Name: reduced itraconazole concentration and durations are successful in treating batrachochytrium dendrobatidis infection in amphibians
Uploaded: 2014-03-14T18:45:00
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나는에 도움을 실험 설계를 개념화 및 재료 지원, 치료 요법 및 부검을 확립 도움 A. Pessier 분석, MWH 채트, MJ Robak, K. 테스 커 및 D. Lenger 도움을 CL 리차드 - Zawacki에게 감사의 말씀을 전합니다 실험실과 촬영 기간 동안 자신의 공간의 사용에 대한 지원 및 타 롱가 동물원에서 M. 맥파든과 P. 할로. 이 프로젝트는 부분적으로 LA Brannelly에게 수여 루이지애나 환경 교육위원회의 승인을 통해 생활 기술에 의해 야생 동물과 수산의 루이지애나 부에 의해 투자되었다.

윤리 승인 :이 연구와 그 방법은 툴레 인 대학의 동물 사용 및 관리위원회 (. 프로토콜없이 0407)에 의해 승인되었다. 1. BD 감염에 대한 테스트 <ol><li> BD에 대한 보라고 <ol><li> 멸균 면봉 면봉 동물 ventrum에 다섯 번, 각 허벅 다리, 양쪽, 45 스트로크의 총 각 다리에 다섯 번. 보라고는 양서류의 피부에 BD에 대한 샘플링의 비 침습적 인 방법입니다....

<ol>
	<li>Stuart, S. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Status+and+trends+of+amphibian+declines+and+extinctions+worldwide.">Status and trends of amphibian declines and extinctions worldwide.</a> Science. 306 (5702), 1783-1786 (2004).</li><li>Skerratt, L. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spread+of+chytridiomycosis+has+caused+the+rapid+global+decline+and+extinction+of+frogs.">Spread of chytridiomycosis has caused the rapid global decline and extinction of frogs.</a> EcoHealth. 4, 125-134 (2007).</li><li>Wake, D. B., Vredenburg, V. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colloquium+paper:+are+we+in+the+midst+of+the+sixth+mass+extinction?+A+view+from+the+world+of+amphibians.">Colloquium paper: are we in the midst of the sixth mass extinction? A view from the world of amphibians.</a> PNAS. 105, 11466-11473 (2008).</li><li>Voyles, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrolyte+depletion+and+osmotic+imbalance+in+amphibians+with+chytridiomycosis.">Electrolyte depletion and osmotic imbalance in amphibians with chytridiomycosis.</a> Dis. Aquat. Org. 77 (2), 113-118 (2007).</li><li>Ramsey, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amphibian+immune+defenses+against+Batrachochytrium+dendrobatidis:+A+war+between+host+and+pathogen.">Amphibian immune defenses against Batrachochytrium dendrobatidis: A war between host and pathogen.</a> , (2011).</li><li>McMahon, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chytrid+fungus+Batrachochytrium+dendrobatidis+has+nonamphibian+hosts+and+releases+chemicals+that+cause+pathology+in+the+absence+of+infection.">Chytrid fungus Batrachochytrium dendrobatidis has nonamphibian hosts and releases chemicals that cause pathology in the absence of infection.</a> PNAS. 110 (1), 210-215 (2013).</li><li>Berger, L., Speare, R., Pessier, A., Voyles, J., Skerratt, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+chytridiomycosis+requires+urgent+clinical+trials.">Treatment of chytridiomycosis requires urgent clinical trials.</a> Dis. Aquat. Org. 92, 165-174 (2010).</li><li>Chatfield, M. W. H., Richards-Zawacki, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elevated+temperature+as+a+treatment+for+Batrachochytrium+dendrobatidis+infection+in+captive+frogs.">Elevated temperature as a treatment for Batrachochytrium dendrobatidis infection in captive frogs.</a> Dis. Aquat. Org. 94 (3), 235-238 (2011).</li><li>Karbowski, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Free+radical-induced+megamitochondria+formation+and+apoptosis.">Free radical-induced megamitochondria formation and apoptosis.</a> Free Rad. Biol. Med. 26 (98), 396-409 (1999).</li><li>Bishop, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elimination+of+the+amphibian+chytrid+fungus+Batrachochytrium+dendrobatidis+by+Archey's+frog+Leiopelma+archeyi.">Elimination of the amphibian chytrid fungus Batrachochytrium dendrobatidis by Archey's frog Leiopelma archeyi.</a> Dis. Aquat. Org. 84 (1), 9-15 (2009).</li><li>Pessier, A. P., Mendelson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> A Manual For Control of Infectious Diseases in Amphibian Survival Assurance Colonies and Reintroduction Programs. , (2009).</li><li>Page, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chloramphenicol+1.+Hazards+of+use+and+the+current+regulatory+environment.">Chloramphenicol 1. Hazards of use and the current regulatory environment.</a> Aus. Vet. J. 68 (1), 1-2 (1991).</li><li>Yoon, H. -. J., Seo, M. H., Kim, J. -. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pharmaceutical formulations for itraconazole. , (2005).</li><li>Garner, T. W. J., Garcia, G., Carroll, B., Fisher, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+itraconazole+to+clean+Batrachochytrium+dendrobatidis+infection,+and+subsequent+depigmentation+of+Alytes+muletensis+tadpoles.">Using itraconazole to clean Batrachochytrium dendrobatidis infection, and subsequent depigmentation of Alytes muletensis tadpoles.</a> Dis. Aquat. Org. 83, 257-260 (2009).</li><li>Brannelly, L. A., Richards-Zawacki, C. L., Pessier, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+trials+with+itraconazole+as+a+treatment+for+chytrid+fungal+infections+in+amphibians.">Clinical trials with itraconazole as a treatment for chytrid fungal infections in amphibians.</a> Dis. Aquat. Org. 101 (2), 95-104 (2012).</li><li>Jones, M. E. B., Paddock, D., Bender, L., Allen, J. L., Schrenzel, M. S., Pessier, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+chytridiomycosis+with+reduced-dose+itraconazole.">Treatment of chytridiomycosis with reduced-dose itraconazole.</a> Dis. Aquat. Org. 99 (3), 243-249 (2012).</li><li>Boyle, D. G., Boyle, D. B., Olsen, V., Morgan, J. A. T., Hyatt, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+quantitative+detection+of+chytridiomycosis+(Batrachochytrium+dendrobatidis)+in+amphibian+samples+using+real-time+Taqman+PCR+assay.">Rapid quantitative detection of chytridiomycosis (Batrachochytrium dendrobatidis) in amphibian samples using real-time Taqman PCR assay.</a> Dis. Aquat. Org. 60 (2), 141-148 (2004).</li><li>Martel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developing+a+safe+antifungal+treatment+protocol+to+eliminate+Batrachochytrium+dendrobatidis+from+amphibians.">Developing a safe antifungal treatment protocol to eliminate Batrachochytrium dendrobatidis from amphibians.</a> Med. Mycol. 49 (2), 143-149 (2011).</li><li>Bowerman, J., Rombough, C., Weinstock, S. R., Padgett-Flohr, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Terbinafine+hydrochloride+in+ethanol+effectively+clears+Batrachochytrium+dendrobatidis+in+amphibians.">Terbinafine hydrochloride in ethanol effectively clears Batrachochytrium dendrobatidis in amphibians.</a> J. Herpetol. Med. Surg. 20 (1), 24-29 (2010).</li><li>Young, S., Speare, R., Berger, L., Skerratt, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chloramphenicol+with+fluid+and+electrolyte+therapy+cures+terminally+ill+green+tree+frogs+(Litoria+caerulea)+with+chytridiomycosis.">Chloramphenicol with fluid and electrolyte therapy cures terminally ill green tree frogs (Litoria caerulea) with chytridiomycosis.</a> J. Zoo Wildlife Med. 43 (2), 330-337 (2012).</li></ol>

이 프로토콜을 이용하여, 우리는 안전하고 효과적으로 양서류 BD에 대한 이트라코나졸의 치료 치료 복용량 및 시간을 절감 할 수 있었다. 가장 낮은 처리 용량과 시간 (6 일 동안 0.0025 %)이 subclinically 감염 I.에 대한 성공적인 치료했다 nebulifer. 낮은 투여 량 및 처리 시간 모두의 효과는 양서류 모든 종 및 나이 클래스에 사용될 제공된 안전하고 효과적인 치료법은 없기 때문에, <e...

수륙 양용 비행기는 현재 모든 척추 동물 분류군 1의 생물 다양성에 가장 큰 감소를 경험하고 있습니다. . Chytridiomycosis, chytrid 곰팡이 병원균 Batrachochytrium의 dendrobatidis (BD)에 의한 피부 질환, BD는 생물 다양성 손실의 원인에 대한 기록에 최악의 병원균이 극적으로 감소 2의 주요 원인 중 하나입니다 그것은 양서류 600 종 이상 감염되어있다 많은 200 종의 멸종 위기 또는 2,3 멸종있는 300 종의 감소를 일으키는 원인이되었다. 양서류 chytrid 균은 특정 호스트되지 않고 심각한 질병을 일으키는 진행하는 BD 감염을 허용하는 호스트의 어떤 자질 불분명하다. Chytridiomycosis 전해질 손실 및 심장 마비 4의 결과로, 피부에 이온 채널을 방해하여 죽음의 원인이됩니다. 또한, (된 BD zoospores을 포함하지 않는) BD 상층 액은 올챙이의 면역 반응 5 의원 원인G 연구원은 BD 부산물 6 독성을 생산하고 생각합니다. 많은 종은 빠르게 감소하고 있기 때문에, 포로 보증 식민지 사육 프로그램은 중요한 보존 조치하고, 어떤 종의 유일한 생명선이 될 수 있습니다. 구축 및 무병 식민지를 유지하는 것은 양서류 관리 시설에 대한 도전입니다. BD 감염을 치료하기위한 현재의 화학 요법의 방법은 효과적이지만, 치료되는 동물에 유해 할 수 있으며, 단일 치료법은 종 및 양서류 7의 연령 등급에 걸쳐 성공적인 없었다. BD 감염에 대한 치료의 몇 가지 임상 시험은 7을 수행하고 있습니다. 치료의 가장 일반적으로 사용되는 세 가지 방법은 열 치료, 클로람페니콜 및 이트라코나졸이다. 열 치료는 몇 가지 부작용, 여러 삶의 단계에서 사용할 수있을 것으로 보인다 nonchemotherapeutic 치료 옵션이며, gener입니다동맹 효과적이다. 치료 연구에서 채트와 리차드 - Zawacki 8은 처리 된 동물의 96 %가 10 일 동안 30 ° C에서 보관 후 감염을 취소 한 것으로 나타났습니다. 이 시험은 100 % 성공하지 않지만, 다른 사람들이 자신의 종족에 대한 열 치료를 평가하기위한 기준을 제공합니다. 열 치료는 많은 종에 효과적이지만, 장시간 고온으로 유지 할 수 많은 고산 종 비실용적이다. 클로람페니콜, 항균, 많은 종의 BD 치료에 성공적으로 사용하고, 체외에서 곰팡이 성장을 억제하고있다. 항균 같이, 클로람페니콜 구체적 균류 공격하지 않지만 진핵 세포 9에서 아폽토시스를 일으키는 것으로 알려져있다. 그것은 행동의 정확한 메커니즘은 알 수 있지만, 클로람페니콜 치료, 세포 내 포자낭을 죽이고, 피부의 세포 사멸을 일으키는 것으로 추측하고있다. 임상 시험 때문에 실시하지 않고,되어 있지만용량과 처리 시간, 평가되지 않은 현재의 치료 프로토콜은 일반적으로 지상파 양서류이 치료가 실용적이지, 2~4주 10, 11에 침수가 필요합니다. 인체 노출은 재생 불량성 빈혈 (12)의 드문 형태와 관련되어 있기 때문에 클로람페니콜은 동물 사용에 대한 일부 국가에서 제한되어 있습니다. 이트라코나졸, 아 졸계 항진균제, 가장 널리 포로 양서류 BD 감염의 치료에 사용된다. 가장 널리 사용되는 프로토콜 5 분 11 일 연속 하루 동안 0.01 % 이트라코나졸 솔루션 목욕 동물입니다. 이 프로토콜은 양서류에 효과적이지만, 양서류는 11, 13의 임상 시험을 기반으로하지 않는, 포유 동물의 관리에 사용되는 표준에서 파생되었다. 이 프로토콜은 특히 속라나와 올챙이 최근 metamorphs (11), 특정 종에 부작용을 일으킬 수 있습니다.올챙이 처리 이트라코나졸의 훨씬 더 낮은 농도 (0.0005 %)을 이용하여 성공을 거두었지만 탈색 (14)와 관련되었다. 이 같은 농도는 최근 metamorphs에 상용화에 박차를 가하고 감염 (15) 치료에 실패한 것으로 밝혀졌다. 이트라코나졸 치료와 부작용의 위험이 있기 때문에, 일부 실무자는 11 일 연속 절반 보통 농도 (0.005 %)를 사용하고이 BD 감염 16을 ​​치료에 성공을 발견했다. 본 연구는 BD 감염 (15)을 치료하는 이트라코나졸을 사용하여 임상 치료 시험을 요약 한 것입니다. 이 프로토콜은 이트라코나졸과 BD 감염된 동물의 치료에 안전하고 효과적인 모두 가장 낮은 용량과 처리 시간을 찾기 위해 시도에 대해 설명합니다. 본 연구에서 사용 된 동물은 걸프 코스트 두꺼비의 최근 metamorphs, Incilius nebulifer했다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="503">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:179px;">0.1% Aqueous Itraconazole, Sporonox</td>
			<td style="width:147px;">Janssen Pharmaceutica Inc.</td>
			<td style="width:177px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:179px;">NaCl</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:177px;">S640-500</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:179px;">KCl</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:177px;">BP366-1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:179px;">CaCl2</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:177px;">BP510-100</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:179px;">NaHCO3</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:177px;">BP328-500</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:179px;">Sterile cotton swabs</td>
			<td style="width:147px;">Medical and Wire Equipment</td>
			<td style="width:177px;">MW113</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:179px;">1.5 ml micro tubes</td>
			<td style="width:147px;">Sarstedt</td>
			<td style="width:177px;">73.703.217</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:179px;">Qiagen DNEasy Blood and Tissue Kit</td>
			<td style="width:147px;">Qiagen</td>
			<td style="width:177px;">69581</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:179px;">7500 Real-time PCR</td>
			<td style="width:147px;">Applied Biosystems</td>
			<td style="width:177px;">4351104</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:179px;">VIC IPC</td>
			<td style="width:147px;">Applied Biosystems</td>
			<td style="width:177px;">4308323</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:179px;">BSA</td>
			<td style="width:147px;">Applied Biosystems</td>
			<td style="width:177px;">AM2618</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:179px;">Agar</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:177px;">30391023</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:179px;">Tryptone</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:177px;">Q10029</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:179px;">Penicillin-streptomycin</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:177px;">15070-063</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:179px;">Petri Dish</td>
			<td style="width:147px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:177px;">CLS430589</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

reduced itraconazole concentration and durations are successful in treating batrachochytrium dendrobatidis infection in amphibians

수륙 양용 비행기는 척추 클래스의 가장 큰 감소를 경험하고 이러한 감소의 주요 원인은 질병 chytridiomycosis을 일으키는 곰팡이 병원균, Batrachochytrium의 dendrobatidis (BD)입니다. 포로 보증 식민지 멸종 위기 종의 양서류 세계적 중요하고 멸종의 중요한 위협이있는 사람들을위한 유일한 생명선이 될 수 있습니다. 무병 식민지를 유지하는 것이 포로 관리자의 우선 순위, 모든 종과 삶의 단계에서 아직 안전하고 효과적인 치료법이 발견되지 않았습니다. 일반적으로 사용되는 투여 량은 일부 개인과 종에 해가 될 수 있지만 가장 널리 사용되는 화학 요법 치료, 이트라코나졸입니다. 우리는 이트라코나졸의 낮은 및 안전하지만 유효 선량은 BD 감염을 치료하기 위해 찾을 수 있는지 여부를 평가하기 위해 임상 치료 실험을 수행 하였다. 우리는 발견 0.01-0.0025 %에서 치료 농도를 감소시키고 (11)로부터 치료 기간을 감소시킴으로써5 분 화장실 -6 일, 개구리 적은 부작용 적은 치료 관련 사망률과 BD 감염으로 치료 될 수 있습니다.

모든 동물 사주 종료 치료 후 BD-음성 인 경우 이트라코나졸 치료가 성공한 것으로 간주되었다. 치료를 시작하기 전에 치료가 끝난 사주 후, BD-양성 대조군 동물 16,765.12의 평균 유주자 부하가 있었을 때 2 주 접종 후, 모든 BD-접종 동물 ((17.34 ±) 1,121.7의 평균 유주자 부하, 감염 ) 14643.08를 ±. Incilius nebulifer의 치료 (N = 15) 6 일 동안 다섯 분 동안 0.0025 % ?...

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Reduced Itraconazole Concentration and Durations Are Successful in Treating Batrachochytrium dendrobatidis Infection in Amphibians

양서류 Batrachochytrium의 dendrobatidis 감염은 감소 된 농도 (0.0025 %) 및 일반적으로 사용되는 것보다 이트라코나졸의 짧은 기간 (6 일 동안 오분 화장실)을 사용하여 제거 할 수있다. 이하 사망률과 적은 부작용이 변경됨 치료 프로토콜을 사용하여 관찰 하였다.

감소 이트라코나졸의 농도와 지속 시간은 치료의 성공<em&gt; Batrachochytrium의 dendrobatidis</em&gt; 수륙 양용 비행기에 감염

Amphibians are experiencing the greatest decline of any vertebrate class and a leading cause of these declines is a fungal pathogen, Batrachochytrium ...

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