Name: whole-cell patch-clamp recordings from morphologically- and neurochemically-identified hippocampal interneurons
Uploaded: 2014-09-30T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Whole-cell Patch-clamp Recordings from Morphologically- and Neurochemically-identified Hippocampal Interneurons at JoVE.com

लेखकों उसे उत्कृष्ट तकनीकी सहायता के लिए इना Wolter का शुक्रिया अदा करना चाहते हैं. VGAT-वीनस ट्रांसजेनिक चूहों डीआरएस द्वारा उत्पन्न किया गया. डॉ ए Miyawaki द्वारा प्रदान pCS2-वीनस का उपयोग वाई Yanagawa, एम Hirabayashi और राष्ट्रीय शारीरिक विज्ञान के लिए संस्थान, Okazaki, जापान में वाई कावागुची,.

आचार विवरण: सभी प्रक्रियाओं और पशु रखरखाव संस्थागत दिशा निर्देशों के अनुसार में प्रदर्शन कर रहे थे, जर्मन पशु कल्याण अधिनियम, यूरोपीय परिषद जानवरों की सुरक्षा के बारे में निर्देशक 86/609 / ईईसी, और स्थानीय...

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	<li>Freund, T. F., Buzs&#225;ki, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interneurons+of+the+hippocampus.">Interneurons of the hippocampus.</a> Hippocampus. 6 (4), 347-470 (1996).</li><li>Meyer, A. H., Katona, I., Blatow, M., Rozov, A., Monyer, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+labeling+of+parvalbumin-positive+interneurons+and+analysis+of+electrical+coupling+in+identified+neurons.">In vivo labeling of parvalbumin-positive interneurons and analysis of electrical coupling in identified neurons.</a> Journal of Neuroscience. 22, 7055-7064 (2002).</li><li>Vida, I., Halasy, K., Szinyei, C., Somogyi, P., Buhl, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unitary+IPSPs+evoked+by+interneurons+at+the+stratum+radiatum-stratum+lacunosum-moleculare+border+in+the+CA1+area+of+the+rat+hippocampus+in+vitro.">Unitary IPSPs evoked by interneurons at the stratum radiatum-stratum lacunosum-moleculare border in the CA1 area of the rat hippocampus in vitro.</a> Journal of Physiolology. 506, 755-773 (1998).</li><li>Mody, I., De Koninck, Y., Otis, T. S., Soltesz, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bridging+the+cleft+at+GABA+synapses+in+the+brain.">Bridging the cleft at GABA synapses in the brain.</a> Trends Neurosci. 17 (12), 517-525 (1994).</li><li>Bartos, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fast+synaptic+inhibition+promotes+synchronized+gamma+oscillations+in+hippocampal+interneuron+networks.">Fast synaptic inhibition promotes synchronized gamma oscillations in hippocampal interneuron networks.</a> PNAS. 99, 13222-13227 (2002).</li><li>Cobb, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+effects+of+identified+interneurons+innervating+both+interneurons+and+pyramidal+cells+in+the+rat+hippocampus.">Synaptic effects of identified interneurons innervating both interneurons and pyramidal cells in the rat hippocampus.</a> Neuroscience. 79 (3), 629-648 (1997).</li><li>Bartos, M., Vida, I., Jonas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+mechanisms+of+synchronized+gamma+oscillations+in+inhibitory+interneuron+networks.">Synaptic mechanisms of synchronized gamma oscillations in inhibitory interneuron networks.</a> Nature Review Neurosci. 8, 45-56 (2007).</li><li>Ascoli, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Petilla+terminology+nomenclature+of+features+of+GABAergic+interneurons+of+the+cerebral+cortex.">Petilla terminology nomenclature of features of GABAergic interneurons of the cerebral cortex.</a> Nature Review Neurosci. 9, 557-568 (2008).</li><li>Klausberger, T., Somogyi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+diversity+and+temporal+dynamics+the+unity+of+hippocampal+circuit+operations.">Neuronal diversity and temporal dynamics the unity of hippocampal circuit operations.</a> Science. 321, 53-57 (2008).</li><li>Buhl, E. H., Szil&#225;gyi, T., Halasy, K., Somogyi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+properties+of+anatomically+identified+basket+and+bistratified+cells+in+the+CA1+areas+of+the+rat+hippocampus+in+vitro.">Physiological properties of anatomically identified basket and bistratified cells in the CA1 areas of the rat hippocampus in vitro.</a> Hippocampus. 6, 294-305 (1996).</li><li>Kawaguchi, Y., Katsumara, H., Kosaka, T., Heizmann, C. W., Hama, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fast+spiking+cells+in+rat+hippocampus+(CA1+region)+contain+the+calcium-+binding+protein+parvalbumin.">Fast spiking cells in rat hippocampus (CA1 region) contain the calcium- binding protein parvalbumin.</a> Brain Res. 416 (2), 369-374 (1987).</li><li>Booker, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+GABAB-Receptor-Mediated+Effects+in+Perisomatic-+and+Dendrite-Targeting+Parvalbumin+Interneurons.">Differential GABAB-Receptor-Mediated Effects in Perisomatic- and Dendrite-Targeting Parvalbumin Interneurons.</a> Journal of Neuroscience. 33 (18), 7961-7974 (2013).</li><li>Uematsu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+chemical+composition+of+cortical+GABAergic+neurons+revealed+in+transgenic+Venus-expressing+rats.">Quantitative chemical composition of cortical GABAergic neurons revealed in transgenic Venus-expressing rats.</a> Cerebral Cortex. 18, 315-330 (2008).</li><li>Bischofberger, J., Engel, D., Li, L., Geiger, J. R. P., Jonas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patch-clamp+recording+from+mossy+fiber+terminals+in+hippocampal+slices.">Patch-clamp recording from mossy fiber terminals in hippocampal slices.</a> Nature Protocols. 1, 2075-2081 (2006).</li><li>Houston, C. M., Bright, D. P., Sivilotti, L. G., Beato, M., Smart, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracellular+Chloride+Ions+Regulate+the+Time+Course+of+GABA-Mediated+Inhibitory+Synaptic+Transmission.">Intracellular Chloride Ions Regulate the Time Course of GABA-Mediated Inhibitory Synaptic Transmission.</a> Journal of Neuroscience. 29 (33), 10416-10423 (2009).</li><li>Sakmann, B., Neher, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patch+clamp+techniques+for+studying+ionic+channels+in+excitable+membranes.">Patch clamp techniques for studying ionic channels in excitable membranes.</a> Annual Review Physiology. 46, 455-472 (1984).</li><li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fiji+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis.">Fiji an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nature Methods. 9, 676-682 (2012).</li><li>Geiger, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patch-clamp+recording+in+brain+slices+with+improved+slicer+technology.">Patch-clamp recording in brain slices with improved slicer technology.</a> Pflugers Archives. 443, 491-501 (2002).</li><li>Malinow, R., Tsien, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Presynaptic+enhancement+shown+by+whole-cell+recordings+of+long-term+potentiation+in+hippocampal+slices.">Presynaptic enhancement shown by whole-cell recordings of long-term potentiation in hippocampal slices.</a> Nature. 346, 177-180 (1990).</li><li>Vida, I., Bartos, M., Jonas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shunting+inhibition+improves+robustness+of+gamma+oscillations+in+hippocampal+interneuron+networks+by+homogenizing+firing+rates.">Shunting inhibition improves robustness of gamma oscillations in hippocampal interneuron networks by homogenizing firing rates.</a> Neuron. 49 (1), 107-117 (2006).</li><li>Neu, A., F&#246;ldy, C., Soltesz, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postsynaptic+origin+of+CB1-dependent+tonic+inhibition+of+GABA+release+at+cholecystokinin-positive+basket+cell+to+pyramidal+cell+synapses+in+the+CA1+region+of+the+rat+hippocampus.">Postsynaptic origin of CB1-dependent tonic inhibition of GABA release at cholecystokinin-positive basket cell to pyramidal cell synapses in the CA1 region of the rat hippocampus.</a> Journal of Physiology. 578 (1), 233-247 (2007).</li><li>Baude, A., Bleasdale, C., Dalezios, Y., Somogyi, P., Klausberger, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoreactivity+for+the+GABAA+receptor+alpha1+subunit,+somatostatin+and+Connexin36+distinguishes+axoaxonic,+basket,+and+bistratified+interneurons+of+the+rat+hippocampus.">Immunoreactivity for the GABAA receptor alpha1 subunit, somatostatin and Connexin36 distinguishes axoaxonic, basket, and bistratified interneurons of the rat hippocampus.</a> Cerebral Cortex. 17, 2094-2107 (2007).</li></ol>

हम कार्यात्मक विट्रो में morphologically- और neurochemically पहचान न्यूरॉन्स चिह्नित करने के लिए electrophysiological और neuroanatomical तकनीकों को जोड़ती है जो एक विधि का वर्णन; विशेष रूप से कॉर्टिकल निरोधात्मक आईएनएस के विभिन्न प्रकार के. प्?...

हिप्पोकैम्पस neuronal सर्किट लंबे समय के कारण मानव और कृन्तकों दोनों में उनके सीखने और स्मृति में महत्वपूर्ण भूमिका के रूप में भी स्थानिक स्किप शरीर रचना विज्ञान और शरीर विज्ञान, दोनों के लिए सम्मान के साथ, गहन जांच का विषय रहा है. समान रूप से, हिप्पोकैम्पस के प्रमुख, लेकिन सरल लामिना संगठन इस क्षेत्र Cortical नेटवर्क के संरचनात्मक और कार्यात्मक संपत्तियों को संबोधित अध्ययन का एक इष्ट विषय बना देता है. हिप्पोकैम्पस सर्किट उत्तेजक प्रिंसिपल कोशिकाओं (&gt; 80%) और एक छोटे (10-20%), लेकिन निरोधात्मक interneurons 1-3 की अत्यधिक विविध पलटन के शामिल हैं. Interneurons तेजी ionotropic GABA एक रिसेप्टर्स पर कार्य करता है जो उनके अक्षतंतु टर्मिनलों से γ aminobutyric एसिड (GABA) (GABA एक रुपए) और धीमी metabotropic गाबा बी रिसेप्टर्स (गाबा बी रुपये) जारी 4. ये निरोधात्मक तंत्र उत्तेजना counterbalance और प्रिंसिपल कोशिकाओं के excitability को विनियमित, और इस प्रकारआईआर समय और छुट्टी के पैटर्न. हालांकि, interneurons से जारी गाबा प्रिंसिपल कोशिकाओं पर, लेकिन यह भी interneurons खुद 5,6 पर न केवल काम करता है. पूर्व और पोस्टअन्तर्ग्रथनी रिसेप्टर्स interneuron के विभिन्न प्रकार के बीच प्रतिक्रिया विनियमन और निरोधात्मक आपसी बातचीत में मध्यस्थता. Interneuron नेटवर्क में इन निरोधात्मक तंत्र विभिन्न आवृत्तियों 7 पर विशेष दोलनों में पीढ़ी और जनसंख्या गतिविधि पैटर्न के आकार देने, के लिए केंद्रीय माना जाता है. पूरे सेल पैच दबाना रिकॉर्डिंग आंतरिक गुणों और न्यूरॉन्स की synaptic बातचीत की परीक्षा के लिए एक अच्छी तरह से स्थापित विधि है. हालांकि, interneuron प्रकार की उच्च विविधता के कारण, निरोधात्मक interneurons की जांच दर्ज की कोशिकाओं के कठोर पहचान की आवश्यकता है. हिप्पोकैम्पस interneuron प्रकार अलग रूपात्मक सुविधाओं और नयूरोचेमिकल मार्कर अभिव्यक्ति, संयुक्त शारीरिक और immunocytochemical ई की विशेषता है के रूप मेंxamination सटीक interneuron पहचान 6,8,9 निर्धारित करने के लिए एक साधन प्रदान कर सकते हैं. वर्तमान पत्र में हम धीमी गाबा बी के लक्षण वर्णन के लिए अनुमति देता है, एकल न्यूरॉन्स या synaptically युग्मित जोड़े से पूरे सेल पैच दबाना रिकॉर्डिंग के बाद हॉक रूपात्मक और immunocytochemical विश्लेषण द्वारा पीछा किया, intracellular लेबलिंग के साथ संयुक्त कर रहे हैं, जिसमें एक प्रयोगात्मक दृष्टिकोण का वर्णन रिसेप्टर पहचान interneurons में निरोधात्मक प्रभाव मध्यस्थता. एक उदाहरण के रूप में, हम अपने पोस्टअन्तर्ग्रथनी लक्ष्यों की सोमा और समीपस्थ डेन्ड्राइट innervates और एक &quot;तेजी से spiking&quot; (एफएस) के द्वारा होती है जो interneuron का एक प्रमुख प्रकार, तथाकथित &quot;टोकरी कोशिकाओं&quot; (ईसा पूर्व) के एक सबसेट, पर ध्यान केंद्रित कैल्शियम बाध्यकारी प्रोटीन parvalbumin (पीवी) 10,11 के पैटर्न, घनी सेल शरीर परत को कवर एक अक्षतंतु, और अभिव्यक्ति का निर्वहन. ये interneurons बड़े पोस्टअन्तर्ग्रथनी निरोधात्मक धाराओं, साथ ही प्रमुख पूर्व प्रदर्शितगाबा बी आर सक्रियण 12 के जवाब में उनके synaptic उत्पादन की synaptic मॉडुलन,. यहाँ वर्णित तकनीक के संयोजन अन्य पहचान न्यूरॉन प्रकार की एक किस्म में आंतरिक या synaptic तंत्र की जांच करने के लिए समान रूप से अच्छी तरह से लागू किया जा सकता है.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="725">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:175px;">Name</td>
			<td style="width:148px;">Company</td>
			<td style="width:152px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:251px;">Comments</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">Transgenic vGAT-venus rats</td>
			<td style="width:148px;">-</td>
			<td style="width:152px;">-</td>
			<td style="width:251px;">see Uematsu et al., 2008</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">Venus (515&#160;nm) goggles</td>
			<td style="width:148px;">BLS Ltd., Hungary</td>
			<td style="width:152px;">-</td>
			<td style="width:251px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">Dissection tools</td>
			<td style="width:148px;">i.e. FST</td>
			<td style="width:152px;">-</td>
			<td style="width:251px;">For brain removal</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:175px;">Vibratome</td>
			<td style="width:148px;">Leica</td>
			<td style="width:152px;">VT1200S</td>
			<td style="width:251px;">Or other high end vibratome with minimal vertical oscillation</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">Slice holding chambers</td>
			<td style="width:148px;">-</td>
			<td style="width:152px;">-</td>
			<td style="width:251px;">Custom-made in lab</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:175px;">Upright IR-DIC microscope</td>
			<td style="width:148px;">Olympus, Japan</td>
			<td style="width:152px;">BX50WI</td>
			<td style="width:251px;">With micromanipulator system; i.e. Luigs and Neumann, Kleindiek etc.</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">CCD camera</td>
			<td style="width:148px;">Till Photonics</td>
			<td style="width:152px;">VX55</td>
			<td style="width:251px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:175px;">505 nm LED system</td>
			<td style="width:148px;">Cairn Research</td>
			<td style="width:152px;">OptiLED system</td>
			<td style="width:251px;">Or mercury lamp or other LED system i.e. CooLED.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:175px;">Multiclamp 700B&#160;</td>
			<td style="width:148px;">Axon Instruments</td>
			<td style="width:152px;"></td>
			<td style="width:251px;">Alternatively 2x Axopatch 200B amplifiers&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:175px;">WinWCP acquisition software</td>
			<td style="width:148px;">John Dempster, Strathclyde University</td>
			<td style="width:152px;">-</td>
			<td style="width:251px;">Any quality acquisition software could be used, i.e. EPHUS, pClamp, Igor etc.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">Electrode Puller</td>
			<td style="width:148px;">Sutter</td>
			<td style="width:152px;">P-97</td>
			<td style="width:251px;">Used with box-filament</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:175px;">Borosilicate pipette glass</td>
			<td style="width:148px;">Hilgenberg, Germany</td>
			<td style="width:152px;">1405020</td>
			<td style="width:251px;">2&#160;mm outer, 1&#160;mm inner diameter, no filament</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:175px;">Peristaltic pump</td>
			<td style="width:148px;">Gilson</td>
			<td style="width:152px;">Minipuls</td>
			<td style="width:251px;">Other pumps or gravity feed could be used instead</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">Digital Thermometer</td>
			<td style="width:148px;">-</td>
			<td style="width:152px;">-</td>
			<td style="width:251px;">Custom made</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">Digital Manometer</td>
			<td style="width:148px;">Supertech, Hungary</td>
			<td style="width:152px;">-</td>
			<td style="width:251px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="34" rowspan="2" style="height:34px;width:175px;">Isolated constant voltage stimulator</td>
			<td rowspan="2" style="width:148px;">Digitimer, Cambridge</td>
			<td rowspan="2" style="width:152px;">DS-2A</td>
			<td rowspan="2" style="width:251px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="17">
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="34" rowspan="2" style="height:34px;width:175px;"><a name="RANGE!A19:D34">Biocytin</a></td>
			<td rowspan="2" style="width:148px;">Invitrogen</td>
			<td rowspan="2" style="width:152px;">B1592</td>
			<td rowspan="2">Otherwise known as &#949;-Biotinoyl-L-Lysine&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="17">
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">DL-AP5(V) disodium salt</td>
			<td style="width:148px;">Abcam Biochemicals</td>
			<td style="width:152px;">ab120271</td>
			<td style="width:251px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">DNQX disodium salt</td>
			<td style="width:148px;">Abcam Biochemicals</td>
			<td style="width:152px;">ab120169</td>
			<td style="width:251px;">Alternatively NBQX or CNQX</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">Gabazine (SR95531)</td>
			<td style="width:148px;">Abcam Biochemicals</td>
			<td style="width:152px;">ab120042</td>
			<td style="width:251px;">Alternatively bicuculline methiodide</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">R-Baclofen</td>
			<td style="width:148px;">Abcam Biochemicals</td>
			<td style="width:152px;">ab120325</td>
			<td style="width:251px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">CGP-55,845 hydrochloride</td>
			<td style="width:148px;">Tocris</td>
			<td style="width:152px;">1248</td>
			<td style="width:251px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">Streptavidin 647</td>
			<td style="width:148px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:152px;">S32357</td>
			<td style="width:251px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:175px;">anti-PV mouse monoclonal antibody</td>
			<td style="width:148px;">Swant, Switzerland</td>
			<td style="width:152px;">235</td>
			<td style="width:251px;">Working concentration 1:5000-1:10,000</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:175px;">anti-mouse secondary antibody&#160;</td>
			<td style="width:148px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:152px;">A11030</td>
			<td style="width:251px;">If using Venus or GFP rodent using a red-channel (i.e. 546 nm) is advisable.</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">Normal Goat Serum</td>
			<td style="width:148px;">Vector Labs</td>
			<td style="width:152px;">S-1000</td>
			<td style="width:251px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">Microscopy slides</td>
			<td style="width:148px;">-</td>
			<td style="width:152px;">-</td>
			<td style="width:251px;">Any high quality brand&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">Glass coverslips</td>
			<td style="width:148px;">-</td>
			<td style="width:152px;">-</td>
			<td style="width:251px;">Usually 22 x 22 mm</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">Agar spacers</td>
			<td style="width:148px;">-</td>
			<td style="width:152px;">-</td>
			<td style="width:251px;">Agar block, cut on vibratome to 300 &#956;m</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:175px;">Laser scanning confocal microscope</td>
			<td style="width:148px;">Olympus, Japan</td>
			<td style="width:152px;">Fluoview FV1000</td>
			<td style="width:251px;">Or other comparable system</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:175px;">Fiji (Fiji is just ImageJ)</td>
			<td>http://fiji.sc/Fiji</td>
			<td style="width:152px;">-</td>
			<td style="width:251px;">See Schindelin et al., 2012</td>
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whole-cell patch-clamp recordings from morphologically- and neurochemically-identified hippocampal interneurons

GABAergic निरोधात्मक interneurons मस्तिष्क की neuronal सर्किट के भीतर एक केंद्रीय भूमिका निभाते हैं. Interneurons न्यूरोनल जनसंख्या (10-20%) के एक छोटे सबसेट शामिल है, लेकिन उनके विविध कार्यों को दर्शाती है, शारीरिक रूपात्मक, और नयूरोचेमिकल विविधता के उच्च स्तर दिखा. इसलिए, interneurons की जांच महत्वपूर्ण संगठन के सिद्धांतों में अंतर्दृष्टि और neuronal सर्किट के समारोह में प्रदान करता है. यह, हालांकि, व्यक्तिगत interneuron प्रकार का चयन और पहचान के लिए एक एकीकृत शारीरिक और neuroanatomical दृष्टिकोण की आवश्यकता है. Interneuron विशेष मार्कर के प्रमोटरों के तहत फ्लोरोसेंट प्रोटीन व्यक्त ट्रांसजेनिक जानवरों की तीव्र मस्तिष्क स्लाइसें से रिकॉर्डिंग पूरे सेल पैच दबाना, लक्ष्य और electrophysiologically विशिष्ट interneuron प्रकार की आंतरिक और synaptic गुण चिह्नित करने के लिए एक कारगर तरीका प्रदान करता है. Intracellular डाई लेबलिंग के साथ संयुक्त, इस दृष्टिकोण के बाद हॉक मो के साथ बढ़ाया जा सकता हैrphological और immunocytochemical विश्लेषण, दर्ज न्यूरॉन्स के व्यवस्थित पहचान सक्षम करने से. इन विधियों cortical न्यूरॉन्स के विविध प्रकार के कार्यात्मक संपत्तियों के बारे में वैज्ञानिक सवालों की एक विस्तृत श्रृंखला के अनुरूप किया जा सकता है.

बशर्ते कि टुकड़ा गुणवत्ता दोनों सीए 1 पीसी और FS आईएनएस न्यूनतम मुश्किल से हासिल किया जा सकता से रिकॉर्डिंग, appreciably अच्छा है. vGAT प्रमोटर 13 के तहत वीनस / YFP व्यक्त ट्रांसजेनिक चूहे लाइन स्पष्ट एफएस इन, या वा?...

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Whole-cell Patch-clamp Recordings from Morphologically- and Neurochemically-identified Hippocampal Interneurons

Morphologically- और Neurochemically पहचान Hippocampal interneurons से पूरे सेल पैच दबाना रिकॉर्डिंग

Cortical नेटवर्क निरोधात्मक interneurons का एक छोटा सा, लेकिन विविध सेट द्वारा नियंत्रित कर रहे हैं. Interneurons के कार्यात्मक जांच इसलिए लक्षित रिकॉर्डिंग और कठोर पहचान की आवश्यकता है. Intracellular लेबलिंग, बाद हॉक रूपात्मक और immunocytochemical विश्लेषण के साथ न्यूरॉन्स की एकल या synaptically युग्मित जोड़े से पूरे सेल रिकॉर्डिंग से जुड़े एक संयुक्त दृष्टिकोण है यहाँ का वर्णन किया.

GABAergic inhibitory interneurons play a central role within neuronal circuits of the brain. Interneurons comprise a small subset of the neuronal ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Patch Clamp Recordings from Mouse Retinal Neurons in a Dark-adapted Slice Preparation

पैच एक डार्क अनुकूलित स्लाइस तैयारी में माउस रेटिना न्यूरॉन्स से दबाना रिकॉर्डिंग

Our visual experience is initiated when the visual pigment in our retinal photoreceptors absorbs photons of light energy and initiates a cascade of ...

Paired Patch Clamp Recordings from Motor-neuron and Target Skeletal Muscle in Zebrafish

मोटर न्यूरॉन से बनती पैच दबाना रिकॉर्डिंग और लक्ष्य Zebrafish में कंकाल की मांसपेशी

Larval zebrafish represent the first vertebrate model system to allow simultaneous patch clamp recording from a spinal motor-neuron and target muscle.  ...

Patch Clamp Recordings in Inner Ear Hair Cells Isolated from Zebrafish

Zebrafish भीतरी कान के बालों की कोशिकाओं में पैच दबाना रिकॉर्डिंग पृथक से

Patch  clamp analyses of the voltage-gated channels in sensory hair cells isolated  from a variety of species have been described previously1-4 but this  ...

Whole Cell Patch Clamp for Investigating the Mechanisms of Infrared Neural Stimulation

इन्फ्रारेड तंत्रिका उत्तेजना के तंत्र की जांच के लिए पूरे सेल पैच दबाना

It has been  demonstrated in recent years that pulsed, infrared laser light can be used to  elicit electrical responses in neural tissue, independent of ...

Patch Clamp Recordings from Embryonic Zebrafish Mauthner Cells

भ्रूणीय Zebrafish Mauthner कोशिकाओं से पैच दबाना रिकॉर्डिंग

Mauthner cells (M-cells) are large  reticulospinal neurons located in the hindbrain of teleost fish. They are key  neurons involved in a characteristic ...

Paired Whole Cell Recordings in Organotypic Hippocampal Slices

Organotypic hippocampal स्लाइस में बनती पूरे सेल रिकॉर्डिंग

Pair recordings involve simultaneous whole cell patch clamp recordings from two synaptically connected neurons, enabling not only direct ...

Whole-cell Patch-clamp Recordings in Brain Slices

ब्रेन स्लाइस में पूरे सेल पैच दबाना रिकॉर्डिंग

Whole-cell patch-clamp recording is an electrophysiological technique that allows the study of the&#160;electrical properties of a substantial part of the ...

Subcellular Patch-clamp Recordings from the Somatodendritic Domain of Nigral Dopamine Neurons

Nigral डोपामाइन न्यूरॉन्स की Somatodendritic डोमेन से Subcellular पैच दबाना रिकॉर्डिंग

Dendrites of dopaminergic neurons receive and convey synaptic input, support action potential back-propagation and neurotransmitter release. Understanding ...

Whole-cell Patch-clamp Recordings for Electrophysiological Determination of Ion Selectivity in Channelrhodopsins

चैनलरहादोपिस में आयन की चुनिंदा के इलेक्ट्रोफिज़ियोलोजिकल निर्धारण के लिए पूरे सेल पैच-क्लैंप रिकॉर्डिंग

Over the past decade, channelrhodopsins became indispensable in neuroscientific research where they are used as tools to non-invasively manipulate ...

Auditory Brainstem Response and Outer Hair Cell Whole-cell Patch Clamp Recording in Postnatal Rats

श्रवण Brainstem प्रतिक्रिया और बाहरी बाल कोशिका पूरी सेल पैच दबाना जन्मोत्तर चूहों में रिकॉर्डिंग

The outer hair cell is one of the two types of sensory hair cells in the mammalian cochlea. They alter their cell length with the receptor potential to ...