Name: extraction and analysis of cortisol from human and monkey hair
Uploaded: 2014-01-24T08:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Extraction and Analysis of Cortisol from Human and Monkey Hair at JoVE.com

Vi tackar Kymberlee O&#39;Brien, Celia Moore, och Edward Tronick (Psykologiska institutionen, University of Massachusetts, Boston) för att tillhandahålla de mänskliga hår prover som analyserats i denna studie, och Stephen Suomi och Amanda Dettmer (Laboratoriet för jämförande etologi, NICHD) för tillhandahålla Rhesusapa hårprover. Initial utveckling och fortsatt användning av denna metod har fått stöd av NIH RR11122 till MAN

1. Provtagning och förvaring <ol><li> Människohår <ol><li> Säkra hela längden av hår som ska provtas (upp till en penna-bredd i diameter) med ett gummiband eller klippet. Klipp håret så nära hårbotten som möjligt (se till att inte nick huden) med en ren sax. Obs: Standardprovtagningsområde är den bakre vertex av skallen. </li><li> Vissa forskare har rapporterat en nedgång i mänskliga hår CORT nivåer med avstånd från hårbotten 6, vilket kan bero på washout från upprepad exponering för ...

<ol>
	<li>Selye, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+and+the+general+adaptation+syndrome.">Stress and the general adaptation syndrome.</a> Br. Med. J. 1 (4667), 1383-1392 (1950).</li><li>Meyer, J. S., Novak, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minireview:+Hair+cortisol:+A+novel+biomarker+of+hypothalamic-+pituitary-adrenocortical+activity.">Minireview: Hair cortisol: A novel biomarker of hypothalamic- pituitary-adrenocortical activity.</a> Endocrinology. 153, 4120-4127 (2012).</li><li>Tiefenbacher, S., Novak, M. A., Lutz, C. K., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+physiology+and+neurochemistry+of+self-injurious+behavior:+A+nonhuman+primate+model.">The physiology and neurochemistry of self-injurious behavior: A nonhuman primate model.</a> Front. Biosci. 10, 1-11 (2005).</li><li>Davenport, M. D., Tiefenbacher, S., Lutz, C. K., Novak, M. A., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+endogenous+cortisol+concentrations+in+the+hair+of+rhesus+macaques.">Analysis of endogenous cortisol concentrations in the hair of rhesus macaques.</a> Gen. Comp. Endocrinol. 147, 255-261 (2006).</li><li>Davenport, M. D., Lutz, C. K., Tiefenbacher, S., Novak, M. A., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rhesus+monkey+model+of+self+injury:+Effects+of+relocation+stress+on+behavior+and+neuroendocrine+function.">A rhesus monkey model of self injury: Effects of relocation stress on behavior and neuroendocrine function.</a> Biol. Psychiatry. 63, 990-996 (2008).</li><li>Kirschbaum, C., Tietze, A., Skoluda, N., Dettenborn, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+as+a+retrospective+calendar+of+cortisol+production+-+Increased+cortisol+incorporation+into+hair+in+the+third+trimester+of+pregnancy.">Hair as a retrospective calendar of cortisol production - Increased cortisol incorporation into hair in the third trimester of pregnancy.</a> Psychoneuroendocrinology. 34, 32-37 (2009).</li><li>Hamel, A. F., Meyer, J. S., Henchey, E., Dettmer, A. M., Suomi, S. J., Novak, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+shampoo+and+water+washing+on+hair+cortisol+concentrations.">Effects of shampoo and water washing on hair cortisol concentrations.</a> Clin. Chim. Acta. 412, 382-385 (2011).</li><li>Manenschijn, L., Koper, J. W., Lamberts, S. W., van Rossum, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+method+to+measure+long+term+cortisol+levels.">Evaluation of a method to measure long term cortisol levels.</a> Steroids. 76, 1032-1036 (2011).</li><li>Thomson, S., Koren, G., Fraser, L. A., Rieder, M., Friedman, T. C., Van Uum, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+analysis+provides+a+historical+record+of+cortisol+levels+in+Cushing&#8217;s+syndrome.">Hair analysis provides a historical record of cortisol levels in Cushing&#8217;s syndrome.</a> Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes. 118, 133-138 (2010).</li><li>LeBeau, M. A., Montgomery, M. A., Brewer, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+variations+in+growth+rate+and+sample+collection+on+interpreting+results+of+segmental+analyses+of+hair.">The role of variations in growth rate and sample collection on interpreting results of segmental analyses of hair.</a> Forensic Sci. Int. 210, 110-116 (2011).</li><li>Dolnick, E. H., Montagna, W., Dobson, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variability+of+hair+growth+in+Macaca+mulatta.">Variability of hair growth in Macaca mulatta.</a> Adv. Biol. Skin. IX, 121-128 (1969).</li><li>Sauv&#233;, B., Koren, G., Walsh, G., Uum Tokmakejian, S. V. a. n., H, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+cortisol+in+human+hair+as+a+biomarker+of+systemic+exposure.">Measurement of cortisol in human hair as a biomarker of systemic exposure.</a> Clin. Invest. Med. 30, 183-191 (2007).</li><li>Gow, R., Thomson, S., Rieder, M., Van Uum, S., Koren, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+assessment+of+cortisol+analysis+in+hair+and+its+clinical+applications.">An assessment of cortisol analysis in hair and its clinical applications.</a> Forensic Sci. Int. 196, 32-37 (2010).</li><li>Bechsh&#248;ft, T. &. #. 2. 1. 6. ;., Sonne, C., Dietz, R., Born, E. W., Novak, M. A., Henchey, E., Meyer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortisol+levels+in+hair+of+East+Greenland+polar+bears.">Cortisol levels in hair of East Greenland polar bears.</a> Sci. Total Environ. 409, 831-834 (2011).</li><li>Cooper, G. A. A., Kronstrand, R., Kintz, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Society+of+Hair+Testing+guidelines+for+drug+testing+in+hair.">Society of Hair Testing guidelines for drug testing in hair.</a> Forensic Sci. Int. 218, 20-28 (2012).</li><li>Ito, N., Ito, T., Kromminga, A., Bettermann, A., Takigawa, M., Kees, F., Straub, R. H., Paus, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+hair+follicles+display+a+functional+equivalent+of+the+hypothalamic-pituitary-adrenal+(HPA)+axis+and+synthesize+cortisol.">Human hair follicles display a functional equivalent of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis and synthesize cortisol.</a> FASEB J. 19, 1332-1334 (2005).</li><li>Russell, E., Koren, G., Rieder, M., Van Uum, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+cortisol+as+a+biological+marker+of+chronic+stress:+Current+status,+future+directions+and+unanswered+questions.">Hair cortisol as a biological marker of chronic stress: Current status, future directions and unanswered questions.</a> Psychoneuroendocrinology. 37, 589-601 (2012).</li><li>Stalder, T., Kirschbaum, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+cortisol+in+hair+-+State+of+the+art+and+future+directions.">Analysis of cortisol in hair - State of the art and future directions.</a> Brain Behav. Immun. 26, 1019-1029 (2012).</li><li>Staufenbiel, S. M., Penninx, B. W., Spijker, A. T., Elzinga, B. M., van Rossum, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+cortisol,+stress+exposure,+and+mental+health+in+humans:+A+systematic+review.">Hair cortisol, stress exposure, and mental health in humans: A systematic review.</a> Psychoneuroendocrinology. 38, 1220-1235 (2013).</li></ol>

Håret CORT förfarande som beskrivs ovan är enkel att utföra, är relativt billigt, använder sig av lättillgängliga kemikalier, reagenser och material, och kräver utrustning som, med ett undantag, kommer sannolikt att vara närvarande i en typisk analyslaboratorium. Undantaget är en malningsanordning, såsom en kulkvarn eller mini-beadbeater. Vi noterar att vissa forskargrupper finhacka hår prover i små fragment ungefär 1 mm i längd 12, men baserat på våra observationer vi rekommenderar att utf?...

Mätning av CORT i plasma, saliv, eller ibland i urin eller avföring har använts som ett index på fysiologisk stress eftersom Selye upptäckt av rollen av HPA-axeln stress 1. Trots att ett stort antal artiklar har publicerats avseende HPA-aktivitet för att akut stressande situationer, har området hämmats av bristen på ett enkelt och tillförlitligt index för kronisk fysiologisk stress. Detta problem uppstår eftersom plasma och saliv både avkastning &quot;point&quot; uppskattningar av HPA-aktivitet som är föremål för dygnsrytm variation och kan förväxlas med miljöstörningar. Urin-och avföringsprov ger mätningar av CORT och / eller metabolit utsöndring som spänner över flera timmar upp till en hel dag i vissa fall. Insamling av flera prover som använder någon av dessa matriser kan ge en grov sammansatt index av CORT nivåer över tiden, men ingen av dessa metoder ger en verkligt långsiktig index på HPA-aktivitet och lyhördhet detta SYstem till kroniska stressfaktorer. Mätning CORT i håret har börjat fylla denna viktiga behov i stresslitteraturen. Inledande studier av flera laboratorier påvisat CORT i människohår, men har man inte undersökt huruvida håret CORT nivåerna förändras som en funktion av spänning 2. Eftersom vårt laboratorium har varit intresserad i många år i regleringen av den rhesusapa HPA-axeln av olika sociala och beteendemässiga faktorer 3, vi ut för att etablera och validera metoder för extraktion och analys av rhesusapa hår 4. Baserat på antagandet att blodburen CORT långsamt och kontinuerligt införlivas växande hår, syftet med den nya metoden var att använda nivåerna av hår-derived CORT som ett integrerat index på HPA-aktivitet under perioder av veckor till månader. Flera metodologiska utmaningar påträffades i att utveckla det nuvarande protokollet. Först hade tidigare studier visat att små mängder of cirkulerande CORT utsöndras i svett och talg och därför kunde belägga utsidan av hårstrået 2. För att eliminera denna potential förväxla, utvecklade vi en mild tvättförfarande som verkar för att ta bort yttre CORT samtidigt ha minimal inverkan på CORT närvarande inom det växande hårstrået. Sålunda apa hår utsattes för detta förfarande (dvs. två 3-min tvättningar med isopropanol) förlorade ca 7-8% av den totala hår CORT innehåll, och en tredje tvätt avlägsnas mindre än 1% mer steroid från provet 4. Det verkar finnas fler externa CORT i människohår, eftersom samma förfarande bort i genomsnitt 27% totala CORT innehåll från proverna (K. Rosenberg och J. Meyer, opublicerade). Liksom apa hår emellertid ett ytterligare tvätt innehöll mycket mindre CORT (ca 7%) än de första två tvättarna. Därför resultat från både apa och människohår stöder påståendet att de flesta (om inte alla) extern CORT kan tas bort samtidigt som en stor fracning av CORT på den inre hår matrisen. För det andra, våra pilotstudier visade även att slip håret före extraktion signifikant ökad CORT återhämtning från provet, troligen genom att bryta upp den komplexa proteinartad matris av hårstrået samt öka den tillgängliga ytan för lösningsmedelspenetration. Två olika malningsmetoder har utvecklats, var och en med fördelar och nackdelar. Metod 1, som använder en kulkvarn, har fördelen av att producera den finaste pulver. Emellertid är en kulkvarn en relativt dyr utrustning produkten och, om den används med standardmalningsburkar och kulor, är det i stånd att mala endast två prover samtidigt. Små prover är också svåra att bearbeta med hjälp av en kulkvarn med standardslip burkar. Metod 2, som använder en beadbeater, är mindre effektiv i sin slipförmåga. Som ett resultat är genomsnittliga CORT återhämtning cirka 10% lägre med denna metod jämfört med kulkvarn (opublicerade data). Å andra sidan, en beadbeaterär betydligt billigare än en boll kvarn, kan 16-24 prover slipas på en gång, beroende på modell, och den metod som lämpar sig väl för små prover. På grund av det ovan nämnda differential återhämtning, är det lämpligt att använda samma slipmetod för alla prover inom en viss studie. När hårprover har behandlats, de extraheras med metanol och CORT i extrakten analyseras med hjälp av en känslig och specifik kommersiell EIA kit ursprungligen för att mäta saliv CORT. Utvinning och analysförfaranden validerades delvis genom att visa att seriespädningar av extrakt från apa hår prover gav MKB avläsningar som nära jämförde avläsningar erhållna från autentiska CORT standarder. Vi visade då att håret CORT (förutom plasma och saliv CORT) var känslig för de stora livsstressfaktor för ett administrativt uppdrag omlokalisering av aporna till nya bostäder kvartal 4,5. Den pret papper ger en detaljerad redogörelse för de metoder som används rutinmässigt i vårt laboratorium för att bearbeta hårprover mänskliga och apa och att utvinna och analysera CORT från sådana prover.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="798">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">HPLC-grade isopropanol</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">A451</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">HPLC-grade methanol</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">A452</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Salivary cortisol assay kits</td>
			<td style="width:116px;">Salimetrics</td>
			<td style="width:119px;">1-3002</td>
			<td>See manufacturer&#39;s kit insert for information on assay sensitivity and specificity</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">15-ml polypropylene screw-cap centrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Max Scientific</td>
			<td>10-9151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">1.5-ml Safe-Lock microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">05-402-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">2.0-ml Safe-Lock microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">05-402-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2.0-ml XXTuff reinforced microvials</td>
			<td style="width:116px;">BioSpec</td>
			<td>330TX</td>
			<td>Use with mini-beadbeater</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3.2-mm chrome-steel beads</td>
			<td style="width:116px;">BioSpec</td>
			<td>11079132c</td>
			<td>Use with mini-beadbeater</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">10-ml stainless steel grinding jars</td>
			<td style="width:116px;">Retsch</td>
			<td style="width:119px;">02.462.0061</td>
			<td>Use with mixer mill</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">12-mm stainless steel grinding balls</td>
			<td style="width:116px;">Retsch</td>
			<td style="width:119px;">05.368.0037</td>
			<td>Use with mixer mill</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant activated carbon cartridge</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>DTK120R</td>
			<td>Use with Savant chemical trap</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;"></td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;"></td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Name of Equipment</td>
			<td style="width:116px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Rotator for 15-ml centrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>S02135</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Rotator for microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>NC9854190&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Benchtop centrifuge for microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>13-100-675</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">MM 200 mixer mill</td>
			<td style="width:116px;">Retsch</td>
			<td style="width:119px;">20.746.0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mini-Beadbeater 16&#160;</td>
			<td style="width:116px;">BioSpec</td>
			<td>607</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant DNA Speedvac</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>DNA120-115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant refrigerated vapor trap</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>RVT400-115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Savant chemical trap</td>
			<td style="width:116px;">Fisher</td>
			<td>SCT120</td>
			<td>Alternative to refrigerated vapor trap</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microplate reader</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microplate washer</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microplate mixer</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:316px;">Multichannel pipetter</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Analytical balance</td>
			<td style="width:116px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

extraction and analysis of cortisol from human and monkey hair

Stresshormonet kortisol (CORT) långsamt införlivas i den växande hårstrået av människor, icke-mänskliga primater och andra däggdjur. Vi utvecklas och valideras en metod för CORT extraktion och analys från rhesusapa hår och därefter anpassat metoden för användning med människans hårbotten hår. I motsats till CORT &quot;punktprov&quot; som erhållits från plasma eller saliv, hår CORT ger ett integrerat mått på hypotalamus-hypofys-binjurebark (HPA) systemaktivitet, och därmed fysiologisk stress, under tiden för hormon inkorporering. Eftersom människans hårbotten hår växer på en genomsnittlig hastighet av 1 cm / månad, CORT halter som erhållits från hår segment flera cm i längd kan eventuellt fungera som en biomarkör för stress som upplevs under ett antal månader. I vår metod är varje hårprov tvättas först två gånger i isopropanol för att avlägsna eventuellt CORT från utsidan av hårstrået som har deponerats av svett eller talg. Efter torkningProvet maldes till ett fint pulver för att bryta upp hårets proteinmatris och öka ytarean för extraktion. CORT från det inre av hårskaftet extraheras i metanol, metanolen indunstades, och extraktet rekonstitueras i analysbuffert. Extraherad CORT, tillsammans med standarder och kvalitetskontroller, analyseras sedan med hjälp av en känslig och specifik kommersiellt tillgänglig enzymimmunanalys (EIA)-kit. Avläsning från MKB omvandlas till pg CORT per mg pulveriserad hår vikt. Denna metod har använts i vårt laboratorium för att analysera hår CORT hos människor, flera arter av makak-apor, silkesapor, hundar och isbjörnar. Många studier både från vårt labb och från andra forskargrupper har visat på bred tillämpning av hår CORT för bedömning av kronisk stress exponering i naturliga såväl som laboratoriemiljö.

Figur 1 visar utskriften från ett representativt urval av människohår prover (vuxna manliga och kvinnliga försökspersoner) bearbetats med metod 2 slipning och utvinning. Dataprogram användes för att generera den data som matas ut och för att passa en 4-parameters sigmoidal kurva till Cort standarderna (Figur 2). De mellan-och CV från denna platta varierade från 0,01 till 5,73% med en genomsnittlig intra-assay CV på 1,34%. Den inter-assay CV bestäms med hjälp av QC-värden f...

Watch this Scientific Journal Video about Extraction and Analysis of Cortisol from Human and Monkey Hair at JoVE.com

Extraction and Analysis of Cortisol from Human and Monkey Hair

Extraktion och analys av kortisol från Human och Monkey Hair

Kortisol (CORT) ackumuleras i den växande hårstrået av människor och icke-mänskliga primater. Vi beskriver metoder för att extrahera och analysera hår CORT med hög precision och känslighet. Mätning av hår CORT är särskilt väl lämpad för att bedöma kronisk stress under perioder av veckor till månader.

The stress hormone cortisol (CORT) is slowly incorporated into the growing hair shaft of humans, nonhuman primates, and other mammals. We developed and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Extraction of High Molecular Weight Genomic DNA from Soils and Sediments

Utvinning av hög molekylvikt Genomiskt DNA från mark och sediment

The soil microbiome is a vast and relatively unexplored reservoir of genomic diversity and metabolic innovation that is intimately associated with ...

DNA Extraction from Paraffin Embedded Material for Genetic and Epigenetic Analyses

DNA-extraktion från paraffininbäddad Material för genetiska och epigenetiska Analyser

Disease development and progression are characterized by frequent genetic and epigenetic aberrations including chromosomal rearrangements, copy number ...

A Noninvasive Hair Sampling Technique to Obtain High Quality DNA from Elusive Small Mammals

En icke-invasiv Hair provtagningsteknik för att med hög kvalitet DNA från Elusive små däggdjur

Noninvasive genetic sampling approaches are becoming increasingly important to study wildlife populations. A number of studies have reported using ...

Rapid Genetic Analysis of Epithelial-Mesenchymal Signaling During Hair Regeneration

Snabb genetisk analys av Epithelial-mesenkymala Signaling Under Hair Regeneration

Hair follicle morphogenesis, a complex process requiring interaction between epithelia-derived keratinocytes and the underlying mesenchyme, is an ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraktion och analys i<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Extraction of Venom and Venom Gland Microdissections from Spiders for Proteomic and Transcriptomic Analyses

Utvinning av Venom och Venom Gland Microdissections från Spiders för proteomik och Transcriptomic Analyser

Venoms are chemically complex secretions typically comprising numerous proteins and peptides with varied physiological activities. Functional ...

Complete Workflow for Analysis of Histone Post-translational Modifications Using Bottom-up Mass Spectrometry: From Histone Extraction to Data Analysis

Komplett arbetsflöde för analys av Histon posttranslationella modifieringar med botten upp masspektrometri: Från Histon Extraction till dataanalys

Nucleosomes are the smallest structural unit of chromatin, composed of 147 base pairs of DNA wrapped around an octamer of histone proteins. Histone ...

Chromatin Extraction from Frozen Chimeric Liver Tissue for Chromatin Immunoprecipitation Analysis

Kromatinextraktion från fryst chimär levervävnad för analys av kromatinimmunoprecipitation

Crosslinking Chromatin Immunoprecipitation (X-ChIP) is a widely used technique to assess levels of histone marks and occupancy of transcription factors on ...

Tissue Collection and RNA Extraction from the Human Osteoarthritic Knee Joint

Vävnadsuppsamling och RNA-extraktion från den mänskliga osteoarthritiska knäleden

Osteoarthritis (OA) is a chronic and degenerative joint disease most often affecting the knee. As there is currently no cure, total knee arthroplasty ...

Extraction, Labeling, and Purification of Lineage-Specific Cells from Human Antral Follicles

Extraktion, märkning och rening av härstamningsspecifika celler från humana antrala folliklar

The activation, growth, development, and maturation of oocytes is a complex process that is coordinated not just between multiple cell types of the ovary ...