Name: using an &#945;-bungarotoxin binding site tag to study gaba a receptor membrane localization and trafficking
Uploaded: 2014-03-28T15:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using an ÃŽÂ±-Bungarotoxin Binding Site Tag to Study GABA A Receptor Membrane Localization and Trafficking at JoVE.com

Unterstützung wurde von startup-Mittel aus der Pharmakologie und Chemische Biologie-Abteilung an der Universität von Pittsburgh School of Medicine. Bestätigung der Jacob Labor-Mitglieder, die an der Video-Vorlage beigetragen: Nicholas Graff.

Alle unten beschriebenen Protokolle sind in Übereinstimmung mit der IACUC und IRB Institutional Review Boards der University of Pittsburgh School of Medicine. 1. Vorbereitung der Hippocampus Neuronale Kulturen in Gewebekultur Hood Hinweis: Verwenden steriler Technik und Reagenzien während Protokoll 1. <ol><li> Vorbereitung Poly-D-Lysin (0,1 mg / ml in H 2 O) beschichteten Deckgläsern als Substrat für die neuronale Kultur. <ol><li> Zeigen 4-5 runden Glasdeckgläschen ...

<ol>
	<li>Jacob, T. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gephyrin+regulates+the+cell+surface+dynamics+of+synaptic+GABAA+receptors.">Gephyrin regulates the cell surface dynamics of synaptic GABAA receptors.</a> J. Neurosci. 25, 10469-10478 (2005).</li><li>Bogdanov, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+GABAA+receptors+are+directly+recruited+from+their+extrasynaptic+counterparts.">Synaptic GABAA receptors are directly recruited from their extrasynaptic counterparts.</a> EMBO J. 25, 4381-4389 (2006).</li><li>Thomas, P., Mortensen, M., Hosie, A. M., Smart, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+mobility+of+functional+GABA(A)+receptors+at+inhibitory+synapses.">Dynamic mobility of functional GABA(A) receptors at inhibitory synapses.</a> Nat. Neurosci. 8, 889-897 (2005).</li><li>Wilkins, M. E., Li, X., Smart, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracking+Cell+Surface+GABAB+Receptors+Using+an+&#945;-Bungarotoxin+Tag.">Tracking Cell Surface GABAB Receptors Using an &#945;-Bungarotoxin Tag.</a> J. Biol. Chem. 283, 34745-34752 (2008).</li><li>Saliba, R. S., Pangalos, M., Moss, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ubiquitin-like+protein+Plic-1+enhances+the+membrane+insertion+of+GABAA+receptors+by+increasing+their+stability+within+the+endoplasmic+reticulum.">The ubiquitin-like protein Plic-1 enhances the membrane insertion of GABAA receptors by increasing their stability within the endoplasmic reticulum.</a> J. Biol. Chem. 283, 18538-18544 (2008).</li><li>Bannai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activity-Dependent+Tuning+of+Inhibitory+Neurotransmission+Based+on+GABAAR+Diffusion+Dynamics.">Activity-Dependent Tuning of Inhibitory Neurotransmission Based on GABAAR Diffusion Dynamics.</a> Neuron. 62, 670-682 (2009).</li><li>Muir, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NMDA+receptors+regulate+GABAA+receptor+lateral+mobility+and+clustering+at+inhibitory+synapses+through+serine+327+on+the+gamma2+subunit.">NMDA receptors regulate GABAA receptor lateral mobility and clustering at inhibitory synapses through serine 327 on the gamma2 subunit.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107, 16679-16684 (2010).</li><li>Katchalski-Katzir, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Design+and+synthesis+of+peptides+that+bind+alpha-bungarotoxin+with+high+affinity+and+mimic+the+three-dimensional+structure+of+the+binding-site+of+acetylcholine+receptor.">Design and synthesis of peptides that bind alpha-bungarotoxin with high affinity and mimic the three-dimensional structure of the binding-site of acetylcholine receptor.</a> Biophys. Chem. 100, 293-305 (2003).</li><li>Scherf, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+beta+-hairpin+structure+in+a+13-mer+peptide+that+binds+alpha+-bungarotoxin+with+high+affinity+and+neutralizes+its+toxicity.">A beta -hairpin structure in a 13-mer peptide that binds alpha -bungarotoxin with high affinity and neutralizes its toxicity.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 98, 6629-6634 (2001).</li><li>Wilkins, M. E., Li, X., Smart, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracking+cell+surface+GABAB+receptors+using+an+alpha-bungarotoxin+tag.">Tracking cell surface GABAB receptors using an alpha-bungarotoxin tag.</a> J. Biol. Chem. 283, 34745-34752 (2008).</li><li>Miesenbock, G., De Angelis, D. A., Rothman, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+secretion+and+synaptic+transmission+with+pH-sensitive+green+fluorescent+proteins.">Visualizing secretion and synaptic transmission with pH-sensitive green fluorescent proteins.</a> Nature. 394, 192-195 (1998).</li><li>Jacob, T. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Benzodiazepine+treatment+induces+subtype-specific+changes+in+GABAA+receptor+trafficking+and+decreases+synaptic+inhibition.">Benzodiazepine treatment induces subtype-specific changes in GABAA receptor trafficking and decreases synaptic inhibition.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 109, 18595-18600 (2012).</li><li>Anderson, M. J., Cohen, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+staining+of+acetylcholine+receptors+in+vertebrate+skeletal+muscle.">Fluorescent staining of acetylcholine receptors in vertebrate skeletal muscle.</a> J. Physiol. 237, 385-400 (1974).</li><li>Axelrod, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crosslinkage+and+visualization+of+acetylcholine+receptors+on+myotubes+with+biotinylated+alpha-bungarotoxin+and+fluorescent+avidin.">Crosslinkage and visualization of acetylcholine receptors on myotubes with biotinylated alpha-bungarotoxin and fluorescent avidin.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 77, 4823-4827 (1980).</li><li>Axelrod, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lateral+motion+of+fluorescently+labeled+acetylcholine+receptors+in+membranes+of+developing+muscle+fibers.">Lateral motion of fluorescently labeled acetylcholine receptors in membranes of developing muscle fibers.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 73, 4594-4598 (1976).</li><li>Sekine-Aizawa, Y., Huganir, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+receptor+trafficking+by+using+alpha-bungarotoxin-binding-site-tagged+receptors.">Imaging of receptor trafficking by using alpha-bungarotoxin-binding-site-tagged receptors.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101, 17114-17119 (2004).</li><li>Jacob, T. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GABAA+receptor+membrane+trafficking+regulates+spine+maturity.">GABAA receptor membrane trafficking regulates spine maturity.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 106, 12500-12505 (2009).</li><li>Hannan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GABAB+receptor+internalisation+is+regulated+by+the+R2+subunit.">GABAB receptor internalisation is regulated by the R2 subunit.</a> J. Biol. Chem. , (2011).</li><li>Saliba, R. S., Kretschmannova, K., Moss, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activity-dependent+phosphorylation+of+GABAA+receptors+regulates+receptor+insertion+and+tonic+current.">Activity-dependent phosphorylation of GABAA receptors regulates receptor insertion and tonic current.</a> EMBO. 31, 2937-2951 (2012).</li><li>Beqollari, D., Betzenhauser, M. J., Kammermeier, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+G-Protein+Coupling+in+an+mGluR6+Point+Mutant+Associated+with+Congenital+Stationary+Night+Blindness.">Altered G-Protein Coupling in an mGluR6 Point Mutant Associated with Congenital Stationary Night Blindness.</a> Mol. Pharmacol. 76, 992-997 (2009).</li><li>Terunuma, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolonged+activation+of+NMDA+receptors+promotes+dephosphorylation+and+alters+postendocytic+sorting+of+GABAB+receptors.">Prolonged activation of NMDA receptors promotes dephosphorylation and alters postendocytic sorting of GABAB receptors.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107, 13918-13923 (2010).</li><li>Goslin, K. G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culturing+Nerve+Cells.">Culturing Nerve Cells.</a> , (1998).</li></ol>

Die hier beschriebenen BBS Basis fest und Live-Techniken können verwendet werden, um Rezeptor oder anderen Plasmamembranprotein Handel in Zelllinien, Neuronen und anderen primären Zellen zu verfolgen. Dieses Verfahren wurde verwendet, um Membran Einsetzen und Entfernen der Liganden-gesteuerte Ionenkanäle und GPCR untersuchen und Veränderungen in den Handel zu beurteilen aufgrund der Gegenwart der Rezeptor-Agonisten und Modulatoren. Schwerpunkte sind entsprechende Lokalisierung der Tag, um eine extrazelluläre Lage u...

Die Verwendung von fluoreszenz gekoppelt α-Bungarotoxin Rezeptor Lokalisation und Dynamik zu studieren wurde in Studien der Nikotinacetylcholinrezeptor 13-15, endogenen Ziel des Toxins Pionierarbeit geleistet. Anschließend Einbau des minimalen Bgt bindende Peptid (BBS) wurde genutzt, um Menschenhandel beider erregenden und hemmenden Liganden-gesteuerte Ionenkanäle und G-Protein-gekoppelten Rezeptoren 2,10,16-21 studieren. Das BBS-basierte Technik bietet Vorteile gegenüber anderen Ansätzen für den Menschenhandel Studien wie Oberflächen Biotinylierung Methoden, Antikörpermarkierung von lebenden Zellen mit Antikörpern gegen die extrazelluläre Epitope und Fluorescence Recovery After Photobleaching (FRAP) verwendet. Während Zelloberflächen Biotinylierung freien Amine kovalent modifiziert, mit dem Potential, die zelluläre Aktivität beeinflussen. Antikörper basierte Studien haben oft durch Oberflächenantigen Clustering oder Deckelung, die Menschenhandel Ereignisse verändern kann behindert. Aufgrund der Bleichstufe für FRAP sTUDIEN, ist ein wichtiges Anliegen Beschädigung der zugrunde liegenden zellulären Struktur. Ein zusätzlicher Vorteil ist, dass BBS-markierten Konstrukte können auch für biochemische Methoden mit Biotin-gekoppelten Rezeptor Bungarotoxin zu beurteilen Handel verwendet werden. Dieses Verfahren ist leicht auf Zelllinien und Primärzellen. Zur Verwendung in Zellen, die nikotinergen Acetylcholin (nAChR)-Rezeptoren exprimieren, muß die nAChR-Antagonisten Tubocurarin gesamten Protokoll verwendet werden, wie angegeben. Durchführen einer einfachen Oberfläche Bgt Kennzeichnung (entspricht der T = 0 Zeitpunkt für die Endozytose-Protokoll) auf nicht-transfizierten Zellen in Abwesenheit von Tubocurarin wird Nachweis von endogenen nAChR bereitzustellen. Eine wichtige Überlegung für die Verwendung dieser Technik entsprechende Einsetzen der BBS, so dass es an einer extrazellulären Stelle, wenn das Protein von Interesse an die Plasmamembran geliefert vorliegt. Zum Beispiel können die N-terminalen Domänen von GABAAR Einheiten befinden sich in den Bläschen Lumen während TRAFHandels und werden nach Einsetzen Rezeptor in der Plasmamembran der extrazellulären, so dass spezifische Markierung von Zelloberflächenrezeptoren und die Bewertung ihrer Entfernung von der Zelloberfläche von endozytischen Veranstaltungen. Wir haben früher gezeigt, dass die Zugabe von GFP, myc oder BBS Epitope dieser Domäne GABAAR Einheiten funktionell still. Standardkontrollen durchgeführt werden sollte, um sicherzustellen, dass das markierte Protein wird in ähnlichen Mengen zu einer unbezeichnet Konstrukt exprimiert wird, dass es angemessen lokalisiert, und dass es keinen Einfluss auf die Rezeptorfunktion. Diese Charakterisierung von transfizierten Konstrukte werden auch bei der Fehlersuche die Überexpression Anliegen zu unterstützen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:811px;" width="809">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:227px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:201px;">Company</td>
			<td style="width:196px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:187px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:227px;">P3 Primary Cell 4D kit&#160;</td>
			<td style="width:201px;">Lonza</td>
			<td style="width:196px;">V4XP-3024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:227px;">&#945;-bungarotoxin, Alexa Fluor 647 conjugate</td>
			<td style="width:201px;">Molecular Probes</td>
			<td style="width:196px;">B35450</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:227px;">&#945;-bungarotoxin, Alexa Fluor 488 conjugate</td>
			<td style="width:201px;">Molecular Probes</td>
			<td style="width:196px;">B13422</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:227px;">&#945;-bungarotoxin, Alexa Fluor 594 conjugate</td>
			<td style="width:201px;">Molecular Probes</td>
			<td style="width:196px;">B13423</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:227px;">(+)-Tubocurarine chloride</td>
			<td style="width:201px;">Tocris</td>
			<td style="width:196px;">2820</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:227px;">mounting medium&#160;</td>
			<td>DAKO</td>
			<td style="width:196px;">cS703</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">DPBS no calcium,magnesium&#160;</td>
			<td style="width:201px;">Invitrogen&#160;</td>
			<td style="width:196px;">14190-136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:227px;">poly-D-lysine&#160;</td>
			<td style="width:201px;">Sigma</td>
			<td style="width:196px;">P6407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:227px;">gephyrin antibody</td>
			<td>Synaptic Systems</td>
			<td>147 011</td>
			<td>1:300</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:227px;">VIAAT/VGAT antibody</td>
			<td>Synaptic Systems</td>
			<td>131 002</td>
			<td>1:1000</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:227px;">anti GFP</td>
			<td style="width:201px;">Life Technologies</td>
			<td>A6455</td>
			<td>1:2000</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:227px;">glass bottom tissue culture dish</td>
			<td style="width:201px;">MatTek Corporation</td>
			<td colspan="2">P35G-1.5-14-C - Mattek Dishes</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:227px;">coverslips (round cover glass), #1 thickness, 12 mm</td>
			<td style="width:201px;">Warner Instruments</td>
			<td style="width:196px;">640-0702</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using an &#945;-bungarotoxin binding site tag to study gaba a receptor membrane localization and trafficking

Es wird zunehmend deutlich, dass Neurotransmitter-Rezeptoren, einschließlich ionotropen GABA A-Rezeptoren (GABAAR), Ausstellungshochdynamischen Handel und Zelloberfläche Mobilität 7.1. Rezeptorzelloberflächenlokalisierung und Endozytose zu untersuchen, die hier beschriebenen Verfahren kombiniert die Verwendung von Fluoreszenz-α-Bungarotoxin-Zellen, die mit Konstrukten, die eine α-Bungarotoxin (Bgt) Bindungsstelle (BBS). Die BBS (WRYYESSLEPYPD) an der α-Untereinheit des nikotinischen Acetylcholinrezeptors Muskeln, die mit hoher Affinität Bgt 8,9 bindet. Einbau des BBS-Website ermöglicht Fläche Lokalisierung und Messung von Rezeptor Einsetzen oder Entfernen mit Applikation exogener Fluoreszenz Bgt, wie zuvor in der Verfolgung von GABAA-und GABAB-Rezeptoren 2,10 metabo beschrieben. Neben der BBS-Website, die zwischen den Aminosäuren 4 und 5 des reifen GABAAR Untereinheit durch Standard m eingesetzt wir eine pH-sensitive GFP (pHGFP 11)olecular Biologie und PCR-Klonierung Strategien (siehe Abbildung 1) 12. Die BBS ist 3 &#39;der pH-sensitive GFP-Reporters durch ein 13-Aminosäure Alanin / Prolin-Linker getrennt ist. Für Handel in dieser Veröffentlichung, die auf festen Proben basieren beschriebenen Studien, die pHGFP dient als ein Reporter der Gesamt getaggt GABAAR Untereinheit Protein-Ebene, so dass eine Normalisierung der Bgt markierten Rezeptor Bevölkerung insgesamt Rezeptor Bevölkerung. Dies minimiert Zelle zu Bgt Färbung Signalvariabilität von höheren oder niedrigeren Ausgangs Ausdruck der markierten Untereinheiten GABAAR resultierende Zell. Außerdem die pHGFP Tag ermöglicht eine einfache Identifizierung der Konstrukt exprimierenden Zellen für Live-oder Fest Imaging Experimenten.

Charakterisierung eines BBS tagged Konstrukt wichtigen Elemente wie die Bestimmung, ob das exprimierte Protein korrekt assembliert (insbesondere Rezeptoren von mehreren Untereinheiten zusammengesetzt), Verkehre auf der Zelloberfläche lokalisiert und geeignet. Hemmende Synapsen von GABA A-Rezeptor-Cluster, die Oberfläche mit der inhibitorischen Gerüstprotein Gephyrin colokalisieren und an präsynaptischen inhibitorischen Terminals, durch den vesikulären inhibitorischen Aminosäuretransporter, die GABA und Glycin in s...

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Using an ÃƒÅ½Ã‚Â±-Bungarotoxin Binding Site Tag to Study GABA A Receptor Membrane Localization and Trafficking

Mit Hilfe eines α-Bungarotoxin Binding Site Tag an GABA A-Rezeptor-Membranlokalisierung und Handel Studieren

Hier zeigen wir die Verwendung von Fluoreszenzfarbstoff Alexa gekoppelt α-Bungarotoxin an GABA A-Rezeptor-Oberflächenlokalisierung und Endozytose in hippocampalen Neuronen zu messen. Durch die Verwendung von Konstrukten, die mit einem kurzen extrazellulären Tag, das α-Bungarotoxin, kann die Analyse der Plasma-Membran-Protein endozytischen Handel erreicht werden, bindet.

It is increasingly evident that neurotransmitter receptors, including ionotropic GABA A receptors (GABAAR), exhibit highly dynamic trafficking and cell ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Using an &#945;-Bungarotoxin Binding Site Tag to Study GABA A Receptor Membrane Localization and Trafficking

Quantitative Analysis of Synaptic Vesicle Pool Replenishment in Cultured Cerebellar Granule Neurons using FM Dyes

Quantitative Analyse der synaptischen Vesikel Pool Replenishment in Cultured Cerebellar Nervenzellen Granulat mit FM Dyes

After neurotransmitter release in central nerve terminals, SVs are rapidly retrieved by endocytosis.  Retrieved SVs are then refilled with ...

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Using MazeSuite and Functional Near Infrared Spectroscopy to Study Learning in Spatial Navigation

Mit MazeSuite und Functional Near Infrared Spectroscopy man Lernen in Spatial Navigation

MazeSuite is a complete toolset to prepare, present and analyze navigational and spatial experiments1. MazeSuite can be used to design and edit adapted ...

Imaging pHluorin-tagged Receptor Insertion to the Plasma Membrane in Primary Cultured Mouse Neurons

Imaging Receptor Insertion in die Plasmamembran pHluorin-Tag in der Grundschule Cultured Mäuseneuronen

A better understanding of the mechanisms governing receptor trafficking between the plasma membrane (PM) and intracellular compartments requires an ...

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Tobacco use leads to numerous health problems, including cancer, heart disease, emphysema, and stroke. Addiction to cigarette smoking is a prevalent ...

Fast Micro-iontophoresis of Glutamate and GABA: A Useful Tool to Investigate Synaptic Integration

Schnelle Micro-Iontophorese von Glutamat und GABA: Ein nützliches Tool, um Synaptic Integration Untersuchen

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Brain Slice Biotinylation: An Ex Vivo Approach to Measure Region-specific Plasma Membrane Protein Trafficking in Adult Neurons

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Hirnschnitt Biotinylierung: Eine<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Ansatz zur Region spezifische Plasma Membrane Protein Handel Erwachsene Neuronen messen

Regulated endocytic trafficking is the central mechanism facilitating a variety of neuromodulatory events, by dynamically controlling receptor, ion ...

Localization of Odorant Receptor Genes in Locust Antennae by RNA In Situ Hybridization

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Live-Bilder von GLUT4 Protein Menschenhandel Maus primäre hypothalamische Neurone mit Dekonvolution Mikroskopie

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Ein alternativer Ansatz zur primären Ereignissen in Neurodegeneration mit Ex Vivo Ratte Gehirnscheiben studieren

Despite&#160;numerous studies that attempt to develop reliable animal models&#160;which reflecting the primary processes underlying neurodegeneration, ...

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