Name: extraction and analysis of cortisol from human and monkey hair
Uploaded: 2014-01-24T08:45:00
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हम इस अध्ययन में विश्लेषण मानव बाल के नमूने उपलब्ध कराने के लिए Kymberlee ओ &#39;ब्रायन, सेलिया मूर, और एडवर्ड Tronick (मनोविज्ञान विभाग, मैसाचुसेट्स, बोस्टन विश्वविद्यालय) धन्यवाद, और स्टीफन फिनिश और अमांडा DETTMER (तुलनात्मक ethology, NICHD की प्रयोगशाला) के लिए रीसस बंदर बाल के नमूने उपलब्ध कराने. प्रारंभिक विकास और इस विधि का उपयोग जारी रखना आदमी के लिए एनआईएच RR11122 द्वारा समर्थित किया गया है

1. नमूना संग्रह और संग्रहण <ol><li> मानव बाल <ol><li> एक रबर बैंड या क्लिप के साथ (व्यास में एक पेंसिल चौड़ाई तक) जांचा जा बालों की पूरी लंबाई सुरक्षित. संभव के रूप में सिर के करीब कट बाल एक स्वच्छ कैंची के साथ (नहीं न?...

<ol>
	<li>Selye, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+and+the+general+adaptation+syndrome.">Stress and the general adaptation syndrome.</a> Br. Med. J. 1 (4667), 1383-1392 (1950).</li><li>Meyer, J. S., Novak, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minireview:+Hair+cortisol:+A+novel+biomarker+of+hypothalamic-+pituitary-adrenocortical+activity.">Minireview: Hair cortisol: A novel biomarker of hypothalamic- pituitary-adrenocortical activity.</a> Endocrinology. 153, 4120-4127 (2012).</li><li>Tiefenbacher, S., Novak, M. A., Lutz, C. K., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+physiology+and+neurochemistry+of+self-injurious+behavior:+A+nonhuman+primate+model.">The physiology and neurochemistry of self-injurious behavior: A nonhuman primate model.</a> Front. Biosci. 10, 1-11 (2005).</li><li>Davenport, M. D., Tiefenbacher, S., Lutz, C. K., Novak, M. A., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+endogenous+cortisol+concentrations+in+the+hair+of+rhesus+macaques.">Analysis of endogenous cortisol concentrations in the hair of rhesus macaques.</a> Gen. Comp. Endocrinol. 147, 255-261 (2006).</li><li>Davenport, M. D., Lutz, C. K., Tiefenbacher, S., Novak, M. A., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rhesus+monkey+model+of+self+injury:+Effects+of+relocation+stress+on+behavior+and+neuroendocrine+function.">A rhesus monkey model of self injury: Effects of relocation stress on behavior and neuroendocrine function.</a> Biol. Psychiatry. 63, 990-996 (2008).</li><li>Kirschbaum, C., Tietze, A., Skoluda, N., Dettenborn, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+as+a+retrospective+calendar+of+cortisol+production+-+Increased+cortisol+incorporation+into+hair+in+the+third+trimester+of+pregnancy.">Hair as a retrospective calendar of cortisol production - Increased cortisol incorporation into hair in the third trimester of pregnancy.</a> Psychoneuroendocrinology. 34, 32-37 (2009).</li><li>Hamel, A. F., Meyer, J. S., Henchey, E., Dettmer, A. M., Suomi, S. J., Novak, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+shampoo+and+water+washing+on+hair+cortisol+concentrations.">Effects of shampoo and water washing on hair cortisol concentrations.</a> Clin. Chim. Acta. 412, 382-385 (2011).</li><li>Manenschijn, L., Koper, J. W., Lamberts, S. W., van Rossum, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+method+to+measure+long+term+cortisol+levels.">Evaluation of a method to measure long term cortisol levels.</a> Steroids. 76, 1032-1036 (2011).</li><li>Thomson, S., Koren, G., Fraser, L. A., Rieder, M., Friedman, T. C., Van Uum, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+analysis+provides+a+historical+record+of+cortisol+levels+in+Cushing&#8217;s+syndrome.">Hair analysis provides a historical record of cortisol levels in Cushing&#8217;s syndrome.</a> Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes. 118, 133-138 (2010).</li><li>LeBeau, M. A., Montgomery, M. A., Brewer, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+variations+in+growth+rate+and+sample+collection+on+interpreting+results+of+segmental+analyses+of+hair.">The role of variations in growth rate and sample collection on interpreting results of segmental analyses of hair.</a> Forensic Sci. Int. 210, 110-116 (2011).</li><li>Dolnick, E. H., Montagna, W., Dobson, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variability+of+hair+growth+in+Macaca+mulatta.">Variability of hair growth in Macaca mulatta.</a> Adv. Biol. Skin. IX, 121-128 (1969).</li><li>Sauv&#233;, B., Koren, G., Walsh, G., Uum Tokmakejian, S. V. a. n., H, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+cortisol+in+human+hair+as+a+biomarker+of+systemic+exposure.">Measurement of cortisol in human hair as a biomarker of systemic exposure.</a> Clin. Invest. Med. 30, 183-191 (2007).</li><li>Gow, R., Thomson, S., Rieder, M., Van Uum, S., Koren, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+assessment+of+cortisol+analysis+in+hair+and+its+clinical+applications.">An assessment of cortisol analysis in hair and its clinical applications.</a> Forensic Sci. Int. 196, 32-37 (2010).</li><li>Bechsh&#248;ft, T. &. #. 2. 1. 6. ;., Sonne, C., Dietz, R., Born, E. W., Novak, M. A., Henchey, E., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortisol+levels+in+hair+of+East+Greenland+polar+bears.">Cortisol levels in hair of East Greenland polar bears.</a> Sci. Total Environ. 409, 831-834 (2011).</li><li>Cooper, G. A. A., Kronstrand, R., Kintz, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Society+of+Hair+Testing+guidelines+for+drug+testing+in+hair.">Society of Hair Testing guidelines for drug testing in hair.</a> Forensic Sci. Int. 218, 20-28 (2012).</li><li>Ito, N., Ito, T., Kromminga, A., Bettermann, A., Takigawa, M., Kees, F., Straub, R. H., Paus, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+hair+follicles+display+a+functional+equivalent+of+the+hypothalamic-pituitary-adrenal+(HPA)+axis+and+synthesize+cortisol.">Human hair follicles display a functional equivalent of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis and synthesize cortisol.</a> FASEB J. 19, 1332-1334 (2005).</li><li>Russell, E., Koren, G., Rieder, M., Van Uum, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+cortisol+as+a+biological+marker+of+chronic+stress:+Current+status,+future+directions+and+unanswered+questions.">Hair cortisol as a biological marker of chronic stress: Current status, future directions and unanswered questions.</a> Psychoneuroendocrinology. 37, 589-601 (2012).</li><li>Stalder, T., Kirschbaum, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+cortisol+in+hair+-+State+of+the+art+and+future+directions.">Analysis of cortisol in hair - State of the art and future directions.</a> Brain Behav. Immun. 26, 1019-1029 (2012).</li><li>Staufenbiel, S. M., Penninx, B. W., Spijker, A. T., Elzinga, B. M., van Rossum, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+cortisol,+stress+exposure,+and+mental+health+in+humans:+A+systematic+review.">Hair cortisol, stress exposure, and mental health in humans: A systematic review.</a> Psychoneuroendocrinology. 38, 1220-1235 (2013).</li></ol>

ऊपर वर्णित बाल CORT प्रक्रिया, प्रदर्शन करने के लिए सरल है अपेक्षाकृत सस्ती है, आसानी से उपलब्ध रसायन, अभिकर्मकों, और आपूर्ति का उपयोग करता है, और एक अपवाद के साथ, एक ठेठ विश्लेषणात्मक प्रयोगशाला में उपस्थ...

प्लाज्मा, लार, या कभी कभी मूत्र या मल में में CORT का मापन तनाव 1 में एचपीए धुरी की भूमिका की Selye की खोज के बाद से शारीरिक तनाव का एक सूचकांक के रूप में इस्तेमाल किया गया है. कई पत्र तीव्रता से तनावपूर्ण स्थितियों को एचपीए गतिविधि से संबंधित प्रकाशित किया गया है, क्षेत्र पुरानी शारीरिक तनाव का एक सरल और विश्वसनीय सूचकांक के अभाव के कारण बाधा उत्पन्न किया गया. यह समस्या पैदा होती है circadian परिवर्तन के अधीन हैं और पर्यावरण गड़बड़ी से चकित किया जा सकता है कि एचपीए गतिविधि के प्लाज्मा और लार उपज दोनों &quot;बिंदु&quot; का अनुमान है. मूत्र और मल के नमूने कुछ मामलों में एक पूरा दिन तक घंटे की एक संख्या है कि अवधि CORT और / या metabolite उत्सर्जन के माप उपज. हालांकि, इन तरीकों में से कोई भी एचपीए गतिविधि के लिए वास्तव में एक लंबे समय तक सूचकांक और इस एसवाई की जवाबदेही प्रदान करता है, इन matrices के किसी भी समय के साथ CORT स्तर की एक किसी न किसी कम्पोजिट सूचकांक प्रदान कर सकता का उपयोग कर कई नमूने का संग्रहजीर्ण तनाव के लिए स्टेम. बालों में CORT मापने तनाव साहित्य में इस महत्वपूर्ण जरूरत को भरने के लिए शुरू हो गया है. कई प्रयोगशालाओं द्वारा प्रारंभिक अध्ययन मानव बालों में CORT की उपस्थिति का प्रदर्शन किया लेकिन बाल CORT स्तरों तनाव 2 के एक समारोह के रूप में बदल गया कि जांच नहीं की थी. हमारी प्रयोगशाला में विभिन्न सामाजिक और व्यवहार कारकों द्वारा 3 रीसस बंदर HPA अक्ष के नियमन में कई वर्षों के लिए दिलचस्पी किया गया है, हम रीसस बंदर बाल 4 की निकासी और विश्लेषण के लिए तरीकों की स्थापना और मान्य करने के लिए निकल पड़े. रक्त जनित CORT धीरे धीरे और लगातार बढ़ रही बाल में शामिल किया गया है जो इस तथ्य पर आधारित है, इस नई विधि के उद्देश्य महीने के लिए सप्ताह की अवधि में एचपीए गतिविधि का एक एकीकृत सूचकांक के रूप में बाल व्युत्पन्न CORT के स्तर का उपयोग करने के लिए था. कई methodological चुनौतियों मौजूद प्रोटोकॉल विकसित करने में सामना करना पड़ा था. सबसे पहले, पिछले अध्ययनों कि थोड़ी मात्रा ओ दिखाया गया थाच पसीना और sebum में उत्सर्जित कर रहे हैं CORT परिसंचारी और इसलिए कोट बाल शाफ्ट 2 के बाहर कर सकता है. इस संभावित उलझाना को खत्म करने के लिए, हम बढ़ रही बाल शाफ्ट के भीतर मौजूद CORT पर एक न्यूनतम प्रभाव रहा, जबकि बाहरी CORT दूर करने के लिए प्रकट होता है कि एक हल्के धोने की प्रक्रिया विकसित की है. इस प्रकार, इस प्रक्रिया (isopropanol साथ यानी दो 3 मिनट washes) के अधीन बंदर बाल कुल बाल CORT सामग्री की लगभग 7-8% खो दिया है, और एक तिहाई धोने नमूना 4 से कम से कम 1% अधिक स्टेरॉयड हटा दिया. उसी प्रक्रिया (अप्रकाशित लालकृष्ण रोसेनबर्ग और जे मेयेर,) के नमूनों से 27% कुल CORT सामग्री की एक औसत हटा के बाद से, मानव बाल में अधिक बाहरी CORT ऐसा प्रतीत होता है. बंदर बालों की तरह, तथापि, एक अतिरिक्त धोने पहले दो washes की तुलना में काफी कम CORT (लगभग 7%) निहित. इसलिए, बंदर और मानव बाल दोनों से परिणाम एक प्रमुख इन्हीं को बनाए रखते हुए सबसे (यदि सभी नहीं) बाह्य CORT हटाया जा सकता है कि विवाद का समर्थनआंतरिक बाल मैट्रिक्स के भीतर CORT की tion. दूसरा, हमारे पायलट अध्ययनों से यह भी पता चला है कि संभवतः बाल शाफ्ट के जटिल प्रोटीन मैट्रिक्स खुला तोड़ने के साथ ही विलायक प्रवेश के लिए उपलब्ध सतह क्षेत्र को बढ़ाने के द्वारा, नमूना से काफी वृद्धि हुई CORT वसूली निकासी के लिए बाल पूर्व पीस. दो अलग पीस तरीकों, फायदे और नुकसान के साथ प्रत्येक विकसित किए गए. एक गेंद मिल का उपयोग करता है जो विधि 1,, बेहतरीन पाउडर उत्पादन का लाभ दिया है. हालांकि, एक गेंद मिल एक अपेक्षाकृत महंगे उपकरण मद और मानक पीस जार और गेंदों के साथ प्रयोग किया जाता है, तो यह एक समय में केवल दो नमूने पीस में सक्षम है. छोटे नमूने भी मानक पीस जार के साथ एक गेंद मिल का उपयोग कर प्रक्रिया को मुश्किल कर रहे हैं. एक beadbeater का उपयोग करता है जो विधि 2, अपने पीस क्षमता में कम प्रभावी है. नतीजतन, औसत CORT वसूली गेंद चक्की (अप्रकाशित डेटा) की तुलना में इस पद्धति का उपयोग करके लगभग 10% कम है. दूसरी ओर, एक beadbeaterकाफी कम खर्चीला एक गेंद मिल से है, 16-24 नमूने एक बार मॉडल के आधार पर जमीन की जा सकती है, और विधि छोटे नमूने के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है. क्योंकि ऊपर उल्लेख अंतर वसूली की, यह एक विशेष अध्ययन के भीतर सभी नमूनों के लिए एक ही पीस विधि का उपयोग करने की सलाह दी जाती है. बालों के नमूने संसाधित किया गया है एक बार, वे मूल रूप से लार CORT को मापने के लिए बनाया गया एक संवेदनशील और विशिष्ट व्यावसायिक ईआईए किट के माध्यम से विश्लेषण किया है निष्कर्षों में मेथनॉल और CORT साथ निकाले जाते हैं. निष्कर्षण और परख प्रक्रियाओं बंदर बाल के नमूने से अर्क के धारावाहिक dilutions बारीकी से प्रामाणिक CORT मानकों से प्राप्त रीडिंग paralleled कि ईआईए रीडिंग झुकेंगे कि प्रदर्शन में हिस्सा द्वारा मान्य किया गया. हम तो (प्लाज्मा और लार CORT के अलावा) बाल CORT नए आवास तिमाहियों 4,5 करने के लिए बंदरों का एक प्रशासकीय अनिवार्य स्थानांतरण की प्रमुख जीवन तनाव के प्रति संवेदनशील था कि पता चला है. presenटी कागज मानव और बंदर बाल के नमूने पर कार्रवाई करने के लिए और इस तरह के नमूनों से CORT निकालने के लिए और विश्लेषण करने के लिए हमारी प्रयोगशाला में नियमित रूप से इस्तेमाल के तरीकों का एक विस्तृत ब्यौरा उपलब्ध कराता है.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="798">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">HPLC-grade isopropanol</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">A451</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">HPLC-grade methanol</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">A452</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Salivary cortisol assay kits</td>
			<td style="width:116px;">Salimetrics</td>
			<td style="width:119px;">1-3002</td>
			<td>See manufacturer&#39;s kit insert for information on assay sensitivity and specificity</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">15-ml polypropylene screw-cap centrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Max Scientific</td>
			<td>10-9151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">1.5-ml Safe-Lock microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">05-402-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">2.0-ml Safe-Lock microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">05-402-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2.0-ml XXTuff reinforced microvials</td>
			<td style="width:116px;">BioSpec</td>
			<td>330TX</td>
			<td>Use with mini-beadbeater</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3.2-mm chrome-steel beads</td>
			<td style="width:116px;">BioSpec</td>
			<td>11079132c</td>
			<td>Use with mini-beadbeater</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">10-ml stainless steel grinding jars</td>
			<td style="width:116px;">Retsch</td>
			<td style="width:119px;">02.462.0061</td>
			<td>Use with mixer mill</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">12-mm stainless steel grinding balls</td>
			<td style="width:116px;">Retsch</td>
			<td style="width:119px;">05.368.0037</td>
			<td>Use with mixer mill</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant activated carbon cartridge</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>DTK120R</td>
			<td>Use with Savant chemical trap</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;"></td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;"></td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Name of Equipment</td>
			<td style="width:116px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Rotator for 15-ml centrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>S02135</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Rotator for microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>NC9854190&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Benchtop centrifuge for microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>13-100-675</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">MM 200 mixer mill</td>
			<td style="width:116px;">Retsch</td>
			<td style="width:119px;">20.746.0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mini-Beadbeater 16&#160;</td>
			<td style="width:116px;">BioSpec</td>
			<td>607</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant DNA Speedvac</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>DNA120-115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant refrigerated vapor trap</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>RVT400-115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant chemical trap</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>SCT120</td>
			<td>Alternative to refrigerated vapor trap</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microplate reader</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microplate washer</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microplate mixer</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Multichannel pipetter</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Analytical balance</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

extraction and analysis of cortisol from human and monkey hair

तनाव हार्मोन कोर्टिसोल (CORT) धीरे धीरे मनुष्यों, nonhuman primates, और अन्य स्तनधारियों की बढ़ती बाल शाफ्ट में शामिल किया है. हम विकसित और पुष्टि रीसस बंदर बालों से CORT निष्कर्षण और विश्लेषण के लिए एक विधि है और बाद में मानव खोपड़ी बालों के साथ प्रयोग के लिए इस विधि का रूपांतरित किया. प्लाज्मा या लार से प्राप्त CORT &quot;बिंदु नमूने&quot; के विपरीत, बाल CORT हार्मोन समावेश की अवधि के दौरान, एक hypothalamic-पीयूषिका adrenocortical (एचपीए) प्रणाली गतिविधि की एकीकृत उपाय, और इस प्रकार शारीरिक तनाव प्रदान करता है. मानव खोपड़ी बाल 1 सेमी / माह की औसत दर से बढ़ता है, बाल क्षेत्रों से प्राप्त CORT स्तरों लंबाई में कई सेमी संभावित महीने की एक संख्या से अधिक का अनुभव तनाव का एक biomarker के रूप में सेवा कर सकते हैं. हमारे विधि में, एक बाल नमूना पहले पसीना या sebum से जमा किया गया है कि बाल शाफ्ट के बाहर से किसी भी CORT दूर करने के लिए isopropanol में दो बार धोया जाता है. सूखने के बाद,नमूना बाल प्रोटीन मैट्रिक्स को तोड़ने और निकासी के लिए सतह क्षेत्र को बढ़ाने के लिए एक ठीक पाउडर के लिए जमीन है. बाल शाफ्ट के इंटीरियर से CORT मेथनॉल में निकाला जाता है, मेथनॉल सुखाया जाता है, और निकालने परख बफर में पुनर्गठित किया जाता है. निकाले Cort, मानकों और गुणवत्ता नियंत्रण के साथ, तो एक संवेदनशील और विशिष्ट व्यावसायिक रूप से उपलब्ध एंजाइम प्रतिरक्षा (ईआईए) किट के माध्यम से विश्लेषण किया है. ईआईए से readout मिलीग्राम पाउडर हेयर वजन प्रति पीजी CORT में बदल जाती है. इस विधि से मानव में बाल CORT का विश्लेषण करने के लिए हमारी प्रयोगशाला में प्रयोग किया गया है, मकाक बंदरों, marmosets, कुत्तों, और ध्रुवीय भालू की कई प्रजातियों. हमारी प्रयोगशाला से और अन्य अनुसंधान समूहों से दोनों कई अध्ययनों से प्राकृतिक में पुराने तनाव जोखिम का आकलन करने के साथ ही प्रयोगशाला सेटिंग्स के लिए बाल CORT की व्यापक प्रयोज्यता दिखा दिया है.

चित्रा 1 विधि 2 पीस और निकासी का उपयोग संसाधित मानव बाल के नमूने (वयस्क पुरुष और महिला मानव विषयों) के एक प्रतिनिधि के सेट से प्रिंटआउट से पता चलता है. कम्प्यूटर सॉफ्टवेयर डेटा निर्गम उत्पन्न करने ?...

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Extraction and Analysis of Cortisol from Human and Monkey Hair

निष्कर्षण और मानव और बंदर बालों से कोर्टिसोल का विश्लेषण

कोर्टिसोल (CORT) मानव और nonhuman primates की बढ़ती बाल शाफ्ट में जम जाता है. हम उच्च परिशुद्धता और संवेदनशीलता के साथ बाल CORT निकालने और विश्लेषण करने के लिए विधियों का वर्णन. बाल CORT का मापन विशेष रूप से महीने के लिए सप्ताह की अवधि में पुराने तनाव का आकलन करने के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है.

The stress hormone cortisol (CORT) is slowly incorporated into the growing hair shaft of humans, nonhuman primates, and other mammals. We developed and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Extraction of High Molecular Weight Genomic DNA from Soils and Sediments

उच्च आण्विक वजन जीनोमिक डीएनए के मृदा और निक्षेपों से निकालना

The soil microbiome is a vast and relatively unexplored reservoir of genomic diversity and metabolic innovation that is intimately associated with ...

DNA Extraction from Paraffin Embedded Material for Genetic and Epigenetic Analyses

जेनेटिक और Epigenetic विश्लेषण के लिए आयल एंबेडेड सामग्री से डीएनए निष्कर्षण

Disease development and progression are characterized by frequent genetic and epigenetic aberrations including chromosomal rearrangements, copy number ...

A Noninvasive Hair Sampling Technique to Obtain High Quality DNA from Elusive Small Mammals

एक अवेध्य बालों नमूनाकरण मायावी छोटे स्तनधारी से उच्च गुणवत्ता डीएनए प्राप्त तकनीक

Noninvasive genetic sampling approaches are becoming increasingly important to study wildlife populations. A number of studies have reported using ...

Rapid Genetic Analysis of Epithelial-Mesenchymal Signaling During Hair Regeneration

बाल उत्थान के दौरान तेजी से उपकला-mesenchymal संकेतन की आनुवांशिक विश्लेषण

Hair follicle morphogenesis, a complex process requiring interaction between epithelia-derived keratinocytes and the underlying mesenchyme, is an ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

में प्रोस्टाग्लैंडीन निष्कर्षण और विश्लेषण<em&gt; Caenorhabditis एलिगेंस</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Extraction of Venom and Venom Gland Microdissections from Spiders for Proteomic and Transcriptomic Analyses

प्रोटिओमिक और Transcriptomic विश्लेषण के लिए मकड़ियों से जहर की निकासी और विष ग्रंथि Microdissections

Venoms are chemically complex secretions typically comprising numerous proteins and peptides with varied physiological activities. Functional ...

Complete Workflow for Analysis of Histone Post-translational Modifications Using Bottom-up Mass Spectrometry: From Histone Extraction to Data Analysis

Histone बाद translational संशोधनों के विश्लेषण के लिए पूरा कार्यप्रवाह नीचे अप मास स्पेक्ट्रोमेट्री का उपयोग: Histone निकासी से डेटा विश्लेषण करने के लिए

Nucleosomes are the smallest structural unit of chromatin, composed of 147 base pairs of DNA wrapped around an octamer of histone proteins. Histone ...

Chromatin Extraction from Frozen Chimeric Liver Tissue for Chromatin Immunoprecipitation Analysis

क्रोमैटिन इम्यूनोप्रेसिपेशन विश्लेषण के लिए जमे हुए चिमेरिक यकृत ऊतक से क्रोमैटिन निष्कर्षण

Crosslinking Chromatin Immunoprecipitation (X-ChIP) is a widely used technique to assess levels of histone marks and occupancy of transcription factors on ...

Tissue Collection and RNA Extraction from the Human Osteoarthritic Knee Joint

मानव ऑस्टियोआर्थ्रिटिक घुटने संयुक्त से ऊतक संग्रह और आरएनए निष्कर्षण

Osteoarthritis (OA) is a chronic and degenerative joint disease most often affecting the knee. As there is currently no cure, total knee arthroplasty ...

Extraction, Labeling, and Purification of Lineage-Specific Cells from Human Antral Follicles

मानव एंट्रल फॉलिकल्स से वंश-विशिष्ट कोशिकाओं का निष्कर्षण, लेबलिंग और शुद्धिकरण

The activation, growth, development, and maturation of oocytes is a complex process that is coordinated not just between multiple cell types of the ovary ...