Name: isolation and differentiation of stromal vascular cells to beige/brite cells
Uploaded: 2013-03-28T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Differentiation of Stromal Vascular Cells to Beige/Brite Cells at JoVE.com

Vi tackar Haruya Ohno, Kosaku Shinoda, Louis Sharp, Emi Tomoda, och Lauren Ruiz för diskussion, teknisk hjälp och redaktionellt stöd på manuskriptet. Detta arbete har finansierats med bidrag från NIH (DK087853), från Programmet för Genombrott biomedicinsk forskning och från Asubio Pharm Inc. till SKULA stöddes av en aktie PhD stipendier från Köpenhamns universitet och EU-FP7-projektet Diabat (HEALTH-F2 -2.011-278.373) till Lise Madsen och Karsten Kristiansen. Vi erkänner också DERC centrum bidraget (NIH P30 DK063720).

1. Förbered Digestion Medium Gör 5 ml per 5 möss per vävnad (ca 1 ml / 1 g fettvävnad). <ol><li> Väg i matsmältningen enzymer: - Collaginase D: 1,5 U / ml (1108874103, 1 g, Roche, 70.334.223) - Dispase II: 2,4 U / ml (04942078001, 0.980 mg / lyo, Roche, 11.466.200) </li><li> Tillsätt 25 ml PBS och blanda väl för att lösa </li><li> Lägg CaClj 2 strax före digestion av vävnaden vid en slutlig koncentration av 10 mM </li></ol> 2. Di...

<ol>
	<li>Barness, L. A., Opitz, J. M., Gilbert-Barness, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obesity:+genetic,+molecular,+and+environmental+aspects.">Obesity: genetic, molecular, and environmental aspects.</a> American Journal of Medical Genetics. Part A. 143A, 3016-3034 (2007).</li><li>Rothwell, N. J., Stock, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+effects+of+cafeteria+and+tube-feeding+on+energy+balance+in+the+rat.">Combined effects of cafeteria and tube-feeding on energy balance in the rat.</a> The Proceedings of the Nutrition Society. 38, 5A (1979).</li><li>Cannon, B., Nedergaard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brown+adipose+tissue:+function+and+physiological+significance.">Brown adipose tissue: function and physiological significance.</a> Physiological Reviews. 84, 277-359 (2004).</li><li>Cypess, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+importance+of+brown+adipose+tissue+in+adult+humans.">Identification and importance of brown adipose tissue in adult humans.</a> The New England Journal of Medicine. 360, 1509-1517 (2009).</li><li>van Marken Lichtenbelt, W. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cold-activated+brown+adipose+tissue+in+healthy+men.">Cold-activated brown adipose tissue in healthy men.</a> The New England Journal of Medicine. 360, 1500-1508 (2009).</li><li>Virtanen, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+brown+adipose+tissue+in+healthy+adults.">Functional brown adipose tissue in healthy adults.</a> The New England Journal of Medicine. 360, 1518-1525 (2009).</li><li>Zingaretti, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+presence+of+UCP1+demonstrates+that+metabolically+active+adipose+tissue+in+the+neck+of+adult+humans+truly+represents+brown+adipose+tissue.">The presence of UCP1 demonstrates that metabolically active adipose tissue in the neck of adult humans truly represents brown adipose tissue.</a> FASEB Journal: Official Publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. 23, 3113-3120 (2009).</li><li>Saito, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+incidence+of+metabolically+active+brown+adipose+tissue+in+healthy+adult+humans:+effects+of+cold+exposure+and+adiposity.">High incidence of metabolically active brown adipose tissue in healthy adult humans: effects of cold exposure and adiposity.</a> Diabetes. 58, 1526-1531 (2009).</li><li>Seale, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PRDM16+controls+a+brown+fat/skeletal+muscle+switch.">PRDM16 controls a brown fat/skeletal muscle switch.</a> Nature. 454, 961-967 (2008).</li><li>Petrovic, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+peroxisome+proliferator-activated+receptor+gamma+(PPARgamma)+activation+of+epididymally+derived+white+adipocyte+cultures+reveals+a+population+of+thermogenically+competent,+UCP1-containing+adipocytes+molecularly+distinct+from+classic+brown+adipocytes.">Chronic peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARgamma) activation of epididymally derived white adipocyte cultures reveals a population of thermogenically competent, UCP1-containing adipocytes molecularly distinct from classic brown adipocytes.</a> The Journal of Biological Chemistry. 285, 7153-7164 (2010).</li><li>Coulter, A. A., Bearden, C. M., Liu, X., Koza, R. A., Kozak, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+fat+interacts+with+QTLs+controlling+induction+of+Pgc-1+alpha+and+Ucp1+during+conversion+of+white+to+brown+fat.">Dietary fat interacts with QTLs controlling induction of Pgc-1 alpha and Ucp1 during conversion of white to brown fat.</a> Physiological Genomics. 14, 139-147 (2003).</li><li>Klingenspor, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cold-induced+recruitment+of+brown+adipose+tissue+thermogenesis.">Cold-induced recruitment of brown adipose tissue thermogenesis.</a> Experimental Physiology. 88, 141-148 (2003).</li><li>Cinti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+adipose+organ.">The adipose organ.</a> Prostaglandins, leukotrienes, and essential fatty acids. 73, 9-15 (1016).</li><li>Ghorbani, M., Himms-Hagen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Appearance+of+brown+adipocytes+in+white+adipose+tissue+during+CL+316,243-induced+reversal+of+obesity+and+diabetes+in+Zucker+fa/fa+rats.">Appearance of brown adipocytes in white adipose tissue during CL 316,243-induced reversal of obesity and diabetes in Zucker fa/fa rats.</a> International Journal of Obesity and Related Metabolic Disorders: Journal of the International Association for the Study of Obesity. 21, 465-475 (1997).</li><li>Hansen, J. B., Kristiansen, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulatory+circuits+controlling+white+versus+brown+adipocyte+differentiation.">Regulatory circuits controlling white versus brown adipocyte differentiation.</a> The Biochemical Journal. 398, 153-168 (2006).</li><li>Ohno, H., Shinoda, K., Spiegelman, B. M., Kajimura, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PPARy+agonists+induce+a+white-to-brown+fat+conversion+through+stabilization+of+PRDM16+protein.">PPARy agonists induce a white-to-brown fat conversion through stabilization of PRDM16 protein.</a> Cell metabolism. 15, 395-404 (2012).</li><li>Lee, Y. H., Petkova, A. P., Mottillo, E. P., Granneman, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+identification+of+bipotential+adipocyte+progenitors+recruited+by+beta3-adrenoceptor+activation+and+high-fat+feeding.">In vivo identification of bipotential adipocyte progenitors recruited by beta3-adrenoceptor activation and high-fat feeding.</a> Cell Metabolism. 15, 480-491 (2012).</li><li>Cinti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transdifferentiation+properties+of+adipocytes+in+the+adipose+organ.">Transdifferentiation properties of adipocytes in the adipose organ.</a> American Journal of Physiology. Endocrinology and Metabolism. 297, E977-E986 (2009).</li><li>Barbatelli, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+emergence+of+cold-induced+brown+adipocytes+in+mouse+white+fat+depots+is+determined+predominantly+by+white+to+brown+adipocyte+transdifferentiation.">The emergence of cold-induced brown adipocytes in mouse white fat depots is determined predominantly by white to brown adipocyte transdifferentiation.</a> American Journal of Physiology. Endocrinology and Metabolism. 298, E1244-E1253 (2010).</li><li>Petrovic, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+peroxisome+proliferator-activated+receptor+gamma+(PPARgamma)+activation+of+epididymally+derived+white+adipocyte+cultures+reveals+a+population+of+thermogenically+competent,+UCP1-containing+adipocytes+molecularly+distinct+from+classic+brown+adipocytes.">Chronic peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARgamma) activation of epididymally derived white adipocyte cultures reveals a population of thermogenically competent, UCP1-containing adipocytes molecularly distinct from classic brown adipocytes.</a> The Journal of Biological Chemistry. 285, 7153-7164 (2009).</li><li>Rong, J. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+mitochondrial+biogenesis+is+suppressed+in+db/db+and+high-fat+diet-fed+mice+and+improved+by+rosiglitazone.">Adipose mitochondrial biogenesis is suppressed in db/db and high-fat diet-fed mice and improved by rosiglitazone.</a> Diabetes. 56, 1751-1760 (2007).</li><li>Wilson-Fritch, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+remodeling+in+adipose+tissue+associated+with+obesity+and+treatment+with+rosiglitazone.">Mitochondrial remodeling in adipose tissue associated with obesity and treatment with rosiglitazone.</a> The Journal of Clinical Investigation. 114, 1281-1289 (2004).</li><li>Sell, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peroxisome+proliferator-activated+receptor+gamma+agonism+increases+the+capacity+for+sympathetically+mediated+thermogenesis+in+lean+and+ob/ob+mice.">Peroxisome proliferator-activated receptor gamma agonism increases the capacity for sympathetically mediated thermogenesis in lean and ob/ob mice.</a> Endocrinology. 145, 3925-3934 (2004).</li><li>Fukui, Y., Masui, S., Osada, S., Umesono, K., Motojima, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+thiazolidinedione,+NC-2100,+which+is+a+weak+PPAR-gamma+activator,+exhibits+potent+antidiabetic+effects+and+induces+uncoupling+protein+1+in+white+adipose+tissue+of+KKAy+obese+mice.">A new thiazolidinedione, NC-2100, which is a weak PPAR-gamma activator, exhibits potent antidiabetic effects and induces uncoupling protein 1 in white adipose tissue of KKAy obese mice.</a> Diabetes. 49, 759-767 (2000).</li><li>Vernochet, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C/EBPalpha+and+the+corepressors+CtBP1+and+CtBP2+regulate+repression+of+select+visceral+white+adipose+genes+during+induction+of+the+brown+phenotype+in+white+adipocytes+by+peroxisome+proliferator-activated+receptor+gamma+agonists.">C/EBPalpha and the corepressors CtBP1 and CtBP2 regulate repression of select visceral white adipose genes during induction of the brown phenotype in white adipocytes by peroxisome proliferator-activated receptor gamma agonists.</a> Molecular and Cellular Biology. 29, 4714-4728 (2009).</li><li>Tai, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+the+nuclear+receptor+peroxisome+proliferator-activated+receptor+gamma+promotes+brown+adipocyte+differentiation.">Activation of the nuclear receptor peroxisome proliferator-activated receptor gamma promotes brown adipocyte differentiation.</a> The Journal of Biological Chemistry. 271, 29909-29914 (1996).</li><li>Sugii, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PPARgamma+activation+in+adipocytes+is+sufficient+for+systemic+insulin+sensitization.">PPARgamma activation in adipocytes is sufficient for systemic insulin sensitization.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106, 22504-22509 (2009).</li></ol>

Här presenterar vi en pålitlig cellulärt system för att studera utvecklingen av beige / Brite celler i primära odlade adipocyter hos möss. Jämfört med flera tillgängliga odödliggjorda cellinjer, är detta system sannolikt att erbjuda förbättrad relevans för brunfärgning av vitt fett in vivo. Även om studien av dessa primära adipocyter erbjuder vissa fördelar, finns det även vissa begränsningar och problem som är viktiga att beakta. Först, är detta system mycket...

<html> Fetma är dramatiskt ökande globalt och anses nu vara en av de allvarligaste problem för folkhälsan 1. Detta villkor är relaterad till en misbalance i energiintag i förhållande till utgifter och resulterar i överskott av energi lagras som lipid i vit fettvävnad (WAT). Förstorad WAT är associerad med ökad kroppsmassa och vikt, medan brun fettvävnad har förmågan att avleda överskottsenergi att producera värme. Därför BAT kan fungera som skydd mot både kyla och fetma 2,3. Detta uppnås genom frånkoppling av elektrontransport i mitokondrier genom frånkoppling protein 1 (UCP1). Detta protein anses kännetecknande för nonshivering termogenes i BAT 3. Flera studier under senare år visar att vuxna människor har funktionell BAT 4-8 och följaktligen kan manipulation av BAT hos människor vara en potentiell terapeutisk intervention i kampen mot fetma och dess relaterade sjukdomar. jove_content &quot;&gt; Aktuell uppgifter tyder på att två typer av bruna adipocyter förekommer hos gnagare,&quot; klassisk &quot;eller&quot; befintlig &quot;brunt fett utvecklas under fosterstadiet och bildar dedikerade brunt fett depåer i interscapular regionen och andra perifera vävnader Å andra sidan. , en &quot;inducerbar&quot; form av brunt fett (så kallade Brite eller beige celler) utvecklas under postnatal scenen och verkar insprängda i vitt fettvävnad. De två typerna av bruna adipocyter också separeras med olika utvecklingsstadier ursprung. Medan tidigare bruna adipocyter uppstår myoblastsic-liknande Myf5 prekursorer, de inducerbara brite / beige celler uppblandade i WAT härrör från ett icke-Myf5 härstamning 9,10. Dessutom är regulatoriska vägar för denna celltyp sannolikt att skilja sig från den Myf5-härledda brun adipocyter 11. Utvecklingen av beige celler (dvs &quot;bryning&quot; vitt fett) kan aktiveras som svar på kronisk kalla exponering ochβ3-adrenoceptor-agonister eller agonister PPARy hos vuxna 12-14. De beige / Brite celler sannolikt är ett lovande terapeutiskt mål för manipulering av totala energibalansen och kan potentiellt bli en del av behandling av fetma, därför är det viktigt att förstå exakta molekylära mekanismer och signalvägar genom vilka miljömässiga signaler styr utvecklingen av beige celler. För att förstå den molekylära kontrollen av brunfärgning av vitt fett, är in vitro-experiment bäst lämpade som differentiering av preadipocyter sker ganska asynkront och det är svårt att detektera cellerna in situ 15. Även studier på fettceller utveckling har hittills utförts främst på cellinjer som 3T3-L1, 3T3-F442A eller HIB1, dessa cellinjer tycks sakna den molekylära undertecknandet av beige celler. Å andra sidan, primära adipocyter isolerade från subkutana WAT ​​är mest sannolikt att sammanfatta de process av missfärgning av vitt fett i en cell autonoma sätt. Här ger vi ett protokoll för effektiv isolering av den stromala-vaskulära fraktionen från fettvävnad och inducera brunfärgning av vitt fett som svar på PPARy-agonister. Rosiglitazon har visat sig vara ett särskilt effektivt förmedlare av brunfärgning i dessa celler. Som tidigare föreslagits 16, kan denna cellulärt system användas för att tjäna ett tillförlitligt cellulärt system för att studera utvecklingen av beige / Brite celler.

<table border="1"><tbody><tr><td></td><td></td><td></td><td> Reagens </td></tr><tr><td> Collaginase D </td><td> Roche </td><td> 11088874103 </td><td></td></tr><tr><td> Dispas II </td><td> Roche </td><td> 04942078001 </td><td></td></tr><tr><td> CaClj 2 </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> DMEM-medium </td><td> Fisher </td><td> 10.017-CV </td><td> Med 2,5 g / l glukos och L-glutamin utan natriumpyruvat </td></tr><tr><td> Insulin </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> T3 (3,3 &#39;,5-trijod-L-tyronin) </td><td> Sigma </td><td> T-2877 </td><td></td></tr><tr><td> Indometacin </td><td> Sigma </td><td> I-7378 </td><td></td></tr><tr><td> Dexametason </td><td> Sigma </td><td> D-1756 </td><td></td></tr><tr><td> IBMX </td><td> Sigma </td><td> I-5879 </td><td></td></tr><tr><td> Rosiglitazone </td><td> Sigma </td><td> R-2408 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Utrustning </td></tr><tr><td> Kollagenbelagda skålar </td><td> BD </td><td> 354.450 </td><td> 10 cm plattor </td></tr><tr><td> 70 pm filter </td><td> BD Falcon </td><td> 352.350 </td><td> Cell sil, 70 um nylon 1/ea </td></tr></tbody></table>

isolation and differentiation of stromal vascular cells to beige/brite cells

Bruna adipocyter har förmågan att koppla loss den respiratoriska kedjan i mitokondrierna och skingra kemisk energi i form av värme. Utveckling av UCP1-positiva bruna adipocyter i vita fettvävnad (sk beige eller Brite celler) starkt induceras av en mångfald miljömässiga signaler såsom kronisk kall exponering eller genom PPARy agonister har därför denna celltyp potential som ett terapeutiskt mål för fetma behandling. Även om de flesta förevigade fettceller linjer inte kan rekapitulera processen &quot;bryning&quot; vitt fett i kultur, primära adipocyter isolerade från stromal vaskulär fraktion i subkutan vit fettvävnad (WAT) ge en tillförlitlig cellulärt system för att studera molekylära kontrollen av beige / Brite cellutveckling . Här beskriver vi ett protokoll för effektiv isolering av primära preadipocyter och för att framkalla differentiering av beige / Brite celler i kultur. Den Browning effekt kan bedömas av uttrycket av brunt fett-selektiv märkningERS som UCP1.

Browning primära adipocyter kan nås genom att mäta mRNA-uttryck av UCP1 och andra bruna fett-specifika eller selektiva gener med QRT-PCR. Presenteras i figur 1 är genuttryck data i inguinal WAT-härledda primära adipocyter. Cellerna inducerades att differentiera i närvaro av två olika doser av rosiglitazon vid 50 nM och 500 nM, respektive. En undergrupp av celler behandlades med forskolin vid 10 pM för 4 timmar före skörd. Detta kommer att inducera cykliskt AMP (cAMP) i cellerna och a...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Differentiation of Stromal Vascular Cells to Beige/Brite Cells at JoVE.com

Isolation and Differentiation of Stromal Vascular Cells to Beige/Brite Cells

Primära vita preadipocyter isolerade från vita fettvävnad hos möss kan differentieras till beige / Brite celler. Presenteras här är en pålitlig cellulärt modellsystem för att studera molekylära regleringen av &quot;bryning&quot; vitt fett.

Isolering och differentiering av stromal vaskulära celler till beige / Brite celler

Brown adipocytes have the ability to uncouple the  respiratory chain in mitochondria and dissipate chemical energy as heat.  Development of UCP1-positive ...

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells (ECFCs)

Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells MSCs and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells ECFCs

Isolering och Animal Serum Fri ökningen av mänsklig Navelsträngen Härledda mesenkymala stromaceller (MSC) och Endothelial kolonibildande progenitorceller (ECFCs)

The umbilical cord is a rich source for progenitor cells with high proliferative potential including mesenchymal stromal cells (also termed mesenchymal ...

Induction and Analysis of Epithelial to Mesenchymal Transition

Induktion och Analys av Epithelial till mesenkymala övergång

Epithelial  to mesenchymal transition (EMT) is essential for proper morphogenesis during  development. Misregulation of this  process has been implicated ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

Isolering och Primär kultur av mus aortaendotelceller

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Isolation of CD146+ Resident Lung Mesenchymal Stromal Cells from Rat Lungs

Isolation of CD146+ Resident Lung Mesenchymal Stromal Cells from Rat Lungs

Isolering av CD146<sup&gt; +</sup&gt; Resident Lung mesenkymala stromaceller celler från råttlungor

Mesenchymal stromal cells (MSCs) are increasingly recognized for their therapeutic potential in a wide range of diseases, including lung diseases. Besides ...

Isolation of Murine Coronary Vascular Smooth Muscle Cells

Isolering av murin Coronary vaskulära glatta muskelceller

While the isolation and culture of vascular smooth muscle cells (VSMCs) from large vessels is well established, we sought to isolate and culture VSMCs ...

Nephrotoxin Microinjection in Zebrafish to Model Acute Kidney Injury

Nefrotoxin mikroinjektion i Zebrafish till Model akut njursvikt

The kidneys are susceptible to harm from exposure to chemicals they filter from the bloodstream. This can lead to organ injury associated with a rapid ...

A Graphical User Interface for Software-assisted Tracking of Protein Concentration in Dynamic Cellular Protrusions

En grafisk användargränssnitt för programvaruassisterad spårning av proteinkoncentration i dynamiska cellulära protrusioner

Filopodia are dynamic, finger-like cellular protrusions associated with migration and cell-cell communication. In order to better understand the complex ...

Isolation, Characterization, and Differentiation of Cardiac Stem Cells from the Adult Mouse Heart

Isolering, karakterisering och differentiering av hjärt stamceller från vuxna mus hjärtat

Myocardial infarction (MI) is a leading cause of morbidity and mortality around the world. A major goal of regenerative medicine is to replenish the dead ...

Isolation, Proliferation and Differentiation of Rhesus Macaque Adipose-Derived Stem Cells

Isolering, spridning och differentiering av Rhesus macaque fett-härledda stamceller

Adipose tissue provides a rich and accessible source of multipotent stem cells, which are able to self-renew. These adipose-derived stem cells (ADSCs) ...

Isolation of High Quality Murine Atrial and Ventricular Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and L-Type Calcium Current

Isolation of High Quality Murine Atrial and Ventricular Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and L-Type Calcium Current

Isolering av högkvalitativa murina förmaks- och ventrikulära myocyter för samtidiga mätningar av Ca2+ transienter och kalciumström av L-typ

Mouse models play a crucial role in arrhythmia research and allow studying key mechanisms of arrhythmogenesis including altered ion channel function and ...