Name: extraction and analysis of cortisol from human and monkey hair
Uploaded: 2014-01-24T08:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Extraction and Analysis of Cortisol from Human and Monkey Hair at JoVE.com

Vi takker Kymberlee O&#39;Brien, Celia Moore og Edward Tronick (Institut for Psykologi, University of Massachusetts, Boston) for at sikre de menneskelige hårprøver analyseret i denne undersøgelse, og Stephen Suomi og Amanda Dettmer (Laboratory of Comparative Etologi, NICHD) for tilvejebringe de rhesus abe hårprøver. Initial udvikling og fortsat anvendelse af denne metode er blevet støttet af NIH RR11122 til MAN

1.. Prøvetagning og opbevaring <ol><li> Menneskehår <ol><li> Fastgør hele længden af ​​håret der skal udtages prøver (op til en blyant-bredde i diameter) med en elastik eller klip. Klip håret så tæt på hovedbunden som muligt (pas på ikke at nick huden) med en ren saks. Bemærk: Den standard prøveudtagning område er den bageste toppunkt af kraniet. </li><li> Nogle forskere har rapporteret et fald i menneskehår CORT niveauer med afstanden fra hovedbunden 6, som kan skyldes udvaskning ved gen...

<ol>
	<li>Selye, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+and+the+general+adaptation+syndrome.">Stress and the general adaptation syndrome.</a> Br. Med. J. 1 (4667), 1383-1392 (1950).</li><li>Meyer, J. S., Novak, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minireview:+Hair+cortisol:+A+novel+biomarker+of+hypothalamic-+pituitary-adrenocortical+activity.">Minireview: Hair cortisol: A novel biomarker of hypothalamic- pituitary-adrenocortical activity.</a> Endocrinology. 153, 4120-4127 (2012).</li><li>Tiefenbacher, S., Novak, M. A., Lutz, C. K., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+physiology+and+neurochemistry+of+self-injurious+behavior:+A+nonhuman+primate+model.">The physiology and neurochemistry of self-injurious behavior: A nonhuman primate model.</a> Front. Biosci. 10, 1-11 (2005).</li><li>Davenport, M. D., Tiefenbacher, S., Lutz, C. K., Novak, M. A., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+endogenous+cortisol+concentrations+in+the+hair+of+rhesus+macaques.">Analysis of endogenous cortisol concentrations in the hair of rhesus macaques.</a> Gen. Comp. Endocrinol. 147, 255-261 (2006).</li><li>Davenport, M. D., Lutz, C. K., Tiefenbacher, S., Novak, M. A., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rhesus+monkey+model+of+self+injury:+Effects+of+relocation+stress+on+behavior+and+neuroendocrine+function.">A rhesus monkey model of self injury: Effects of relocation stress on behavior and neuroendocrine function.</a> Biol. Psychiatry. 63, 990-996 (2008).</li><li>Kirschbaum, C., Tietze, A., Skoluda, N., Dettenborn, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+as+a+retrospective+calendar+of+cortisol+production+-+Increased+cortisol+incorporation+into+hair+in+the+third+trimester+of+pregnancy.">Hair as a retrospective calendar of cortisol production - Increased cortisol incorporation into hair in the third trimester of pregnancy.</a> Psychoneuroendocrinology. 34, 32-37 (2009).</li><li>Hamel, A. F., Meyer, J. S., Henchey, E., Dettmer, A. M., Suomi, S. J., Novak, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+shampoo+and+water+washing+on+hair+cortisol+concentrations.">Effects of shampoo and water washing on hair cortisol concentrations.</a> Clin. Chim. Acta. 412, 382-385 (2011).</li><li>Manenschijn, L., Koper, J. W., Lamberts, S. W., van Rossum, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+method+to+measure+long+term+cortisol+levels.">Evaluation of a method to measure long term cortisol levels.</a> Steroids. 76, 1032-1036 (2011).</li><li>Thomson, S., Koren, G., Fraser, L. A., Rieder, M., Friedman, T. C., Van Uum, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+analysis+provides+a+historical+record+of+cortisol+levels+in+Cushing&#8217;s+syndrome.">Hair analysis provides a historical record of cortisol levels in Cushing&#8217;s syndrome.</a> Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes. 118, 133-138 (2010).</li><li>LeBeau, M. A., Montgomery, M. A., Brewer, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+variations+in+growth+rate+and+sample+collection+on+interpreting+results+of+segmental+analyses+of+hair.">The role of variations in growth rate and sample collection on interpreting results of segmental analyses of hair.</a> Forensic Sci. Int. 210, 110-116 (2011).</li><li>Dolnick, E. H., Montagna, W., Dobson, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variability+of+hair+growth+in+Macaca+mulatta.">Variability of hair growth in Macaca mulatta.</a> Adv. Biol. Skin. IX, 121-128 (1969).</li><li>Sauv&#233;, B., Koren, G., Walsh, G., Uum Tokmakejian, S. V. a. n., H, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+cortisol+in+human+hair+as+a+biomarker+of+systemic+exposure.">Measurement of cortisol in human hair as a biomarker of systemic exposure.</a> Clin. Invest. Med. 30, 183-191 (2007).</li><li>Gow, R., Thomson, S., Rieder, M., Van Uum, S., Koren, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+assessment+of+cortisol+analysis+in+hair+and+its+clinical+applications.">An assessment of cortisol analysis in hair and its clinical applications.</a> Forensic Sci. Int. 196, 32-37 (2010).</li><li>Bechsh&#248;ft, T. &. #. 2. 1. 6. ;., Sonne, C., Dietz, R., Born, E. W., Novak, M. A., Henchey, E., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortisol+levels+in+hair+of+East+Greenland+polar+bears.">Cortisol levels in hair of East Greenland polar bears.</a> Sci. Total Environ. 409, 831-834 (2011).</li><li>Cooper, G. A. A., Kronstrand, R., Kintz, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Society+of+Hair+Testing+guidelines+for+drug+testing+in+hair.">Society of Hair Testing guidelines for drug testing in hair.</a> Forensic Sci. Int. 218, 20-28 (2012).</li><li>Ito, N., Ito, T., Kromminga, A., Bettermann, A., Takigawa, M., Kees, F., Straub, R. H., Paus, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+hair+follicles+display+a+functional+equivalent+of+the+hypothalamic-pituitary-adrenal+(HPA)+axis+and+synthesize+cortisol.">Human hair follicles display a functional equivalent of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis and synthesize cortisol.</a> FASEB J. 19, 1332-1334 (2005).</li><li>Russell, E., Koren, G., Rieder, M., Van Uum, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+cortisol+as+a+biological+marker+of+chronic+stress:+Current+status,+future+directions+and+unanswered+questions.">Hair cortisol as a biological marker of chronic stress: Current status, future directions and unanswered questions.</a> Psychoneuroendocrinology. 37, 589-601 (2012).</li><li>Stalder, T., Kirschbaum, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+cortisol+in+hair+-+State+of+the+art+and+future+directions.">Analysis of cortisol in hair - State of the art and future directions.</a> Brain Behav. Immun. 26, 1019-1029 (2012).</li><li>Staufenbiel, S. M., Penninx, B. W., Spijker, A. T., Elzinga, B. M., van Rossum, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+cortisol,+stress+exposure,+and+mental+health+in+humans:+A+systematic+review.">Hair cortisol, stress exposure, and mental health in humans: A systematic review.</a> Psychoneuroendocrinology. 38, 1220-1235 (2013).</li></ol>

Håret CORT ovenfor beskrevne procedure er enkel at udføre, er relativt billigt, gør brug af let tilgængelige kemikalier, reagenser og forsyninger og kræver udstyr, der, med en undtagelse, er tilbøjelige til at være til stede i en typisk analytisk laboratorium. Undtagelsen er en slibning apparat, såsom en kuglemølle eller mini-beadbeater. Vi bemærker, at nogle forskergrupper hakkekød hårprøver i små fragmenter omkring 1 mm i længde 12, men baseret på vores observationer, vi anbefaler at udføre...

Måling af CORT i plasma, spyt eller lejlighedsvis i urin eller afføring er blevet brugt som et indeks for fysiologisk stress siden Selye opdagelse af den rolle, HPA akse i stress 1. Selvom mange papirer er blevet offentliggjort vedrørende HPA aktivitet akut stressende situationer, har inden været hæmmet af manglen på en enkel og pålidelig indeks af kronisk fysiologisk stress. Dette problem opstår, fordi plasma og spyt både yield &quot;Point&quot; estimater af HPA aktivitet, der er genstand for døgnrytmen variation og kan forstyrret af miljømæssige forstyrrelser. Urinveje og fækale prøver gav målinger af CORT og / eller metabolitudskillelse der spænder et antal timer op til en hel dag i nogle tilfælde. Indsamling af flere prøver ved hjælp af nogen af ​​disse matricer kan give et groft sammensat indeks for CORT niveauer over tid, men ingen af ​​disse tilgange giver en virkelig langsigtet indeks HPA aktivitet og reaktionsevne denne SYstamceller til kroniske stressfaktorer. Måling CORT i håret er begyndt at udfylde dette vigtige behov i stress litteratur. Indledende undersøgelser af flere laboratorier viste tilstedeværelsen af CORT i menneskehår, men ikke undersøge, om hår CORT niveauer ændres som en funktion af stress 2. Som vores laboratorium har været interesseret i mange år i reguleringen af rhesusaben HPA aksen ved forskellige sociale og adfærdsmæssige faktorer 3, vi satte sig for at etablere og validere metoder til ekstraktion og analyse af rhesusabe hår 4. Baseret på den forudsætning, at CORT blodbårne langsomt og kontinuerligt er indarbejdet i voksende hår, med henblik på denne nye metode var at anvende niveauer af hår afledt CORT som en integreret indeks for HPA aktivitet i perioder på uger til måneder. Række metodologiske udfordringer opstod i udviklingen af ​​den nuværende protokol. For det første havde de tidligere undersøgelser vist, at små mængder of cirkulerende CORT udskilles i sved og talg, og derfor kunne belægge ydersiden af hårstrået 2. For at fjerne denne potentielle forvirre, har vi udviklet en mild vask procedure, der synes at fjerne ekstern CORT samtidig have en minimal effekt på CORT til stede inden for det voksende hårstrået. Således abe hår underkastes denne fremgangsmåde (dvs. to 3-minutters vaske med isopropanol) mistede ca 7-8% af den samlede hår CORT indhold, og en tredje vask fjernes mindre end 1% mere steroid fra prøven 4. Der synes at være mere ekstern CORT i menneskehår, da den samme procedure fjernet i gennemsnit 27% samlede CORT indhold fra prøverne (K. Rosenberg og J. Meyer, upublicerede). Ligesom abe hår imidlertid en yderligere vask indeholdt meget mindre CORT (ca. 7%) end de første to vaske. Derfor resultaterne fra både abe og menneskehår understøtte den påstand, at de fleste (hvis ikke alle) ekstern CORT kan fjernes, samtidig med at en stor brøkdelning af CORT i det indre hår matrix. For det andet, vores pilotundersøgelser viste også, at formaling håret inden ekstraktionen væsentligt forøget CORT opsving fra prøven, formentlig ved at bryde åbne den komplekse proteinholdige matrix af håret samt øge det areal til rådighed for opløsningsmiddel penetration. To forskellige slibe metoder blev udviklet, hver med fordele og ulemper. Metode 1, som anvender en kuglemølle har den fordel, at producere de fineste pulver. Men en kuglemølle er et relativt dyrt udstyr element, og hvis de anvendes med standard formaling krukker og kugler, er det i stand til at slibe kun to prøver ad gangen. Små prøver er også vanskelige at bearbejde ved hjælp af en kuglemølle med standard slibning krukker. Metode 2, som anvender en beadbeater, er mindre effektiv i dens slibning evne. Som et resultat, gennemsnitlig CORT recovery er cirka 10% lavere ved hjælp af denne metode i forhold til kuglemølle (upublicerede data). På den anden side, en beadbeaterer betydeligt billigere end en kuglemølle, kan 16-24 prøver slibes på en gang afhængigt af modellen, og metoden er velegnet til små prøver. På grund af ovennævnte forskellen genvinding, er det tilrådeligt at bruge den samme slibning metode for alle prøver i en særlig undersøgelse. Når hårprøver er blevet behandlet, er de ekstraheres med methanol og CORT i ekstrakterne analyseres ved hjælp af en følsom og specifik kommerciel EIA-kit oprindeligt designet til at måle spyt CORT. Udtræk og assayprocedurer blev valideret i en del ved at påvise, serielle fortyndinger af uddrag fra abe hårprøver gav VVM aflæsninger, der nøje sidestykke måleresultaterne fra autentiske CORT standarder. Vi derefter viste, at hår CORT (foruden plasma og spyt CORT) var følsomme over for den store liv stressor af en administrativt mandat flytning af aberne til nye boliger kvartaler 4,5. Den præsentationt papir giver en detaljeret redegørelse for de metoder, der anvendes rutinemæssigt i vores laboratorium til at behandle menneskelige og abe hårprøver og at uddrage og analysere CORT fra sådanne prøver.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="798">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">HPLC-grade isopropanol</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">A451</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">HPLC-grade methanol</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">A452</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Salivary cortisol assay kits</td>
			<td style="width:116px;">Salimetrics</td>
			<td style="width:119px;">1-3002</td>
			<td>See manufacturer&#39;s kit insert for information on assay sensitivity and specificity</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">15-ml polypropylene screw-cap centrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Max Scientific</td>
			<td>10-9151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">1.5-ml Safe-Lock microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">05-402-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">2.0-ml Safe-Lock microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">05-402-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2.0-ml XXTuff reinforced microvials</td>
			<td style="width:116px;">BioSpec</td>
			<td>330TX</td>
			<td>Use with mini-beadbeater</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3.2-mm chrome-steel beads</td>
			<td style="width:116px;">BioSpec</td>
			<td>11079132c</td>
			<td>Use with mini-beadbeater</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">10-ml stainless steel grinding jars</td>
			<td style="width:116px;">Retsch</td>
			<td style="width:119px;">02.462.0061</td>
			<td>Use with mixer mill</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">12-mm stainless steel grinding balls</td>
			<td style="width:116px;">Retsch</td>
			<td style="width:119px;">05.368.0037</td>
			<td>Use with mixer mill</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant activated carbon cartridge</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>DTK120R</td>
			<td>Use with Savant chemical trap</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;"></td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;"></td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Name of Equipment</td>
			<td style="width:116px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Rotator for 15-ml centrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>S02135</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Rotator for microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>NC9854190&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Benchtop centrifuge for microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>13-100-675</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">MM 200 mixer mill</td>
			<td style="width:116px;">Retsch</td>
			<td style="width:119px;">20.746.0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mini-Beadbeater 16&#160;</td>
			<td style="width:116px;">BioSpec</td>
			<td>607</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant DNA Speedvac</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>DNA120-115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant refrigerated vapor trap</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>RVT400-115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant chemical trap</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>SCT120</td>
			<td>Alternative to refrigerated vapor trap</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microplate reader</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microplate washer</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microplate mixer</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Multichannel pipetter</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Analytical balance</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

extraction and analysis of cortisol from human and monkey hair

Stresshormonet cortisol (CORT) langsomt indarbejdet i voksende hår akslen af ​​mennesker, ikke-humane primater, og andre pattedyr. Vi udviklet og valideret en metode til CORT ekstraktion og analyser fra rhesusabe hår og derefter tilpasset denne metode til brug med human hovedbund hår. I modsætning til CORT &quot;punktprøver&quot; opnået fra plasma eller spyt, hår CORT giver en integreret måling af hypothalamus-hypofyse-binyrebark-system (HPA)-aktivitet, og dermed fysiologisk stress, i løbet af hormonet inkorporering. Da humant hovedbund hår vokser med en gennemsnitlig hastighed på 1 cm / måned, CORT niveauer opnået fra hår segmenter flere cm i længden potentielt kan tjene som en biomarkør for stress opleves over flere måneder. I vores fremgangsmåde hver hårprøve først vasket to gange i isopropanol for at fjerne enhver CORT fra kanten af ​​håret, der er blevet deponeret fra sved eller sebum. Efter tørringPrøven formales til et fint pulver til at bryde op hårets proteinmatrix og øge overfladearealet til ekstraktion. CORT fra det indre af håret ekstraheres med methanol, methanolen afdampes, og ekstrakten rekonstitueres i assaypuffer. Ekstraheret CORT sammen med standarder og kvalitetskontrol, analyseres derefter ved hjælp af en følsom og specifik kommercielt tilgængeligt enzymimmunoassay (EIA) kit. Udlæsning fra VVM omdannes til pg CORT per mg pulveriseret hår vægt. Denne metode er blevet anvendt i vores laboratorium til analyse hår CORT i mennesker, flere arter af makakaber, silkeaber, hunde og isbjørne. Mange undersøgelser både fra vores laboratorium og fra andre forskergrupper har vist den brede anvendelighed af hår CORT til vurdering af kronisk stress eksponering i naturlige såvel som laboratorie-indstillinger.

Figur 1 viser udskrift fra et repræsentativt sæt af menneskelige hårprøver (voksen mandlige og kvindelige forsøgspersoner) behandles ved hjælp af metode 2 slibning og udvinding. Computer software blev anvendt til at generere data output og passer til en 4-parameter sigmoidal kurve til Cort standarder (figur 2). De mellem-og cv&#39;er fra denne plade varierede fra 0,01 til 5,73% med en gennemsnitlig intra-assay CV på 1,34%. Den inter-assay CV bestemt ved QC værdier fra ni seneste...

Watch this Scientific Journal Video about Extraction and Analysis of Cortisol from Human and Monkey Hair at JoVE.com

Extraction and Analysis of Cortisol from Human and Monkey Hair

Udvinding og analyse af Cortisol fra menneske og Monkey Hair

Cortisol (CORT) akkumuleres i voksende hår akslen af ​​mennesker og ikke-menneskelige primater. Vi beskriver fremgangsmåder til ekstraktion og analyse af hår CORT med høj præcision og følsomhed. Måling af hår CORT er særligt velegnet til vurdering af kronisk stress over perioder på uger til måneder.

The stress hormone cortisol (CORT) is slowly incorporated into the growing hair shaft of humans, nonhuman primates, and other mammals. We developed and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Extraction of High Molecular Weight Genomic DNA from Soils and Sediments

The soil microbiome is a vast and relatively unexplored reservoir of genomic diversity and metabolic innovation that is intimately associated with ...

DNA Extraction from Paraffin Embedded Material for Genetic and Epigenetic Analyses

Disease development and progression are characterized by frequent genetic and epigenetic aberrations including chromosomal rearrangements, copy number ...

A Noninvasive Hair Sampling Technique to Obtain High Quality DNA from Elusive Small Mammals

Noninvasive genetic sampling approaches are becoming increasingly important to study wildlife populations. A number of studies have reported using ...

Rapid Genetic Analysis of Epithelial-Mesenchymal Signaling During Hair Regeneration

Hurtig genetisk analyse af Epithelial-mesenkyme Signaling Under Hair Regeneration

Hair follicle morphogenesis, a complex process requiring interaction between epithelia-derived keratinocytes and the underlying mesenchyme, is an ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Udvinding og Analyse i<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Extraction of Venom and Venom Gland Microdissections from Spiders for Proteomic and Transcriptomic Analyses

Udvinding af Venom og Venom Gland Microdissections fra edderkopper for proteomiske og transkriptom Analyser

Venoms are chemically complex secretions typically comprising numerous proteins and peptides with varied physiological activities. Functional ...

Complete Workflow for Analysis of Histone Post-translational Modifications Using Bottom-up Mass Spectrometry: From Histone Extraction to Data Analysis

Komplet Workflow for Analyse af Histon post-translationelle modifikationer Brug Bottom-up-massespektrometri: Fra Histon Extraction til dataanalyse

Nucleosomes are the smallest structural unit of chromatin, composed of 147 base pairs of DNA wrapped around an octamer of histone proteins. Histone ...

Chromatin Extraction from Frozen Chimeric Liver Tissue for Chromatin Immunoprecipitation Analysis

Kromatinekstraktion fra frosset kimært levervæv til kromatinimmunudfældningsanalyse

Crosslinking Chromatin Immunoprecipitation (X-ChIP) is a widely used technique to assess levels of histone marks and occupancy of transcription factors on ...

Tissue Collection and RNA Extraction from the Human Osteoarthritic Knee Joint

Vævssamling og RNA-udvinding fra human osteoarthritic knee joint

Osteoarthritis (OA) is a chronic and degenerative joint disease most often affecting the knee. As there is currently no cure, total knee arthroplasty ...

Extraction, Labeling, and Purification of Lineage-Specific Cells from Human Antral Follicles

Ekstraktion, mærkning og oprensning af afstamningsspecifikke celler fra humane antrale follikler

The activation, growth, development, and maturation of oocytes is a complex process that is coordinated not just between multiple cell types of the ovary ...