Name: isolation, characterization and comparative differentiation of human dental pulp stem cells derived from permanent teeth by using two different methods
Uploaded: 2012-11-24T14:00:00
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我々は感謝し、彼の技術的支援のための彼らの重要な議論とモハマド·レザ·カデムシャリフ博士のレイラShakeri＆博士アレフDournaeiを認める。

1。酵素溶液及び増殖培地（PM）を準備<ol><li> コラゲナーゼI型溶液を作る：コラゲナーゼI型（12 mg / ml）を秤量し、0.2μmのシリンジフィルターを用いて1mlのPBSとフィルターで溶解する。それを15 mlチューブを配置し、必要になるまで-20℃で保管してください。 </li><li> ディスパーゼ溶液を作る：ディスパーゼを秤量（16 mg / ml）と1mlのPBSとフィルターが0.2μmのシリンジ?...

<ol>
	<li>Volponi, A. A., Pang, Y., Sharpe, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell-based+biological+tooth+repair+and+regeneration.">Stem cell-based biological tooth repair and regeneration.</a> Trends Cell Biol. 20, 715-722 (2010).</li><li>Nosrat, I. V., Widenfalk, J., Olson, L., Nosrat, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dental+pulp+cells+produce+neurotrophic+factors,+interact+with+trigeminal+neurons+in+vitro,+and+rescue+motoneurons+after+spinal+cord+injury.">Dental pulp cells produce neurotrophic factors, interact with trigeminal neurons in vitro, and rescue motoneurons after spinal cord injury.</a> Dev. Biol. 238, 120-132 (2001).</li><li>Gandia, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+dental+pulp+stem+cells+improve+left+ventricular+function,+induce+angiogenesis,+and+reduce+infarct+size+in+rats+with+acute+myocardial+infarction.">Human dental pulp stem cells improve left ventricular function, induce angiogenesis, and reduce infarct size in rats with acute myocardial infarction.</a> Stem Cells. 26, 638-645 (2008).</li><li>Gronthos, S., Mankani, M., Brahim, J., Robey, P. G., Shi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postnatal+human+dental+pulp+stem+cells+(DPSCs)+in+vitro+and+in+vivo.">Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in vitro and in vivo.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A.. 97, 13625-13630 (2000).</li><li>Graziano, A., d'Aquino, R., Laino, G., Papaccio, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dental+pulp+stem+cells:+a+promising+tool+for+bone+regeneration.">Dental pulp stem cells: a promising tool for bone regeneration.</a> Stem Cell Rev. 4, 21-26 (2008).</li><li>Kerkis, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+transplantation+of+human+immature+dental+pulp+stem+cells+from+baby+teeth+to+golden+retriever+muscular+dystrophy+(GRMD)+dogs:+Local+or+systemic.">Early transplantation of human immature dental pulp stem cells from baby teeth to golden retriever muscular dystrophy (GRMD) dogs: Local or systemic.</a> J. Transl. Med. 6, 35 (2008).</li><li>Onyekwelu, O., Seppala, M., Zoupa, M., Cobourne, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tooth+development:+2.+Regenerating+teeth+in+the+laboratory.">Tooth development: 2. Regenerating teeth in the laboratory.</a> Dent. Update. 34, 20-29 (2007).</li><li>Cordeiro, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dental+pulp+tissue+engineering+with+stem+cells+from+exfoliated+deciduous+teeth.">Dental pulp tissue engineering with stem cells from exfoliated deciduous teeth.</a> J. Endod. 34 (08), 962-969 (2008).</li><li>Pierdomenico, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multipotent+mesenchymal+stem+cells+with+immunosuppressive+activity+can+be+easily+isolated+from+dental+pulp.">Multipotent mesenchymal stem cells with immunosuppressive activity can be easily isolated from dental pulp.</a> Transplantation. 80, 836-842 (2005).</li><li>de Mendonca Costa, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstruction+of+large+cranial+defects+in+nonimmunosuppressed+experimental+design+with+human+dental+pulp+stem+cells.">Reconstruction of large cranial defects in nonimmunosuppressed experimental design with human dental pulp stem cells.</a> J. Craniofac. Surg. 19, 204-210 (2008).</li><li>Tirino, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+the+identification,+characterization+and+banking+of+human+DPSCs:+current+strategies+and+perspectives.">Methods for the identification, characterization and banking of human DPSCs: current strategies and perspectives.</a> Stem Cell Rev. 7, 608-615 (2011).</li><li>Tirino, V., Paino, F., De Rosa, A., Papaccio, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification,+isolation,+characterization,+and+banking+of+human+dental+pulp+stem+cells.">Identification, isolation, characterization, and banking of human dental pulp stem cells.</a> Methods Mol. Biol. 879, 443-463 (2012).</li><li>Eslaminejad, M. B., Vahabi, S., Shariati, M., Nazarian, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+Growth+and+Characterization+of+Stem+Cells+from+Human+Dental+Pulp+of+Deciduous+Versus+Permanent+Teeth.">In vitro Growth and Characterization of Stem Cells from Human Dental Pulp of Deciduous Versus Permanent Teeth.</a> J. Dent. (Tehran). 7, 185-195 (2010).</li><li>Wei, X., Ling, J., Wu, L., Liu, L., Xiao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+mineralization+markers+in+dental+pulp+cells.">Expression of mineralization markers in dental pulp cells.</a> J. Endod. 33, 703-708 (2007).</li><li>Nombela-Arrieta, C., Ritz, J., Silberstein, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+elusive+nature+and+function+of+mesenchymal+stem+cells.">The elusive nature and function of mesenchymal stem cells.</a> Nat. Rev. Mol Cell Biol. 12, 126-131 (2011).</li><li>Huang, G. T., Gronthos, S., Shi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cells+derived+from+dental+tissues+vs.+those+from+other+sources:+their+biology+and+role+in+regenerative+medicine.">Mesenchymal stem cells derived from dental tissues vs. those from other sources: their biology and role in regenerative medicine.</a> J. Dent. Res. 88, 792-806 (2009).</li><li>Graziano, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scaffold's+surface+geometry+significantly+affects+human+stem+cell+bone+tissue+engineering.">Scaffold's surface geometry significantly affects human stem cell bone tissue engineering.</a> J. Cell Physiol. 214, 166-172 (2008).</li><li>d'Aquino, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+dental+pulp+stem+cells:+from+biology+to+clinical+applications.">Human dental pulp stem cells: from biology to clinical applications.</a> J. Exp. Zool. B. Mol. Dev. Evol. 312, 408-415 (2009).</li><li>Mitsiadis, T. A., Feki, A., Papaccio, G., Caton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dental+pulp+stem+cells,+niches,+and+notch+signaling+in+tooth+injury.">Dental pulp stem cells, niches, and notch signaling in tooth injury.</a> Adv. Dent. Res. 23, 275-279 (2011).</li><li>Shi, S., Gronthos, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+niche+of+postnatal+mesenchymal+stem+cells+in+human+bone+marrow+and+dental+pulp.">Perivascular niche of postnatal mesenchymal stem cells in human bone marrow and dental pulp.</a> J. Bone Miner. Res. 18, 696-704 (2003).</li><li>Tomic, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunomodulatory+properties+of+mesenchymal+stem+cells+derived+from+dental+pulp+and+dental+follicle+are+susceptible+to+activation+by+toll-like+receptor+agonists.">Immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells derived from dental pulp and dental follicle are susceptible to activation by toll-like receptor agonists.</a> Stem Cells Dev. 20, 695-708 (2011).</li><li>Tsukamoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mineralized+nodule+formation+by+cultures+of+human+dental+pulp-derived+fibroblasts.">Mineralized nodule formation by cultures of human dental pulp-derived fibroblasts.</a> Arch. Oral Biol. 37, 1045-1055 (1992).</li><li>About, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+dentin+production+in+vitro.">Human dentin production in vitro.</a> Exp. Cell Res. 258, 33-41 (2000).</li><li>Couble, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odontoblast+differentiation+of+human+dental+pulp+cells+in+explant+cultures.">Odontoblast differentiation of human dental pulp cells in explant cultures.</a> Calcif. Tissue Int. 66, 129-138 (2000).</li><li>Onishi, T., Kinoshita, S., Shintani, S., Sobue, S., Ooshima, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stimulation+of+proliferation+and+differentiation+of+dog+dental+pulp+cells+in+serum-free+culture+medium+by+insulin-like+growth+factor.">Stimulation of proliferation and differentiation of dog dental pulp cells in serum-free culture medium by insulin-like growth factor.</a> Arch. Oral Biol. 44 (99), 361-371 (1999).</li><li>Huang, G. T., Sonoyama, W., Chen, J., Park, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+characterization+of+human+dental+pulp+cells:+various+isolation+methods+and+culturing+environments.">In vitro characterization of human dental pulp cells: various isolation methods and culturing environments.</a> Cell Tissue Res. 324, 225-236 (2006).</li><li>Bakopoulou, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+the+impact+of+two+different+isolation+methods+on+the+osteo/odontogenic+differentiation+potential+of+human+dental+stem+cells+derived+from+deciduous+teeth.">Assessment of the impact of two different isolation methods on the osteo/odontogenic differentiation potential of human dental stem cells derived from deciduous teeth.</a> Calcif. Tissue Int. 88, 130-141 (2011).</li><li>Curtis, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EF1alpha+and+RPL13a+represent+normalization+genes+suitable+for+RT-qPCR+analysis+of+bone+marrow+derived+mesenchymal+stem+cells.">EF1alpha and RPL13a represent normalization genes suitable for RT-qPCR analysis of bone marrow derived mesenchymal stem cells.</a> BMC Mol. Biol. 11, 61 (2010).</li><li>Suchanek, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dental+pulp+stem+cells+and+their+characterization.">Dental pulp stem cells and their characterization.</a> Biomed. Pap. Med. Fac. Univ. Palacky Olomouc Czech Repub. 153, 31-35 (2009).</li><li>d'Aquino, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+postnatal+dental+pulp+cells+co-differentiate+into+osteoblasts+and+endotheliocytes:+a+pivotal+synergy+leading+to+adult+bone+tissue+formation.">Human postnatal dental pulp cells co-differentiate into osteoblasts and endotheliocytes: a pivotal synergy leading to adult bone tissue formation.</a> Cell Death Differ. 14, 1162-1171 (2007).</li><li>Atari, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+pluripotent+stem+cells+from+human+third+molar+dental+pulp.">Isolation of pluripotent stem cells from human third molar dental pulp.</a> Histol. Histopathol. 26, 1057-1070 (2011).</li></ol>

このプロトコルは、2つの方法、酵素的解離と歯髄組織外植片からの幹細胞の直接の伸長を用いて歯髄からhDPSCsの単離および特性のプロセスについて説明します。また、象牙芽細胞へのこれらの細胞のインビトロ分化に 、定量的なアリザリンレッドS＆QPCRアッセイにより評価した。 人間の歯から歯髄組織を分離するための既存のプロトコルは、プライヤー（?...

幹細胞は、マルチ効力と自己再生15として知られている2つの顕著な特徴を持っているクローン原性細胞である。異なる複製効力を持つすべての幹細胞のう ​​ち、生後幹細胞などの歯科幹細胞は、それらのアクセシビリティ、可塑性、および他の16の成体幹細胞と比較して高い増殖能力を近年注目を集めている。特徴的には、間葉系幹細胞と同様に、歯髄幹細胞は、複数の分化間充織に能力および/ ​​または in vitro および in vivo の両方において非間葉系統を持って付着クローン原性細胞である。1-8,17,18 DPSCsが特定される彼らの造血抗原の陰性発現（ 例えば 、CD45、CD34、CD14）、およびCD90、CD29、CD73、CD105、CD44およびSTRO-1の陽性発現。19,20 最小痛み＆罹患率との容易な得られた電位は貴重として人間DPSCsを作るMSCのできる源は、骨髄間葉系幹細胞21として普通のソースに比べて。一般的に、DPSCsは伸長法、 すなわち 、歯髄組織外植片からの幹細胞の遊走（DPSC-OG）22から24、および/ ​​または酵素消化によって（DPSC-ED）の4,6,25のいずれかの方法で単離されている。これまでの研究では、単離法と培養条件は 、in vitro の通路26,27 内で異なる集団または系統を誘導できることが示されている。永久歯（pDPSCs）の場合では、Huang らは、酵素消化pDPSCsが手狭DPSCsに比べて高い増殖能力を持っていることを明らかにした。また26は 、乳歯（dDPSCs）の場合、それが実証されたそのSTRO-1とCD34マーカーはdDPSC-OGと比較してdDPSC-EDの続きを表明した。また、dDPSC-EDは、定義された骨/ odonto培地で高い無機化速度が表示されていましたので27によりrのDPSCsの傑出した電位にegenerative薬は、より多くの研究は、異なる分離方法に由来している可能性のある様々な集団をよりよく理解するために必要となります。 ここでは、パルプ抽出のプロセスを容易にするためのワンステップデンタルダイヤモンドディスクを使用することにより、パルプ抽出の簡単な方法を紹介する試みであった。また、EDまたはOGの方法を適用することにより、ヒト歯髄由来幹細胞を単離した後、両群間の一般的なプロパティと分化能についても検討した。

<table border="1"><tbody><tr><td>試薬の名称</td><td>会社</td><td>カタログまたはロット。数</td><td>コメント（オプション） </td></tr><tr><td> α-MEM </td><td> GIBCO </td><td> 11900-073 </td><td></td></tr><tr><td>コラゲナーゼI型</td><td>シグマアルドリッチ</td><td> C0130-100MG </td><td></td></tr><tr><td>ディスパーゼ</td><td> GIBCO </td><td> 17105-041 </td><td></td></tr><tr><td>ペニシリン/ストレプトマイシン</td><td> GIBCO </td><td> 15140-122 </td><td></td></tr><tr><td>アムホテリシンB </td><td> GIBCO </td><td> 15290-018 </td><td></td></tr><tr><td>定義されたウシ胎児血清（FBS） </td><td> Hyclone社</td><td> SH30070.03 </td><td></td></tr><tr><td> L-アスコルビン酸-2 - リン酸</td><td>シグマ</td><td> A8960-5G </td><td></td></tr><tr><td> L-グルタミン酸</td><td> GIBCO </td><td> 25030-024 </td><td></td></tr><tr><td>デキサメタゾン</td><td>シグマ</td><td> D4902 </td><td></td></tr><tr><td> β-グリセロールリン酸二ナトリウム塩水和物、BioUltra </td><td>シグマ</td><td> G9422-100G </td><td></td></tr><tr><td>リン酸二水素カリウム</td><td>シグマアルドリッチ</td><td> P5655 </td><td></td></tr><tr><td>骨形成アッセイキット</td><td>ミリポア</td><td> PS01802031 </td><td></td></tr><tr><td>マウスIgG2b-PEアイソタイプコントロール</td><td> BDファーミンジェン</td><td> 50808088029 </td><td></td></tr><tr><td> FITC標識マウスIgG2bアイソタイプコントロール</td><td> BDファーミンジェン</td><td> 559532 </td><td></td></tr><tr><td> FITC標識マウスIgG1κアイソタイプ</td><td> BDファーミンジェン</td><td> 11471471 </td><td></td></tr><tr><td> FITC / PEのマウス抗ヒトCD34/CD45 </td><td> BDファーミンジェン</td><td>341071 </td><td></td></tr><tr><td> PEの抗ヒトCD146 </td><td> BDファーミンジェン</td><td> 550315 </td><td></td></tr><tr><td>モノクローナルマウス抗ヒトCD90/FITC </td><td> Daka </td><td> 00034418 </td><td></td></tr><tr><td> PEのマウス抗ヒトCD73 </td><td> BDファーミンジェン</td><td> 550257 </td><td></td></tr><tr><td>抗H CD105/Endoglin PE </td><td> BDファーミンジェン</td><td> FAB10971P </td><td></td></tr><tr><td> PEのマウス抗ヒトCD11b/Mac1 </td><td> BDファーミンジェン</td><td> 5553888 </td><td></td></tr><tr><td> CD44は、PEマウス抗ヒト</td><td> BDファーミンジェン</td><td> 555479 </td><td></td></tr><tr><td>リン酸緩衝液（PBS） </td><td> GIBCO </td><td> 003000 </td><td></td></tr><tr><td> 70μmのセルストレーナー</td><td>ファルコン</td><td> 352360 </td><td></td></tr><tr><td&gt;0.2μmのシリンジフィルター</td><td>マイレクス-GV </td><td> SLGV033RB </td><td></td></tr><tr><td> 25cm 2の培養フラスコ</td><td>シグマアルドリッチ</td><td> Z707481 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> 機器 </td></tr><tr><td> BD FACSキャリバー</td><td> BD </td><td> 342975 </td><td></td></tr><tr><td>マイクロプレート分光光度計multiskan </td><td>サーモサイエンティフィック</td><td> 51119200 </td><td></td></tr><tr><td> Fleurcense顕微鏡</td><td>オリンポス</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ソフトウェアバージョン2.3.1を流れる</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

isolation, characterization and comparative differentiation of human dental pulp stem cells derived from permanent teeth by using two different methods

<p class="jove_content"開発&gt;親知らずはルーチン矯正治療によって得られることが成人期に幹細胞の容易にアクセス可能なソースです。ヒト歯髄由来幹細胞（hDPSCs）成体幹細胞の通常のソースと比較して多系統分化能力と高い増殖能力を持っている<sup&gt; 1月8日</sup&gt;ので、hDPSCsは、組​​織工学や再生医療における自家移植のための良い候補である可能性があります。これらの利点に加えて、そのようなimmunolodulatory効果などの間葉系幹細胞（MSC）の機能を有するも、同種移植の場合には、hDPSCsがより貴重作る<sup&gt; 6,9,10</sup&gt;。そのため、幹細胞のこのソースを使用する主なステップは、歯髄組織からhDPSCsを単離するための最適なプロトコルを選択することです。この目標を達成するためには、そのような彼らの一般的な表面マーカー＆またそれらの分化能など異なる細胞行動、上の様々な分離条件の影響を調査することが重要です。</p&gt;<p class="jove_content"&gt;このように、ここで我々は影響を受け第三大臼歯歯からヒト歯髄組織を分離し、次にhDPSCsを単離するための文献に基づいて、両方の既存のプロトコルを使用し、<sup&gt; 11月13日</sup&gt;<em&gt;すなわち</em組織外植片から&gt;酵素歯髄組織の解離（DPSC-ED）または伸長（DPSC-OG）。これに関しては、我々は、歯科ダイヤモンドディスクを使用して単離法を容易にしようとしました。次に、これらの細胞はCD146ともSTRO-1のような間質関連マーカー（CD73、CD90、CD105、CD44＆）、造血/内皮細胞マーカー（CD34、CD45及びCD11bを）、血管周囲のマーカーで特徴付け。その後、これらの2つのプロトコルは、定量的ポリメラーゼ連鎖反応（QPCR）＆アリザリンレッド染色の両方による象牙芽細胞への分化能に基づいて比較した。 QPCRは、鉱化関連遺伝子の発現（; ALP、マトリックス細胞外リン糖タンパク質; MEPE＆象牙シアロホスホ·タンパク質; DSPPアルカリホスファターゼ）の評価のために使用された。<sup&gt; 14</sup</p

<ol><li> 酵素的解離（DPSC-ED）により得られたDPSCsは10日、15,18（図1）ここに示されています。分離後約3〜5日に形成するために開始されたコロニーが。 </li><li> 手狭DPSCs（DPSC-OG）は5日、10、13＆18ページの図2に示されています。線維芽細胞様細胞は、平行播種後約5日で注文してフラスコに歯髄組織から移行し始めた。 </li><li> 両方の方法を使用して通路3でDPSCsを図3に示します。DPSCs</...

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Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

のいずれかを使用して人間の歯髄幹細胞（hDPSCs）の単離および特性を説明する方法<strongパルプ&gt;酵素的解離（DPSC-ED）</strong&gt;または<strong歯髄組織外植片からの幹細胞の&gt;直接伸長（DPSC-OG）。その後に続く</strong&gt;<em&gt; in vitroで</em象牙芽細胞へのhDPSCs両方のタイプの&gt;比較分化。

単離、特徴付けと二つの異なる方法を使用して永久歯に由来するヒト歯髄幹細胞の分化の比較

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Patient Derived Cell Culture and Isolation of CD133+ Putative Cancer Stem Cells from Melanoma

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CD133の患者由来の細胞培養および分離<sup&gt; +</supメラノーマから&gt;推定されるがん幹細胞

Despite improved treatments options for melanoma available today, patients with advanced malignant melanoma still have a poor prognosis for ...

医学

Isolation and Functional Characterization of Human Ventricular Cardiomyocytes from Fresh Surgical Samples

離と新鮮な外科的試料からのヒト心室の心筋細胞の機能解析

Cardiomyocytes from diseased hearts are subjected to complex remodeling processes involving changes in cell structure, excitation contraction coupling and ...

Isolation of Cancer Stem Cells From Human Prostate Cancer Samples

ヒト前立腺癌サンプルからがん幹細胞の単離

The cancer stem cell (CSC) model has been considerably revisited over the last two decades. During this time CSCs have been identified and directly ...

Two Methods for Establishing Primary Human Endometrial Stromal Cells from Hysterectomy Specimens

子宮摘出標本から初代ヒト子宮内膜間質細胞の確立するための2つの方法

Many efforts have been devoted to establish in vitro cell culture systems. These systems are designed to model a vast number of in vivo processes. Cell ...

Isolation and Cellular Phenotyping of Mesenchymal Stem Cells Derived from Synovial Fluid and Bone Marrow of Minipigs

ミニブタの滑液および骨髄由来の間葉系幹細胞の単離および細胞表現型

Mesenchymal stem cells (MSCs) have been established after isolation from various tissue sources, including bone marrow and synovial fluid. Recently, ...

Characterization of Immune Cells in Human Adipose Tissue by Using Flow Cytometry

フローサイトメトリーを用いたひと脂肪組織での免疫細胞のキャラクタリゼーション

Infiltration of immune cells in the subcutaneous and visceral adipose tissue (AT) deposits leads to a low-grade inflammation contributing to the ...

Oral Biofilm Formation on Different Materials for Dental Implants

歯科用インプラント ・異種材料の口腔バイオ フィルム形成

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An Enzyme-free Method for Isolation and Expansion of Human Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells

ヒト脂肪由来間葉系幹細胞の単離・増殖のための酵素フリー法

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Ex Vivo Expansion of Hematopoietic Stem Cells from Human Umbilical Cord Blood-derived CD34+ Cells Using Valproic Acid

Ex Vivo Expansion of Hematopoietic Stem Cells from Human Umbilical Cord Blood-derived CD34+ Cells Using Valproic Acid

ひと臍帯血由来 cd34 陽性造血幹細胞の体外増幅+細胞を用いたバルプロ酸

Umbilical cord blood (UCB) units provide an alternative source of human hematopoietic stem cells (HSCs) for patients who require allogeneic bone marrow ...

Simultaneous Flow Cytometric Characterization of Multiple Cell Types Retrieved from Mouse Brain/Spinal Cord Through Different Homogenization Methods

異なる均質化法を通じてマウス脳/脊髄から取り出された複数の細胞型の同時フロー細胞特性評価

Recent advances in viral vector and nanomaterial sciences have opened the way for new cutting-edge approaches to investigate or manipulate the central ...