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膜片钳电生理技术

Overview

神经元细胞膜上有离子通道,它们控制电荷流入和流出细胞,从而调节神经元激发。一种用于研究这些通道的生物物理学特性的极为有用的技术被称为膜片钳记录。在这种方法中,神经科学家把抛光的玻璃微吸管置于细胞上通过吸力形成高电阻封接。这个过程分隔了一小“片“包含一种或多种离子通道的膜。通过微吸管中的电极,研究人员可以“钳制”或控制膜的电属性,这对分析通道活动很重要。该电极还能记录跨膜电压的变化,或离子通过膜的流动。

本短片首先回顾了膜片钳电生理学的原理,介绍了必要的设备,描述了各种类型的膜片钳测量模式,其中包括全细胞式,细胞粘附式,穿孔式,内翻外式和外翻外式膜片钳。接下来,概述了一个典型的全细胞膜片钳实验的关键步骤,并做了电流 - 电压(IV)曲线。最后,我们提供了膜片钳记录的应用以演示如何在当今的神经生理学实验室里评估离子通道的生物物理学特性,细胞的兴奋性,和神经活性化合物。

Procedure

膜片钳记录是一项非常有用的技术,它用于研究控制神经元激活的离子通道的生物物理学特性。

该方法需要将玻璃微电极压在细胞上以隔离出一小“片”的细胞膜,其中包含一个或多个离子通道。

实验装置还让科学家能通过精确控制通过细胞膜的电压“钳制”该膜片的电环境,根据离子通道类型的不同,它将影响通过该膜的离子流动并允许对这些通道进行复杂的研究。

本...

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Patch Clamp ElectrophysiologyBiophysical PropertiesIon ChannelsGlass MicropipetteMembrane PatchVoltage ControlElectrical EnvironmentIon FlowPatch Clamp TechniqueExperiment StepsApplicationsMembrane PotentialIon MovementElectrical CurrentsPatch Clamp Rig

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Overview

1:04

Principles Behind Patch Clamping

3:20

Patch Clamp Configurations

4:43

Preparing Micropipettes and Forming a Seal

6:05

Whole-cell Patch Clamp Procedure

7:15

Applications

9:11

Summary

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