Name: ascending aortic constriction in rats for creation of pressure overload cardiac hypertrophy model
Uploaded: 2014-06-29T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model at JoVE.com

Gli autori riconoscono Dipartimento di Biotecnologie, Governo dell&#39;India per il sostegno finanziario di questo progetto. Ajith Kumar GS è stato sostenuto con borsa di ricerca senior Consiglio di ricerca scientifica e industriale, Governo dell&#39;India e Binil Raj con assegno di ricerca senior Consiglio indiano di ricerca medica, Governo dell&#39;India.

Gli esperimenti sugli animali sono stati eseguiti dopo aver ottenuto l&#39;approvazione del Comitato Etico Animal Istituzionale. Ratti Wistar sono stati alloggiati in un buio 12 ore al ciclo di luce, temperatura costante (24 ± 2 ° C), con cibo e acqua ad libitum (secondo le linee guida CPCSEA). 1) Assistenza pre-operatoria e anestesia <ol><li> Tenere rat (circa 200 g di peso corporeo), sotto antibiotico ombrello 24 ore prima dell&#39;intervento chirurgico con la somministrazione di amoxi...

<ol>
	<li>Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+animal+models+of+heart+failure:+development+of+novel+therapies,+past+and+present.">Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present.</a> Circ Heart Fail. 2, 138-144 (2009).</li><li>Weinberg, E. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin-converting+enzyme+inhibition+prolongs+survival+and+modifies+the+transition+to+heart+failure+in+rats+with+pressure+overload+hypertrophy+due+to+ascending+aortic+stenosis.">Angiotensin-converting enzyme inhibition prolongs survival and modifies the transition to heart failure in rats with pressure overload hypertrophy due to ascending aortic stenosis.</a> Circulation. 90, 1410-1422 (1994).</li><li>Schunkert, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+rat+cardiac+angiotensin+converting+enzyme+activity+and+mRNA+expression+in+pressure+overload+left+ventricular+hypertrophy.+Effects+on+coronary+resistance,+contractility,+and+relaxation.">Increased rat cardiac angiotensin converting enzyme activity and mRNA expression in pressure overload left ventricular hypertrophy. Effects on coronary resistance, contractility, and relaxation.</a> J Clin Invest. 86, 1913-1920 (1990).</li><li>Hasenfuss, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+human+cardiovascular+disease,+heart+failure+and+hypertrophy.">Animal models of human cardiovascular disease, heart failure and hypertrophy.</a> Cardiovasc Res. 39, 60-76 (1998).</li><li>Litwin, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serial+echocardiographic-Doppler+assessment+of+left+ventricular+geometry+and+function+in+rats+with+pressure-overload+hypertrophy.+Chronic+angiotensin-converting+enzyme+inhibition+attenuates+the+transition+to+heart+failure.">Serial echocardiographic-Doppler assessment of left ventricular geometry and function in rats with pressure-overload hypertrophy. Chronic angiotensin-converting enzyme inhibition attenuates the transition to heart failure.</a> Circulation. 91, 2642-2654 (1995).</li><li>Miyamoto, M. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenoviral+gene+transfer+of+SERCA2a+improves+left-ventricular+function+in+aortic-banded+rats+in+transition+to+heart+failure.">Adenoviral gene transfer of SERCA2a improves left-ventricular function in aortic-banded rats in transition to heart failure.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 97, 793-798 (2000).</li><li>Kagaya, Y., Hajjar, R. J., Gwathmey, J. K., Barry, W. H., Lorell, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+angiotensin-converting+enzyme+inhibition+with+fosinopril+improves+depressed+responsiveness+to+Ca2++in+myocytes+from+aortic-banded+rats.">Long-term angiotensin-converting enzyme inhibition with fosinopril improves depressed responsiveness to Ca2+ in myocytes from aortic-banded rats.</a> Circulation. 94, 2915-2922 (1996).</li><li>Del Monte, F., Butler, K., Boecker, W., Gwathmey, J. K., Hajjar, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+technique+of+aortic+banding+followed+by+gene+transfer+during+hypertrophy+and+heart+failure.">Novel technique of aortic banding followed by gene transfer during hypertrophy and heart failure.</a> Physiol Genomics. 9, 49-56 (2002).</li><li>Turcani, M., Rupp, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+failure+development+in+rats+with+ascending+aortic+constriction+and+angiotensin-converting+enzyme+inhibition.">Heart failure development in rats with ascending aortic constriction and angiotensin-converting enzyme inhibition.</a> Br J Pharmacol. 130, 1671-1677 (2000).</li><li>Kerem, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+endothelial+dysfunction+in+congestive+heart+failure:+role+of+impaired+Ca2++signaling+and+cytoskeletal+reorganization.">Lung endothelial dysfunction in congestive heart failure: role of impaired Ca2+ signaling and cytoskeletal reorganization.</a> Circ Res. 106, 1103-1116 (2010).</li><li>Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transverse+aortic+constriction+in+mice.">Transverse aortic constriction in mice.</a> J Vis Exp. (38), (2010).</li></ol>

Ci sono diversi modelli chirurgici per l&#39;induzione di sovraccarico di pressione e ipertrofia cardiaca e scompenso cardiaco. In piccoli animali, Lorell e colleghi hanno sviluppato il modello che abbiamo descritto qui ed hanno segnalato la comparsa di ipertrofia cardiaca compensata 8 settimane dopo banding aortico 5. Alterazioni cardiache gradualmente progredire a uno stato scompensata e poi portare a insufficienza cardiaca. Il vantaggio principale di questo modello è la graduale insorgenza di aumento dell...

Modelli piccoli animali sono gli strumenti più preferite per lo studio dei cambiamenti cronici nello sviluppo di ipertrofia cardiaca e la sua progressione a insufficienza cardiaca. Modelli di insufficienza cardiaca con metodi chirurgici sono stati originariamente sviluppati in ratti in quanto questi animali sono più adatti per interventi chirurgici al torace aperto, ecocardiografia e la valutazione dei parametri emodinamici. Essi forniscono inoltre adeguate campioni post mortem di tessuti, cellule e gli studi a livello molecolare 1. Costrizione dell&#39;aorta ascendente è uno dei modelli chirurgiche più comuni e di successo per la creazione di sovraccarico di pressione insufficienza cardiaca 2, 3. Questo modello è adatto per studiare gli eventi rimodellamento cellulare cellulari e sub e le proprietà contrattili del cuore durante la transizione da ipertrofia ad infarto 4. Un importante vantaggio di questo modello è la graduale insorgenza di sovraccarico di pressione sul cuore 5, &lt;/ Sup&gt; 6. Questo modello è clinicamente rilevante a causa della sua lenta ma costante progressione da ipertrofia cardiaca compensata a fase scompensata e infine alla fase insufficienza cardiaca. La durata per la progressione dell&#39;ipertrofia cardiaca per insufficienza cardiaca e cambiamenti fisiologici associati sono influenzati principalmente dal grado di stenosi prodotto 7. Ascendente costrizione aortica può essere eseguita in due modi, sia utilizzando suture o mediante l&#39;applicazione di clips metalliche 8, 9. Il principale vantaggio di utilizzare un clip metallico per costrizione aortica è che le procedure chirurgiche sono meno complicati. In questo metodo si deve individuare la sovra valvolare dell&#39;aorta ascendente e inserire la clip attorno l&#39;aorta per ottenere il livello desiderato di costrizione. Un divaricatore petto non è necessario in questa procedura. Banding aortico da sutura richiede manipolazioni più chirurgici per posizionare l&#39;ago calibro accanto alla aorta ascendente e sutura intorno aprodurre il livello desiderato di costrizione aortica. Quest&#39;ultima tecnica è più tempo rispetto all&#39;uso di clips metalliche per costrizione aortica. Il metodo descritto in questo video mostra la procedura chirurgica per crescente costrizione aortica in ratti che permette la creazione di pressione sovraccarico ventricolare sinistra ipertrofia modello.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="742">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Wistar rats</td>
			<td style="width:149px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:220px;">Maintained at ARF, RGCB</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Inhalation anaesthesia systems&#160;</td>
			<td style="width:149px;">VetEquip</td>
			<td style="width:119px;">AB19276</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Rodent ventilator</td>
			<td style="width:149px;">CWE Inc</td>
			<td style="width:119px;">SAR- 830/AP&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Rat tracheal cannula</td>
			<td style="width:149px;">CWE Inc</td>
			<td style="width:119px;">13-21032</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Ultrasound system</td>
			<td style="width:149px;">Philips</td>
			<td style="width:119px;">HD7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Ultrasound transducer</td>
			<td style="width:149px;">Philips</td>
			<td style="width:119px;">S 12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Titanium clip (small)</td>
			<td style="width:149px;">Horizon</td>
			<td style="width:119px;">1204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Clip applicator</td>
			<td style="width:149px;">Weck</td>
			<td style="width:119px;">137081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Electric shaver</td>
			<td style="width:149px;">Vinverth</td>
			<td style="width:119px;">VBT0817</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">BP blade (size:11)</td>
			<td style="width:149px;">Surgeon</td>
			<td style="width:119px;">REF10111</td>
			<td>Preparation of surgical site</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Tramadol</td>
			<td style="width:149px;">Orchid health care</td>
			<td style="width:119px;">OCH043</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Amoxycillin Hydrochloride</td>
			<td style="width:149px;">Ranbaxy</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:149px;">Piramal health care</td>
			<td style="width:119px;">A23M10A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Syringes</td>
			<td style="width:149px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">2015-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">4-0 braided silk</td>
			<td style="width:149px;">Diamond</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">3-0 prolene</td>
			<td style="width:149px;">Johnson&#38;Johnson</td>
			<td style="width:119px;">NW018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Surgical tape</td>
			<td style="width:149px;">Romsons</td>
			<td style="width:119px;">SH 6301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Povidone iodine</td>
			<td style="width:149px;">Win Medicare</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Temp. controlled heating pad</td>
			<td style="width:149px;">Flamingo</td>
			<td style="width:119px;">HC1003</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ascending aortic constriction in rats for creation of pressure overload cardiac hypertrophy model

Crescente costrizione aortica è il modello chirurgica più comune e di successo per la creazione di sovraccarico di pressione indotta ipertrofia cardiaca e insufficienza cardiaca. Qui, descriviamo una procedura chirurgica dettagliata per la creazione sovraccarico di pressione e ipertrofia cardiaca in ratti mediante costrizione dell&#39;aorta ascendente con una piccola clip metallica. Dopo l&#39;anestesia, la trachea è intubato inserendo una cannula attraverso un&#39;incisione a metà strada tra due anelli di cartilagine trachea. Poi una incisione cutanea viene effettuata a livello del secondo spazio intercostale sulla parete toracica sinistra e strati muscolari vengono cancellati per identificare la parte ascendente dell&#39;aorta. L&#39;aorta ascendente viene costretto a 50-60% del suo diametro originale mediante applicazione di una piccola clip titanio dimensioni. A seguito di costrizione aortica, la seconda e terza costola vengono approssimate con punti di sutura prolene. La cannula tracheale viene rimossa la respirazione spontanea una volta è stata ristabilita. L&#39;animale è permesso di recuperare on per il rilievo di riscaldamento abbassando gradualmente anestesia. L&#39;intensità del sovraccarico di pressione creata dalla costrizione dell&#39;aorta ascendente è determinato registrando il gradiente di pressione utilizzando transtoracica bidimensionale Doppler-ecocardiografia. Nel complesso questo protocollo è utile per studiare gli eventi di rimodellamento e le proprietà contrattili del cuore durante la graduale insorgenza e la progressione da compensata ipertrofia cardiaca allo stadio di insufficienza cardiaca.

Nei nostri esperimenti siamo in grado di raggiungere oltre il 80% i tassi di sopravvivenza. L&#39;efficacia di costrizione aortica è stata confermata eseguendo ecocardiografia Doppler. Ratti (n = 6) con un gradiente di pressione di circa 60 mm di Hg nel sito ristretta aortica sono stati osservati per 8 settimane e sacrificato per analizzare lo sviluppo di ipertrofia cardiaca (Figura 1). Dopo 8 settimane di valutazione ecocardiografica post-chirurgia ha rivelato un significativo aumento dei parametri ve...

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Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model

Crescente aortica Costrizione in ratti per la creazione di sovraccarico di pressione cardiaca Ipertrofia Modello

Descriviamo una procedura graduale per la creazione di sovraccarico di pressione e ipertrofia ventricolare sinistra in ratti Wistar dalla costrizione dell&#39;aorta ascendente con una piccola clip metallica. Questo modello è ampiamente utilizzato per studiare i cambiamenti di rimodellamento durante l&#39;ipertrofia cardiaca e per identificare e valutare le strategie per la regressione di tali cambiamenti.

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart ...

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