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鸡胚的壳內电转化

Overview

电转化是应用在生物医学研究中的技术,它通过将外源基因物质导入到细胞中来改变基因的表达。更确切地说,壳內电转处理的是蛋壳内的早期发育中的小鸡胚胎。在该过程中,先将DNA或敲除载体注射到目的组织中。然而,遗传物质不能穿透胞膜进入细胞内行使功能。为解决这个问题,可施加一个电场暂时破坏胞膜的完整性。该电场还会造成带负电荷的核酸穿过胞膜上的小孔向正电极迁移,因此有效地将DNA或敲除载体引入了细胞内。该技术的主要优点是可将遗传物质的导入定位到某个特定发育时期的特定组织中。这样就可研究操控某个发育事件的遗传机制。

本短片概述了壳內电转的原理,介绍了该技术要用到的工具,包括毛细针,电极和电转 仪。还演示了该过程的逐步操作,接着讨论了如何利用该技术在鸡胚中进行多种遗传操作的几个有趣例子。

Procedure

电转化是一种将外源基因物质引入到细胞的技术。对鸡蛋内的鸡胚进行电转,或称壳內电转化,可将遗传物质的导入定位到某个特定发育时期的特定组织中,因而是一个对发育生物学家及其有价值的工具。本短片将介绍壳內电转的基本原理,描述该过程的主要步骤,并讨论如何将该技术应用于研究发育中的生物进程。

首先,让我们来回顾一下电转的基本原理,以了解它是如?...

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ElectroporationIn Ovo ElectroporationGenetic MaterialCellsChick EmbryosDevelopmental BiologistsTissuesDevelopmental Time PointsDNA DeliveryMicroinjectionPlasma MembraneElectrical CurrentPoresPositive ElectrodeTransfected CellsHamburger Hamilton Stage 20Ex Ovo Culture

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Overview

0:46

Basic Principles of Electroporation

1:37

Preparing for Electroporation

3:58

Performing the Electroporation

4:45

Applications

6:21

Summary

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