Name: isolation, characterization and comparative differentiation of human dental pulp stem cells derived from permanent teeth by using two different methods
Uploaded: 2012-11-24T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods at JoV

אנו מכירים תודה ד&quot;ר ליילה Shakeri &amp; ד&quot;ר עארף Dournaei לדיסקוסם הקריטי ומר מוחמד רזא Khadem שריף לתומך הטכני שלו.

1. הכן את פתרון אנזימים ובינוני הפצה (PM) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך סוג collagenase פתרון: תשקול את collagenase סוגי (12 מ&quot;ג / מ&quot;ל) ולהתמוסס במ&quot;ל PBS 1 ומסנן באמצעות מסנן מזרק מיקרומטר 0.2. ואז למקם אותו צינור מ&quot;ל 15 ולשמור אותו ב -20 ° C עד צורך. ...

<ol>
	<li>Volponi, A. A., Pang, Y., Sharpe, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell-based+biological+tooth+repair+and+regeneration.">Stem cell-based biological tooth repair and regeneration.</a> Trends Cell Biol. 20, 715-722 (2010).</li><li>Nosrat, I. V., Widenfalk, J., Olson, L., Nosrat, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dental+pulp+cells+produce+neurotrophic+factors,+interact+with+trigeminal+neurons+in+vitro,+and+rescue+motoneurons+after+spinal+cord+injury.">Dental pulp cells produce neurotrophic factors, interact with trigeminal neurons in vitro, and rescue motoneurons after spinal cord injury.</a> Dev. Biol. 238, 120-132 (2001).</li><li>Gandia, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+dental+pulp+stem+cells+improve+left+ventricular+function,+induce+angiogenesis,+and+reduce+infarct+size+in+rats+with+acute+myocardial+infarction.">Human dental pulp stem cells improve left ventricular function, induce angiogenesis, and reduce infarct size in rats with acute myocardial infarction.</a> Stem Cells. 26, 638-645 (2008).</li><li>Gronthos, S., Mankani, M., Brahim, J., Robey, P. G., Shi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postnatal+human+dental+pulp+stem+cells+(DPSCs)+in+vitro+and+in+vivo.">Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in vitro and in vivo.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A.. 97, 13625-13630 (2000).</li><li>Graziano, A., d'Aquino, R., Laino, G., Papaccio, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dental+pulp+stem+cells:+a+promising+tool+for+bone+regeneration.">Dental pulp stem cells: a promising tool for bone regeneration.</a> Stem Cell Rev. 4, 21-26 (2008).</li><li>Kerkis, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+transplantation+of+human+immature+dental+pulp+stem+cells+from+baby+teeth+to+golden+retriever+muscular+dystrophy+(GRMD)+dogs:+Local+or+systemic.">Early transplantation of human immature dental pulp stem cells from baby teeth to golden retriever muscular dystrophy (GRMD) dogs: Local or systemic.</a> J. Transl. Med. 6, 35 (2008).</li><li>Onyekwelu, O., Seppala, M., Zoupa, M., Cobourne, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tooth+development:+2.+Regenerating+teeth+in+the+laboratory.">Tooth development: 2. Regenerating teeth in the laboratory.</a> Dent. Update. 34, 20-29 (2007).</li><li>Cordeiro, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dental+pulp+tissue+engineering+with+stem+cells+from+exfoliated+deciduous+teeth.">Dental pulp tissue engineering with stem cells from exfoliated deciduous teeth.</a> J. Endod. 34 (08), 962-969 (2008).</li><li>Pierdomenico, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multipotent+mesenchymal+stem+cells+with+immunosuppressive+activity+can+be+easily+isolated+from+dental+pulp.">Multipotent mesenchymal stem cells with immunosuppressive activity can be easily isolated from dental pulp.</a> Transplantation. 80, 836-842 (2005).</li><li>de Mendonca Costa, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstruction+of+large+cranial+defects+in+nonimmunosuppressed+experimental+design+with+human+dental+pulp+stem+cells.">Reconstruction of large cranial defects in nonimmunosuppressed experimental design with human dental pulp stem cells.</a> J. Craniofac. Surg. 19, 204-210 (2008).</li><li>Tirino, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+the+identification,+characterization+and+banking+of+human+DPSCs:+current+strategies+and+perspectives.">Methods for the identification, characterization and banking of human DPSCs: current strategies and perspectives.</a> Stem Cell Rev. 7, 608-615 (2011).</li><li>Tirino, V., Paino, F., De Rosa, A., Papaccio, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification,+isolation,+characterization,+and+banking+of+human+dental+pulp+stem+cells.">Identification, isolation, characterization, and banking of human dental pulp stem cells.</a> Methods Mol. Biol. 879, 443-463 (2012).</li><li>Eslaminejad, M. B., Vahabi, S., Shariati, M., Nazarian, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+Growth+and+Characterization+of+Stem+Cells+from+Human+Dental+Pulp+of+Deciduous+Versus+Permanent+Teeth.">In vitro Growth and Characterization of Stem Cells from Human Dental Pulp of Deciduous Versus Permanent Teeth.</a> J. Dent. (Tehran). 7, 185-195 (2010).</li><li>Wei, X., Ling, J., Wu, L., Liu, L., Xiao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+mineralization+markers+in+dental+pulp+cells.">Expression of mineralization markers in dental pulp cells.</a> J. Endod. 33, 703-708 (2007).</li><li>Nombela-Arrieta, C., Ritz, J., Silberstein, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+elusive+nature+and+function+of+mesenchymal+stem+cells.">The elusive nature and function of mesenchymal stem cells.</a> Nat. Rev. Mol Cell Biol. 12, 126-131 (2011).</li><li>Huang, G. T., Gronthos, S., Shi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cells+derived+from+dental+tissues+vs.+those+from+other+sources:+their+biology+and+role+in+regenerative+medicine.">Mesenchymal stem cells derived from dental tissues vs. those from other sources: their biology and role in regenerative medicine.</a> J. Dent. Res. 88, 792-806 (2009).</li><li>Graziano, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scaffold's+surface+geometry+significantly+affects+human+stem+cell+bone+tissue+engineering.">Scaffold's surface geometry significantly affects human stem cell bone tissue engineering.</a> J. Cell Physiol. 214, 166-172 (2008).</li><li>d'Aquino, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+dental+pulp+stem+cells:+from+biology+to+clinical+applications.">Human dental pulp stem cells: from biology to clinical applications.</a> J. Exp. Zool. B. Mol. Dev. Evol. 312, 408-415 (2009).</li><li>Mitsiadis, T. A., Feki, A., Papaccio, G., Caton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dental+pulp+stem+cells,+niches,+and+notch+signaling+in+tooth+injury.">Dental pulp stem cells, niches, and notch signaling in tooth injury.</a> Adv. Dent. Res. 23, 275-279 (2011).</li><li>Shi, S., Gronthos, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+niche+of+postnatal+mesenchymal+stem+cells+in+human+bone+marrow+and+dental+pulp.">Perivascular niche of postnatal mesenchymal stem cells in human bone marrow and dental pulp.</a> J. Bone Miner. Res. 18, 696-704 (2003).</li><li>Tomic, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunomodulatory+properties+of+mesenchymal+stem+cells+derived+from+dental+pulp+and+dental+follicle+are+susceptible+to+activation+by+toll-like+receptor+agonists.">Immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells derived from dental pulp and dental follicle are susceptible to activation by toll-like receptor agonists.</a> Stem Cells Dev. 20, 695-708 (2011).</li><li>Tsukamoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mineralized+nodule+formation+by+cultures+of+human+dental+pulp-derived+fibroblasts.">Mineralized nodule formation by cultures of human dental pulp-derived fibroblasts.</a> Arch. Oral Biol. 37, 1045-1055 (1992).</li><li>About, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+dentin+production+in+vitro.">Human dentin production in vitro.</a> Exp. Cell Res. 258, 33-41 (2000).</li><li>Couble, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odontoblast+differentiation+of+human+dental+pulp+cells+in+explant+cultures.">Odontoblast differentiation of human dental pulp cells in explant cultures.</a> Calcif. Tissue Int. 66, 129-138 (2000).</li><li>Onishi, T., Kinoshita, S., Shintani, S., Sobue, S., Ooshima, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stimulation+of+proliferation+and+differentiation+of+dog+dental+pulp+cells+in+serum-free+culture+medium+by+insulin-like+growth+factor.">Stimulation of proliferation and differentiation of dog dental pulp cells in serum-free culture medium by insulin-like growth factor.</a> Arch. Oral Biol. 44 (99), 361-371 (1999).</li><li>Huang, G. T., Sonoyama, W., Chen, J., Park, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+characterization+of+human+dental+pulp+cells:+various+isolation+methods+and+culturing+environments.">In vitro characterization of human dental pulp cells: various isolation methods and culturing environments.</a> Cell Tissue Res. 324, 225-236 (2006).</li><li>Bakopoulou, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+the+impact+of+two+different+isolation+methods+on+the+osteo/odontogenic+differentiation+potential+of+human+dental+stem+cells+derived+from+deciduous+teeth.">Assessment of the impact of two different isolation methods on the osteo/odontogenic differentiation potential of human dental stem cells derived from deciduous teeth.</a> Calcif. Tissue Int. 88, 130-141 (2011).</li><li>Curtis, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EF1alpha+and+RPL13a+represent+normalization+genes+suitable+for+RT-qPCR+analysis+of+bone+marrow+derived+mesenchymal+stem+cells.">EF1alpha and RPL13a represent normalization genes suitable for RT-qPCR analysis of bone marrow derived mesenchymal stem cells.</a> BMC Mol. Biol. 11, 61 (2010).</li><li>Suchanek, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dental+pulp+stem+cells+and+their+characterization.">Dental pulp stem cells and their characterization.</a> Biomed. Pap. Med. Fac. Univ. Palacky Olomouc Czech Repub. 153, 31-35 (2009).</li><li>d'Aquino, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+postnatal+dental+pulp+cells+co-differentiate+into+osteoblasts+and+endotheliocytes:+a+pivotal+synergy+leading+to+adult+bone+tissue+formation.">Human postnatal dental pulp cells co-differentiate into osteoblasts and endotheliocytes: a pivotal synergy leading to adult bone tissue formation.</a> Cell Death Differ. 14, 1162-1171 (2007).</li><li>Atari, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+pluripotent+stem+cells+from+human+third+molar+dental+pulp.">Isolation of pluripotent stem cells from human third molar dental pulp.</a> Histol. Histopathol. 26, 1057-1070 (2011).</li></ol>

פרוטוקול זה מתאר את התהליך של בידוד ואפיון של hDPSCs מעיסת שיניים באמצעות שתי שיטות, דיסוציאציה האנזימטית ותולדה ישירה של תאי גזע מרקמת explants עיסה. בנוסף, בבידול במבחנה של תאים אלו לתוך odontoblasts, הוערך על ידי assay &amp; S QPCR כמותית אליזרין האדום. <p class="jove_content" style=";text-align:righ...

תאי גזע הם תאי clonogenic אשר מחזיקים שתי תכונות יוצאות דופן, הידועים כ- עצמה רבה והתחדשות עצמית 15. בין כל תאי גזע עם פוטנציות replicative שונות, תאי גזע שיניים כתאי גזע לאחר הלידה יכולים לעורר תשומת לב בשנים האחרונות בגלל הנגישות שלהם, הפלסטיות, ויכולת שגשוג גבוהה בהשוואה לתאי גזע בוגרים אחרים 16. אופייני, בדומה לתאי גזע mesenchymal, תאי גזע הם תאי עיסת שיני clonogenic חסיד שבו יש יכולת המרובה בידול לmesenchyme ו / או שושלות אינן mesenchyme, היא במבחנת in vivo. 1-8,17,18 DPSCs מזוהים על ידי הביטוי שלהם השלילי של אנטיגנים hematopoietic (למשל, CD45, CD34, CD14), וביטוי חיובי של CD90, CD29, CD73, CD105, CD44 וstro-1. 19,20 פוטנציאל להשיג קל עם כאבים ותחלואה מינימאליים לעשות DPSCs אדם כvaluמקור של תאי גזע מסוגל בהשוואה למקורות הרגילים, כגון תאי מח עצם mesenchymal גזע 21. באופן כללי, DPSCs היה מבודד על ידי אף אחת משיטות תולדה, כלומר, הגירה של תאי גזע מרקמת explants עיסה (DPSC-OG) 22-24, ו / או על ידי עיכול אנזימטי (DPSC-ED) 4,6,25. המחקרים קודמים הראו כי תנאי תרבות שיטת בידוד ויכולים לגרום לאוכלוסיות או שושלות שונות תחת במעברי המבחנה 26,27. במקרה של שיניים קבועות (pDPSCs), הואנג ואח&#39; גילה כי pDPSCs מתעכל אנזימטית יש פוטנציאל התפשטות גבוהה יותר בהשוואה לDPSCs נחלץ מהם. 26 יתר על כן, במקרה של שיניים נשירות (dDPSCs), היא ההוכחה שstro-1 &amp; CD34 סמנים הביעו יותר בdDPSC-ED בהשוואת dDPSC-OG. בנוסף, dDPSC-ED מוצג שיעור מינרליזציה גבוהה במדיום מוגדר osteo / odonto 27. לכן, בשל הפוטנציאל יוצא הדופן של DPSCs בrרפואת egenerative, מחקרים נוספים תידרש להבנה טובה יותר של אוכלוסיות שונות אפשריות אשר נגזרות משיטות בידוד שונות. הנה, זה היה ניסיון להציג את הדרך קלה להפקת עיסה, באמצעות דיסק יהלום שיני צעד אחד כדי להקל על התהליך של מיצוי עיסה. יתר על כן, לאחר הבידוד של תאי גזע המופקים מעיסת אדם על ידי שימוש בשיטות ED או OG, תכונות כלליות ויכולת הבחנה בין שתי קבוצות היו גם נחקרו.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם המגיב </td><td> חברה </td><td> קטלוג או לוט. מספר </td><td> תגובות (אופציונלי) </td></tr><tr><td> α-MEM </td><td> GIBCO </td><td> 11900-073 </td><td></td></tr><tr><td> Collagenase סוגי </td><td> סיגמה אולדריץ </td><td> C0130-100 מ&quot;ג </td><td></td></tr><tr><td> Dispase </td><td> GIBCO </td><td> 17105-041 </td><td></td></tr><tr><td> פניצילין / סטרפטומיצין </td><td> GIBCO </td><td> 15140-122 </td><td></td></tr><tr><td> Amphotericin B </td><td> GIBCO </td><td> 15290-018 </td><td></td></tr><tr><td> עוברי שור בסרום מוגדר (FBS) </td><td> HyClone </td><td> SH30070.03 </td><td></td></tr><tr><td> חומצה אסקורבית L-2-פוספט </td><td> סיגמא </td><td> A8960-5G </td><td></td></tr><tr><td> L-גלוטמין </td><td> GIBCO </td><td> 25030-024 </td><td></td></tr><tr><td> דקסאמתאזון </td><td> סיגמא </td><td> D4902 </td><td></td></tr><tr><td> מימה β-גליצרול פוספט disodium מלח, BioUltra </td><td> סיגמא </td><td> G9422-100G </td><td></td></tr><tr><td> אשלגן זרח monobasic </td><td> סיגמה אולדריץ </td><td> P5655 </td><td></td></tr><tr><td> Osteogenesis Assay קיט </td><td> Millipore </td><td> PS01802031 </td><td></td></tr><tr><td> עכבר IgG2b-PE אלוטיפ שליטה </td><td> BD pharmingen </td><td> 50808088029 </td><td></td></tr><tr><td> FITC עכבר IgG2b אלוטיפ שליטה </td><td> BD pharmingen </td><td> 559532 </td><td></td></tr><tr><td> FITC העכבר IgG1 κ אלוטיפ </td><td> BD pharmingen </td><td> 11471471 </td><td></td></tr><tr><td> FITC / PE העכבר אנטי אנושי CD34/CD45 </td><td> BD pharmingen </td><td>341071 </td><td></td></tr><tr><td> CD146 PE אנטי אנושי </td><td> BD pharmingen </td><td> 550315 </td><td></td></tr><tr><td> אנטי אנושי חד שבטי העכבר CD90/FITC </td><td> דקה </td><td> 00034418 </td><td></td></tr><tr><td> CD73 PE עכבר אנטי אנושי </td><td> BD pharmingen </td><td> 550257 </td><td></td></tr><tr><td> Anti-h CD105/Endoglin PE </td><td> BD pharmingen </td><td> FAB10971P </td><td></td></tr><tr><td> CD11b/Mac1 PE עכבר אנטי אנושי </td><td> BD pharmingen </td><td> 5553888 </td><td></td></tr><tr><td> CD44 PE עכבר אנטי אנושי </td><td> BD pharmingen </td><td> 555479 </td><td></td></tr><tr><td> פתרון חיץ פוספט (PBS) </td><td> GIBCO </td><td> 003000 </td><td></td></tr><tr><td> מסננת תא 70-מיקרומטר </td><td> בז </td><td> 352360 </td><td></td></tr><tr><td&gt; 0.2 מיקרומטר מזרק מסנן </td><td> Millex-GV </td><td> SLGV033RB </td><td></td></tr><tr><td> 25 בקבוק התרבות 2 סנטימטר </td><td> סיגמה אולדריץ </td><td> Z707481 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> ציוד </td></tr><tr><td> BD FACSCalibur </td><td> BD </td><td> 342975 </td><td></td></tr><tr><td> multiskan microplate ספקטרופוטומטר </td><td> Thermo מדעי </td><td> 51119200 </td><td></td></tr><tr><td> מיקרוסקופ Fleurcense </td><td> אולימפוס </td><td></td><td></td></tr><tr><td> גרסת תוכנת 2.3.1 זורם </td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

isolation, characterization and comparative differentiation of human dental pulp stem cells derived from permanent teeth by using two different methods

<p class="jove_content"&gt; שיני בינה מתפתחת הן מקור קל נגיש של תאי גזע במהלך הבגרות שלא ניתן להשיג על ידי טיפולים אורתודונטים שיגרתי. תאי גזע המופקים מעיסת אנוש (hDPSCs) ניחן בפוטנציאל התפשטות גבוהה עם יכולת בידול רבת שושלת להשוות למקור הרגיל של תאי גזע בוגרים<sup&gt; 1-8</sup&gt;, ולכן hDPSCs יכול להיות המועמדים הטובים להשתלה עצמית בהנדסת רקמות ורפואת רגנרטיבית. בנוסף ליתרונות אלה, המחזיק את תאי גזע (mesenchymal MSC) תכונות, כגון השפעת immunolodulatory, להפוך hDPSCs יקר יותר, גם במקרה של השתלת שתל<sup&gt; 6,9,10</sup&gt;. לכן, הצעד הראשון לשימוש במקור זה לתאי גזע הוא לבחור את הפרוטוקול הטוב ביותר לבידוד hDPSCs מרקמות עיסה. על מנת להשיג מטרה זו, היא חיוני כדי לחקור את ההשפעה של תנאי בידוד שונים על התנהגויות סלולריות שונות, כגון סמניהם המשותפים השטח וגם יכולת ההתמיינות שלהם.</p&gt;<p class="jove_content"&gt; לכן, כאן אנו מפרידים רקמות עיסה אנושיות משיניים טוחנות 3 השפיעו עליהם, ולאחר מכן השתמשנו בשני פרוטוקולים קיימים המבוססים על ספרות, לhDPSCs המבודד,<sup&gt; 11-13</sup&gt;<em&gt; כלומר</em&gt; דיסוציאציה האנזימטית של רקמת עיסה (DPSC-ED) או תולדה מexplants רקמות (DPSC-OG). מבחינה זו, ניסו להקל על שיטות הבידוד באמצעות דיסק יהלום שיניים. לאחר מכן, תאים אלה מתאפיינים במונחים של סמנים הקשורים סטרומה (CD73, CD90, CD105 &amp; CD44), סמני hematopoietic / אנדותל (CD34, CD45 &amp; CD11b), סמן perivascular, כמו CD146 וגם stro-1. לאחר מכן, בשני פרוטוקולים אלה הושוו מבוססים על עצמת הבידול לodontoblasts ידי שניהם תגובת שרשרת פולימראז כמותית (QPCR) וכתמים אדומים אליזרין. QPCR שמש להערכה של הביטוי של גנים הקשורים למינרליזציה (phosphatase אלקליין; ALP, phosphoglycoprotein התאי מטריקס; MEPE &amp; דנטין sialophosphoprotein; DSPP).<sup&gt; 14</sup</p

<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> DPSCs שהתקבלו על ידי ניתוק האנזימטית (DPSC-ED) מוצגות כאן ביום 10, 15,18 (איור 1). המושבות יזמו להיוצר על כמעט 3 עד 5 ימים לאחר הבידוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> DPSCs outgrown (DPSC-OG) מוצג באיור 2 ביום 5, 10, 13 &amp; 18. פיברובלסטים דמויי תאים החלו להגר מרקמות עיסה ...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods at JoV

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

השיטה מתוארת בידוד ואפיון של תאי גזע אנושיים שיניים זולות (hDPSCs) באמצעות אחת<strong&gt; דיסוציאציה האנזימטית של עיסה (DPSC-ED)</strong&gt; או<strong&gt; תולדה ישירה של תאי גזע מרקמת explants עיסה (DPSC-OG). לאחר מכן על ידי</strong&gt;<em&gt; במבחנה</em&gt; בידול השוואתי של שני סוגי hDPSCs לodontoblasts.

בידוד, אפיון והשוואתי התמיינות של תאי גזע אנושיים שיניים זולות נגזרה שיניים קבועות על ידי שימוש בשתי שיטות שונות

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Patient Derived Cell Culture and Isolation of CD133+ Putative Cancer Stem Cells from Melanoma

Patient Derived Cell Culture and Isolation of CD133+ Putative Cancer Stem Cells from Melanoma

תרבות מטופל נגזר סלולרי ובידוד של CD133<sup&gt; +</sup&gt; תאי גזע סרטני משוערים מלנומה

Despite improved treatments options for melanoma available today, patients with advanced malignant melanoma still have a poor prognosis for ...

Isolation and Functional Characterization of Human Ventricular Cardiomyocytes from Fresh Surgical Samples

בידוד ואפיון פונקציונלי של אדם חדרית שריר לב מדוגמאות כירורגי טריות

Cardiomyocytes from diseased hearts are subjected to complex remodeling processes involving changes in cell structure, excitation contraction coupling and ...

Isolation of Cancer Stem Cells From Human Prostate Cancer Samples

בידוד של תאי גזע סרטני מדגימות אדם סרטן הערמונית

The cancer stem cell (CSC) model has been considerably revisited over the last two decades. During this time CSCs have been identified and directly ...

Two Methods for Establishing Primary Human Endometrial Stromal Cells from Hysterectomy Specimens

שתי שיטות לקביעת אדם תאי רירית הרחם סטרומה ראשיים מדוגמאות כריתת הרחם

Many efforts have been devoted to establish in vitro cell culture systems. These systems are designed to model a vast number of in vivo processes. Cell ...

Isolation and Cellular Phenotyping of Mesenchymal Stem Cells Derived from Synovial Fluid and Bone Marrow of Minipigs

בידוד נייד phenotyping של בתאי גזע mesenchymal נגזר הסינוביאלי נוזל מח עצם של Minipigs

Mesenchymal stem cells (MSCs) have been established after isolation from various tissue sources, including bone marrow and synovial fluid. Recently, ...

Characterization of Immune Cells in Human Adipose Tissue by Using Flow Cytometry

אפיון של תאים חיסוניים בתוך רקמת שומן אנושי באמצעות Cytometry זרימה

Infiltration of immune cells in the subcutaneous and visceral adipose tissue (AT) deposits leads to a low-grade inflammation contributing to the ...

Oral Biofilm Formation on Different Materials for Dental Implants

ביופילמים אוראלי על חומרים שונים עבור שתלים דנטליים

Dental implants and their prosthetic components are prone to bacterial colonization and biofilm formation. The use of materials that provides low ...

An Enzyme-free Method for Isolation and Expansion of Human Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells

שיטה נטולת אנזימים לבידוד והתרחבות של אדיפוז האנושית-תאי גזע נגזרים

Mesenchymal stem cells (MSCs) are a population of multipotent cells that can be isolated from various adult and fetal tissues, including adipose tissue. ...

Ex Vivo Expansion of Hematopoietic Stem Cells from Human Umbilical Cord Blood-derived CD34+ Cells Using Valproic Acid

Ex Vivo Expansion of Hematopoietic Stem Cells from Human Umbilical Cord Blood-derived CD34+ Cells Using Valproic Acid

Ex-Vivo הרחבה של תאי גזע Hematopoietic מן הטבור האדם הנגזרות דם CD34+ תאים באמצעות חומצה ולפרואית

Umbilical cord blood (UCB) units provide an alternative source of human hematopoietic stem cells (HSCs) for patients who require allogeneic bone marrow ...

Simultaneous Flow Cytometric Characterization of Multiple Cell Types Retrieved from Mouse Brain/Spinal Cord Through Different Homogenization Methods

אפיון מרובה של סוגי תאים שאוחזרו ממוח העכבר/חוט השדרה דרך שיטות הומוקות שונות

Recent advances in viral vector and nanomaterial sciences have opened the way for new cutting-edge approaches to investigate or manipulate the central ...