Name: diagnostic ultrasound imaging of mouse diaphragm function
Uploaded: 2014-04-21T16:00:00
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Este trabajo es apoyado por becas de Fondo General y el Fondo de OU G110 Investigación de Excelencia de la Investigación Biomédica y OSU-HRS Fondo 013.000. Los autores desean agradecer a Lauren Chen por su ayuda en la preparación de este manuscrito.

Fueron aprobados y completados de conformidad y el cumplimiento del Cuidado de Animales institucional y el empleo Comisión de la Universidad Estatal de Ohio (IACUC) los reglamentos y directrices Todos los procedimientos que involucran sujetos animales. 1. Ratón Anestesia <ol><li> Establecer una mesa procedimiento de limpieza con una almohadilla isotérmica climatizada envuelta en una toalla quirúrgica. La almohadilla de calefacción debe mantenerse entre 30 ° C y 34 ° C para estabiliz...

<ol>
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El protocolo experimental actual desarrolla técnicas de imagen de ultrasonido de diagnóstico específicos para la actividad del diafragma en un modelo de ratón a través de una, en el enfoque no invasivo vivo. Los ajustes del equipo de anestesia son valores aproximados, que podrán ajustarse ligeramente para cada animal ya que los ratones individuo puede responder de manera diferente a la anestesia. Para evitar que la administración de la anestesia inadecuada, es importante controlar regularmente l...

Recientemente, las técnicas de imagen de ultrasonido de diagnóstico se han aplicado a modelos de ratón de la hipertensión renovascular y 1,2 del cáncer de páncreas. Sin embargo, estas técnicas no han sido ampliamente utilizados en el ensayo de la función de los músculos respiratorios de roedores. Por lo tanto, hemos desarrollado un método de imagen de ultrasonido de diagnóstico como una herramienta valiosa para las evaluaciones longitudinales en vivo de la movilidad del diafragma en ratones. Hay varias ventajas de la ecografía diagnóstica. Por ejemplo, no es invasiva, segura, portátil y permite mediciones en tiempo real a un costo relativamente bajo 3. En particular, algunos dispositivos de ultrasonido de baja frecuencia fueron capaces de detectar el atrapamiento de aire, una característica clínica de la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) leve a severa limitación del flujo aéreo 4. Por lo tanto, de formación de imágenes de ultrasonidos de diagnóstico puede servir como un método de cribado fácilmente accesible y reproducible para la monitorización en tiempo real<html> de trastornos respiratorios. Las técnicas de imagen de ultrasonido de diagnóstico se aplican con frecuencia a los animales más grandes o los sujetos humanos. Sin embargo, ha habido un número limitado de estudios de imágenes de ultrasonido en modelos de ratones, lo cual es probable que se deba a los desafíos de la realización de la ecografía en temas de pequeña escala. El protocolo actual describe un procedimiento novedoso para la medición de la función de diafragma en el ratón. Además, aunque se han realizado varios estudios con roedores sobre la función de diafragma, la mayor parte de los resultados se generaron mediante el aislamiento de tiras de músculo directamente desde el animal sacrificado 5-7. En contraste, el uso de un método de formación de imágenes de ultrasonidos de diagnóstico in vivo para analizar la actividad de diafragma disminuiría el número de animales sacrificados para la experimentación. Por otra parte, los tratamientos a largo plazo centradas en ampliar la contractilidad diafragmática pueden evaluar con precisión a través de ultrasonido en modelos de roedores sin sacrificar animales. ntent &quot;&gt; En nuestro laboratorio, hemos desarrollado un método eficaz para la visualización y análisis de la actividad del diafragma de ratón utilizando una máquina de ultrasonido, que ayuda a la comprensión de la función del diafragma in vivo, evita métodos invasivos a los animales, y ayuda en el desarrollo de la terapéutica tratamientos para la disfunción respiratoria.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="602">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="127">
			<td height="127" style="height:127px;width:147px;">Veterinary digital ultrasonic diagnostic imaging system</td>
			<td style="width:111px;">Edan</td>
			<td style="width:151px;">DUS 3 VET</td>
			<td style="width:196px;">Ultrasound parameters include: frequency of 6.5 MHz, Depth of 29 mm. Note: An equivalent ultrasound machine may be used for this protocol</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:147px;">Micro-convex array transducer</td>
			<td>Edan</td>
			<td>C611</td>
			<td>Or equivalent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:147px;">GE Logiq i hand-carried unit (HCU)&#160;</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td style="width:151px;">GE Logiq i hand-carried unit (HCU)&#160;</td>
			<td>Or equivalent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:147px;">GE 12 MHz linear array probe</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td style="width:151px;">12L-RS</td>
			<td>Or equivalent</td>
		</tr>
		<tr height="171">
			<td height="171" style="height:171px;width:147px;">Veterinary anesthetic vaporizer</td>
			<td style="width:111px;">Webster Veterinary</td>
			<td>Serial #: W422021</td>
			<td style="width:196px;">Isoflurane was exclusively used with this vaporizer (or equivalent). A custom made induction chamber for anesthesia was assembled for initial anesthesia. Maintenance anesthesia was performed using a nose cone</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:147px;">Isothesia (Isoflurane, USP)</td>
			<td>Butler Schein</td>
			<td>29405 250ML PVL</td>
			<td>Or equivalent</td>
		</tr>
		<tr height="57">
			<td height="57" style="height:57px;width:147px;">Enviro-pure anesthesia absorbing canister</td>
			<td style="width:111px;">Surgivet Smiths Medical PM, Inc.</td>
			<td>Part #: 32373B10</td>
			<td>Or equivalent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:147px;">Ultrasound transmission gel</td>
			<td>HM Sonic</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Or equivalent&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:147px;">Puralube vet ointment</td>
			<td>Puralube&#160;</td>
			<td>NDC 17033-211-38</td>
			<td>Or equivalent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:147px;">Deltaphase isothermal pad</td>
			<td style="width:111px;">Braintree Scientific Inc.</td>
			<td>39DP</td>
			<td>Or equivalent</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Hair remover</td>
			<td>Nair</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Or equivalent</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Electric razor</td>
			<td>Remington</td>
			<td>HC-5015</td>
			<td>Or equivalent</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surgical tape</td>
			<td>3M Micropore</td>
			<td>1530-1</td>
			<td>Or equivalent</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Gauze sponges</td>
			<td>Dynarex</td>
			<td>3262</td>
			<td>Or equivalent</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

diagnostic ultrasound imaging of mouse diaphragm function

Análisis de funciones de los músculos esqueléticos respiratorios de roedores, en particular el diafragma, se realiza comúnmente mediante el aislamiento de tiras de músculo usando los procedimientos quirúrgicos invasivos. Aunque este es un método eficaz de evaluar la actividad in vitro de diafragma, que consiste en una cirugía no supervivencia. La aplicación de imágenes por ultrasonido no invasiva como un procedimiento in vivo es beneficioso, ya que no sólo reduce el número de animales sacrificados, pero también es adecuado para el seguimiento de la progresión de la enfermedad en ratones vivos. Por lo tanto, nuestro método de formación de imágenes de ultrasonido puede probablemente ayudará en el desarrollo de nuevas terapias que alivian lesión muscular inducida por diversas enfermedades respiratorias. En particular, en los diagnósticos clínicos de las enfermedades pulmonares obstructivas, imágenes de ultrasonido tiene el potencial de ser utilizado en conjunción con otras pruebas estándar para detectar la aparición temprana de la fatiga del músculo del diafragma. En el protocolo actual, se describe la forma de evaluar con precisión contracti diafragmadad en un modelo de ratón utilizando una técnica de imágenes de ultrasonido de diagnóstico.

Una imagen de ultrasonidos típico de un diafragma de ratón se muestra en la Figura 1A. El desplazamiento vertical máxima de diafragma de ratón fue grabado. Esta distancia se calcula con precisión la medición de la profundidad de movimiento del diafragma de la relajación a la contracción usando los calibradores electrónicos que son parte del software de ultrasonido. Tabla 1 muestra estas mediciones de distancia de las contracciones del diafragma de tres ratones diferentes. Despu...

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Diagnostic Ultrasound Imaging of Mouse Diaphragm Function

De imágenes de ultrasonido de diagnóstico ha demostrado ser eficaz en el diagnóstico de diversas enfermedades respiratorias en sujetos humanos y animales. Demostramos un protocolo integral de ultrasonido utilizado por el laboratorio del Dr. Zuo para analizar la cinética de diafragma específicamente en modelos de ratón. Esta es también una técnica de investigación no invasiva que puede proporcionar información cuantitativa sobre la función de los músculos respiratorios ratón.

Ultrasonido Diagnóstico por la Imagen de la función del ratón del diafragma

Function analysis of rodent respiratory skeletal muscles, particularly the diaphragm, is commonly performed by isolating muscle strips using invasive ...

Research

JoVE Journal

Medicine

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