Mycobacterium leprae, o agente causador da lepra, não crescem in vitro. Nós descrevemos um fácil de seguir o protocolo para preparar uma suspensão bacilar para garantir a manutenção de grandes quantidades de M. leprae para uma variedade de aplicações. Protocolos para propagação por rato inoculação pata, avaliação de viabilidade, congelamento e descongelamento estoque bacilar são descritos em detalhes.