JoVE Logo

Sign In

אלקטרופיזיולוגיה של מהדק תיקון

Overview

קרום תאי נוירון מאוכלסים ערוצי יונים השולטים בתנועת המטען לתוך ומחוץ לתא, ובכך מווסתים ירי נוירונים. טכניקה שימושית מאוד אחת לחקירת התכונות הביופיסיות של ערוצים אלה נקראת הקלטת מהדק תיקון. בשיטה זו, מדעני מוח מניחים מיקרופיפט זכוכית מלוטשת על תא ומחילים יניקה כדי ליצור חותם התנגדות גבוהה. תהליך זה מבודד "תיקון" קטן של ממברנה המכילה ערוץ יונים אחד או יותר. באמצעות אלקטרודה בתוך micropipette, החוקרים יכולים "להדק" או לשלוט על המאפיינים החשמליים של הממברנה, אשר חשוב לניתוח של פעילות הערוץ. האלקטרודה מאפשרת גם שינויים במתח על פני הממברנה, או זרימת היונים דרך הממברנה, להיות מתועד.

וידאו זה מתחיל בסקירה כללית של העקרונות שמאחורי אלקטרופיזיולוגיה של מהדק תיקון, מבוא לציוד הדרוש, ותיאורים של תצורות התיקון השונות, כולל תאים שלמים, מחוברים לתאים, מחוררים, מבפנים החוצה, ותיקונים חיצוניים. לאחר מכן, השלבים העיקריים של ניסוי מהדק תיקון תא שלם טיפוסי מפורטים, שבו נוצרת עקומת מתח זרם (IV). לבסוף, יישומים של הקלטת מהדק תיקון מסופקים כדי להדגים כיצד המאפיינים הביופיסיים של ערוצי יונים, עירור תאים, ותרכובות נוירואקטיביות מוערכים במעבדות נוירופיזיולוגיות היום.

Procedure

הקלטת מהדק תיקון היא טכניקה שימושית ביותר לחקירת התכונות הביופיסיות של ערוצי היון השולטים בהפעלה העצבית.

ההליך כרוך בלחיצת מיקרופיפט זכוכית על תא על מנת לבודד "תיקון" קטן של ממברנה המכילה תעלות יונים אחת או יותר.

ההתקנה הניסיונית מאפשרת עוד יותר למדענים "להדק" את הסביבה החשמלית...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Tags

Skip to...

0:00

Overview

1:04

Principles Behind Patch Clamping

3:20

Patch Clamp Configurations

4:43

Preparing Micropipettes and Forming a Seal

6:05

Whole-cell Patch Clamp Procedure

7:15

Applications

9:11

Summary

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved