Name: a novel light damage paradigm for use in retinal regeneration studies in adult zebrafish
Uploaded: 2013-10-24T15:50:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Novel Light Damage Paradigm for Use in Retinal Regeneration Studies in Adult Zebrafish at JoVE.com

De auteurs willen graag Xixia Luo bedanken voor uitstekende vis veeteelt en technische ondersteuning. Dit werk werd gefinancierd door de National Institutes of Health subsidies R21EY019401 (RT) en P30EY04068 (RT), en start-up middelen aan RT, waaronder een onbeperkte subsidie ​​van onderzoek ter voorkoming van Blindheid aan de Wayne State University, Afdeling Oogheelkunde. JT werd ondersteund door een Thomas C. Rumble Fellowship verstrekt door de Wayne State University Graduate School.

Alle in dit protocol beschreven procedures werden goedgekeurd door de commissie gebruik van dieren aan de Wayne State University School of Medicine. 1. Dark Aanpassing <ol><li> Transfer ~ 10 volwassen albino of gepigmenteerde vissen uit de normale huisvestingssysteem in een donkere kast. Indien beschikbaar, gebruik dan een donkere behuizing die is ingebouwd in de zebravis behuizing module, die het mogelijk maakt voor de normale waterstroom door de tank. (Indien een dergelijk syste...

Hier laten we zien dat het combineren van een korte blootstelling aan UV met een continue blootstelling aan fel licht resulteert in wijdverspreide photoreceptor verlies en een robuuste regeneratie respons. Vergeleken met de individuele LIRD methoden, deze gecombineerde werkwijze is ook de meest effectieve protocol zowel staafjes en kegeltjes beschadigen beide helften van de retina. Belangrijk is dat deze behandeling effectief in gepigmenteerde dieren en albinodieren. Hoewel wij leve...

Licht-geïnduceerde retinale degeneratie (LIRD) wordt gebruikt op zowel knaagdieren en zebravis schade staafjes en kegeltjes fotoreceptoren. Bij volwassen zebravissen, fotoreceptor degeneratie triggers Müller gliacellen opnieuw in te voeren de celcyclus en produceren voorbijgaande versterkende voorlopers. Deze voorlopers blijven prolifereren als ze migreren naar het beschadigde gebied, waar zij uiteindelijk tot nieuwe fotoreceptoren. Momenteel zijn er twee algemeen gebruikte LIRD paradigma&#39;s, die elk resulteert in verschillende graden van fotoreceptor verlies en overeenkomstige verschillen in de regeneratie reactie. Naarmate meer genetische en farmacologische hulpmiddelen zijn beschikbaar om de rol van individuele genen van belang tijdens de regeneratie testen, is er behoefte aan een robuuste LIRD paradigma ontwikkelen. Hier een LIRD protocol beschrijven we dat resulteert in wijdverspreide en consistente verlies van zowel de staafjes en kegeltjes fotoreceptoren waarin we het gebruik van twee eerder vastgestelde LIRD technieken gecombineerd. BovendienDit protocol kan worden uitgebreid voor gebruik in gepigmenteerde dieren, die de noodzaak om transgene lijnen van rente te handhaven op de albino achtergrond voor LIRD studies elimineert.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="586">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">UV light source</td>
			<td style="width:215px;">Leica</td>
			<td style="width:155px;">EL600</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glass Petri dish (150 x 20 mm)</td>
			<td>Sigma-Aldrich/Pyrex</td>
			<td>CLS3160152BO</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">250 ml glass beaker</td>
			<td>Sigma-Aldrich/Pyrex</td>
			<td>CLS1000250</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">4 L glass beaker</td>
			<td>Sigma-Aldrich/Pyrex</td>
			<td>CLS10004L</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Aluminum foil</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>01-213-105</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">250 W halogen lamps</td>
			<td>Workforce</td>
			<td>265-669</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1.8 L clear acrylic tanks</td>
			<td>Aquaneering</td>
			<td>ZT180T</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1.8 L clear acrylic tank lids</td>
			<td>Aquaneering</td>
			<td>ZT180LCL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fan</td>
			<td>Honeywell</td>
			<td>HT-900</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Aerator</td>
			<td>Tetra</td>
			<td>77853-900</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Thermometer</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td>YO-08008-58</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bent forceps (5/45)</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>504155</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a novel light damage paradigm for use in retinal regeneration studies in adult zebrafish

Licht-geïnduceerde retinale degeneratie (LIRD) wordt gebruikt op zowel knaagdieren en zebravis schade staafjes en kegeltjes fotoreceptoren. Bij volwassen zebravissen, fotoreceptor degeneratie triggers Müller gliacellen opnieuw in te voeren de celcyclus en produceren voorbijgaande versterkende voorlopers. Deze voorlopers blijven prolifereren als ze migreren naar het beschadigde gebied, waar zij uiteindelijk tot nieuwe fotoreceptoren. Momenteel zijn er twee algemeen gebruikte LIRD paradigma&#39;s, die elk resulteert in verschillende graden van fotoreceptor verlies en overeenkomstige verschillen in de regeneratie reactie. Naarmate meer genetische en farmacologische hulpmiddelen zijn beschikbaar om de rol van individuele genen van belang tijdens de regeneratie testen, is er behoefte aan een robuuste LIRD paradigma ontwikkelen. Hier een LIRD protocol beschrijven we dat resulteert in wijdverspreide en consistente verlies van zowel de staafjes en kegeltjes fotoreceptoren waarin we het gebruik van twee eerder vastgestelde LIRD technieken gecombineerd. BovendienDit protocol kan worden uitgebreid voor gebruik in gepigmenteerde dieren, die de noodzaak om transgene lijnen van rente te handhaven op de albino achtergrond voor LIRD studies elimineert.

De hiervoor beschreven licht behandelprotocol werd vergeleken aan elke individuele wijze van LIRD. In donkere behandelde volwassen albino dieren (figuren 3-5), de individuele licht behandelingen resulteerden in een significant verlies van staaf (figuur 3) en de conus (figuur 4) fotoreceptoren. Zowel individuele behandelingen hoofdzakelijk beschadigd fotoreceptoren in de dorsale helft van het netvlies, waardoor de ventrale netvlies relatief beschermd tegen licht...

Watch this Scientific Journal Video about A Novel Light Damage Paradigm for Use in Retinal Regeneration Studies in Adult Zebrafish at JoVE.com

A Novel Light Damage Paradigm for Use in Retinal Regeneration Studies in Adult Zebrafish

Meerdere lichte schade protocollen zijn beschreven schade fotoreceptoren en dientengevolge een netvlies regeneratie respons bij volwassen zebravissen induceren. Dit protocol beschrijft een verbeterde werkwijze die kan worden gebruikt in gepigmenteerde dieren en beschadigt de meeste staafjes en kegeltjes fotoreceptoren over de gehele retina.

A Novel Lichte Schade Paradigm voor gebruik in retinale Regeneration Studies in Adult zebravis

Light-induced retinal degeneration (LIRD) is commonly used in both rodents and zebrafish to damage rod and cone photoreceptors. In adult zebrafish, ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Recording and Analysis of Circadian Rhythms in Running-wheel Activity in Rodents

Registratie en analyse van circadiane ritmen bij Running-wheel activiteit in knaagdieren

When rodents have free access to a running wheel in their home cage, voluntary use of this wheel will depend on the time of day1-5. Nocturnal rodents, ...

Retrograde Labeling of Retinal Ganglion Cells in Adult Zebrafish with Fluorescent Dyes

Retrograde Labeling van retinale ganglioncellen in Adult zebravis met fluorescente kleurstoffen

As retrograde labeling retinal ganglion cells (RGCs) can isolate RGCs somata from dying sites, it has become the gold standard for counting RGCs in RGCs ...

Stab Wound Injury of the Zebrafish Adult Telencephalon: A Method to Investigate Vertebrate Brain Neurogenesis and Regeneration

Steekwond Letsel van de zebravis Adult Telencephalon: Een methode om Onderzoek gewervelde Brain Neurogenese and Regeneration

Adult zebrafish have an amazing capacity to regenerate their central nervous system after injury. To investigate the cellular response and the molecular ...

The Use of Trace Eyeblink Classical Conditioning to Assess Hippocampal Dysfunction in a Rat Model of Fetal Alcohol Spectrum Disorders

Het gebruik van Trace Eyeblink klassieke conditionering te beoordelen Hippocampal dysfunctie in een Rat Model van Fetal Alcohol Spectrum Disorders

Neonatal rats were administered a relatively high concentration of ethyl alcohol (11.9% v/v) during postnatal days 4-9, a time when the fetal brain ...

Modeling Amyloid-&#946;42 Toxicity and Neurodegeneration in Adult Zebrafish Brain

Modeling Amyloid-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²42 Toxicity and Neurodegeneration in Adult Zebrafish Brain

Modelleren van Amyloid-β42 toxiciteit en neurodegeneratie in volwassen Zebrafish hersenen

Alzheimer's disease (AD) is a debilitating neurodegenerative disease in which accumulation of toxic amyloid-&#946;42 (A&#946;42) peptides leads to ...

M&#252;ller Glia Cell Activation in a Laser-induced Retinal Degeneration and Regeneration Model in Zebrafish

MÃƒÆ’Ã†'Ãƒâ€šÃ‚Â¼ller Glia Cell Activation in a Laser-induced Retinal Degeneration and Regeneration Model in Zebrafish

Müller Glia cel activatie in een Laser-geïnduceerde Retina degeneratie en regeneratie Model in de zebravis

A fascinating difference between teleost and mammals is the lifelong potential of the teleost retina for retinal neurogenesis and regeneration after ...

Preparing Fresh Retinal Slices from Adult Zebrafish for Ex Vivo Imaging Experiments

Preparing Fresh Retinal Slices from Adult Zebrafish for Ex Vivo Imaging Experiments

Voorbereiding verse retinale segmenten van volwassen Zebrafish voor Ex Vivo Imaging experimenten

The retina is a complex tissue that initiates and integrates the first steps of vision. Dysfunction of retinal cells is a hallmark of many blinding ...

Ablation of a Neuronal Population Using a Two-photon Laser and Its Assessment Using Calcium Imaging and Behavioral Recording in Zebrafish Larvae

Ablatie van een neuronale bevolking met behulp van een twee-foton Laser en haar beoordeling met Calcium Imaging en gedrags opname in Zebrafish larven

To identify the role of a subpopulation of neurons in behavior, it is essential to test the consequences of blocking its activity in living animals. Laser ...

A Novel In Vitro Model of Blast Traumatic Brain Injury

A Novel In Vitro Model of Blast Traumatic Brain Injury

Een roman In Vitro Model van traumatische hersenenverwonding Blast

Traumatic brain injury is a leading cause of death and disability in military and civilian populations. Blast traumatic brain injury results from the ...

An Emerging Target Paradigm to Evoke Fast Visuomotor Responses on Human Upper Limb Muscles

Een opkomende doel paradigma op te roepen snelle visuomotorische reacties op humane bovenste ledematen spieren

To reach towards a seen object, visual information has to be transformed into motor commands. Visual information such as the object&#8217;s color, shape, ...