Name: who is who? non-invasive methods to individually sex and mark altricial chicks
Uploaded: 2014-05-24T14:00:00
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도덕적 지원을위한 아름다운 젤과 토비아스 크라우스 울라 Kobalz에 계속 지원을위한 Janett Birkenfeld에 현장에서 열정적 인 시료 채취에 대한 실케 키퍼, 사라 키퍼, 마이클 와이즈, 코니 BARTSCH 및 실케 보이트 - Heucke에 많은 감사.

모든 절차는 동물 보호 (TierSchG)에 대한 독일의 법률을 준수 하였다. 시약 및 소모품의 1. 준비 <ol><li> 분자 수준의 물에 5 % (w / w) Chelex-100 솔루션을 준비합니다. 표준 1.5 ml의 반응 튜브에 200 ㎕의 분취 량을 준비합니다. Chelex 수지 현탁액으로부터 빠른 침전이 그것의 분취 량을 준비하는 동안 계속해서 다시 균질화 정지 할 필요가있다. 그것은 하나의 일괄 처리로 50 ㎖ 이상을...

<ol>
	<li>Russell, W. M. S., Burch, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+principles+of+humane+experimental+technique.">The principles of humane experimental technique.</a> , (1959).</li><li>Robertson, B. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+sexing+of+individual+kakapo,+Strigops+habroptilus+Aves,+from+feces.">Molecular sexing of individual kakapo, Strigops habroptilus Aves, from feces.</a> Mol. Ecol. 8, 1349-1350 (1999).</li><li>Yannic, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Description+of+microsatellite+markers+and+genotyping+performances+using+feathers+and+buccal+swabs+for+the+Ivory+gull+(Pagophila+eburnea).">Description of microsatellite markers and genotyping performances using feathers and buccal swabs for the Ivory gull (Pagophila eburnea).</a> Mol. Ecol. Resour. 11, 877-889 (2011).</li><li>Bello, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+genomic+DNA+from+feathers.">Isolation of genomic DNA from feathers.</a> J. Vet. Diagn. Invest. 13, 162-164 (2001).</li><li>Handel, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+buccal+swabs+for+sampling+DNA+from+nestling+and+adult+birds.">Use of buccal swabs for sampling DNA from nestling and adult birds.</a> Wildl. Soc. Bull. 34, 1094-1100 (2006).</li><li>Brubaker, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+noninvasive,+direct+real-time+PCR+method+for+sex+determination+in+multiple+avian+species.">A noninvasive, direct real-time PCR method for sex determination in multiple avian species.</a> Mol. Ecol. Resour. 11, 415-417 (2011).</li><li>Arima, H., Ohnishi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Usefulness+of+avian+buccal+cells+for+molecular+sexing.">Usefulness of avian buccal cells for molecular sexing.</a> Ornithological Science. 5, 139-143 (2006).</li><li>Seki, S. -. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+sexing+of+individual+Ryukyu+Robins+Erithacus+komadori+using+buccal+cells+as+a+non-invasive+source+of+DNA.">Molecular sexing of individual Ryukyu Robins Erithacus komadori using buccal cells as a non-invasive source of DNA.</a> Ornithological Science. 2, 135-137 (2003).</li><li>Wellbrock, A. H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Buccal+swabs+as+a+reliable+source+of+DNA+for+sexing+young+and+adult+Common+Swifts+(Apus+apus).">Buccal swabs as a reliable source of DNA for sexing young and adult Common Swifts (Apus apus).</a> J. Ornithol. 153, 991-994 (2012).</li><li>Marion, W. R., Shamis, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Annotated-Bibliography+of+Bird+Marking+Techniques.">Annotated-Bibliography of Bird Marking Techniques.</a> Bird Banding. 48, 42-61 (1977).</li><li>Scharff, C., Adam, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurogenetics+of+birdsong.">Neurogenetics of birdsong.</a> Curr. Opin. Neurobiol. , (2012).</li><li>Griffith, S. C., Buchanan, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Zebra+Finch:+the+ultimate+Australian+supermodel.">The Zebra Finch: the ultimate Australian supermodel.</a> Emu. 110, 5-12 (2010).</li><li>Fee, M. S., Scharff, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+songbird+as+a+model+for+the+generation+and+learning+of+complex+sequential+behaviors.">The songbird as a model for the generation and learning of complex sequential behaviors.</a> Ilar J. 51, 362-377 (2010).</li><li>Honarmand, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stressful+dieting:+nutritional+conditions+but+not+compensatory+growth+elevate+corticosterone+levels+in+zebra+finch+nestlings+and+fledglings.">Stressful dieting: nutritional conditions but not compensatory growth elevate corticosterone levels in zebra finch nestlings and fledglings.</a> PLoS On. 5, (1371).</li><li>Krause, E. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebra+finch+nestlings+beg+more+under+better+nutritional+conditions.">Zebra finch nestlings beg more under better nutritional conditions.</a> Behaviour. 148, 1239-1255 (2011).</li><li>Griffiths, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+DNA+test+to+sex+most+birds.">A DNA test to sex most birds.</a> Mol. Ecol. 7, 1071-1075 (1998).</li><li>Pluthero, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+purification+of+high-activity+Taq+DNA+polymerase.">Rapid purification of high-activity Taq DNA polymerase.</a> Nucleic Acids Res. 21, 4850-4851 (1993).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Joint+Working+Group+on+Refinement.+Laboratory+birds:+refinements+in+husbandry+and+procedures.+Fifth+report+of+BVAAWF/FRAME/RSPCA/UFAW+Joint+Working+Group+on+Refinement.">Joint Working Group on Refinement. Laboratory birds: refinements in husbandry and procedures. Fifth report of BVAAWF/FRAME/RSPCA/UFAW Joint Working Group on Refinement.</a> Lab Anim. 35, 1-163 (2001).</li></ol>

Chelex를 이용한 구강 면봉 Sexing는 매우 높은 성공률을 나타내었다. 다리 밴딩이 가능해질 때까지 절단 해츨링의 다운 깃털는 nestlings 사이에 차별화를 가능하게했다. 구강 면봉 Chelex-DNA 추출이 성공적 분자 sexing을 수행하기에 충분한 DNA를 얻었다. 성별 결정은 성적으로 동종 이형의 깃털에 의해 확인으로 100 % 정확했다. 여기에보고 성공률이 이전의 연구에서보고 된 7,9</sup...

개별 인식, sexing과 유전자형이 실험 연구의 다양한 기본 전제 조건이다. DNA 베어링 재료를 얻기 및 (심지어 어린 나이에) 명확하게 주제를 표시하는 생리, 행동, 그리고 생존에 미치는 영향을 최소화해야한다. 가능하면, 침략적인 절차는 RRR 원칙 1에 따라 피해야한다. 비 침습적 인 방법뿐만 아니라 동물에 대한 도움이됩니다뿐만 아니라 동물이 적은 치료에 의해 영향으로 얻어진 데이터를 향상시킬 수 있습니다. 조류, DNA의 sexing는 배설물이, 깃털 3,4 또는 구강 면봉 3,5,9와 같은 비 침습적으로 얻을 수있는 재료의 수에 수행 할 수 있습니다. 그들이 수행 쉽기 때문에 상관없이 피사체의 상태와 연령 구강 면봉의 조류 sexing에 대한 선택의 방법은 거의 실패하지 않습니다 및 취급이 짧고,,입니다. 구강 면봉 지금까지 DNA시판 키트 3,6 또는 시간 표준 DNA 추출 프로토콜 3,6-8 소모로 추출 하였다. 장비뿐만 아니라 오히려 비싸지 만, 자신의 프로토콜은 현장 작업을위한 과제를 부과 할 수 있습니다. 일부 세부 절차, 예를 들면 건조 및 샘플의 배양은, 현장에서 실제 없습니다. 특히 실험 프로토콜이 이미 몇 분 후 부화로에서 섹스 의존 치료를 필요로 설정의 결과를 얻을 수있는, 빠르고 비 침습적, 믿을 수있는 쉬운 방법을 촉구있다. 조류 분류군에 걸쳐 표시 개인을위한 많은 도구 상자 (10)를 개발하고있다. 사용 가능한 기술의 광범위한 연구의 목적, 종류 및 예산의 다양한 차지한다. 그러나, 작은는 nestlings를 표시하는 추가 과제와 연구자를 직면하고있다. 어떤 종에서 (예를 들면 passerines) 병아리 다리 밴드를 적용하기에 너무 작고 다른 방법을 필요로하는부모 - 자식의 동작을 변경하지 않습니다. 인식과 동물 복지 현장 및 실험실 연구에서 기술 향상에 대한 관심이 증가함에 따라, 비 침습 기술의 사용을 강력하게 권장하고 바람직하다. 이 프로토콜은 개별적으로 다리 밴드를 적용하기 전에 아주 어린는 nestlings를 표시하는 비 침습, 빠르고, 쉽게 인식하고 지속적인 방법을 제공하는 것은 가능하다. 이 표시 방법은 가장 중요한 조류 실험실 모델 종 중 하나, 얼룩말 핀치 (Taeniopygia의 guttata) 11 ~ 13에 도입된다. 이 프로토콜은 개별 마킹 기술 10 이전에 게시 된 모든 목적을 준수하며 이미 성공적으로 14, 15을 적용하고있다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="702">
	<tbody>
		<tr height="75">
			<td height="75" style="height:75px;width:191px;">Whatman 3MM Chromatography paper</td>
			<td style="width:163px;">e.g. Fisher Scientific</td>
			<td style="width:269px;">No.:3030-153</td>
			<td style="width:80px;"></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:191px;">Chelex 100 Resin</td>
			<td style="width:163px;">Biorad</td>
			<td style="width:269px;">#143-2832</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="50">
			<td height="50" style="height:50px;width:191px;">Taq polymerase</td>
			<td style="width:163px;">addgene</td>
			<td style="width:269px;">http://www.addgene.org/25712/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="75">
			<td height="75" style="height:75px;width:191px;">leg band (Flexi number rings for birds, diameter 2,5 mm)</td>
			<td style="width:163px;">Horst Stengel &#38; Sohn</td>
			<td style="width:269px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

who is who? non-invasive methods to individually sex and mark altricial chicks

대부분의 실험은 초기 자손의 성별을 결정뿐만 아니라 초기에 개별 인정 신생아의 표시를 필요로합니다. 적용 할 때마다 동물 복지 가이드 라인에 따르면, 비 침습 기술을 선호한다. 우리 그룹에서, 우리는 실험실과 현장에서 노래 조류의 종에서 작동하고, 우리는 성공적으로 섹스에 비 침습적 인 방법을 적용하고 개별적으로 병아리를 표시합니다. 이 문서는 포괄적 인 비 침습 도구 상자를 제공합니다. 새를 Sexing하기 전에 보조 성적 특성의 발현을 PCR을위한 DNA 함유 물질의 수집이 필요합니다. 우리는 구강 면봉의 DNA를 추출하여 모든 연령 (포스트 부화)의 성 조류에 빠르고 쉬운 방법을 설립했다. 결과, 3 시간 내에 얻을 수있다. 개별 표시 병아리의 다운 깃털이 부화 순서 내에서 빠른 식별을 허용하는 특정 패턴으로 트리밍됩니다하십시오. 방법의이 세트는 표준 장비 실험실에서 쉽게 적용 가능하며 일하고에 특히 적합특별한 장비와 같은 분야에서 G는 샘플링과 저장을 위해 필요합니다. 병아리의 취급을 최소화하고 표시 및 sexing 기술함으로써 동물 복지 가이드 라인의 RRR 원리를 지원하는 비 침습된다.

<html> 협측 면봉 작은 조류의 다양한 성 결정을위한 DNA를 얻기 위해 사용될 수있다 , 카나리아 (Serinus 카나리아), 벵골 피리새 류 (Lonchura의 선조체), 나이팅게일 (Luscinia의 megarhynchos), 박새 (Parus 주요)와 찌르레기 (Turdus - 샘플은 얼룩말 피리새 류 (5 년 Taeniopygia의 guttata, 99 개인, 0 세 일간)에서 수집 된 merula) (다른 종 : 샘플 크기 1-3, 나...

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Who is Who? Non-invasive Methods to Individually Sex and Mark Altricial Chicks

누구는 누구입니까? 비 침습적 인 방법 개별적으로 섹스와 마크 Altricial 병아리

이 프로토콜은 매우 빠르고, 쉽고, 비 침습, 신뢰성과 저비용 수 방법의 편리한 세트, 조류의 분자 성 결정과 자신의 비 침습, 빠르고, 안전하고 쉽게 알아볼 곧 부화 후 마킹을 제공합니다. 병아리의 제한된 처리가 필요합니다. 방법이 편리한 도구는 RRR-지침을 완전히 준수합니다.

Many experiments require early determination of offspring's sex as well as early marking of newborns for individual recognition. According to animal ...

Research

JoVE Journal

Biology

Labeling hESCs and hMSCs with Iron Oxide Nanoparticles for Non-Invasive in vivo Tracking with MR Imaging

이런 산화물로 hESCs과 hMSCs을 라벨링하는 MR 영상과 생체내 추적 비침습에 대한 Nanoparticles

In recent years, stem cell research has led to a better understanding of developmental biology, various diseases and its potential impact on regenerative ...

연구

생물학

Labeling Stem Cells with Fluorescent Dyes for non-invasive Detection with Optical Imaging

광학 이미징과 비침습 감지를위한 형광 염료와 함께 줄기 세포를 라벨링

Optical imaging (OI) is an easy, fast and inexpensive tool for in vivo monitoring of new stem cell based therapies. The technique is based on ex vivo ...

Non-invasive 3D-Visualization with Sub-micron Resolution Using Synchrotron-X-ray-tomography

싱크로 트론 - X - 레이 - tomography를 사용하여 서브 마이크론 해상도로 비침습 3D - 시각화

Little is known about the internal organization of many micro-arthropods with body sizes below 1 mm. The reasons for that are the small size and the hard ...

A Magnetic Tether System to Investigate Visual and Olfactory Mediated Flight Control in Drosophila

Drosophila에서 Visual과 강한 중재 플라이트 컨트롤을 맡은 이후로 자기 테더 시스템

It has been clear for many years that insects use visual cues to stabilize their heading in a wind stream. Many animals track odors carried in the wind. ...

Cell Block Preparation from Cytology Specimen with Predominance of Individually Scattered Cells

개별적으로 흩어져 셀의 우위와 세포학 표본에서 셀 블록 준비

This video demonstrates Shidham's method for preparation of cell blocks from liquid based cervicovaginal cytology specimens containing individually ...

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유전자 Inducible의 운명 매핑에 대한 실용적인 접근법 : 셀을 선택하고 추적하는 비주얼 가이드 VIVO에서</em

Fate maps are generated by marking and tracking cells in vivo to determine how progenitors contribute to specific structures and cell types in developing ...

A Reversible, Non-invasive Method for Airway Resistance Measurements and Bronchoalveolar Lavage Fluid Sampling in Mice

에어웨이 저항 측정 및 마우스에 Bronchoalveolar 세척 유체 샘플링에 대한 가역, 비침습 방법

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기본<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; 방법 : 동기화 및 전망

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

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