Name: extraction and analysis of cortisol from human and monkey hair
Uploaded: 2014-01-24T08:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Extraction and Analysis of Cortisol from Human and Monkey Hair at JoVE.com

نشكر Kymberlee أوبراين، سيليا مور، وإدوارد Tronick (قسم علم النفس، جامعة ماساشوستس، بوسطن) لتوفير عينات شعر الإنسان تحليلها في هذه الدراسة، وستيفن سومي وأماندا Dettmer (مختبر المقارن علم السلوك، معاهد الصحة القومية) ل توفير عينات الشعر قرد هندي صغير. واستمر استخدام هذه الطريقة وقد تم دعم التطوير الأولي من قبل المعاهد الوطنية للصحة RR11122 لMAN

1. جمع العينات والتخزين <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> شعر الإنسان <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأمين كامل طول الشعر لأخذ عينات (تصل إلى عرض قلم رصاص في القطر) مع الشريط المطاطي أو مقطع. قص الشعر أقرب إلى فروة الرأس ممكن (مع الحرص ع...

<ol>
	<li>Selye, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+and+the+general+adaptation+syndrome.">Stress and the general adaptation syndrome.</a> Br. Med. J. 1 (4667), 1383-1392 (1950).</li><li>Meyer, J. S., Novak, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minireview:+Hair+cortisol:+A+novel+biomarker+of+hypothalamic-+pituitary-adrenocortical+activity.">Minireview: Hair cortisol: A novel biomarker of hypothalamic- pituitary-adrenocortical activity.</a> Endocrinology. 153, 4120-4127 (2012).</li><li>Tiefenbacher, S., Novak, M. A., Lutz, C. K., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+physiology+and+neurochemistry+of+self-injurious+behavior:+A+nonhuman+primate+model.">The physiology and neurochemistry of self-injurious behavior: A nonhuman primate model.</a> Front. Biosci. 10, 1-11 (2005).</li><li>Davenport, M. D., Tiefenbacher, S., Lutz, C. K., Novak, M. A., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+endogenous+cortisol+concentrations+in+the+hair+of+rhesus+macaques.">Analysis of endogenous cortisol concentrations in the hair of rhesus macaques.</a> Gen. Comp. Endocrinol. 147, 255-261 (2006).</li><li>Davenport, M. D., Lutz, C. K., Tiefenbacher, S., Novak, M. A., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rhesus+monkey+model+of+self+injury:+Effects+of+relocation+stress+on+behavior+and+neuroendocrine+function.">A rhesus monkey model of self injury: Effects of relocation stress on behavior and neuroendocrine function.</a> Biol. Psychiatry. 63, 990-996 (2008).</li><li>Kirschbaum, C., Tietze, A., Skoluda, N., Dettenborn, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+as+a+retrospective+calendar+of+cortisol+production+-+Increased+cortisol+incorporation+into+hair+in+the+third+trimester+of+pregnancy.">Hair as a retrospective calendar of cortisol production - Increased cortisol incorporation into hair in the third trimester of pregnancy.</a> Psychoneuroendocrinology. 34, 32-37 (2009).</li><li>Hamel, A. F., Meyer, J. S., Henchey, E., Dettmer, A. M., Suomi, S. J., Novak, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+shampoo+and+water+washing+on+hair+cortisol+concentrations.">Effects of shampoo and water washing on hair cortisol concentrations.</a> Clin. Chim. Acta. 412, 382-385 (2011).</li><li>Manenschijn, L., Koper, J. W., Lamberts, S. W., van Rossum, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+method+to+measure+long+term+cortisol+levels.">Evaluation of a method to measure long term cortisol levels.</a> Steroids. 76, 1032-1036 (2011).</li><li>Thomson, S., Koren, G., Fraser, L. A., Rieder, M., Friedman, T. C., Van Uum, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+analysis+provides+a+historical+record+of+cortisol+levels+in+Cushing&#8217;s+syndrome.">Hair analysis provides a historical record of cortisol levels in Cushing&#8217;s syndrome.</a> Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes. 118, 133-138 (2010).</li><li>LeBeau, M. A., Montgomery, M. A., Brewer, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+variations+in+growth+rate+and+sample+collection+on+interpreting+results+of+segmental+analyses+of+hair.">The role of variations in growth rate and sample collection on interpreting results of segmental analyses of hair.</a> Forensic Sci. Int. 210, 110-116 (2011).</li><li>Dolnick, E. H., Montagna, W., Dobson, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variability+of+hair+growth+in+Macaca+mulatta.">Variability of hair growth in Macaca mulatta.</a> Adv. Biol. Skin. IX, 121-128 (1969).</li><li>Sauv&#233;, B., Koren, G., Walsh, G., Uum Tokmakejian, S. V. a. n., H, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+cortisol+in+human+hair+as+a+biomarker+of+systemic+exposure.">Measurement of cortisol in human hair as a biomarker of systemic exposure.</a> Clin. Invest. Med. 30, 183-191 (2007).</li><li>Gow, R., Thomson, S., Rieder, M., Van Uum, S., Koren, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+assessment+of+cortisol+analysis+in+hair+and+its+clinical+applications.">An assessment of cortisol analysis in hair and its clinical applications.</a> Forensic Sci. Int. 196, 32-37 (2010).</li><li>Bechsh&#248;ft, T. &. #. 2. 1. 6. ;., Sonne, C., Dietz, R., Born, E. W., Novak, M. A., Henchey, E., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortisol+levels+in+hair+of+East+Greenland+polar+bears.">Cortisol levels in hair of East Greenland polar bears.</a> Sci. Total Environ. 409, 831-834 (2011).</li><li>Cooper, G. A. A., Kronstrand, R., Kintz, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Society+of+Hair+Testing+guidelines+for+drug+testing+in+hair.">Society of Hair Testing guidelines for drug testing in hair.</a> Forensic Sci. Int. 218, 20-28 (2012).</li><li>Ito, N., Ito, T., Kromminga, A., Bettermann, A., Takigawa, M., Kees, F., Straub, R. H., Paus, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+hair+follicles+display+a+functional+equivalent+of+the+hypothalamic-pituitary-adrenal+(HPA)+axis+and+synthesize+cortisol.">Human hair follicles display a functional equivalent of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis and synthesize cortisol.</a> FASEB J. 19, 1332-1334 (2005).</li><li>Russell, E., Koren, G., Rieder, M., Van Uum, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+cortisol+as+a+biological+marker+of+chronic+stress:+Current+status,+future+directions+and+unanswered+questions.">Hair cortisol as a biological marker of chronic stress: Current status, future directions and unanswered questions.</a> Psychoneuroendocrinology. 37, 589-601 (2012).</li><li>Stalder, T., Kirschbaum, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+cortisol+in+hair+-+State+of+the+art+and+future+directions.">Analysis of cortisol in hair - State of the art and future directions.</a> Brain Behav. Immun. 26, 1019-1029 (2012).</li><li>Staufenbiel, S. M., Penninx, B. W., Spijker, A. T., Elzinga, B. M., van Rossum, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+cortisol,+stress+exposure,+and+mental+health+in+humans:+A+systematic+review.">Hair cortisol, stress exposure, and mental health in humans: A systematic review.</a> Psychoneuroendocrinology. 38, 1220-1235 (2013).</li></ol>

الإجراء CORT الشعر المذكورة أعلاه بسيطة لتنفيذ، غير مكلفة نسبيا، يجعل من استخدام المواد الكيميائية متاحة بيسر والكواشف، واللوازم، والمعدات التي تتطلب، مع استثناء واحد، ومن المرجح أن يكون حاضرا في مختبر تحليلي نموذجي. الاستثناء هو جهاز طحن مثل طاحونة الكرة أو مصغرة bea...

وقد استخدم قياس CORT في البلازما واللعاب، أو أحيانا في البول أو البراز وذلك في مؤشر الإجهاد الفسيولوجية منذ اكتشاف Selye للدور المحور HPA في الإجهاد 1. على الرغم من أن العديد من ورقات وقد نشرت المتعلقة النشاط HPA إلى المواقف العصيبة الحاد، وقد أعاق هذا المجال من خلال عدم وجود مؤشر بسيط وموثوق بها من الإجهاد الفسيولوجية المزمن. تنشأ هذه المشكلة بسبب البلازما واللعاب على حد سواء تقديرات العائد &quot;نقطة&quot; من النشاط HPA التي تخضع لاختلاف الساعة البيولوجية، ويمكن أن يكون مرتبك من قبل الاضطرابات البيئية. عينات البول والبراز تسفر قياسات CORT و / أو إفراز الأيض التي تمتد عدة ساعات تصل إلى يوم كامل في بعض الحالات. جمع عينات متعددة باستخدام قد توفر أي من هذه المصفوفات مؤشر مركب الخام من مستويات CORT مع مرور الوقت، ومع ذلك، فإن أيا من هذه النهج يوفر مؤشر حقا على المدى الطويل من النشاط HPA واستجابة لهذا سيوقف لالضغوطات المزمنة. قياس CORT في الشعر بدأت لملء هذه الحاجة الهامة في الأدب الإجهاد. أظهرت الدراسات الأولية من قبل العديد من المختبرات وجود CORT في الشعر الإنسان، ولكن لم تحقق ما إذا كانت مستويات CORT الشعر تغيرت بوصفها وظيفة من التوتر 2. كما كان لدينا مختبر مهتمة لسنوات عديدة في تنظيم محور قرد هندي صغير HPA من قبل مختلف العوامل الاجتماعية والسلوكية 3، شرعنا في إنشاء والتحقق من صحة طرق لاستخراج وتحليل ريسوس قرد الشعر 4. استنادا إلى فرضية أن يتم تضمينها CORT المنقولة عن طريق الدم ببطء وبشكل مستمر في نمو الشعر، وكان الغرض من هذه الطريقة الجديدة لاستخدام مستويات المستمدة من الشعر CORT وذلك في مؤشر متكاملة من النشاط HPA على مدى فترات من أسابيع إلى أشهر. ووجهت العديد من التحديات المنهجية في تطوير هذا البروتوكول. الأولى، وكانت دراسات سابقة أظهرت أن كميات صغيرة سو تعميم CORT تفرز في العرق والزهم، وبالتالي يمكن أن معطف السطح الخارجي للرمح الشعر 2. من أجل القضاء على هذا الخلط المحتملة، وضعنا إجراء غسيل اللطيفة التي تظهر لإزالة CORT الخارجية في حين وجود تأثير ضئيل على CORT الحاضر داخل رمح الشعر النامي. وبالتالي، قرد الشعر تخضع لهذا الإجراء (أي اثنين 3 مين يغسل مع الأيزوبروبانول) خسر ما يقرب من 7-8٪ من المحتوى الكلي للCORT الشعر، ويغسل الثالثة إزالة أقل من 1٪ أكثر من الستيرويد في العينة 4. يبدو أن هناك أكثر CORT الخارجية في شعر الإنسان، منذ نفس الإجراء إزالة ما معدله 27٪ من إجمالي المحتوى CORT من العينات (ك. روزنبرغ وجيه ماير، غير منشورة). مثل الشعر قرد، ومع ذلك، تضمنت غسل إضافية أقل بكثير CORT (حوالي 7٪) من يغسل الأولين. لذلك، النتائج من كل من القرد والإنسان الشعر دعم حجته بأن معظم (إن لم يكن كلها) CORT الخارجية يمكن إزالتها مع الحفاظ على فارك الرئيسيةنشوئها CORT داخل المصفوفة الشعر الداخلية. الثانية، وأظهرت دراسات تجريبية لدينا أيضا أن طحن الشعر قبل استخلاص زيادة كبيرة الانتعاش CORT من العينة، ويفترض طريق كسر الباب مفتوحا أمام مصفوفة البروتينية المعقدة للعمود الشعر، فضلا عن زيادة المساحة المتاحة لاختراق المذيبات. تم تطوير طريقتين طحن مختلفة، ولكل منها مزاياه وعيوبه. طريقة 1، والذي يستخدم طاحونة الكرة، لديه ميزة من إنتاج أرقى مسحوق. ومع ذلك، مطحنة الكرة هو بند معدات باهظة الثمن نسبيا، وإذا ما استخدمت مع الجرار طحن القياسية والكرات، وأنها قادرة على طحن عينات اثنين فقط في كل مرة. عينات صغيرة هي أيضا من الصعب معالجة باستخدام طاحونة الكرة طحن مع الجرار القياسية. طريقة 2، والذي يستخدم beadbeater، هو أقل فعالية في القدرة الطاحنة التي. ونتيجة لذلك، متوسط ​​الانتعاش CORT هو أقل ما يقرب من 10٪ باستخدام هذا الأسلوب بالمقارنة مع مطحنة الكرة (بيانات غير منشورة). من ناحية أخرى، beadbeaterإلى حد كبير أقل تكلفة من طاحونة الكرة، 16-24 العينات يمكن أن تكون الأرض في وقت واحد اعتمادا على نموذج، وهذه الطريقة مناسبة تماما للعينات الصغيرة. بسبب الانتعاش الفرق المذكورة أعلاه، فإنه من المستحسن استخدام نفس الأسلوب طحن لجميع العينات ضمن دراسة خاصة. مرة واحدة تم تجهيزها عينات الشعر، ويتم استخراج أنها مع الميثانول وCORT في مقتطفات تم تحليلها عن طريق مجموعة EIA تجارية حساسة ومحددة صممت في الأصل لقياس CORT اللعابية. تم التحقق من سلامة إجراءات استخراج وفحص جزئيا من خلال إظهار أن التخفيفات المسلسل من مقتطفات من عينات شعر القرد أسفرت EIA القراءات التي يتوازى بشكل وثيق القراءات التي تم الحصول عليها من المعايير CORT أصيلة. نحن بعد ذلك أظهرت أن CORT الشعر (بالإضافة إلى البلازما واللعابية CORT) كان حساسا إلى الضغوطات الحياة الرئيسية لنقل تكليف إداريا من القرود إلى أرباع المساكن الجديدة 4،5. وحاضرايوفر ر رقة وصفا مفصلا للأساليب تستخدم بشكل روتيني في مختبرنا لمعالجة عينات شعر الإنسان والقرد، واستخراج وتحليل CORT من هذه العينات.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="798">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">HPLC-grade isopropanol</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">A451</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">HPLC-grade methanol</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">A452</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Salivary cortisol assay kits</td>
			<td style="width:116px;">Salimetrics</td>
			<td style="width:119px;">1-3002</td>
			<td>See manufacturer&#39;s kit insert for information on assay sensitivity and specificity</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">15-ml polypropylene screw-cap centrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Max Scientific</td>
			<td>10-9151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">1.5-ml Safe-Lock microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">05-402-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">2.0-ml Safe-Lock microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">05-402-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2.0-ml XXTuff reinforced microvials</td>
			<td style="width:116px;">BioSpec</td>
			<td>330TX</td>
			<td>Use with mini-beadbeater</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3.2-mm chrome-steel beads</td>
			<td style="width:116px;">BioSpec</td>
			<td>11079132c</td>
			<td>Use with mini-beadbeater</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">10-ml stainless steel grinding jars</td>
			<td style="width:116px;">Retsch</td>
			<td style="width:119px;">02.462.0061</td>
			<td>Use with mixer mill</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">12-mm stainless steel grinding balls</td>
			<td style="width:116px;">Retsch</td>
			<td style="width:119px;">05.368.0037</td>
			<td>Use with mixer mill</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant activated carbon cartridge</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>DTK120R</td>
			<td>Use with Savant chemical trap</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;"></td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;"></td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Name of Equipment</td>
			<td style="width:116px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Rotator for 15-ml centrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>S02135</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Rotator for microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>NC9854190&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Benchtop centrifuge for microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>13-100-675</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">MM 200 mixer mill</td>
			<td style="width:116px;">Retsch</td>
			<td style="width:119px;">20.746.0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mini-Beadbeater 16&#160;</td>
			<td style="width:116px;">BioSpec</td>
			<td>607</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant DNA Speedvac</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>DNA120-115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant refrigerated vapor trap</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>RVT400-115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant chemical trap</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>SCT120</td>
			<td>Alternative to refrigerated vapor trap</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microplate reader</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microplate washer</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microplate mixer</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Multichannel pipetter</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Analytical balance</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

extraction and analysis of cortisol from human and monkey hair

أدرج الكورتيزول هرمون التوتر (CORT) ببطء في جذع الشعرة متزايد من البشر، والرئيسات من غير البشر والثدييات الأخرى. قمنا بتطوير والتحقق من صحتها وسيلة لCORT استخراج وتحليل من شعر قرد هندي صغير وتكييفها في وقت لاحق هذا الأسلوب للاستخدام مع شعر فروة الرأس الإنسان. وعلى النقيض من كورت &quot;عينات نقطة&quot; تم الحصول عليها من البلازما أو اللعاب، الشعر CORT يوفر تدبيرا متكاملة من النشاط الغدة النخامية الكظرية (HPA) النظام، وبالتالي الإجهاد الفسيولوجية، خلال الفترة من هرمون التأسيس. لأن الشعر فروة الرأس الإنسان ينمو بمعدل 1 سم / الشهر، ومستويات CORT تم الحصول عليها من قطاعات عدة الشعر سم في الطول يمكن أن يحتمل أن تكون بمثابة العلامات البيولوجية من التوتر شهدت على مدى عدد من الشهور. في أسلوبنا، يتم غسلها كل عينة الشعر أولا مرتين في الأيزوبروبانول لإزالة أي CORT من الخارج من جذع الشعرة التي أودعت من عرق أو الزهم. بعد التجفيف، ووالأرض العينة إلى مسحوق ناعم لتفريق الشعر في بروتين المصفوفة وزيادة المساحة السطحية لاستخراج. يتم استخراج CORT من داخل جذع الشعرة في الميثانول، يبخر الميثانول، وأعيد استخراج العازلة في الفحص. المستخرجة CORT، جنبا إلى جنب مع معايير وضوابط الجودة، ثم يتم تحليلها عن طريق حساسة ومحددة متاحة تجاريا انزيم المناعه (EIA) عدة. يتم تحويل قراءات من تقييم الأثر البيئي لخريج CORT في ملغ مسحوق شعر الوزن. وقد استخدمت هذه الطريقة في المختبر لدينا لتحليل CORT الشعر في البشر، وعدة أنواع من القرود المكاك، القرد الأميركي، والكلاب، والدببة القطبية. وقد أثبتت العديد من الدراسات سواء من مختبرنا ومن مجموعات بحثية أخرى في تطبيق واسعة من CORT الشعر لتقييم التعرض التوتر المزمن في الطبيعية، فضلا عن بيئة معملية.

ويبين الشكل 1 النسخة المطبوعة من مجموعة تمثيلية من عينات شعر الانسان (الذكور البالغين والموضوعات البشرية النسائية) معالجتها باستخدام أسلوب 2 طحن والاستخراج. تم استخدام برامج الكمبيوتر لتوليد إخراج البيانات وتناسب منحنى السيني 4 المعلمة لمعايير CORT (الشك...

Watch this Scientific Journal Video about Extraction and Analysis of Cortisol from Human and Monkey Hair at JoVE.com

Extraction and Analysis of Cortisol from Human and Monkey Hair

استخراج وتحليل الكورتيزول من الإنسان والقرد الشعر

الكورتيزول (CORT) يتراكم في جذع الشعرة متزايد من البشر والرئيسيات غير البشرية. وصفنا طرق لاستخراج وتحليل CORT الشعر مع دقة عالية وحساسية. قياس الشعر CORT بشكل خاص مناسبة تماما لتقييم الإجهاد المزمن على مدى فترات من أسابيع إلى أشهر.

The stress hormone cortisol (CORT) is slowly incorporated into the growing hair shaft of humans, nonhuman primates, and other mammals. We developed and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Extraction of High Molecular Weight Genomic DNA from Soils and Sediments

استخراج عالية الوزن الجزيئي الحمض النووي الجينوم من التربة والرواسب

The soil microbiome is a vast and relatively unexplored reservoir of genomic diversity and metabolic innovation that is intimately associated with ...

DNA Extraction from Paraffin Embedded Material for Genetic and Epigenetic Analyses

استخراج الحمض النووي من مادة البارافين جزءا لا يتجزأ من التحليلات الجينية واللا جيني

Disease development and progression are characterized by frequent genetic and epigenetic aberrations including chromosomal rearrangements, copy number ...

A Noninvasive Hair Sampling Technique to Obtain High Quality DNA from Elusive Small Mammals

عينات الشعر نونينفاسيفي تقنيات الحمض النووي للحصول على ارتفاع الجودة من الثدييات الصغيرة المراوغ

Noninvasive genetic sampling approaches are becoming increasingly important to study wildlife populations. A number of studies have reported using ...

Rapid Genetic Analysis of Epithelial-Mesenchymal Signaling During Hair Regeneration

تحليل سريع لالوراثية طلائي-الوسيطة اشارة خلال تجديد الشعر

Hair follicle morphogenesis, a complex process requiring interaction between epithelia-derived keratinocytes and the underlying mesenchyme, is an ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

استخراج البروستاجلاندين والتحليل في<em&gt; انواع معينة ايليجانس</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Extraction of Venom and Venom Gland Microdissections from Spiders for Proteomic and Transcriptomic Analyses

استخراج السم والسم الغدة Microdissections من العناكب عن البروتين وتحليلات Transcriptomic

Venoms are chemically complex secretions typically comprising numerous proteins and peptides with varied physiological activities. Functional ...

Complete Workflow for Analysis of Histone Post-translational Modifications Using Bottom-up Mass Spectrometry: From Histone Extraction to Data Analysis

سير العمل كاملا لتحليل هيستون التعديلات بعد متعدية عن طريق أسفل إلى أعلى الطيف الكتلي: من هيستون استخراج لتحليل البيانات

Nucleosomes are the smallest structural unit of chromatin, composed of 147 base pairs of DNA wrapped around an octamer of histone proteins. Histone ...

Chromatin Extraction from Frozen Chimeric Liver Tissue for Chromatin Immunoprecipitation Analysis

استخراج الكروماتين من أنسجة الكبد الخيمرية المجمدة لتحليل الترسيب المناعي للكروماتين

Crosslinking Chromatin Immunoprecipitation (X-ChIP) is a widely used technique to assess levels of histone marks and occupancy of transcription factors on ...

Tissue Collection and RNA Extraction from the Human Osteoarthritic Knee Joint

جمع الأنسجة واستخراج الحمض النووي الريبي من مفصل الركبة هشاشة العظام البشرية

Osteoarthritis (OA) is a chronic and degenerative joint disease most often affecting the knee. As there is currently no cure, total knee arthroplasty ...

Extraction, Labeling, and Purification of Lineage-Specific Cells from Human Antral Follicles

استخراج وتوسيم وتنقية الخلايا الخاصة بالنسب من الجريبات الغارية البشرية

The activation, growth, development, and maturation of oocytes is a complex process that is coordinated not just between multiple cell types of the ovary ...