Name: a protocol for genetic induction and visualization of benign and invasive tumors in cephalic complexes of drosophila melanogaster
Uploaded: 2013-09-11T15:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Protocol for Genetic Induction and Visualization of Benign and Invasive Tumors in Cephalic Complexes of Drosophila melanogaster at JoVE.com

मेरी प्रयोगशाला में अनुसंधान जीवविज्ञान स्टार्टअप धन की wku विभाग, wku रिसर्च फाउंडेशन RCAP मैं # 11-8032 अनुदान और के द्वारा समर्थित है राष्ट्रीय संस्थानों की जनरल मेडिकल साइंसेज के राष्ट्रीय संस्थान से एक माता पिता के अनुदान के माध्यम से वित्त पोषित एक KBRIN क्षेत्र अनुदान द्वारा स्वास्थ्य का पुरस्कार संख्या 5P20GM103436-13 के तहत. मैं भी प्रयोगशाला जिसका मैं पहले जू प्रयोगशाला में इस तकनीक की स्थापना की है जो इस तकनीक और डा. रेमंड PAGLIARINI के लिए पेश किया गया था डॉ. तियन जू में स्वीकार करना चाहते हैं.

1. सौम्य गैर आक्रामक ट्यूमर की प्रेरण <ol><li> सौम्य ट्यूमर के शामिल होने के लिए 2 तालिका में सूचीबद्ध शेयरों का प्रयोग करें. </li><li> निम्नलिखित जीनोटाइप के &quot;परीक्षक&quot; शेयर के लिए एक स्टार्टर संस्कृति ...

<ol>
	<li>Bale, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hedgehog+signaling+and+human+disease.">Hedgehog signaling and human disease.</a> Annu Rev Genomics Hum Genet. 3, 47-65 (2002).</li><li>Bier, E., Bodmer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila,+an+emerging+model+for+cardiac+disease.">Drosophila, an emerging model for cardiac disease.</a> Gene. 342, 1-11 (2004).</li><li>Coombs, G. S., Covey, T. M., Virshup, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wnt+signaling+in+development,+disease+and+translational+medicine.">Wnt signaling in development, disease and translational medicine.</a> Curr Drug Targets. 9, 513-531 (2008).</li><li>Gistelinck, M., Lambert, J. C., Callaerts, P., Dermaut, B., Dourlen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+models+of+tauopathies:+what+have+we+learned.">Drosophila models of tauopathies: what have we learned.</a> Int J Alzheimers Dis. 2012, 970980 (2012).</li><li>Marsh, J. L., Thompson, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+in+the+study+of+neurodegenerative+disease.">Drosophila in the study of neurodegenerative disease.</a> Neuron. 52, 169-178 (2006).</li><li>Reiter, L. T., Bier, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+Drosophila+melanogaster+to+uncover+human+disease+gene+function+and+potential+drug+target+proteins.">Using Drosophila melanogaster to uncover human disease gene function and potential drug target proteins.</a> Expert Opin Ther Targets. 6, 387-399 (2002).</li><li>Valenta, T., Hausmann, G., Basler, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+many+faces+and+functions+of+beta-catenin.">The many faces and functions of beta-catenin.</a> EMBO J. 31, 2714-2736 (2012).</li><li>Hanahan, D., Weinberg, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hallmarks+of+cancer:+the+next+generation.">Hallmarks of cancer: the next generation.</a> Cell. 144, 646-674 (2011).</li><li>Pagliarini, R. A., Xu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+genetic+screen+in+Drosophila+for+metastatic+behavior.">A genetic screen in Drosophila for metastatic behavior.</a> Science. 302, 1227-1231 (2003).</li><li>Wu, J. S., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+protocol+for+mosaic+analysis+with+a+repressible+cell+marker+(MARCM)+in+Drosophila.">A protocol for mosaic analysis with a repressible cell marker (MARCM) in Drosophila.</a> Nat Protoc. 1, 2583-2589 (2006).</li><li>Boccaccio, C., Comoglio, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasive+growth:+a+MET-driven+genetic+programme+for+cancer+and+stem+cells.">Invasive growth: a MET-driven genetic programme for cancer and stem cells.</a> Nat Rev Cancer. 6, 637-645 (2006).</li><li>Srivastava, A., Pastor-Pareja, J. C., Igaki, T., Pagliarini, R., Xu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basement+membrane+remodeling+is+essential+for+Drosophila+disc+eversion+and+tumor+invasion.">Basement membrane remodeling is essential for Drosophila disc eversion and tumor invasion.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 104, 2721-2726 (2007).</li><li>Wang, W., Eddy, R., Condeelis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cofilin+pathway+in+breast+cancer+invasion+and+metastasis.">The cofilin pathway in breast cancer invasion and metastasis.</a> Nat Rev Cancer. 7, 429-440 (2007).</li><li>Brand, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GFP+as+a+cell+and+developmental+marker+in+the+Drosophila+nervous+system.">GFP as a cell and developmental marker in the Drosophila nervous system.</a> Methods Cell Biol. 58, 165-181 (1999).</li><li>Brand, A. H., Dormand, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+GAL4+system+as+a+tool+for+unravelling+the+mysteries+of+the+Drosophila+nervous+system.">The GAL4 system as a tool for unravelling the mysteries of the Drosophila nervous system.</a> Curr Opin Neurobiol. 5, 572-578 (1995).</li><li>Vidal, M., Cagan, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+models+for+cancer+research.">Drosophila models for cancer research.</a> Curr Opin Genet Dev. 16, 10-16 (2006).</li><li>Parks, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+generation+of+high-resolution+deletion+coverage+of+the+Drosophila+melanogaster+genome.">Systematic generation of high-resolution deletion coverage of the Drosophila melanogaster genome.</a> Nat Genet. 36, 288-292 (2004).</li><li>Blair, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+mosaic+techniques+for+studying+Drosophila+development.">Genetic mosaic techniques for studying Drosophila development.</a> Development. 130, 5065-5072 (2003).</li><li>Xu, T., Rubin, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+genetic+mosaics+in+developing+and+adult+Drosophila+tissues.">Analysis of genetic mosaics in developing and adult Drosophila tissues.</a> Development. 117, 1223-1237 (1993).</li><li>Xu, T., Wang, W., Zhang, S., Stewart, R. A., Yu, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identifying+tumor+suppressors+in+genetic+mosaics:+the+Drosophila+lats+gene+encodes+a+putative+protein+kinase.">Identifying tumor suppressors in genetic mosaics: the Drosophila lats gene encodes a putative protein kinase.</a> Development. 121, 1053-1063 (1995).</li><li>Rebay, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+genetic+screen+for+novel+components+of+the+Ras/Mitogen-activated+protein+kinase+signaling+pathway+that+interact+with+the+yan+gene+of+Drosophila+identifies+split+ends,+a+new+RNA+recognition+motif-containing+protein.">A genetic screen for novel components of the Ras/Mitogen-activated protein kinase signaling pathway that interact with the yan gene of Drosophila identifies split ends, a new RNA recognition motif-containing protein.</a> Genetics. 154, 695-712 (2000).</li><li>Therrien, M., Morrison, D. K., Wong, A. M., Rubin, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+genetic+screen+for+modifiers+of+a+kinase+suppressor+of+Ras-dependent+rough+eye+phenotype+in+Drosophila.">A genetic screen for modifiers of a kinase suppressor of Ras-dependent rough eye phenotype in Drosophila.</a> Genetics. 156, 1231-1242 (2000).</li><li>Albini, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rapid+in+vitro+assay+for+quantitating+the+invasive+potential+of+tumor+cells.">A rapid in vitro assay for quantitating the invasive potential of tumor cells.</a> Cancer Res. 47, 3239-3245 (1987).</li><li>Zicha, D., Dunn, G. A., Brown, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+direct-viewing+chemotaxis+chamber.">A new direct-viewing chemotaxis chamber.</a> J Cell Sci. 99 (Pt 4), 769-775 (1991).</li><li>Fidler, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+developments+in+in+vivo+models+of+neoplasia.">New developments in in vivo models of neoplasia.</a> Cancer Metastasis Rev. 10, 191-192 (1991).</li><li>Mueller, B. M., Romerdahl, C. A., Trent, J. M., Reisfeld, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+spontaneous+melanoma+metastasis+in+scid+mice+with+an+antibody+to+the+epidermal+growth+factor+receptor.">Suppression of spontaneous melanoma metastasis in scid mice with an antibody to the epidermal growth factor receptor.</a> Cancer Res. 51, 2193-2198 (1991).</li><li>Konantz, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+xenografts+as+a+tool+for+in+vivo+studies+on+human+cancer.">Zebrafish xenografts as a tool for in vivo studies on human cancer.</a> Ann N Y Acad Sci. 1266, 124-137 (2012).</li><li>McIntyre, R. E., vander Weyden, L., Adams, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+gene+discovery+in+the+mouse.">Cancer gene discovery in the mouse.</a> Curr Opin Genet Dev. 22, 14-20 (2012).</li><li>Mattison, J., vander Weyden, L., Hubbard, T., Adams, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+gene+discovery+in+mouse+and+man.">Cancer gene discovery in mouse and man.</a> Biochim Biophys Acta. 1796, 140-161 (2009).</li><li>Miles, W. O., Dyson, N. J., Walker, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+tumor+invasion+and+metastasis+in+Drosophila.">Modeling tumor invasion and metastasis in Drosophila.</a> Dis Model Mech. 4, 753-761 (2011).</li><li>Stefanatos, R. K., Vidal, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+invasion+and+metastasis+in+Drosophila:+a+bold+past,+a+bright+future.">Tumor invasion and metastasis in Drosophila: a bold past, a bright future.</a> J Genet Genomics. 38, 431-438 (2011).</li><li>Beaucher, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+brain+tumor+metastases+express+both+neuronal+and+glial+cell+type+markers.">Drosophila brain tumor metastases express both neuronal and glial cell type markers.</a> Dev Biol. 301, 287-297 (2007).</li><li>Beaucher, M., Hersperger, E., Page-McCaw, A., Shearn, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metastatic+ability+of+Drosophila+tumors+depends+on+MMP+activity.">Metastatic ability of Drosophila tumors depends on MMP activity.</a> Dev Biol. 303, 625-634 (2007).</li><li>Joyce, J. A., Pollard, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironmental+regulation+of+metastasis.">Microenvironmental regulation of metastasis.</a> Nat Rev Cancer. 9, 239-252 (2009).</li><li>Igaki, T., Pagliarini, R. A., Xu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+cell+polarity+drives+tumor+growth+and+invasion+through+JNK+activation+in+Drosophila.">Loss of cell polarity drives tumor growth and invasion through JNK activation in Drosophila.</a> Curr Biol. 16, 1139-1146 (2006).</li><li>Uhlirova, M., Jasper, H., Bohmann, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-cell-autonomous+induction+of+tissue+overgrowth+by+JNK/Ras+cooperation+in+a+Drosophila+tumor+model.">Non-cell-autonomous induction of tissue overgrowth by JNK/Ras cooperation in a Drosophila tumor model.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 102, 13123-13128 (2005).</li><li>Uhlirova, M., Bohmann, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=JNK-+and+Fos-regulated+Mmp1+expression+cooperates+with+Ras+to+induce+invasive+tumors+in+Drosophila.">JNK- and Fos-regulated Mmp1 expression cooperates with Ras to induce invasive tumors in Drosophila.</a> EMBO J. 25, 5294-5304 (2006).</li><li>Menut, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mosaic+genetic+screen+for+Drosophila+neoplastic+tumor+suppressor+genes+based+on+defective+pupation.">A mosaic genetic screen for Drosophila neoplastic tumor suppressor genes based on defective pupation.</a> Genetics. 177, 1667-1677 (2007).</li><li>Wu, M., Pastor-Pareja, J. C., Xu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+between+Ras(V12)+and+scribbled+clones+induces+tumour+growth+and+invasion.">Interaction between Ras(V12) and scribbled clones induces tumour growth and invasion.</a> Nature. 463, 545-548 (2010).</li></ol>

कैंसर अतीत की तुलना में एक बेहतर समझ के साथ आज एक जटिल बीमारी है. हालांकि, अभी भी बहुत कुछ सीखा है और हम अंतर्निहित तंत्र की एक पूरी तस्वीर है पहले समझाया जाना चाहिए. यहाँ प्रस्तुत सरल प्रोटोकॉल यह संभव आ?...

एक metastatic राज्य के लिए एक सौम्य से ट्यूमर को बढ़ने से शरीर 8 में मौजूद सुरक्षा तंत्र की चोरी की विशेषता है कि एक कदम बुद्धिमान प्रक्रिया है. उदाहरण के लिए शरीर में ट्यूमर कोशिकाओं, apoptosis और प्रतिरक्षा प्रणाली से बचने के तहखाने झिल्ली बुलाया विशेष बाह्य मैट्रिक्स (ईसीएम) सफलता और आसपास की कोशिकाओं 8 द्वारा लगाए गए किसी भी सामाजिक नियंत्रण पर काबू पाने के लिए सक्षम होना चाहिए. यह कैंसर कोशिकाओं मेटास्टेसिस नामक प्रक्रिया में दूर के स्थानों की ओर पलायन और उपनिवेश स्थापित करने की क्षमता हासिल है कि एक कदम वार प्रगति के माध्यम से है. ट्यूमर सेल शरीर द्वारा लगाया बाधाओं पर काबू की हमारी समझ हालांकि, अनुसंधान से उभरती तस्वीर कैंसर की कोशिकाओं को 11-13 से सामान्य विकास की प्रक्रिया और संकेत रास्ते में से एक दोहराया का उपयोग करने के लिए इस प्रकार अब तक अंक किया, अपनी प्रारंभिक अवस्था में है. फल ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर हमारी समझ के लिए काफी योगदान दिया है मक्खीपिछले कई दशकों से 14-17 से अधिक विकसित परिष्कृत आनुवंशिक तकनीक के उपयोग के माध्यम से सामान्य विकास और रोग की erstanding. हम विभिन्न ओंकोजीन और ट्यूमर शमन जीनों 18-22 की एक बेहतर समझ में आ चुके हैं mutagenesis और overexpression उपकरणों का उपयोग करना. हालांकि, ट्यूमर मेटास्टेसिस सेल संस्कृति मॉडल 23,24 के साथ ही विभिन्न xenograft मॉडल 25-27 में मुख्य रूप से अध्ययन किया गया है कि कई आनुवंशिक घावों के बीच सहयोग का एक परिणाम है. वे पूरी तरह से एक जीवित जीव में पाया शर्तों की नकल नहीं है के रूप में इन मॉडलों को शक्तिशाली हालांकि अपनी सीमाएं हैं. इसके अलावा, चूहों में उपलब्ध ट्रांसजेनिक मॉडल बोझिल और आक्रामक व्यवहार 28,29 के आनुवांशिक विश्लेषण के लिए अनुकूल नहीं हैं. कई अध्ययनों से ड्रोसोफिला 30,31 में ट्यूमर कोशिकाओं के आक्रमण को समझने का प्रयास किया है. इन तकनीकों में मुख्य रूप से मेजबान टीम के लिए प्राथमिक ट्यूमर के प्रत्यारोपण का उपयोग और फिर टीआरए ट्रैकिंग पर भरोसापड़ोसी ऊतकों 32,33 के आक्रमण के लिए ट्यूमर nsplanted. MARCM 10 नामक एक शक्तिशाली तकनीक ड्रोसोफिला 9 में ट्यूमर आक्रमण मॉडल पर PAGLIARINI और जू द्वारा रूपांतरित किया गया. ट्यूमर आक्रमण की यह खूबसूरत आनुवंशिक मॉडलिंग एक सक्रिय ओंकोजीन और सेल polarity के नुकसान के बीच सहयोग का फायदा उठाया. इस मॉडलिंग की सत्ता में आक्रामक ट्यूमर इस प्रकार के ऊतकों के प्रत्यारोपण के लिए जरूरत circumventing एक अक्षुण्ण जीव में बनाया जाता है कि तथ्य में निहित है. Oncogenic सहयोग के बारे में लाने के लिए, रास V12 तरह एक सक्रिय ओंकोजीन लार्वा आंख स्पर्शतंतु डिस्क में कोशिकाओं के क्लोन में व्यक्त किया है. MARCM तकनीक का एक परिणाम के रूप में इन क्लोन भी आसान दृश्य के लिए हरी फ्लोरोसेंट प्रोटीन (GFP) के साथ चिह्नित कर रहे हैं और घातक विशाल लार्वा, कुछ लिखा है, और बड़े डिस्क की तरह सेल polarity म्यूटेंट के लिए homozygous बना रहे हैं. परिणाम GFP में आक्रामक ट्यूमर में चिह्नित है मस्तक जटिल. इस रिपोर्ट में मैंप्रेरित करने के लिए प्रदर्शन, और एक अक्षुण्ण लार्वा के संदर्भ में और बाहर विच्छेदित मस्तक परिसर में इन दोनों आक्रामक ट्यूमर कल्पना. यहाँ प्रस्तुत ट्यूमर प्रेरण ड्रोसोफिला के दूसरे गुणसूत्र पर अभिकर्मकों का इस्तेमाल करता. तालिका 2 में, मैं एक ही उद्देश्य के लिए उपयोग किया जा सकता है कि एक्स और 3 गुणसूत्रों पर शेयरों की एक सूची प्रदान करते हैं. मैं इस सरल प्रोटोकॉल ट्यूमर प्रगति की आणविक आधार को समझने में दिलचस्पी शोधकर्ताओं के लिए इस तकनीक को आसानी से सुलभ बनाना होगा कि विश्वास करते हैं.

<table border="1">
	<tbody>
 <tr>
 <td>10X PBS (phosphate buffered saline) pH 7.2 stock solution</td>
 <td>Invitrogen, Sigma Aldrich</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Chilled 1X PBS pH7.2 working solution</td>
 <td>Invitrogen, Sigma Aldrich</td>
 <td></td>
 <td>Make fresh and refrigerate, can be used up to a week</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Flynap</td>
 <td>Carolina Biologicals</td>
 <td></td>
 <td>Fly anesthesia needed to anesthetize larvae</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Fixative</td>
 <td>0.1M PIPES, pH 7.2, 4% Paraformaldehyde</td>
 <td></td>
 <td>Needed to fix the dissected cephalic complex</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Ice Bucket</td>
 <td>Several</td>
 <td></td>
 <td>Maintain solutions on ice. Also, dissect cephalic complex in chilled 1X PBS and then place on ice in an Eppendorf tube</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1.7ml Eppendorf tube</td>
 <td>Various</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Glass slides, cover glass</td>
 <td>Fisher Scientific</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Vectashield Mounting Media or any other mounting media</td>
 <td>Vector Laboratories</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Halocarbon 200 or 700 Oil</td>
 <td>Polysciences Inc. or Halocarbon.com</td>
 <td></td>
 <td>Halocarbon 200 is used to mount the larvae for visualization on a fluorescence stereoscope</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Sally Hansen "Hard as Nails" nail polish</td>
 <td>Can be found at any general merchandise store</td>
 <td></td>
 <td>Needed to seal the edges of Coverslip</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>A Leica MZ16.5 fluorescence stereomicroscope or any other fluorescence stereomicroscope</td>
 <td>Leica and others</td>
 <td></td>
 <td>Needed to observe the GFP fluorescence in larvae</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Dumont #5 forceps</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Pyrex 9 well spot plate or any other dissection dish</td>
 <td>Sigma Aldrich</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Paint Brush</td>
 <td>Can be found at any general merchandise store</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Table 1. Materials needed to perform the experimental protocol presented in this article.</td>
 </tr>
 </tbody>
 </table>

a protocol for genetic induction and visualization of benign and invasive tumors in cephalic complexes of drosophila melanogaster

ड्रोसोफिला यह जटिल रोगों 1-7 की हमारी समझ के लिए बेहद योगदान करने के लिए जारी है पिछले कई दशकों और आज के लिए सामान्य विकास और रोग के आनुवंशिक आधार के बारे में हमारी समझ के प्रबुद्ध गया है. एक metastatic राज्य के लिए एक सौम्य से ट्यूमर को बढ़ने से एक जटिल घटना 8 और हमें बेहतर इस रोग 9 के आनुवंशिक आधार को समझने में मदद करने के लिए ड्रोसोफिला में मॉडलिंग कर दिया गया है. यहाँ मैं आनुवंशिक रूप से प्रेरित निरीक्षण और फिर ड्रोसोफिला लार्वा में ट्यूमर की प्रगति का विश्लेषण करने के लिए एक सरल प्रोटोकॉल उपस्थित थे. ट्यूमर प्रेरण तकनीक MARCM प्रणाली 10 पर आधारित है और एक सक्रिय ओंकोजीन, रास V12 और सेल polarity जीन की हानि (कुछ लिखा, डिस्क बड़े और घातक विशाल लार्वा) आक्रामक ट्यूमर 9 उत्पन्न करने के बीच सहयोग का लाभ उठाते है. मैं इन ट्यूमर बरकरार लार्वा में कल्पना की जा सकती प्रदर्शन कैसे औरतो कैसे इन आगे के विश्लेषण के लिए बाहर विच्छेदित किया जा सकता है. यहाँ प्रस्तुत सरलीकृत प्रोटोकॉल यह संभव है कि इस तकनीक ट्यूमर आक्रमण में एक जीन की भूमिका को समझने में दिलचस्पी जांचकर्ताओं द्वारा उपयोग किया जा करने के लिए करना चाहिए.

प्रोटोकॉल का एक परिणाम यहाँ प्रस्तुत के रूप में उपयोगकर्ता लार्वा आंख स्पर्शतंतु imaginal डिस्क में एक सक्रिय ओंकोजीन overexpressing द्वारा सौम्य ट्यूमर को उत्पन्न करने में सक्षम हो जाएगा. उपयोगकर्ता भी भी एक सेल po...

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A Protocol for Genetic Induction and Visualization of Benign and Invasive Tumors in Cephalic Complexes of Drosophila melanogaster

रास V12 और कुछ लिखा, ट्यूमर कोशिकाओं को भी आक्रामक व्यवहार प्रदर्शित जहां ड्रोसोफिला में ट्यूमर के विकास में परिणाम की तरह सेल polarity जीन में उत्परिवर्तन की तरह एक सक्रिय ओंकोजीन के बीच सहयोग. यहाँ सौम्य और आक्रामक ट्यूमर के शामिल होने और अवलोकन के लिए एक सरल प्रोटोकॉल प्रस्तुत किया है.

के मस्तक परिसरों में जेनेटिक प्रेरण और सौम्य और आक्रामक ट्यूमर के दृश्य के लिए एक प्रोटोकॉल<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

Drosophila has illuminated our  understanding of the genetic basis of normal development and disease for the  past several decades and today it continues ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A Protocol for Genetic Induction and Visualization of Benign and Invasive Tumors in Cephalic Complexes of Drosophila melanogaster

Establishment and Propagation of Human Retinoblastoma Tumors in Immune Deficient Mice

स्थापना और इम्यून कमी चूहों में मानव retinoblastoma ट्यूमर का प्रचार

Culturing retinoblastoma tumor cells in defined stem cell media gives rise to primary tumorspheres that can be grown and maintained for only a limited ...

Non-invasive Optical Measurement of Cerebral Metabolism and Hemodynamics in Infants

गैर इनवेसिव सेरेब्रल और शिशुओं में चयापचय hemodynamics की ऑप्टिकल मापन

Perinatal brain injury remains a significant cause of infant mortality  and morbidity, but there is not yet an effective bedside tool that can  accurately ...

Renal Capsule Xenografting and Subcutaneous Pellet Implantation for the Evaluation of Prostate Carcinogenesis and Benign Prostatic Hyperplasia

प्रोस्टेट Carcinogenesis और सौम्य Prostatic Hyperplasia के मूल्यांकन के लिए गुर्दे कैप्सूल Xenografting और चमड़े के नीचे गोली आरोपण

New therapies for two common prostate diseases,  prostate cancer (PrCa) and benign prostatic hyperplasia (BPH), depend  critically on experiments ...

Induction of Invasive Transitional Cell Bladder Carcinoma in Immune Intact Human MUC1 Transgenic Mice:  A Model for Immunotherapy Development

इम्यून बरकरार मानव MUC1 ट्रांसजेनिक चूहों में आक्रामक संक्रमणकालीन सेल मूत्राशय कार्सिनोमा की प्रेरण: Immunotherapy विकास के लिए एक मॉडल

A preclinical model of invasive bladder cancer was developed in human mucin 1 (MUC1) transgenic (MUC1.Tg) mice for the purpose of evaluating immunotherapy ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

चूहों में त्वरित एथेरोस्क्लेरोसिस का समावेश: "वायर-इंजरी" मॉडल

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

Induction of Ischemic Stroke and Ischemia-reperfusion in Mice Using the Middle Artery Occlusion Technique and Visualization of Infarct Area

इस्कीमिक स्ट्रोक और चूहे में ischemia-reperfusion की प्रेरण मध्य धमनी आड़ तकनीक और रोधगलितांश क्षेत्र के दृश्य का उपयोग

Cerebrovascular disease is highly prevalent in the global population and encompasses several types of conditions, including stroke. To study the impact of ...

Non-invasive Assessments of Subjective and Objective Recovery Characteristics Following an Exhaustive Jump Protocol

विषेश और उद्देश्य रिकवरी के लक्षणों के गैर-आक्रामक आकलन एक विस्तृत जंप प्रोटोकॉल के बाद

Fast recovery after strenuous exercise is important in sports and is often studied via cryotherapy applications. Cryotherapy has a significant ...

Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy

बाईं वेंट्रिकुलर अतिवृद्धि की प्रेरण के लिए चूहों में न्यूनतम इनवेसिव अनुप्रस्थ महाधमनी कसना की तकनीक

Transverse aortic constriction (TAC) in mice is one of the most commonly used surgical techniques for experimental investigation of pressure ...

Non-invasive Assessment of Dorsiflexor Muscle Function in Mice

चूहों में Dorsiflexor मांसपेशी समारोह के गैर इनवेसिव आकलन

Assessment of skeletal muscle contractile function is an important measurement for both clinical and research purposes. Numerous conditions can negatively ...

Visualization of Endogenous Mitophagy Complexes In Situ in Human Pancreatic Beta Cells Utilizing Proximity Ligation Assay

मानव अग्नाशय बीटा कोशिकाओं में Situ में अंतर्जात Mitophagy परिसरों का दृश्य निकटता लिगेशन परख का उपयोग

Mitophagy is an essential mitochondrial quality control pathway, which is crucial for pancreatic islet beta cell bioenergetics to fuel glucose-stimulated ...