Name: extraction and analysis of cortisol from human and monkey hair
Uploaded: 2014-01-24T08:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Extraction and Analysis of Cortisol from Human and Monkey Hair at JoVE.com

Vi takker Kymberlee O&#39;Brien, Celia Moore, og Edward Tronick (Department of Psychology, University of Massachusetts, Boston) for å gi den menneskelige hårprøver analysert i denne studien, og Stephen Suomi og Amanda Dettmer (Laboratory of Comparative Etologi, NICHD) for gi rhesus ape hårprøver. Initial utvikling og fortsatt bruk av denne metoden har vært støttet av NIH RR11122 til MAN

En. Prøvetaking og oppbevaring <ol><li> Menneskehår <ol><li> Sikre hele lengden av hår som skal avsøkes (opp til en blyant-bredde i diameter) med en gummistrikk eller klips. Klipp håret så nær hodebunnen som mulig (pass på å ikke nick huden) med en ren saks. Merk: Standardprøvetakingsområdet er den bakre toppunktet av skallen. </li><li> Noen etterforskere har rapportert en nedgang i menneskelig hår CORT nivåer med avstanden fra hodebunnen 6, noe som kan skyldes utvasking av gjentatt eksponering...

<ol>
	<li>Selye, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+and+the+general+adaptation+syndrome.">Stress and the general adaptation syndrome.</a> Br. Med. J. 1 (4667), 1383-1392 (1950).</li><li>Meyer, J. S., Novak, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minireview:+Hair+cortisol:+A+novel+biomarker+of+hypothalamic-+pituitary-adrenocortical+activity.">Minireview: Hair cortisol: A novel biomarker of hypothalamic- pituitary-adrenocortical activity.</a> Endocrinology. 153, 4120-4127 (2012).</li><li>Tiefenbacher, S., Novak, M. A., Lutz, C. K., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+physiology+and+neurochemistry+of+self-injurious+behavior:+A+nonhuman+primate+model.">The physiology and neurochemistry of self-injurious behavior: A nonhuman primate model.</a> Front. Biosci. 10, 1-11 (2005).</li><li>Davenport, M. D., Tiefenbacher, S., Lutz, C. K., Novak, M. A., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+endogenous+cortisol+concentrations+in+the+hair+of+rhesus+macaques.">Analysis of endogenous cortisol concentrations in the hair of rhesus macaques.</a> Gen. Comp. Endocrinol. 147, 255-261 (2006).</li><li>Davenport, M. D., Lutz, C. K., Tiefenbacher, S., Novak, M. A., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rhesus+monkey+model+of+self+injury:+Effects+of+relocation+stress+on+behavior+and+neuroendocrine+function.">A rhesus monkey model of self injury: Effects of relocation stress on behavior and neuroendocrine function.</a> Biol. Psychiatry. 63, 990-996 (2008).</li><li>Kirschbaum, C., Tietze, A., Skoluda, N., Dettenborn, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+as+a+retrospective+calendar+of+cortisol+production+-+Increased+cortisol+incorporation+into+hair+in+the+third+trimester+of+pregnancy.">Hair as a retrospective calendar of cortisol production - Increased cortisol incorporation into hair in the third trimester of pregnancy.</a> Psychoneuroendocrinology. 34, 32-37 (2009).</li><li>Hamel, A. F., Meyer, J. S., Henchey, E., Dettmer, A. M., Suomi, S. J., Novak, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+shampoo+and+water+washing+on+hair+cortisol+concentrations.">Effects of shampoo and water washing on hair cortisol concentrations.</a> Clin. Chim. Acta. 412, 382-385 (2011).</li><li>Manenschijn, L., Koper, J. W., Lamberts, S. W., van Rossum, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+method+to+measure+long+term+cortisol+levels.">Evaluation of a method to measure long term cortisol levels.</a> Steroids. 76, 1032-1036 (2011).</li><li>Thomson, S., Koren, G., Fraser, L. A., Rieder, M., Friedman, T. C., Van Uum, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+analysis+provides+a+historical+record+of+cortisol+levels+in+Cushing&#8217;s+syndrome.">Hair analysis provides a historical record of cortisol levels in Cushing&#8217;s syndrome.</a> Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes. 118, 133-138 (2010).</li><li>LeBeau, M. A., Montgomery, M. A., Brewer, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+variations+in+growth+rate+and+sample+collection+on+interpreting+results+of+segmental+analyses+of+hair.">The role of variations in growth rate and sample collection on interpreting results of segmental analyses of hair.</a> Forensic Sci. Int. 210, 110-116 (2011).</li><li>Dolnick, E. H., Montagna, W., Dobson, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variability+of+hair+growth+in+Macaca+mulatta.">Variability of hair growth in Macaca mulatta.</a> Adv. Biol. Skin. IX, 121-128 (1969).</li><li>Sauv&#233;, B., Koren, G., Walsh, G., Uum Tokmakejian, S. V. a. n., H, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+cortisol+in+human+hair+as+a+biomarker+of+systemic+exposure.">Measurement of cortisol in human hair as a biomarker of systemic exposure.</a> Clin. Invest. Med. 30, 183-191 (2007).</li><li>Gow, R., Thomson, S., Rieder, M., Van Uum, S., Koren, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+assessment+of+cortisol+analysis+in+hair+and+its+clinical+applications.">An assessment of cortisol analysis in hair and its clinical applications.</a> Forensic Sci. Int. 196, 32-37 (2010).</li><li>Bechsh&#248;ft, T. &. #. 2. 1. 6. ;., Sonne, C., Dietz, R., Born, E. W., Novak, M. A., Henchey, E., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortisol+levels+in+hair+of+East+Greenland+polar+bears.">Cortisol levels in hair of East Greenland polar bears.</a> Sci. Total Environ. 409, 831-834 (2011).</li><li>Cooper, G. A. A., Kronstrand, R., Kintz, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Society+of+Hair+Testing+guidelines+for+drug+testing+in+hair.">Society of Hair Testing guidelines for drug testing in hair.</a> Forensic Sci. Int. 218, 20-28 (2012).</li><li>Ito, N., Ito, T., Kromminga, A., Bettermann, A., Takigawa, M., Kees, F., Straub, R. H., Paus, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+hair+follicles+display+a+functional+equivalent+of+the+hypothalamic-pituitary-adrenal+(HPA)+axis+and+synthesize+cortisol.">Human hair follicles display a functional equivalent of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis and synthesize cortisol.</a> FASEB J. 19, 1332-1334 (2005).</li><li>Russell, E., Koren, G., Rieder, M., Van Uum, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+cortisol+as+a+biological+marker+of+chronic+stress:+Current+status,+future+directions+and+unanswered+questions.">Hair cortisol as a biological marker of chronic stress: Current status, future directions and unanswered questions.</a> Psychoneuroendocrinology. 37, 589-601 (2012).</li><li>Stalder, T., Kirschbaum, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+cortisol+in+hair+-+State+of+the+art+and+future+directions.">Analysis of cortisol in hair - State of the art and future directions.</a> Brain Behav. Immun. 26, 1019-1029 (2012).</li><li>Staufenbiel, S. M., Penninx, B. W., Spijker, A. T., Elzinga, B. M., van Rossum, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+cortisol,+stress+exposure,+and+mental+health+in+humans:+A+systematic+review.">Hair cortisol, stress exposure, and mental health in humans: A systematic review.</a> Psychoneuroendocrinology. 38, 1220-1235 (2013).</li></ol>

Håret CORT fremgangsmåte som er beskrevet ovenfor er enkel å utføre, er relativt billig, gjør bruk av lett tilgjengelige kjemikalier, reagenser og utstyr, og krever utstyr som, med ett unntak, er sannsynlig å være tilstede i et typisk analytisk laboratorium. Unntaket er et slipeapparat som for eksempel en kulemølle eller mini-beadbeater. Vi registrerer at enkelte forskningsmiljøer hakke hårprøver i små fragmenter omtrent 1 mm i lengde 12, men basert på våre observasjoner vi anbefaler å utføre ...

Måling av CORT i plasma, spytt, eller av og til i urin eller avføring har blitt brukt som en indeks av fysiologisk stress siden Selye oppdagelse av rollen til HPA-aksen i stress en. Selv om tallrike artikler er publisert vedrørende HPA aktiviteten til akutt stressende situasjoner, har feltet vært hemmet av mangel på en enkel og pålitelig indeks av kronisk fysiologisk stress. Dette problemet oppstår fordi plasma og spytt både avkastning &quot;Point&quot; estimater av HPA-aktivitet som er gjenstand for circadian variasjon og kan bli forvirret av miljøforstyrrelser. Urin og fecal prøver gi målinger av CORT og / eller metabolitten utskillelse som spenner over et antall timer opp til en hel dag i enkelte tilfeller. Samling av flere prøver ved å bruke en hvilken som helst av disse matrisene kan gi et grovt komposittindeks på CORT nivåer over tid, men ingen av disse metoder gir en virkelig langvarig indeks av HPA aktivitet og respons av dette system til kroniske stressfaktorer. Måling CORT i håret har begynt å fylle denne viktige behov i stress litteratur. Innledende studier av flere laboratorier viste tilstedeværelse av CORT i humant hår, men ikke undersøke hvorvidt hår CORT nivåer endres som en funksjon av stress 2. Som vårt laboratorium har vært interessert i mange år i reguleringen av den rhesus ape HPA-aksen ved ulike sosiale og atferdsmessige faktorer tre, setter vi ut for å etablere og validere metoder for utvinning og analyse av rhesus ape hår fire. Basert på premisset om at blod-borne CORT er langsomt og kontinuerlig innlemmet i voksende hår, er hensikten med denne nye metoden var å bruke nivåer av hår-avledet CORT som en integrert indeks av HPA aktivitet over perioder på uker til måneder. Flere metodiske utfordringer ble påtruffet i å utvikle den nåværende protokollen. Først tidligere studier hadde vist at små mengder of sirkulerende CORT utskilles i svette og talg og derfor kunne strøk utsiden av håret to. For å eliminere dette potensialet forvirre, utviklet vi en mild vaskeprosedyren som ser ut til å fjerne ekstern CORT samtidig ha en minimal effekt på CORT stede innen det voksende håret. Således, ape håret utsettes for denne fremgangsmåten (dvs. to tre-min vaskinger med isopropanol) tapte omtrent 7-8% av det totale hår CORT innhold, og en tredje vask fjernes mindre enn 1% mer steroid fra prøven 4. Det synes å være mer ekstern CORT i menneskehår, siden den samme prosedyre fjernet et gjennomsnitt på 27% total CORT innhold fra prøvene (K. Rosenberg and J. Meyer, upublisert). Som ape hår, men inneholdt en ekstra vaske mye mindre CORT (ca. 7%) enn de første to vaskinger. Derfor Resultatene fra begge ape og menneskehår støtter påstanden om at de fleste (om ikke alle) ytre CORT kan fjernes og samtidig opprettholde en stor fracsjon av CORT i det indre hår matrisen. For det andre pilotstudier viste også at slipe håret før ekstraksjon betydelig økt CORT utvinning fra prøven, antagelig ved å bryte åpen komplekse proteinholdig grunnmasse av håret i tillegg til å øke overflatearealet tilgjengelig for penetrering oppløsningsmiddel. To forskjellige slipemetoder ble utviklet, hver med fordeler og ulemper. Metode 1, som anvender en kulemølle, har fordelen av å produsere det fineste pulver. Imidlertid er en kulemølle en forholdsvis kostbart utstyr for elementet og, hvis det brukes med standard slipe glass og kuler, er det i stand til å slipe det bare to prøver på en gang. Små prøver er også vanskelig å behandle ved hjelp av en kulemølle med standard slipe krukker. Metode 2, som bruker en beadbeater, er mindre effektive i sin slipeevne. Som et resultat er gjennomsnittet CORT gjenoppretting omtrent 10% lavere ved hjelp av denne metoden i forhold til den kulemølle (upubliserte data). På den annen side, en beadbeaterer betydelig rimeligere enn en kulemølle, kan 16 til 24 prøvene slipes samtidig, avhengig av modellen, og fremgangsmåten er godt egnet for små prøver. På grunn av den ovenfor nevnte differensial utvinning, er det tilrådelig å bruke samme slipemetode for alle prøver i løpet av en bestemt undersøkelse. Når hårprøver er blitt behandlet, blir de trukket ut med metanol og Cort i ekstraktene blir analysert ved hjelp av en sensitiv og spesifikk kommersiell EIA kit opprinnelig ble utviklet for å måle spytt CORT. Utvinning og analyseprosedyrene ble validert i en del ved å demonstrere at serielle fortynninger av ekstrakter fra ape hårprøver ga EIA avlesninger som tett parallell målingene hentet fra autentiske CORT standarder. Vi viste at håret CORT (i tillegg til plasma-og spytt CORT) var følsom for store livet stressor av et administrativt mandat flytting av apekatter til nye boligkvarter 4,5. Den presentat papir gir en detaljert redegjørelse av metodene som brukes rutinemessig i vårt laboratorium for å behandle menneskelige og ape hårprøver og å trekke ut og analysere CORT fra slike prøver.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="798">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">HPLC-grade isopropanol</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">A451</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">HPLC-grade methanol</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">A452</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Salivary cortisol assay kits</td>
			<td style="width:116px;">Salimetrics</td>
			<td style="width:119px;">1-3002</td>
			<td>See manufacturer&#39;s kit insert for information on assay sensitivity and specificity</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">15-ml polypropylene screw-cap centrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Max Scientific</td>
			<td>10-9151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">1.5-ml Safe-Lock microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">05-402-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">2.0-ml Safe-Lock microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">05-402-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2.0-ml XXTuff reinforced microvials</td>
			<td style="width:116px;">BioSpec</td>
			<td>330TX</td>
			<td>Use with mini-beadbeater</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3.2-mm chrome-steel beads</td>
			<td style="width:116px;">BioSpec</td>
			<td>11079132c</td>
			<td>Use with mini-beadbeater</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">10-ml stainless steel grinding jars</td>
			<td style="width:116px;">Retsch</td>
			<td style="width:119px;">02.462.0061</td>
			<td>Use with mixer mill</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">12-mm stainless steel grinding balls</td>
			<td style="width:116px;">Retsch</td>
			<td style="width:119px;">05.368.0037</td>
			<td>Use with mixer mill</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant activated carbon cartridge</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>DTK120R</td>
			<td>Use with Savant chemical trap</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;"></td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;"></td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Name of Equipment</td>
			<td style="width:116px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Rotator for 15-ml centrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>S02135</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Rotator for microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>NC9854190&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Benchtop centrifuge for microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>13-100-675</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">MM 200 mixer mill</td>
			<td style="width:116px;">Retsch</td>
			<td style="width:119px;">20.746.0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mini-Beadbeater 16&#160;</td>
			<td style="width:116px;">BioSpec</td>
			<td>607</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant DNA Speedvac</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>DNA120-115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant refrigerated vapor trap</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>RVT400-115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant chemical trap</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>SCT120</td>
			<td>Alternative to refrigerated vapor trap</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microplate reader</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microplate washer</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microplate mixer</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Multichannel pipetter</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Analytical balance</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

extraction and analysis of cortisol from human and monkey hair

Stresshormonet kortisol (CORT) er sakte innlemmet i den voksende håret av mennesker, ikke-menneskelige primater, og andre pattedyr. Vi utviklet og validert en fremgangsmåte for CORT ekstraksjon og analyse av rhesus ape hår og senere tilpasset denne fremgangsmåte for bruk sammen med human hodehår. I motsetning til CORT &quot;punktprøver&quot; hentet fra plasma eller spytt, gir håret CORT en integrert mål på hypothalamus-hypofyse-binyrebark (HPA) system aktivitet, og dermed fysiologisk stress, i løpet av hormonet innlemmelse. Fordi menneskelig hodehår vokser til en gjennomsnittlig rate på 1 cm / måned, CORT nivåer hentet fra hår segmenter noen cm i lengden kan potensielt tjene som en biomarkør for stress opplevd over flere måneder. I foreliggende fremgangsmåte blir hver hår prøve først vasket to ganger i isopropanol for å fjerne eventuelle CORT fra utsiden av håret som er blitt avsatt fra svette eller talg. Etter tørking iprøven blir malt til et fint pulver for å bryte opp hårets proteinmatriks og øke overflatearealet for ekstraksjon. CORT fra det indre av håret ekstraheres i metanol, blir metanolen fordampet, og ekstraktet rekonstitueres i analysebuffer. Utpakkede CORT, sammen med standarder og kvalitetskontroll, blir deretter analysert ved hjelp av en sensitiv og spesifikk kommersielt tilgjengelig enzym-immunoassay (EIA) kit. Avlesning fra EIA er konvertert til pg CORT per mg pulverisert hår vekt. Denne metoden har vært brukt i vårt laboratorium for å analysere hår CORT hos mennesker, flere arter av macaque aper, silkeaper, hunder og isbjørn. Mange studier både fra vår lab og fra andre forskningsgrupper har vist bred anvendelse av hår CORT for vurdering av kronisk stress eksponering i naturlig samt laboratoriemiljøer.

Figur 1 viser utskriften fra et representativt sett av menneskelige hårprøver (voksen mannlige og kvinnelige forsøkspersoner) behandlet ved hjelp av metode 2 sliping og utvinning. Dataprogrammer ble brukt til å generere data-utgang, og for å passe til en 4-parameter sigmoidal kurve til Cort standarder (figur 2). De mellom-vel CV&#39;er fra denne platen varierte 0,01 til 5,73% med en gjennomsnittlig intra-assay CV på 1,34%. Den inter-assay CV bestemmes ved hjelp av QC verdier fra n...

Watch this Scientific Journal Video about Extraction and Analysis of Cortisol from Human and Monkey Hair at JoVE.com

Extraction and Analysis of Cortisol from Human and Monkey Hair

Utvinning og analyse av kortisol fra Menneske og Monkey Hair

Kortisol (CORT) akkumuleres i den voksende håret av mennesker og ikke-menneskelige primater. Vi beskriver fremgangsmåter for ekstrahering og analyse av hår CORT med høy presisjon og følsomhet. Måling av hår CORT er spesielt godt egnet for å vurdere kronisk stress over perioder på uker til måneder.

The stress hormone cortisol (CORT) is slowly incorporated into the growing hair shaft of humans, nonhuman primates, and other mammals. We developed and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Extraction of High Molecular Weight Genomic DNA from Soils and Sediments

The soil microbiome is a vast and relatively unexplored reservoir of genomic diversity and metabolic innovation that is intimately associated with ...

DNA Extraction from Paraffin Embedded Material for Genetic and Epigenetic Analyses

Disease development and progression are characterized by frequent genetic and epigenetic aberrations including chromosomal rearrangements, copy number ...

A Noninvasive Hair Sampling Technique to Obtain High Quality DNA from Elusive Small Mammals

Noninvasive genetic sampling approaches are becoming increasingly important to study wildlife populations. A number of studies have reported using ...

Rapid Genetic Analysis of Epithelial-Mesenchymal Signaling During Hair Regeneration

Rapid Genetic Analysis of epitelial-mesenchymale signaleringsprotokoll Under Hair Regeneration

Hair follicle morphogenesis, a complex process requiring interaction between epithelia-derived keratinocytes and the underlying mesenchyme, is an ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Utvinning og analyse i<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Extraction of Venom and Venom Gland Microdissections from Spiders for Proteomic and Transcriptomic Analyses

Utvinning av Venom og Venom Gland Microdissections fra Spiders for proteomikk og Transcriptomic Analyser

Venoms are chemically complex secretions typically comprising numerous proteins and peptides with varied physiological activities. Functional ...

Complete Workflow for Analysis of Histone Post-translational Modifications Using Bottom-up Mass Spectrometry: From Histone Extraction to Data Analysis

Komplett arbeidsflyt for analyse av Histone posttranslasjonelle modifikasjoner hjelp Bottom-up massespektrometri: Fra Histone Utvinning til dataanalyse

Nucleosomes are the smallest structural unit of chromatin, composed of 147 base pairs of DNA wrapped around an octamer of histone proteins. Histone ...

Chromatin Extraction from Frozen Chimeric Liver Tissue for Chromatin Immunoprecipitation Analysis

Kromatinekstraksjon fra frosset kimært levervev for analyse av kromatinimmunoutfelling

Crosslinking Chromatin Immunoprecipitation (X-ChIP) is a widely used technique to assess levels of histone marks and occupancy of transcription factors on ...

Tissue Collection and RNA Extraction from the Human Osteoarthritic Knee Joint

Vevsinnsamling og RNA-ekstraksjon fra den humane osteoarthritic kneleddet

Osteoarthritis (OA) is a chronic and degenerative joint disease most often affecting the knee. As there is currently no cure, total knee arthroplasty ...

Extraction, Labeling, and Purification of Lineage-Specific Cells from Human Antral Follicles

Ekstraksjon, merking og rensing av avstamningsspesifikke celler fra humane antralfollikler

The activation, growth, development, and maturation of oocytes is a complex process that is coordinated not just between multiple cell types of the ovary ...