr><tr><td> O4 </td><td> Mus </td><td> IgM </td><td> Millipore, MA </td><td> GaM IgM-FITC, Invitrogen, Kalifornien </td></tr><tr><td> GalC </td><td> Mus </td><td> IgG 3 </td><td> Millipore, MA </td><td> GaM IgG 3-PE, Södra Biotech, AL </td></tr><tr><td> MBP </td><td> Kyckling </td><td> IgY </td><td> Millipore, MA </td><td> dαck IgY-AMCA, Jackson Immu., PA </td></tr><tr><td> Nestin </td><td> Mus </td><td> IgG 1 </td><td> Messam et al. 2000 28 </td><td> GaM IgG 1-PECy5, Invitrogen, CA </td></tr><tr><td> GFAP </td><td> Kanin </td><td> IgG </td><td> Millipore, MA </td><td> gαrb IgG-PE, Jackson Immu, PA </td></tr><tr><td> βIII tubulin </td><td> Mus </td><td> IgG 2 </td><td> Covance, Kalifornien </td><td> GaM IgG 2 a-Petr, Invitrogen, Kalifornien </td></tr><tr><td colspan="6"> Immunocytokemi </td></tr><tr><td> βIII tubulin (1:1,500) </td><td> Mus </td><td> IgG2a </td><td> Covance, Kalifornien </td><td> GaM IgG2a-FITC, Invitrogen, Kalifornien (1:1,000) </td></tr><tr><td> GFAP (1:1,000) </td><td> Kanin </td><td> IgG </td><td> Millipore, MA </td><td> gαrb IgG-FITC, Jackson Immu, PA (1:500) </td></tr><tr><td> MBP (1:50) </td><td> Kyckling </td><td> IgY </td><td> Millipore, MA </td><td> dαck IgY-FITC, Jackson Immu, PA (1:100) </td></tr><tr><td> O4 (1:100) </td><td> Mus </td><td> IgM </td><td> Millipore, MA </td><td> GaM IgM-AF546, Invitrogen, CA (1: 100) </td></tr><tr><td> GalC (1:10) </td><td> Kanin </td><td> IgG </td><td> Millipore, MA </td><td> GaM IgM-AF750, Invitrogen, CA (1:100) </td></tr></tbody></table> . Tabell 2 Antikroppar (Abs) används för flödescytometri och analyser immunocytokemi antikroppskonjugat: PE, fykoerytrin, Petr, fykoerytrin Texas Red, AMCA, amino-metyl-kumarin-acetat, Cy, cyanin, FITC, fluoresceinisotiocyanat Ig:. Immunoglobulin. . AF: Alexa Fluor, GaM: get-anti-mus, gαrb: get-anti-kanin, dαck: åsna anti-kyckling. </td></tr></tbody></table>

progenitor-derived oligodendrocyte culture system from human fetal brain

Differentiering av humana neurala stamceller i neuronala och glia celltyper erbjuder en modell för att studera och jämföra molekylära regleringen av neurala celler härstamning utveckling. In vitro expansion av neurala stamceller från foster CNS-vävnad har väl karakteriserade. Trots identifiering och isolering av gliala progenitorceller från vuxen människa subkortikal vita substansen och utveckling av olika odlingsbetingelser för direkt differentiering av fetala neurala stamceller till myelin producerar oligodendrocyter, förvärva tillräckliga personalresurser oligodendrocyter för in vitro experiment är fortfarande svårt. Differentiering av galaktocerebrosid + (GalC) och O4 + har oligodendrocyt föregångare eller stamfaderceller (OPC) från neurala prekursorceller rapporterats med andra trimestern fostrets hjärna. Emellertid dessa celler prolifererar inte i frånvaro av stödceller innefattande astrocyter och neuroner, och försvinner snabbt över tiden i odling. Behovet kvarstår för en kultur för att producera celler av oligodendrocyt härstamning lämplig för in vitro-experiment. Odling av primära humana oligodendrocyter kan, exempelvis, vara en användbar modell för att studera patogenesen för neurotropa smittämnen såsom humana polyomavirus, JCV, att in vivo infekterar dessa celler. Dessa odlade celler kan också ge modeller för andra demyeliniserande sjukdomar i det centrala nervsystemet (CNS). Primär human fetal hjärna-derived, multipotentiella neurala stamceller förökar in vitro samtidigt som förmågan att differentiera till neuron (stamfader-härledda neuroner, PDN) och astrocyter (stamfader härledda astrocyter, PDA) Denna studie visar att neurala stamceller kan induceras att differentiera genom många av de olika stadierna i oligodendrocytic härstamning utveckling (stamfader-härledda oligodendrocyter, SUB). Vi kultur neurala progenitorceller i DMEM-F12 serumfritt medium supkompletterat med basisk fibroblasttillväxtfaktor (bFGF), blodplättshärledd tillväxtfaktor (PDGF-AA), Sonic hedgehog (Shh), neurotrofisk faktor 3 (NT-3), N-2 och trijodtyronin (T3). De odlade cellerna passeras vid 2.5e6 celler per 75cm kolvar ungefär var sjunde dag. Med användning av dessa betingelser, majoriteten av cellerna i odling bibehålla en morfologi kännetecknas av få processer och uttrycka markörer för pre-oligodendrocytceller, såsom A2B5 och O-4. När vi tar bort de fyra tillväxtfaktorer (GF) (bFGF, PDGF-AA, Shh, NT-3) och lägg konditionerade media från PDN, cellerna börjar få fler processer och uttrycka markörer specifika för oligodendrocyt differentiering, såsom GalC och myelin basiskt protein (MBP). Vi utförde fenotypisk karaktärisering med multicolor flödescytometri för att identifiera unika markörer för oligodendrocyt.

Det är mycket viktigt att starta differentiering processen från en 70% -80% konfluenta neurala progenitorceller kultur (figur 1A). Många celler kommer att dö ut efter byte av odlingsmedium från stamfader till oligo-medium eftersom det innehåller specifika tillväxtfaktorer. Detta tyder på att tillväxten av neurala stamceller inte engagerade i en oligodendrocytic fenotyp inte kommer att stödjas av det nya mediet (Figur 1B). Inkubation i oligo-medium + GF under en vecka resultera...

Watch this Scientific Journal Video about Progenitor-derived Oligodendrocyte Culture System from Human Fetal Brain at JoVE.com

Progenitor-derived Oligodendrocyte Culture System from Human Fetal Brain

Primär, mänskliga fostrets hjärna-derived, multipotentiella progenitorceller förökar<em&gt; In vitro</em&gt; Samtidigt som förmågan att differentiera till neuroner och astrocyter. Detta arbete visar att neurala stamceller kan induceras att differentiera genom stegen i oligodendrocytic härstamning genom konditionering med utvalda tillväxtfaktorer.

Progenitor-härledda oligodendrocyt Kultur System från human fetal hjärna

Differentiation of human neural progenitors into neuronal and glial cell types offers a model to study and compare molecular regulation of neural cell ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Generation of Neural Stem Cells from Discarded Human Fetal Cortical Tissue

Generering av neuronala stamceller från kasserade mänskliga foster Bark-Tissue

Neural stem cells (NSCs) reside along the ventricular zone neuroepithelium during the development of the cortical plate. These early progenitors ...

Derivation of Enriched Oligodendrocyte Cultures and Oligodendrocyte/Neuron Myelinating Co-cultures from Post-natal Murine Tissues

Härledning av anrikat Oligodendrocyte kulturer och Oligodendrocyte / Neuron Myelinating Co-kulturer från Postnatal Murine vävnader

Identifying the molecular mechanisms underlying OL development is not only critical to furthering our knowledge of OL biology, but also has implications ...

Isolation and Culture of Endothelial Cells from the Embryonic Forebrain

Isolering och odling av endotelceller från embryonal framhjärnan

Embryonic brain endothelial cells can serve as an important tool in the study of angiogenesis and neurovascular development and interactions. The two ...

A cGMP-applicable Expansion Method for Aggregates of Human Neural Stem and Progenitor Cells Derived From Pluripotent Stem Cells or Fetal Brain Tissue

En cGMP-tillämplig Expansion Metod för aggregat av mänskliga neurala Stem och stamceller härledas från pluripotenta stamceller eller fosterhjärnvävnad

A cell expansion technique to amass large numbers of cells from a single specimen for research experiments and clinical trials would greatly benefit the ...

Live Imaging of Primary Cerebral Cortex Cells Using a 2D Culture System

Live avbildning av primära hjärnbarken celler använder ett 2D kultur

During cerebral cortex development, progenitor cells undergo several rounds of symmetric and asymmetric cell divisions to generate new progenitors or ...

Simple Generation of a High Yield Culture of Induced Neurons from Human Adult Skin Fibroblasts

Enkla Generation av en hög avkastning kultur av inducerade nervceller från mänsklig vuxen hud fibroblaster

Induced neurons (iNs), the product of somatic cells directly converted to neurons, are a way to obtain patient-derived neurons from tissue that is easily ...

Isolation of Cerebral Capillaries from Fresh Human Brain Tissue

Isolering av Cerebral kapillärerna från färska mänsklig hjärnvävnad

Understanding blood-brain barrier function under physiological and pathophysiological conditions is critical for the development of new therapeutic ...

Migration, Chemo-Attraction, and Co-Culture Assays for Human Stem Cell-Derived Endothelial Cells and GABAergic Neurons

Migration, Chemo-Attraction och Co-Kultur Analyser för humanstamcells-härledda endotelceller och GABAergic nervceller

Role of brain vasculature in nervous system development and etiology of brain disorders is increasingly gaining attention. Our recent studies have ...

Measuring and Manipulating Functionally Specific Neural Pathways in the Human Motor System with Transcranial Magnetic Stimulation

Mätning och manipulera funktionellt specifika neurala vägar i det mänskliga motorsystemet med transkraniell magnetisk stimulering

Understanding interactions between brain areas is important for the study of goal-directed behavior. Functional neuroimaging of brain connectivity has ...

Generation of Oligodendrocytes and Oligodendrocyte-Conditioned Medium for Co-Culture Experiments

Generation oligodendrocyter och Oligodendrocyte-Konditionerat medium för samkulturexperiment

In the central nervous system, oligodendrocytes are well-known for their role in axon myelination, that accelerates the propagation of action potentials ...