JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

0:00

Overview

0:35

The Reaction

4:46

Reaction Components

7:10

Setting up the Reaction

9:54

Helpful Hints

11:23

Applications

12:56

Summary

PCR: 聚合酶链式反应

聚合酶链式反应,或称PCR,是一种通过热循环反应来扩增DNA的技术,热循环是指在固定的时间间隔内温度变化的循环。采用热稳定的DNA聚合酶,PCR可以用DNA的合成原料,脱氧核苷三磷酸合成大量的DNA拷贝。PCR反应包括三步,变性,退火,和延伸。变性是PCR循环的第一步,它将DNA碱基之间的氢键打开来熔解DNA双链而产生单链DNA。退火则是将温度降到足够低,使寡聚核苷酸引物能够结合到DNA模板上。在延伸过程中,DNA聚合酶将合成新的双链DNA。

本短片将介绍PCR的过程。除了逐步讲述如何准备一个常用的PCR反应,还将描述PCR的基本原理。视频展示了一个PCR反应的所需组分,以及引物设计的规则,并给出了保证PCR反应成功的一些有用技巧。

聚合酶链式反应或称PCR, 是一种被广泛用来扩增DNA片段的方法。PCR要用到热循环,就是在三个被称为变性、退火和延伸的特定温度之间反复地加热和制冷。

一旦将PCR试剂混合物置于热循环仪中,热循环反应就开始了。热循环仪是一种被设定来精确地加热和制冷反应的仪器。

PCR循环从变性开始,在95度持续20到30秒,它远高于DNA的熔解温度。溶解温度是当半数DNA处于双?...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Tags

PCR

-- Views

Related Videos

Application Videos

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved