Name: unilateral pyramidotomy of the corticospinal tract in rats for assessment of neuroplasticity-inducing therapies
Uploaded: 2014-12-15T14:00:00
Duration: 8 min 41 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Unilateral Pyramidotomy of the Corticospinal Tract in Rats for Assessment of Neuroplasticity-inducing Therapies at JoVE.com

Эта работа была поддержана Международным спинного Research Trust и доверие Rosetrees.

Заявление по этике: Все процедуры проводились в соответствии с руководящими указаниями внутренних дел Великобритании и животных (научные процедуры) Закон 1986 года. 1. хирургии и травмы Примечание: Использование крысы тяжелее 220 г может помочь с послеоперационного восстановления, если хирург считает, животные часто теряют больше, чем 10% от их предоперационной массы тела. <ol><li> Перед операцией, проверить животных для их предпочтения передней лапы с тестом цилиндра выращивания 15 или Монтойя staicase теста 24. Предпочтительно, вырезать пирамида / CST соответствующие доминирующей передней лапой. ПРИМЕЧАНИЕ: В течение двух дней до операции, поместите следующие элементы в клетках, так что крысы ознакомиться с продуктов питания, которые будут полезны в период выздоровления после операции: гидрогеля пакетов, мокрый пюре, и высокая калорийность пищевых добавок. Стерильные версии этих пищевых добавок доступны из различных поставщиков. </li><li> Обезболить женский LИстр с капюшоном крыс (весом от 200 до 250 г) с ИФ (5% индукции и от 1 до 2% для технического обслуживания) в кислороде (расхода: 1,5 л / мин). ПРИМЕЧАНИЕ: Выбор анестезии важно. Вдыхание анестетика позволяет быстрее регулирования глубины анестезии кетамином, чем, который также широко используется. Isoflurane позволяет лучше контролировать частоты дыхания и глубины. Выбор анестетика является изофлуран. Примечание: Использование крысы тяжелее 220 г может помочь с послеоперационного восстановления, если хирург считает, животные часто теряют больше, чем 10% от их предоперационной массы тела. </li><li> Администрирование Carprofen подкожно в качестве анальгетика, когда животные анестезировали для уменьшения воспаления и обеспечить обезболивание. Примечание: Carprofen сделано в течение пирамидотомия хирургии в нашей лаборатории по совету нашего ветеринара. Опиаты могут вызвать дальнейшее угнетение дыхания во время операции. </li><li> Поддержание животных при 37 ° С во время операции с использованием домothermic система одеяло и ректальной температуры зонда. </li><li> Подтвердите полная анестезия путем проверки лапы щепотка вывода рефлекс и рефлекс моргания. Примечание: Дополнительно: Для борьбы с дыхательными проблемами во время операции, интубации и вентиляции могут быть возможным. Однако, имейте в виду, что нужно трахеи смещаться во время операции. </li><li> После того, как под наркозом, поместите крысы в ​​положении лежа на спине, бриться брюшной шею и стерилизовать с 1% хлоргексидина салфетки и / или спиртовыми салфетками. Наложите стерильную хирургическую одеяло над животным и сохранить место в стерильной во все времена. </li><li> После того, как под наркозом, поместите крысы в ​​положении лежа на спине, бриться брюшной шею и стерилизовать с 1% хлоргексидина и спиртовыми салфетками. Наложите стерильную хирургическую одеяло над животным и сохранить место в стерильной во все времена. ПРИМЕЧАНИЕ: При необходимости, голова крысы могут быть установлены в стереотаксической рамы в положении лежа на спине во время операции, чтобы отключить мобильность головы, т.е.затылочная кость. </li><li> Сделайте долгий от 2 до 3 см срединный разрез от подбородка до почти ростральной конце грудины с использованием стерильного скальпеля (# 10). При желании, нанести небольшие бульдог зажимы, чтобы убрать кожу. </li><li> Блант рассекать верхние слои ткани, такие как желез (например, подчелюстной железы и околоушной железы) и мышц, покрывающих трахеи с использованием обратного действия с притупленными ножниц и зубчатых щипцов. Всегда оставаться на линии. Ткани должны легко отделить. </li><li> После того, как трахея подвергается, сворачивайте его в сторону. По средней линии видно под ней два белых жировых отложений, маркировка срединной линии на ростральной конца. </li><li> Спинка с белыми жировых отложений, тупая рассекают ткани до вентральной поверхности черепа (затылочной кости кость) будет достигнута. </li><li> Вставьте давно зубчатые ретракторы (длина зуба 5,5 мм или 16 мм), чтобы сохранить трахею смещается в одну сторону (максимум 1 см) и выставить основание черепа. Смещение трахеи может Обьструктура дыхание. ПРИМЕЧАНИЕ: Для некоторых животных, ослабьте втягивающие на несколько раз во время операции, чтобы снять напряжение на трахее, например, каждые 10 мин в течение 2 мин. Крюк ретракторы может быть использован вместо длинных зубьями ретракторов чтобы уменьшить напряжение смещения. </li><li> Тщательно прижечь мелкие видны кровеносные сосуды в ростральной конце пошло на гортани, чтобы избежать кровотечения. ПРИМЕЧАНИЕ: Для того, чтобы предотвратить прижигание Возвратный гортанный нерв кровеносные сосуды тщательно оторвался от ткани стены, прежде чем они прижигали. </li><li> Настройте микроскоп для остальной части операции. </li><li> Удалить надкостницу, покрывающую основание черепа с тонким пинцетом. Отрегулируйте преднатяжителями для достижения наилучшего представления для бурения. </li><li> Почувствуйте неровную поверхность в затылочной кости кости с тонким пинцетом, отметив, возвышение на средней линии, которая охватывает основной артерии. Рострально, череп становится поднят небольшой выпуклости. </li><li> В зависимости от того, какой стороной желании поражение, просверлить отверстие около 1 мм латеральнее средней линии в медиолатеральной движений. ПРИМЕЧАНИЕ: Помните, что крыса в положении лежа на спине, а его левая сторона может быть на следователей правой стороны! </li><li> После того, как отверстие сделано, увеличить к средней линии с небольшими вертикальными вверх и сверху донизу движений со сверлом до базилярной артерии не станет четким и увеличить боков, по крайней мере, 2 мм. </li><li> Убедитесь в том, базилярная артерия четко виден. Пирамида может быть идентифицирован по его слегка выпуклые формы (рис 2) и граничащих кровеносные сосуды. </li><li> Удалите все оставшиеся фрагменты костей с тонким пинцетом. </li><li> Нанесите один каплю Доксапрам гидрохлорид, дыхательной стимулятор, на языке. </li><li> Откройте твердую мозговую оболочку в продольном направлении с 26 иглы и тонкие щипцы сбоку от основной артерии. Окунитесь в спинномозговой жидкости (ликвора) и любое кровотечение с ватными палочками. </li><li> Как избежать injuры в основной артерии, сделать разрез шириной около 1,5 мм, охватывающей ширину пирамиды и 0,5 мм в глубину с Vännäs Весна Ножницы перпендикулярно к основной артерии (рис 2), чтобы прервать волокон CST. ПРИМЕЧАНИЕ: Отметьте microscissors заранее на 0,5 мм от самых кончиков. После того, как твердая мозговая оболочка открывается базилярной артерии могут быть перемещены немного сбоку позволяет более широкий доступ к пирамиде. </li><li> Повторите разрез, используя конец 26 иглы, чтобы обеспечить поражение включает в себя волокна, близкие к основной артерии. </li><li> Остановить кровотечение с легким нажимом, применяемой ватные палочки. Необязательно, разрез может быть покрыта Gelfoam. </li><li> Снимите преднатяжителями, заменить ткани и шов только кожу 3-0 викрил швов. </li><li> После операции, не держать животное в инкубаторе при 32 ° С до полностью проснулся и управлять 5 мл физиологического раствора подкожно, если это необходимо. Не оставляйте животное без присмотра. </li><li> Дайте Carporfen подкожнокак противовоспалительное, и как болеутоляющее при послеоперационной боли в один прекрасный день послеоперационные. </li><li> Монитор животных тесно в течение одной недели после операции и по крайней мере один раз в неделю после этого. </li><li> В соответствии с требованиями после операции, гель пакеты место гидратации, протертые детского питания, мокрый пюре и сухого чау на полу клетки. Обеспечить бутылки с водой с длинными носиками (не имеющих шарикоподшипник клапаны). </li></ol>

<ol>
	<li>Lemon, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Descending+pathways+in+motor+control.">Descending pathways in motor control.</a> Annual review of neuroscience. 31, 195-218 (2008).</li><li>Lemon, R. N., Griffiths, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparing+the+function+of+the+corticospinal+system+in+different+species:+organizational+differences+for+motor+specialization.">Comparing the function of the corticospinal system in different species: organizational differences for motor specialization.</a> Muscle &amp; nerve. 32, 261-279 (2005).</li><li>Starkey, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+behavioural+function+following+a+pyramidotomy+lesion+of+the+corticospinal+tract+in+adult+mice.">Assessing behavioural function following a pyramidotomy lesion of the corticospinal tract in adult mice.</a> Experimental neurology. 195, 524-539 (2005).</li><li>Starkey, M. L., Bartus, K., Barritt, A. W., Bradbury, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chondroitinase+ABC+promotes+compensatory+sprouting+of+the+intact+corticospinal+tract+and+recovery+of+forelimb+function+following+unilateral+pyramidotomy+in+adult+mice.">Chondroitinase ABC promotes compensatory sprouting of the intact corticospinal tract and recovery of forelimb function following unilateral pyramidotomy in adult mice.</a> Eur J Neurosci. 36, 3665-3678 (2012).</li><li>Brosamle, C., Schwab, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cells+of+origin,+course,+and+termination+patterns+of+the+ventral,+uncrossed+component+of+the+mature+rat+corticospinal+tract.">Cells of origin, course, and termination patterns of the ventral, uncrossed component of the mature rat corticospinal tract.</a> The Journal of comparative neurology. 386, 293-303 (1997).</li><li>Brosamle, C., Schwab, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ipsilateral,+ventral+corticospinal+tract+of+the+adult+rat:+ultrastructure,+myelination+and+synaptic+connections.">Ipsilateral, ventral corticospinal tract of the adult rat: ultrastructure, myelination and synaptic connections.</a> Journal of neuroctology. 29, 499-507 (2000).</li><li>Bareyre, F. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+injured+spinal+cord+spontaneously+forms+a+new+intraspinal+circuit+in+adult+rats.">The injured spinal cord spontaneously forms a new intraspinal circuit in adult rats.</a> Nat Neurosci. 7, 269-277 (2004).</li><li>Chen, Q., Smith, G. M., Shine, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+activation+is+required+for+NT-3-induced+axonal+plasticity+in+chronic+spinal+cord+injury.">Immune activation is required for NT-3-induced axonal plasticity in chronic spinal cord injury.</a> Exp Neurol. 209, 497-509 (2008).</li><li>Z'Graggen, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compensatory+sprouting+and+impulse+rerouting+after+unilateral+pyramidal+tract+lesion+in+neonatal+rats.">Compensatory sprouting and impulse rerouting after unilateral pyramidal tract lesion in neonatal rats.</a> J Neurosci. 20, 6561-6569 (2000).</li><li>Rosenzweig, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extensive+spontaneous+plasticity+of+corticospinal+projections+after+primate+spinal+cord+injury.">Extensive spontaneous plasticity of corticospinal projections after primate spinal cord injury.</a> Nat Neurosci. 13, 1505-1510 (2010).</li><li>Z'Graggen, W. J., Metz, G. A., Kartje, G. L., Thallmair, M., Schwab, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+recovery+and+enhanced+corticofugal+plasticity+after+unilateral+pyramidal+tract+lesion+and+blockade+of+myelin-associated+neurite+growth+inhibitors+in+adult+rats.">Functional recovery and enhanced corticofugal plasticity after unilateral pyramidal tract lesion and blockade of myelin-associated neurite growth inhibitors in adult rats.</a> J Neurosci. 18, 4744-4757 (1998).</li><li>Kartje-Tillotson, G., O'Donoghue, D. L., Dauzvardis, M. F., Castro, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pyramidotomy+abolishes+the+abnormal+movements+evoked+by+intracortical+microstimulation+in+adult+rats+that+sustained+neonatal+cortical+lesions.">Pyramidotomy abolishes the abnormal movements evoked by intracortical microstimulation in adult rats that sustained neonatal cortical lesions.</a> Brain Res. 415, 172-177 (1987).</li><li>Thallmair, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurite+growth+inhibitors+restrict+plasticity+and+functional+recovery+following+corticospinal+tract+lesions.">Neurite growth inhibitors restrict plasticity and functional recovery following corticospinal tract lesions.</a> Nature Neuroscience. 1, 124-131 (1998).</li><li>Akbik, F. V., Bhagat, S. M., Patel, P. R., Cafferty, W. B., Strittmatter, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomical+plasticity+of+adult+brain+is+titrated+by+Nogo+Receptor+1.">Anatomical plasticity of adult brain is titrated by Nogo Receptor 1.</a> Neuron. 77, 859-866 (2013).</li><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke,+cortical+ablation,+parkinsonism+and+spinal+cord+injury.">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacol. 39, 777-787 (2000).</li><li>Steward, O., Sharp, K., Yee, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+re-assessment+of+the+effects+of+intracortical+delivery+of+inosine+on+transmidline+growth+of+corticospinal+tract+axons+after+unilateral+lesions+of+the+medullary+pyramid.">A re-assessment of the effects of intracortical delivery of inosine on transmidline growth of corticospinal tract axons after unilateral lesions of the medullary pyramid.</a> Experimental neurology. 233, 662-673 (2012).</li><li>Thallmair, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurite+growth+inhibitors+restrict+plasticity+and+functional+recovery+following+corticospinal+tract+lesions.">Neurite growth inhibitors restrict plasticity and functional recovery following corticospinal tract lesions.</a> Nature neuroscience. 1, 124-131 (1998).</li><li>Weidner, N., Ner, A., Salimi, N., Tuszynski, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+corticospinal+axonal+plasticity+and+functional+recovery+after+adult+central+nervous+system+injury.">Spontaneous corticospinal axonal plasticity and functional recovery after adult central nervous system injury.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 98, 3513-3518 (2001).</li><li>Schnell, L., Schneider, R., Kolbeck, R., Barde, Y. A., Schwab, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurotrophin-3+enhances+sprouting+of+corticospinal+tract+during+development+and+after+adult+spinal+cord+lesion.">Neurotrophin-3 enhances sprouting of corticospinal tract during development and after adult spinal cord lesion.</a> Nature. 367, 170-173 (1994).</li><li>Starkey, M. L., Bleul, C., Maier, I. C., Schwab, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rehabilitative+training+following+unilateral+pyramidotomy+in+adult+rats+improves+forelimb+function+in+a+non-task-specific+way.">Rehabilitative training following unilateral pyramidotomy in adult rats improves forelimb function in a non-task-specific way.</a> Experimental neurology. 232, 81-89 (2011).</li><li>Ueno, M., Hayano, Y., Nakagawa, H., Yamashita, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraspinal+rewiring+of+the+corticospinal+tract+requires+target-derived+brain-derived+neurotrophic+factor+and+compensates+lost+function+after+brain+injury.">Intraspinal rewiring of the corticospinal tract requires target-derived brain-derived neurotrophic factor and compensates lost function after brain injury.</a> Brain : a journal of neurology. 135, 1253-1267 (2012).</li><li>Maier, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Constraint-induced+movement+therapy+in+the+adult+rat+after+unilateral+corticospinal+tract+injury.">Constraint-induced movement therapy in the adult rat after unilateral corticospinal tract injury.</a> J Neurosci. 28, 9386-9403 (2008).</li><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke,+cortical+ablation,+parkinsonism+and+spinal+cord+injury.">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39, 777-787 (2000).</li><li>Montoya, C. P., Campbell-Hope, L. J., Pemberton, K. D., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+&amp;#34;staircase+test&amp;#34;:+a+measure+of+independent+forelimb+reaching+and+grasping+abilities+in+rats.">The &amp;#34;staircase test&amp;#34;: a measure of independent forelimb reaching and grasping abilities in rats.</a> Journal of neuroscience methods. 36, 219-228 (1991).</li><li>Soblosky, J. S., Song, J. H., Dinh, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graded+unilateral+cervical+spinal+cord+injury+in+the+rat:+evaluation+of+forelimb+recovery+and+histological+effects.">Graded unilateral cervical spinal cord injury in the rat: evaluation of forelimb recovery and histological effects.</a> Behavioural brain research. 119, 1-13 (2001).</li><li>Soleman, S., Yip, P., Leasure, J. L., Moon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustained+sensorimotor+impairments+after+endothelin-1+induced+focal+cerebral+ischemia+(stroke)+in+aged+rats.">Sustained sensorimotor impairments after endothelin-1 induced focal cerebral ischemia (stroke) in aged rats.</a> Experimental neurology. 222, 13-24 (2010).</li><li>Paxinos, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Rat Nervous System. , (1995).</li><li>Benowitz, L. I., Goldberg, D. E., Madsen, J. R., Soni, D., Irwin, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inosine+stimulates+extensive+axon+collateral+growth+in+the+rat+corticospinal+tract+after+injury.">Inosine stimulates extensive axon collateral growth in the rat corticospinal tract after injury.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 96, 13486-13490 (1999).</li><li>Zhou, L., Baumgartner, B. J., Hill-Felberg, S. J., McGowen, L. R., Shine, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurotrophin-3+expressed+in+situ+induces+axonal+plasticity+in+the+adult+injured+spinal+cord.">Neurotrophin-3 expressed in situ induces axonal plasticity in the adult injured spinal cord.</a> J Neurosci. 23, 1424-1431 (2003).</li></ol>

Авторы не имеют ничего раскрывать.

Мы описали модель пирамидотомия травмы. Кортикоспинальных тракта разрезают на уровне ствола головного мозга. С технической точки зрения эта операция требует много осторожности и точности. Ствола мозга вмещает дыхательные центры и сердечно-сосудистых центров в нескольких ядер, таких как ядра неоднозначной и solitarii встроенного в ретикулярной формации под пирамидами. Если надрез слишком глубоко, это может привести к внезапным затруднением дыхания, которые могут быть фатальными. Мы даем Dopram непосредственно перед разрезом, чтобы увеличить дыхательной деятельности человека, чтобы предотвратить внезапное прекращение дыхания. Если дыхание останавливается стоит вентиляции животное для следующих пяти минут с кислородом, как это может восстановиться. Кроме того, любое повреждение артерии абсолютно следует избегать. Осложнения в течение первых нескольких дней postinjury являются: еще кровоизлияния в стволе мозга влияет на жизненно важные функции, значительную потерю веса, тяжелой дыхательной difficulties из-за трахеи перемещения и тяжелых ориентации и баланса проблем животного из-за обширных травм, включая оливки просто сбоку от пирамид. Эти осложнения могут рассматриваться как может быть гуманно убиты концы и животных. Тщательный контроль в течение первой недели после операции имеет важное значение. Прикорм можно дать для того, чтобы уравновесить потерю веса. Воспаление дыхательных путей (скрипучий дыхание), как правило проходит в течение одного-двух дней. Как правило, молодые животные легче работать в качестве их шея менее глубоким. Кроме того, они более устойчивы и имеют меньше осложнений с дыханием. Это требует некоторой практики, чтобы добиться полного поражения КНТ с пирамидотомия. Кроме того, в двух исследованиях Стюард и др. 16, в котором изложены повторить прежний эксперимент Benowitz и др. 28, заявленных первоначально высокие показатели смертности и что некоторые из их поражений были неполными. Поведенческиедефициты также быть переменной. Мы рекомендуем новый хирург выполняет множество практика пирамидотомия операции до того, как полный эксперимент, чтобы проверить кандидатскую терапии осуществляется. Пути предотвращения неполные поражений повторяя разрез с игла убедившись Кортикоспинальных волокна, близкие к основной артерии разорваны, как описано в данном протоколе. Другие варианты для аспирации поражения сайт с наконечником стекла всасывания пипетки, как описано в Чжоу и др., 2003 29. Тонкой вольфрамовой проволоки также может быть использован, чтобы сократить тракт 22. Альтернативой пирамидотомия является сокращение шейки C3 спинной КНТ в одностороннем порядке, а затем сократить с вентральной подхода к ipsilesional C2 вентральной части КНТ 18. Однако можно утверждать, что полная поражение не требуется, если целью является изучение прорастание contralesional КНТ; Если большинство пирамиды поражений и в ответ прорастание из непораженный стороне возникает это может быть достаточным. Одна из целей модели пирамидотомия поражение для абляции одну сторону корково-кишечного тракта и использовать Нейропластичность индуцирующего лечения, чтобы стимулировать прорастание пластичность и интактной не поврежденных волокон. Чтобы проверить нервно-защитной терапии эта модель не подходит и другие модели травмы, такие как контузии травмы должны быть использованы. Результаты pyramidotomies оцениваются чаще всего с тестирования поведения и анатомии. Горизонтальный тест лестница, тест цилиндр Воспитание и лестница тест Монтойя наиболее часто используемые оценки поведения. Другие тесты, описанные в литературе, осадок достижения тест, тест веревка, анализ походки и липкую ленту тест 3,17-19. Тем не менее, результаты большинства поведенческих теста часто только контролируются вплоть до максимум 42 дней postlesion 3,4,11,17,18,20-22. Из опыта прошлых лет, грызуны восстановить большую функцию в более поздние моменты времени без какого-либо вмешательства лечения. Мы показали, тхаT Test горизонтальная лестница и тест Монтойя лестница осадок достижения обнаружить инвалидности до более позднем этапе. Они могут быть использованы для измерения функционального восстановления из-за обработки. Поражение полноте судят по ПКС гамма окрашивания (который маркирует CST волокон в спинной столбцов) спинного мозга на шейном уровне ростральной или eriochrome цианинового окрашивания поперечных сечений месте повреждения. Биотинилированных декстран амин может быть введен в contralesional коры для оценки прорастания неповрежденных волокон по всей средней линии в денервированной спинного мозга области. В заключение, модель пирамидотомия хорош для оценки Нейропластичность вызывающие способности лечебного препарата для центральных травм нервной системы, если операция успешно освоили. Он оценивает пластичность неповрежденных волокон. Следующим шагом будет использовать более клинически значимой модели, такой как контузии травмы, чтобы оценить способность препарата преодолевать большие injuriES затрагивающий несколько трактов.

Кортикоспинальных путей (CST) является одним из основных путей двигателя в спинном мозге человека. Повреждения тракта после спинного мозга приводит травматизма в значительной потери ловкости. CST особенно важно для тонкой движения двигателя в людях, таких, как значный движения и дистальной мышечного контроля. Он также находится на грызунах, хотя его анатомической локализации в спинном мозге отличается от людей и CST ущерб менее отключение 1-4. Один из естественных модель CST травмы включает в одностороннем порядке пирамидотомия, где пирамида в брюшной мозга режется ростральная в перекрест (рисунок 1). Пирамиды ясно анатомическая особенность на брюшной стороне продолговатого мозга, через которые CST работает, прежде чем он decussates. У крыс, большинство волокон (около 95%) decussate на хвостовом конце продолговатого мозга и после этого найти в спинной медиальной части спинного мозга. Тем не менее, approximatЭли 10% decussated волокна идут в дорсолатеральных столбцов. Оставшиеся ~ 5% волокон остаться зачеркнутым на той же стороне и отдых в брюшной медиальной части 5,6. После пирамидотомия спинного мозга теряет Прямой ввод с противоположной CST (рис 1). Пирамидотомия модель особенно хороша для тестирования ответов интактной волокон непораженный КНТ лечения. Это позволяет оценить пластичность и прорастание интактных волокон по всей средней линии в спинном мозге, которые иннервируют денервированных области. Кортикоспинальных тракта наблюдается значительно прорастают в спинной моделей травматизма и посредником особенно передних конечностей восстановления 7-10. Лечение может стремиться к улучшению данного восстановления передних конечностей. Эффективность терапии могут быть проверены с оценки поведения, анатомические методы Розыск непораженный путей и терминальных электрофизиологических экспериментов 3,11,12. &lt;/ P&gt; Преимущество по сравнению с большинством других доклинических моделях спинномозговых травм является то, что он специально поражает одну тракт по сравнению с другими повреждениями спинного мозга часто затрагивающих несколько трактов. Только один тракт в ясной, поверхностный анатомического расположения является поражением,. Еще одним преимуществом является то, что пирамидотомия является воспроизводимой модели травмы. Это подходит в естественных условиях ресурса для исследователей для проверки эффекта потенциальных Нейропластичность вызывающие лечения, которые направлены на восстановление двигательной функции после травм или расстройств, влияющих на систему 13,14 двигателя.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Norbrook</td>
			<td>Vm No; 02000/4229</td>
			<td>give 5mg/kg twice daily</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homeothermic Blanket System</td>
			<td>Harvard Instruments</td>
			<td>507222F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>B506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Scissors- Tough Cut</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14058-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11019-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Long-toothed Alm retractors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>17009-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cautery system kit</td>
			<td>Harvard Instruments</td>
			<td>726067</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fine Dumont forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon Steel burrs</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>19007-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dopram V-drops</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td></td>
			<td>apply 1 drop to tongue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gelfoam</td>
			<td>Equimedical</td>
			<td>EQU705001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-0 Vicryl sutures</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>operating microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compact Anaesthesia System Isoflurane K/F Single Gas</td>
			<td>VetTech Solutions</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scales</td>
			<td>Ohaus</td>
			<td>NVT3201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon Steel Scalpel blades No. 10</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td align="right">201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25g needles</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>NN-2525R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>syringes (1ml and 5ml)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SS+01T1 / SS*05SE1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline (Sodium Chloride 0.9%)</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td>Pl 08828/0178</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton buds</td>
			<td>Johnson and Johnson</td>
			<td align="right">5000207582502</td>
			<td>sterilize before use</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

unilateral pyramidotomy of the corticospinal tract in rats for assessment of neuroplasticity-inducing therapies

Кортикоспинальных путей (КНТ), может быть полностью разорваны в одностороннем порядке в мозговой пирамид ствола мозга грызунов. КНТ двигателя тракта, который имеет большое значение для дистального мышечного контроля в организме человека и, в меньшей степени, у грызунов. Одностороннее сокращение одного результатов пирамиды к потере КНТ иннервации спинного мозга, главным образом, на противоположной стороне спинного мозга, ведущей к переходным двигательные нарушения в передних и понес ущерб ловкости. ОДНОСТОРОННЯЯ проекции корково-кишечного тракта являются незначительными. Мы усовершенствовали наш хирургический метод, чтобы повысить вероятность поражения полноты. Мы описываем послеоперационный уход. Дефицит на тесте Монтойя лестница гранул достигает и лестницы теста горизонтальной, показанные здесь, было обнаружено до 8 недель postinjury. Дефицит по испытанию цилиндра выращивания выявляются только временно. Таким образом, тест цилиндр может быть только подходит для обнаружения короткого срока восстановления. Мы покажем, как электрофизиологическии анатомически, можно оценить повреждения и пластиковые изменения. Мы также описывается, как анализировать волокна из неповрежденную КНТ прорастания через срединную линию в неблагополучных районах. Это является сложной задачей, чтобы получить&gt; 90% полных поражений последовательно из-за близости к основной артерии в мозге и выживаемость может быть низкой. Альтернативные хирургические подходы и поведенческие испытания описаны в данном протоколе. Пирамидотомия модель является хорошим инструментом для оценки Нейропластичность вызывающие процедуры, которые увеличивают прорастания неповрежденных волокон после травмы.

Watch this Scientific Journal Video about Unilateral Pyramidotomy of the Corticospinal Tract in Rats for Assessment of Neuroplasticity-inducing Therapies at JoVE.com

Unilateral Pyramidotomy of the Corticospinal Tract in Rats for Assessment of Neuroplasticity-inducing Therapies

Односторонний пирамидотомия из кортикоспинальных тракта у крыс для оценки нейропластики вызывающие Терапии

Кортикоспинальных тракта, одним из основных путей сенсомоторных, может быть поражений в одностороннем мозга грызунов с целью проверки Нейропластичность индуцирующего терапии для центральной нервной системы. Эта хирургическая процедура (&quot;пирамидотомия&quot;) и послеоперационные оценки описаны в данном протоколе.

The corticospinal tract (CST) can be completely severed unilaterally in the medullary pyramids of the rodent brainstem. The CST is a motor tract that has ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Assessment of Ultrasonic Vocalizations During Drug Self-administration in Rats

Оценка Ультразвуковые Вокализации Во наркотиками Самоуправление у крыс

Drug self-administration procedures are commonly used to study behavioral and neurochemical changes associated with human drug abuse, addiction and ...

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

Общий метод оценки Инкубация Сахароза Тяга у крыс

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and ...

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Расширение эмбриональных и взрослых нервных стволовых клеток путем<em&gt; В Utero</em&gt; Электропорации или вирусных Стереотаксическая инъекций

Somatic stem cells can divide to generate additional stem cells (expansion) or more differentiated cell types (differentiation), which is fundamental for ...

Micromanipulation of Gene Expression in the Adult Zebrafish Brain Using Cerebroventricular Microinjection of Morpholino Oligonucleotides

Микроманипуляция экспрессии генов в головном мозге взрослых данио рерио Использование церебровентрикулярных Микроинъекции олигонуклеотиды Морфолино

Manipulation of gene expression in tissues is  required to perform functional studies. In this paper, we demonstrate the  cerebroventricular ...

Growing Neural Stem Cells from Conventional and Nonconventional Regions of the Adult Rodent Brain

Выращивание нервные стволовые клетки из обычных и нетрадиционных областях мозга взрослых грызунов

Recent work demonstrates that central nervous system (CNS) regeneration and tumorigenesis involves populations of stem cells (SCs) resident within the ...

One Mouse, Two Cultures: Isolation and Culture of Adult Neural Stem Cells from the Two Neurogenic Zones of Individual Mice

Один мышь, двух культур: Выделение и культивирование взрослых нервных стволовых клеток из двух Нейрогенные зон отдельных мышей

The neurosphere assay and the adherent monolayer culture system are valuable tools to determine the potential (proliferation or differentiation) of adult ...

Personalized Needles for Microinjections in the Rodent Brain

Персонализированные иглы для микроинъекций в мозге, грызунов

Microinjections have been used for a long time for the delivery of drugs or toxins within specific brain areas and, more recently, they have been used to ...

The Power of Interstimulus Interval for the Assessment of Temporal Processing in Rodents

Мощность Interstimulus интервала для оценки временных обработки грызунов

Temporal processing deficits have been implicated as a potential elemental dimension of higher-level cognitive processes, commonly observed in ...

Bilateral Assessment of the Corticospinal Pathways of the Ankle Muscles Using Navigated Transcranial Magnetic Stimulation

Двусторонней оценки кортикоспинальных путей лодыжки мышц используя переход транскраниальная магнитная стимуляция

Distal leg muscles receive neural input from motor cortical areas via the corticospinal tract, which is one of the main motor descending pathway in humans ...

Determining the Functional Status of the Corticospinal Tract Within One Week of Stroke

Определение функционального состояния Кортикоспинального тракта в течение одной недели после инсульта

High interindividual variability in the recovery of upper limb (UL) function after stroke means it is difficult to predict an individual&#39;s potential ...