Name: intralymphatic immunotherapy and vaccination in mice
Uploaded: 2014-02-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intralymphatic Immunotherapy and Vaccination in Mice at JoVE.com

Författarna är tacksamma för den experimentella hjälp med att utveckla metoden för intralymfatisk immunisering i möss från Iris Erdmann, Barbara von Beust, och Julia Maria Martínez-Gómez. Tack också till Maggy Arras och Nikola Cesarovic för att vi fick använda deras kirurgiska teater för denna videoproduktion.

1. Anestesi av möss <ol><li> Förbered anestetika genom att blanda ketamin (dissociativ bedövningsmedel) och xylazin (lugnande och smärtstillande) i saltlösning. Koncentrationerna av ketamin och xylazin i den slutliga lösningen är 12,5 och 2 mg / ml, respektive. </li><li> Injicera anestetika till mössen genom intraperitoneal administration med användning av en spruta med en 25 till 30 G nål. Använd 0,1 ml/10 g kroppsvikt. </li><li> Applicera en oftalmisk salva till mössens ögonen för att förhindra uttork...

<ol>
	<li>Johansen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+intralymphatic+injection+of+peptide+vaccines+enhances+immunogenicity.">Direct intralymphatic injection of peptide vaccines enhances immunogenicity.</a> Eur. J. Immunol. 35, 568-574 (2005).</li><li>Maloy, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intralymphatic+immunization+enhances+DNA+vaccination.">Intralymphatic immunization enhances DNA vaccination.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 98, 3299-3303 (2001).</li><li>Smith, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancing+DNA+vaccination+by+sequential+injection+of+lymph+nodes+with+plasmid+vectors+and+peptides.">Enhancing DNA vaccination by sequential injection of lymph nodes with plasmid vectors and peptides.</a> Vaccine. 27, 2603-2615 (2009).</li><li>Kreiter, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranodal+vaccination+with+naked+antigen-encoding+RNA+elicits+potent+prophylactic+and+therapeutic+antitumoral+immunity.">Intranodal vaccination with naked antigen-encoding RNA elicits potent prophylactic and therapeutic antitumoral immunity.</a> Cancer Res. 70, 9031-9040 (2010).</li><li>Johansen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antigen+kinetics+determines+immune+reactivity.">Antigen kinetics determines immune reactivity.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105, 5189-5194 (2008).</li><li>Smith, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymph+node-targeted+immunotherapy+mediates+potent+immunity+resulting+in+regression+of+isolated+or+metastatic+human+papillomavirus-transformed+tumors.">Lymph node-targeted immunotherapy mediates potent immunity resulting in regression of isolated or metastatic human papillomavirus-transformed tumors.</a> Clin. Cancer Res. 15, 6167-6176 (2009).</li><li>Johansen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toll-like+receptor+ligands+as+adjuvants+in+allergen-specific+immunotherapy.">Toll-like receptor ligands as adjuvants in allergen-specific immunotherapy.</a> Clin. Exp. Allergy. 35, 1591-1598 (2005).</li><li>Johansen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heat+denaturation,+a+simple+method+to+improve+the+immunotherapeutic+potential+of+allergens.">Heat denaturation, a simple method to improve the immunotherapeutic potential of allergens.</a> Eur. J. Immunol. 35, 3591-3598 (2005).</li><li>Martinez-Gomez, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intralymphatic+injections+as+a+new+administration+route+for+allergen-specific+immunotherapy.">Intralymphatic injections as a new administration route for allergen-specific immunotherapy.</a> Int. Arch. Allergy Immunol. 150, 59-65 (2009).</li><li>Martinez-Gomez, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+the+MHC+class+II+pathway+of+antigen+presentation+enhances+immunogenicity+and+safety+of+allergen+immunotherapy.">Targeting the MHC class II pathway of antigen presentation enhances immunogenicity and safety of allergen immunotherapy.</a> Allergy. 64, 172-178 (2009).</li><li>Mohanan, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Administration+routes+affect+the+quality+of+immune+responses:+A+cross-sectional+evaluation+of+particulate+antigen-delivery+systems.">Administration routes affect the quality of immune responses: A cross-sectional evaluation of particulate antigen-delivery systems.</a> J. Control Release. 147, 342-349 (2010).</li><li>Waeckerle-Men, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymph+node+targeting+of+BCG+vaccines+amplifies+CD4+and+CD8+T-cell+responses+and+protection+against+Mycobacterium+tuberculosis.">Lymph node targeting of BCG vaccines amplifies CD4 and CD8 T-cell responses and protection against Mycobacterium tuberculosis.</a> Vaccine. 31, 1057-1064 (2013).</li><li>von Beust, B. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+the+therapeutic+index+of+CpG+oligodeoxynucleotides+by+intralymphatic+administration.">Improving the therapeutic index of CpG oligodeoxynucleotides by intralymphatic administration.</a> Eur. J. Immunol. 35, 1869-1876 (2005).</li><li>Senti, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intralymphatic+immunotherapy+for+cat+allergy+induces+tolerance+after+only+3+injections.">Intralymphatic immunotherapy for cat allergy induces tolerance after only 3 injections.</a> J. Allergy Clin. Immunol. 129, 1290-1296 (2012).</li><li>Senti, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intralymphatic+allergen+administration+renders+specific+immunotherapy+faster+and+safer:+a+randomized+controlled+trial.">Intralymphatic allergen administration renders specific immunotherapy faster and safer: a randomized controlled trial.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105, 17908-17912 (2008).</li><li>Lesterhuis, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Route+of+administration+modulates+the+induction+of+dendritic+cell+vaccine-induced+antigen-specific+T+cells+in+advanced+melanoma+patients.">Route of administration modulates the induction of dendritic cell vaccine-induced antigen-specific T cells in advanced melanoma patients.</a> Clin. Cancer Res. 17, 5725-5735 (2011).</li><li>Fadul, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+response+in+patients+with+newly+diagnosed+glioblastoma+multiforme+treated+with+intranodal+autologous+tumor+lysate-dendritic+cell+vaccination+after+radiation+chemotherapy.">Immune response in patients with newly diagnosed glioblastoma multiforme treated with intranodal autologous tumor lysate-dendritic cell vaccination after radiation chemotherapy.</a> J. Immunother. 34, 382-389 (2011).</li><li>Eizenberg, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acceptance+of+Intanza(R)+9+mug+intradermal+influenza+vaccine+in+routine+clinical+practice+in+Australia+and+Argentina.">Acceptance of Intanza(R) 9 mug intradermal influenza vaccine in routine clinical practice in Australia and Argentina.</a> Adv. Ther. 28, 640-649 (2011).</li><li>Durando, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adjuvants+and+alternative+routes+of+administration+towards+the+development+of+the+ideal+influenza+vaccine.">Adjuvants and alternative routes of administration towards the development of the ideal influenza vaccine.</a> Hum. Vaccin. 7, 29-40 (2011).</li><li>Barth, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+randomized+trial+of+ex+vivo+CD40L+activation+of+a+dendritic+cell+vaccine+in+colorectal+cancer+patients:+tumor-specific+immune+responses+are+associated+with+improved+survival.">A randomized trial of ex vivo CD40L activation of a dendritic cell vaccine in colorectal cancer patients: tumor-specific immune responses are associated with improved survival.</a> Clin. Cancer Res. 16, 5548-5556 (2010).</li><li>Schwaab, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+and+immunologic+effects+of+intranodal+autologous+tumor+lysate-dendritic+cell+vaccine+with+Aldesleukin+(Interleukin+2)+and+IFN-{alpha}2a+therapy+in+metastatic+renal+cell+carcinoma+patients.">Clinical and immunologic effects of intranodal autologous tumor lysate-dendritic cell vaccine with Aldesleukin (Interleukin 2) and IFN-{alpha}2a therapy in metastatic renal cell carcinoma patients.</a> Clin. Cancer Res. 15, 4986-4992 (2009).</li><li>Senti, G., Johansen, P., Kundig, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intralymphatic+immunotherapy.">Intralymphatic immunotherapy.</a> Curr. Opin. Allergy Clin. Immunol. 9, 537-543 (2009).</li><li>Catron, D. M., Itano, A. A., Pape, K. A., Mueller, D. L., Jenkins, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+the+first+50+hr+of+the+primary+immune+response+to+a+soluble+antigen.">Visualizing the first 50 hr of the primary immune response to a soluble antigen.</a> Immunity. 21, 341-347 (2004).</li><li>Itano, A. A., Jenkins, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antigen+presentation+to+naive+CD4+T+cells+in+the+lymph+node.">Antigen presentation to naive CD4 T cells in the lymph node.</a> Nat. Immunol. 4, 733-739 (2003).</li><li>Johansen, P., Mohanan, D., Martinez-Gomez, J. M., Kundig, T. M., Gander, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lympho-geographical+concepts+in+vaccine+delivery.">Lympho-geographical concepts in vaccine delivery.</a> J. Control Release. 148, 56-62 (2010).</li><li>Johansen, P., von Moos, S., Mohanan, D., Kundig, T. M., Senti, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+routes+for+allergen+immunotherapy.">New routes for allergen immunotherapy.</a> Hum. Vacc. Immunother. 8, 1525-1533 (2012).</li><li>Senti, G., Johansen, P., Kundig, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intralymphatic+immunotherapy:+from+the+rationale+to+human+applications.">Intralymphatic immunotherapy: from the rationale to human applications.</a> Curr. Top. Microbiol. Immunol. 352, 71-84 (2011).</li><li>Duthie, M. S., Windish, H. P., Fox, C. B., Reed, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+defined+TLR+ligands+as+adjuvants+within+human+vaccines.">Use of defined TLR ligands as adjuvants within human vaccines.</a> Immunol. Rev. 239, 178-196 (2011).</li><li>Ribas, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intra-lymph+node+prime-boost+vaccination+against+Melan+A+and+tyrosinase+for+the+treatment+of+metastatic+melanoma:+results+of+a+phase+1+clinical+trial.">Intra-lymph node prime-boost vaccination against Melan A and tyrosinase for the treatment of metastatic melanoma: results of a phase 1 clinical trial.</a> Clin. Cancer Res. 17, 2987-2996 (2011).</li><li>Bedrosian, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranodal+administration+of+peptide-pulsed+mature+dendritic+cell+vaccines+results+in+superior+CD8++T-cell+function+in+melanoma+patients.">Intranodal administration of peptide-pulsed mature dendritic cell vaccines results in superior CD8+ T-cell function in melanoma patients.</a> J. Clin. Oncol. 21, 3826-3835 (2003).</li><li>Lesimple, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Injection+by+various+routes+of+melanoma+antigen-associated+macrophages:+biodistribution+and+clinical+effects.">Injection by various routes of melanoma antigen-associated macrophages: biodistribution and clinical effects.</a> Cancer Immunol. Immunother. 52, 438-444 (2003).</li><li>Brown, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenovirus-transduced+dendritic+cells+injected+into+skin+or+lymph+node+prime+potent+simian+immunodeficiency+virus-specific+T+cell+immunity+in+monkeys.">Adenovirus-transduced dendritic cells injected into skin or lymph node prime potent simian immunodeficiency virus-specific T cell immunity in monkeys.</a> J. Immunol. 171, 6875-6882 (2003).</li><li>Fong, L., Brockstedt, D., Benike, C., Wu, L., Engleman, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+cells+injected+via+different+routes+induce+immunity+in+cancer+patients.">Dendritic cells injected via different routes induce immunity in cancer patients.</a> J. Immunol. 166, 4254-4259 (2001).</li></ol>

Intralymfatisk immunisering och immunterapi har visat sig vara lämplig för stimulering av både antikroppssvar och T-cellsvar. Som visas i denna video-artikeln, är det intralymfatisk förfarande för vaccination en snabb och enkel metod för att stimulera starka immunsvar hos möss. En utbildad kirurg kan utföra proceduren under 3-4 min. Sessionen kan även delas mellan två kirurger där man vanligtvis gör anestesi och suturering och den andra kirurgen gör snittet och injektionen. Effektiviteten i förfarandet ä...

Vacciner är oftast injiceras subkutant eller intramuskulärt för stimulering av immunsvar. Framgången med detta förfarande kräver en effektiv dränering av vaccin till lymfkörtlarna där antigenpresenterande celler kan interagera med lymfocyter för generering av T-och B-cellsvar. Dessutom, styrkan och den typ av immunsvar som induceras beror också på tätheten eller frekvensen av sådana interaktioner samt mikromiljön i sig, i synnerhet innehållet av cytokiner. Eftersom endast en liten fraktion av ett vaccin injiceras i en perifer vävnad når en lymfkörtel, vaccinering av möss och människor genom direkt injektion av vaccinet i lymfkörtlar, platsen var immunsvar alstras, har utförts. Hos människa är proceduren med hjälp av ultraljud, en procedur används också för administration av avbildningsmedel för visualisering och diagnos i lymfsystemet. I möss, är proceduren invasiva. Här en liten (5-10 mm) incision är gjord i den inguinala regionen hos bedövade djur 1, är lymfkörtel lokaliserad och immobiliserades med pincett, och en volym på 10 till 20 | il av vaccinet injiceras under visuell kontroll, 10 | il används för första injektionerna och i unga möss med små lymfkörtlar, medan 20 | il kan injiceras i lymfkörtlar hos äldre eller redan primade möss, vilka har större lymfkörtlarna. Snittet kan stängas med ett enda stygn med hjälp av kirurgiska suturer. Genom denna metod har möss vaccinerades med plasmid-DNA 2,3, budbärar-RNA 4, peptid 1,3,5,6, protein 7-10, partiklar 11, bakterier 12 liksom adjuvanser 7,13, och en stark förbättring av immun svar mot alla typer av vaccin har observerats. Den intralymfatisk metoden för vaccination är speciellt lämpligt i situationer där konventionell vaccinering producerar otillräcklig immunitet eller där mängden tillgängligt vaccin är begränsad eller very kostsam. I människa har intralymfatisk metoden för immunisering tillämpats på allergipatienter 14,15 eller till patienter med cancer 16-21. Även om den nuvarande uppfattningen är att den intralymfatisk metoden är mer invasiv än andra injicerbara metoder såsom intramuskulära och subkutana injektioner, är smärtförnimmelse inte högre än efter en venös punktering 15. Det förväntas att intralymfatisk vaccinationen kommer att bli ett alternativ eller komplement till andra metoder för förebyggande och speciellt terapeutiska vaccinationer. Denna artikel beskriver i detalj hur förfarandet för intralymfatisk vaccination utförs på möss. Samtliga förfaranden som beskrivs, godkändes av kantonala veterinärmyndigheten i Zürich och utfördes enligt schweiziska federala riktlinjer och direktiv om skydd av djur som används för vetenskapliga ändamål.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="653">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:233px;">Ketamine (Ketasol-100)</td>
			<td style="width:135px;">Graeub AG, Switzerland</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Anesthetics</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:233px;">Xylazine (Rompun)</td>
			<td style="width:135px;">Bayer, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Anesthetics</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Viscotears Eye-Gel</td>
			<td style="width:135px;">Novartis, Switzerland</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>To keep eyes from drying out during anesthesia.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:233px;">BD Micro-Fine 0.5 ml</td>
			<td style="width:135px;">BD Medical, France</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>29 G Insulin syringes with permanently attached needles</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:233px;">6-0 Dermalon Monofilament nylon</td>
			<td style="width:135px;">Covidien, MA, USA</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>For sutures (0.7 metric, 18G, 45 cm, Blue)</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:233px;">Curved forceps, 4.5 inch</td>
			<td style="width:135px;">Polymed, Switzerland</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>For incision and holding of lymph node</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:233px;">Straight surgical scissors, 4.5 inch</td>
			<td style="width:135px;">Polymed, Switzerland</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>For incision</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:233px;">Needle holder, 5.5 inch</td>
			<td style="width:135px;">Polymed, Switzerland</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>To close incision with suture</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:233px;"></td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intralymphatic immunotherapy and vaccination in mice

Vacciner är oftast injiceras subkutant eller intramuskulärt för stimulering av immunsvar. Framgången för detta krävs en effektiv dränering av vaccin till lymfkörtlarna där antigenpresenterande celler kan interagera med lymfocyter för alstring av de önskade immunsvar. Styrkan och vilken typ av immunsvar som induceras beror också på tätheten eller frekvensen av interaktioner samt mikromiljö, särskilt innehållet av cytokiner. Eftersom endast en bråkdel av perifert injicerade vacciner når lymfkörtlarna har vaccinering av möss och människor utföras genom direkt injektion av vaccinet i inguinala lymfknutor, dvs intralymfatisk injektion. Hos människa är proceduren med hjälp av ultraljud. I möss är en liten (5-10 mm) snitt i inguinalregionen hos bedövade djur, lymfkörteln är lokaliserad och immobiliserades med pincett, och en volym på 10 till 20 | il av vaccinet injiceras under visuell kontroll.Snittet är stängt med ett enda stygn med hjälp av kirurgiska suturer. Möss som vaccinerades med plasmid-DNA, RNA, peptid, protein, partiklar och bakterier samt adjuvantia, och stark förbättring av immunsvar mot alla typer av vacciner iakttogs. Den intralymfatisk metoden för vaccination är speciellt lämpligt i situationer där konventionell vaccinering producerar otillräcklig immunitet eller där mängden tillgängligt vaccin är begränsad.

Förfarandet för intralymfatisk injektioner i möss, trots den kirurgiska natur, är rakt fram och relativt snabb. En tränad person kan utföra proceduren i 3-4 min. Snittet som stängs med ett stygn läker vanligtvis inom två dagar (figur 1) Intralymfatisk vaccinering eller immunisering har utförts med mRNA, plasmid-DNA, peptider, proteiner, virus och bakterier. Figur 2 illustrerar antikroppsproduktion efter immunisering med proteinet fosfolipas A2 (PLA...

Watch this Scientific Journal Video about Intralymphatic Immunotherapy and Vaccination in Mice at JoVE.com

Intralymphatic Immunotherapy and Vaccination in Mice

Profylaktisk och terapeutisk vaccination ofta misslyckas med att stimulera starka immunsvar på grund av vecka dränering av vaccinet till lymfkörtlar och följaktligen dålig medverkan av immunceller. Genom direkt injektion av vaccin till lymfkörtlarna, så kallade intralymfatisk injektion, vaccineffekt kan kraftigt förbättras och vaccindoser kan minskas.

Intralymfatisk Immunterapi och vaccination hos möss

Vaccines are typically injected subcutaneously or intramuscularly for stimulation of immune responses. The success of this requires efficient drainage of ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Experimental Metastasis and CTL Adoptive Transfer Immunotherapy Mouse Model

Experimentell Metastas och CTL adoptiv transfer Immunterapi musmodell

Experimental metastasis mouse model is a simple and yet physiologically relevant metastasis model. The tumor cells are injected intravenously (i.v) into ...

Protocol for Recombinant RBD-based SARS Vaccines: Protein Preparation, Animal Vaccination and Neutralization Detection

Protokoll för rekombinant RBD-baserade SARS Vaccines: Protein Förberedelser, Animal Vaccination och neutralisering Detection

Based on their safety profile and ability to induce potent immune responses against infections, subunit vaccines have been used as candidates for a wide ...

Preparation of Tumor Antigen-loaded Mature Dendritic Cells for Immunotherapy

Framställning av tumörantigen-laddade mogna dendritceller för Immunotherapy

While clinical studies have established that antigen-loaded DC vaccines are safe and promising therapy for tumors 1, their clinical efficacy remains to be ...

High-throughput Screening for Broad-spectrum Chemical Inhibitors of RNA Viruses

High-throughput screening för brett spektrum kemiska inhibitorer av RNA-virus

RNA viruses are responsible for major human diseases such as flu, bronchitis, dengue, Hepatitis C or measles. They also represent an emerging threat ...

Generation of CAR T Cells for Adoptive Therapy in the Context of Glioblastoma Standard of Care

Generering av CAR T-celler för adoptiv terapi som led i Glioblastoma Standard of Care

Adoptive T cell immunotherapy offers a promising strategy for specifically targeting and eliminating malignant gliomas. T cells can be engineered ex vivo ...

In Vivo Assay for Detection of Antigen-specific T-cell Cytolytic Function Using a Vaccination Model

In Vivo Assay for Detection of Antigen-specific T-cell Cytolytic Function Using a Vaccination Model

In Vivo Test för påvisande av Antigen-specifika T-cell cytolytisk funktion använder en Vaccination modell

Current methodologies for antigen-specific killing are limited to in vitro use or utilized in infectious disease models. However, there is not a protocol ...

Generation of Discriminative Human Monoclonal Antibodies from Rare Antigen-specific B Cells Circulating in Blood

Generation av diskriminerande humana monoklonala antikroppar från sällsynta Antigen-specifika B-celler som cirkulerar i blodet

Monoclonal antibodies (mAbs) are powerful tools useful for both fundamental research and in biomedicine. Their high specificity is indispensable when the ...

Stereotactic Adoptive Transfer of Cytotoxic Immune Cells in Murine Models of Orthotopic Human Glioblastoma Multiforme Xenografts

Stereotaktisk överföring av cytotoxiska immunceller i murina modeller av ortotop mänskliga Glioblastoma Multiforme xenograft

Glioblastoma multiforme (GBM), the most frequent and aggressive primary brain cancer in adults, is generally associated with a poor prognosis, and scarce ...

Optimized Interferon-gamma ELISpot Assay to Measure T Cell Responses in the Guinea Pig Model after Vaccination

Optimerad Interferon-gamma ELISpot Assay till åtgärd T-Cell svar i Guinea Pig modellen efter Vaccination

The guinea pig has played a pivotal role as a relevant small animal model in the development of vaccines for infectious diseases such as tuberculosis, ...

Adoptive Immunotherapy of iNKT Cells in Glucose-6-Phosphate Isomerase (G6PI)-Induced RA Mice

Adoptive Immunotherapy of iNKT Cells in Glucose-6-Phosphate Isomerase G6PI-Induced RA Mice

Adoptiv immunterapi av iNKT-celler i glukos-6-fosfatisomeras (G6PI)-inducerad RA Möss

Rheumatoid arthritis (RA) is a complex chronic inflammatory autoimmune disease. The pathogenesis of the disease is related to invariant natural killer T ...