Name: long-term time lapse imaging of mouse cochlear explants
Uploaded: 2014-11-02T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Long-term Time Lapse Imaging of Mouse Cochlear Explants at JoVE.com

Tack till Willy Sun för tekniskt stöd och Dr Kris Gellynck för värdefulla kommentarer och tre anonyma granskare för deras konstruktiva råd. Detta arbete har finansierats av Sunnybrook Hearing Regeneration Initiative

Mus vävnad skördades från Sox2 EGFP -reporter möss 12 hållna och avlivas i enlighet med kanadensiska rådet om Animal Care riktlinjer för vård och användning av försöksdjur. 1. Odling Embryonala hörselsnäckor <ol><li> Supplement Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM) genom blandning av 8,89 ml DMEM, 1 ml fetalt bovint serum (FBS), 100 | il av 100x N2 supplement, och 10 | il av 10 mg / ml ciprofloxacin. Supplement Hanks Balanced Salt Solution (HBSS...

<ol>
	<li>Wu, D. K., Kelley, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+inner+ear+development.">Molecular mechanisms of inner ear development.</a> Cold Spring Harbor perspectives in biology. 4, (2012).</li><li>Shim, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+auditory+sensory+epithelium:+the+instrument+of+sound+perception.">The auditory sensory epithelium: the instrument of sound perception.</a> The international journal of biochemistry &amp; cell biology. 38, 1827-1833 (2006).</li><li>Van de Water, T., Ruben, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+of+the+inner+ear+in+organ+culture.">Growth of the inner ear in organ culture.</a> The Annals of otology, rhinology, and laryngology. 83, 1-16 (1974).</li><li>Jacques, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dual+function+for+canonical+Wnt/beta-catenin+signaling+in+the+developing+mammalian+cochlea.">A dual function for canonical Wnt/beta-catenin signaling in the developing mammalian cochlea.</a> Development. 139, 4395-4404 (2012).</li><li>Castellano-Munoz, M., Peng, A. W., Salles, F. T., Ricci, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Swept+field+laser+confocal+microscopy+for+enhanced+spatial+and+temporal+resolution+in+live-cell+imaging.+Microscopy+and+microanalysis+:+the+official+journal+of+Microscopy.">Swept field laser confocal microscopy for enhanced spatial and temporal resolution in live-cell imaging. Microscopy and microanalysis : the official journal of Microscopy.</a> Society of America, Microbeam Analysis Society, Microscopical Society of Canada. 18, 753-760 (2012).</li><li>Szarama, K. B., Gavara, N., Petralia, R. S., Chadwick, R. S., Kelley, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thyroid+hormone+increases+fibroblast+growth+factor+receptor+expression+and+disrupts+cell+mechanics+in+the+developing+organ+of+corti.">Thyroid hormone increases fibroblast growth factor receptor expression and disrupts cell mechanics in the developing organ of corti.</a> BMC developmental biology. 13, 6 (2013).</li><li>Appler, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gata3+is+a+critical+regulator+of+cochlear+wiring.">Gata3 is a critical regulator of cochlear wiring.</a> The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 33, 3679-3691 (2013).</li><li>Wibowo, I., Pinto-Teixeira, F., Satou, C., Higashijima, S., Lopez-Schier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compartmentalized+Notch+signaling+sustains+epithelial+mirror+symmetry.">Compartmentalized Notch signaling sustains epithelial mirror symmetry.</a> Development. 138, 1143-1152 (2011).</li><li>Hashimoto, S., Kato, N., Saeki, K., Morimoto, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selection+of+high-potential+embryos+by+culture+in+poly(dimethylsiloxane)+microwells+and+time-lapse+imaging.">Selection of high-potential embryos by culture in poly(dimethylsiloxane) microwells and time-lapse imaging.</a> Fertility and sterility. 97, 332-337 (2012).</li><li>Matsuoka, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphology-based+prediction+of+osteogenic+differentiation+potential+of+human+mesenchymal+stem+cells.">Morphology-based prediction of osteogenic differentiation potential of human mesenchymal stem cells.</a> PloS one. 8, (2013).</li><li>Ma, G. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=et+al.Transforming+growth+factor-beta1+and+-beta2+in+gastric+precancer+and+cancer+and+roles+in+tumor-cell+interactions+with+peripheral+blood+mononuclear+cells+in+vitro.">et al.Transforming growth factor-beta1 and -beta2 in gastric precancer and cancer and roles in tumor-cell interactions with peripheral blood mononuclear cells in vitro.</a> PloS one. 8, (2013).</li><li>Taranova, O. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SOX2+is+a+dose-dependent+regulator+of+retinal+neural+progenitor+competence.">SOX2 is a dose-dependent regulator of retinal neural progenitor competence.</a> Genes &amp; development. 20, 1187-1202 (2006).</li><li>Chen, P., Segil, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=p27(Kip1)+links+cell+proliferation+to+morphogenesis+in+the+developing+organ+of+Corti.">p27(Kip1) links cell proliferation to morphogenesis in the developing organ of Corti.</a> Development. , 1581-1590 (1999).</li></ol>

Det finns flera tekniska punkter att tänka på när kulturer är etablerade och i upprättandet av tidsförlopp mikroskop för att långsiktigt avbildning. Vi använder basalmembranmatris som ett substrat för odling av cochlea explantat, men substratet bör matchas till den celltyp. För att till exempel bild neuronala kulturer kan det vara bättre att ge en fibronektin beläggning. Inkubationstemperatur och gassammansättning bör också väljas beroende på vävnadstyp. Att välja en ål...

Den däggdjurs snäckan är en mycket beställt komplext organ. I musen, mellan framväxten av den primitiva innerörat från öron vesikler på dag E11 och slutförande av utvecklings programmet vid första tiden efter födseln, flera vågor av cellsignalering och samordnade förändringar i genuttryck sker. Köra från bas till spets cochlea kanalen är ljudet upptäcka sensoriska epitel, eller organ Corti. Utveckling av organ Corti är utsökt kontrolleras så att i slutet av utvecklingen kommer det att bestå av en enda rad av inre hårceller, tre rader av yttre hårceller varvas med fem rader av stödjande celler (två rader av pelare celler, tre rader av Deiters &#39;celler) 1. Avvikelse från detta exakta order medför hörselnedsättning, heighlighting vikten av studye FATTAT uppkomst och mönstring av den sensoriska epithemlium 2. In vitro odling av embryonala musen cochlea är ett viktigt verktyg för att studera mekanismerna för utvecklingen av organ Corti. Denna teknik grundades 1974 och under de senaste 40 åren, har använts för att belysa många av de mekanismer genom vilka den sensoriska epitelet specificeras och Cortis organ etablerade 3. Snäckan är ett komplext organ med dynamiska utvecklingsprocesser; en manipulation kan ta så länge som sju dagar att manifestera 1. Till exempel, när man lägger till GSK 3β inhibitorer till ett cochlea explantatet kulturen vid E13, den optimala inkubationstiden för att observera en stark effekt av föreningen är sex dagar 4. Live avbildning av utvecklings snäckan medger undersökning förändringar i morfologi Cortis organ, förändringar i genuttryck, spårning av migrerande, förökar eller döende celler, och det tillåter realtid observation av resultaten av farmaceutiska medel och störning av signalering vägar. Hittills levande avbildning av snäckanhar främst utförts med hjälp av konfokalmikroskopi att avbilda små områden av Cortis organ under korta tidsperioder 5-8, men denna teknik har begränsningar på grund av explant livskraft. I avbildning av effekterna av långsiktiga manipulationer på långsamma utvecklingsprocesser, är bildmiljön avgörande. Typiskt en konfokala Bildproduktion system använder en fuktig plastlåda som sitter på mikroskopet. Värme och fukt kan komma ut genom luckorna i inkubation rutan där den möter mikroskopbordet, genom access fönstren, genom de svängbara öppningar och genom luckor runt olika delar av microscope- såsom målet eller ljuskällan. Detta är inte optimalt för en hälsosam explantat i mer än två eller tre dagar. Vi definierar &quot;kuvös mikroskop&quot; som ett inverterat mikroskop förseglat inne i en standard CO2 inkubator, snarare än en inkubator byggd runt mikroskopet. En inkubator mikroskop extenderar livet av experimentet så att i stället för avbildning under två eller tre dagar, kan prover avbildas i upp till två veckor. En inkubator mikroskop ger en utmärkt miljö för celltillväxt och differentiering, med minimal störning till explantation kulturer och standardkontrollerade betingelser. I studier som sker över flera dagar är det vanligt att ta till avbildnings prover dagligen genom att ta bort dem från inkubatorn och transporterar dem till ett inverterat fluorescensmikroskop. Detta förhållningssätt kan arbeta, ta bort disken från inkubatorn fogar stress på känsliga utveckla vävnaden. Förändringar i surhetsgrad odlingsmediet och svängningar i temperaturen på grund av avlägsnande från inkubatorn kan resultera i suboptimal utveckling och ohälsosamt vävnad. Avbildning av samma region vid samma fokalplan och i samma orientering vid varje tidpunkt är extremt utmanande. Genom att använda ett automatiserat system inom en inkubator, är det möjligt att bevara friskavävnad, för att samla in bilderna vid flera tidpunkter och för att säkerställa att samma område fångas i varje ram. Under senare år har flera integrerade mikroskop vävnads inkubatorer har utvecklats, dessa har varit till nytta, inte bara i klinisk praxis 9 men också i stamcells och cancerforskning 10,11. Här presenterar vi ett protokoll för långsiktig levande avbildning av embryonala mus cochlea explants. Vi använder en automatiserad mikroskope-system i en vanlig CO2 inkubator som har förmågan att ta bilder av flera prover vid inställda tidpunkter. Systemet består av ett inverterat mikroskop inställd inuti en inkubator. Proverna placeras i en roterande podium som tillåter avbildning av multipla prover vid varje tidpunkt. Belysning, bildfångst, och rotation av podiet styrs av ett automatiserat system drivs genom metamorfa programvara. Genom att sätta en avbildningsrutin med hjälp av operatörsprogrammet kan vi ställa ett experiment för att köra upp till two veckor med minimal mänsklig inblandning. I det här exemplet använder vi både ljusa fält och fluorescens för att visa storskalig tillväxt och omarrangemang av snäckan, och specifikt prosensory regionen. I detta experiment kommer hörselsnäckor dissekeras från Sox2 EGFP reporter möss på embryonala dag E13. In vitro kulturer kommer att upprättas och sedan avbildas under fem dagar.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modified Eagle media</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12430</td>
			<td>Multiple brands manufacture this</td>
			<td>http://www.lifetechnologies.com/us/en/home/life-science/cell-culture/mammalian-cell-culture/classical-media/dmem.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basement membrane extract&#160;</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354230</td>
			<td>Matrigel. Alternative similar products are available from other suppliers. 
			http://catalog2.corning.com/Lifesciences/en-US/Shopping/Product.aspx?categoryname=Cell+Culture+and+Bioprocess%28Lifesciences%29|Extracellular+Matrix+Proteins+ECMs+and+Attachment+Factors%28Lifesciences%29|Matrigel+Basement+Membrane+Matrix+%28Lifesciences%29</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16000044</td>
			<td>Multiple brands manufacture this 
			http://www.lifetechnologies.com/search/global/searchAction.action?query=fbs&#38;resultPage=1&#38;results PerPage=15&#38;autocomplete=</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>5630080</td>
			<td>Multiple brands manufacture this 
			http://www.lifetechnologies.com/search/global/searchAction.action?query=hepes&#38;resultPage=1&#38;results PerPage=15&#38;autocomplete=</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 x N2 supplement</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17502-048</td>
			<td>Multiple brands manufacture this 
			http://www.lifetechnologies.com/search/global/searchAction.action?query=n2&#38;resultPage=1&#38;results PerPage=15&#38;autocomplete=</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ciprofloxacin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>17850-5G-F</td>
			<td>Multiple brands manufacture this 
			http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/fluka/17850?lang=en&#38;region=CA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hank&#39;s balanced salt solution</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14170161</td>
			<td>Multiple brands manufacture this. Should be refidgerated before use. 
			http://www.lifetechnologies.com/us/en/home/life-science/cell-culture/mammalian-cell-culture/reagents/balanced-salt-solutions/hbss-hanks-balanced-salt-solution.html?s_kwcid=AL!3652!3!26107410508!e!!g!!hbss&#38;ef_id=xoFOglw2s UMAAMU8:20140228185720:s</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Forceps</td>
			<td>Fine Science tools</td>
			<td>11254-20</td>
			<td>Size number 5 
			http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=350&#38;CategoryId=29</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curette&#160;</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10080-05</td>
			<td>size 1 mm&#160; 
			http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=91&#38;CategoryId=118</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insect Pins</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>26001-35</td>
			<td>Must be stainless Steel 
			http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=124</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mm plastic dishes</td>
			<td>Corning/Falcon</td>
			<td>351006</td>
			<td>Multiple brands manufacture this</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>charcoal</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>05105-250G</td>
			<td>Multiple brands manufacture similar items 
			http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/fluka/05105?lang=en&#38;region=CA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>184 silicone elastomer</td>
			<td>Dow/Corning&#160;</td>
			<td>SYLGARD&#174; 184 SILICONE ELASTOMER KIT</td>
			<td>Dishes are home made several weeks in advance.&#160; Silicone elastomer can be from any supplier.<a href="http://www.dowcorning.com/applications/search/products/Details.aspx?prod=01064291">http://www.dowcorning.com/applications/search/products/Details.aspx?prod=01064291</a></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass bottom dishes</td>
			<td>MatTek</td>
			<td>P35G-0-10-C</td>
			<td>The dimensions of the dish are determined by the specifications of the imaging system.&#160; 35 mm diameter, 10mm well, number 0 coverslip fits Olympus Vivaview FL. 
			http://glass-bottom-dishes.com/catalog/index.php?main_page=product_info&#38;cPath= 1_4_15&#38;products_id=2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Zeiss&#160;</td>
			<td>495101-9804-000</td>
			<td>&#160;Stemi 2000 model. multiple brands manufacture similar items 
			http://microscopy.zeiss.com/microscopy/en_de/products/stereo-zoom-microscopes/stemi-2000.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cold Light Source</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>000000-1063-182</td>
			<td>Multiple brands manufacture similar items 
			http://microscopy.zeiss.com/microscopy/en_de/products/microscope-components/lightsources.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescent Stereomicroscope&#160;</td>
			<td>Leica microsystems</td>
			<td>Contact Leica microsystems</td>
			<td>Leica M165-FC. Multiple brands manufacture similar items 
			http://www.leica-microsystems.com/products/stereo-microscopes-macroscopes/fluorescence/details/product/leica-m165-fc/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator Microscope +imaging software</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>Contact Olympus</td>
			<td>Inverted microcope sealed inside a Co2 incubator. Vivaview FL incubator microscope with proprietry Metamorpoh imaging software. 
			http://olympuscanada.com/seg_section/product.asp?product=1055&#38;c=0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clean bench</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>51029701</td>
			<td>Multiple brands manufacture similar items 
			http://www.thermoscientific.com/en/product/heraguard-eco-clean-bench.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 incubator</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>3310</td>
			<td>Multiple brands manufacture similar items 
			http://www.thermoscientific.com/en/products/co2-incubators.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar Flow hood</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>51026651</td>
			<td>Multiple brands manufacture similar items 
			http://www.thermoscientific.com/en/products/biological-safety-cabinets-clean-benches.html</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

long-term time lapse imaging of mouse cochlear explants

Här presenterar vi en metod för långsiktig tidsförlopp avbildning av levande embryonala mus cochlea explants. Det utvecklingsprogram ansvarig för att bygga den starkt ordnade, komplex struktur av däggdjurs cochlea intäkterna för cirka tio dagar. För att studera förändringar i genuttryck under denna period och deras reaktion på läkemedel eller genetisk manipulering, är nödvändiga långsiktiga avbildning. Tidigare har Bildproduktion typiskt begränsats av livskraft explanterad vävnad i en fuktig kammare ovanpå en vanlig mikroskop. Svårigheter att upprätthålla optimala förutsättningar för kultur tillväxt med avseende på luftfuktighet och temperatur har placerat gränser på hur lång avbildning experiment. Ett mikroskop integreras i en modifierad vävnadsodlingsinkubator ger en utmärkt miljö för långsiktig-levande avbildning. I denna metod visar vi hur man kan upprätta embryonala mus cochlea explants och hur man använder en inkubator mikroskop för att bedriva time lapse fantasinng med både ljusa fält och fluorescerande mikroskopi för att undersöka beteendet hos en typisk embryonala dag (E) 13 cochlea explant och Sox2, en markör av prosensory cellerna i snäckan, under 5 dagar.

Här visar vi ett montage (figur 1) och en film (figur 2) visar hur en typisk organotypisk cochlea Explantation kommer att växa om det pläterade på E13.5. En Sox2 reporter mus användes för att visualisera prosensory regionen. Filmen illustrerar att snäckan undergår tillväxt och konvergens och förlängning, behöver cellerna i det laterala området av grönt Sox2 domän verkar inte för att dela upp som den vävnad som omger den expanderar. Detta är en egenska...

Watch this Scientific Journal Video about Long-term Time Lapse Imaging of Mouse Cochlear Explants at JoVE.com

Long-term Time Lapse Imaging of Mouse Cochlear Explants

Live avbildning av embryonala däggdjur snäckan är en utmaning eftersom de utvecklingsprocesser till hands verkar på en tidsmässig lutning under tio dagar. Här presenterar vi en metod för odling och sedan avbilda embryonal cochlea explantat vävnad som tas från en fluorescerande reporter musen över fem dagar.

Långsiktig Time Lapse avbildning av Mouse Cochlear Explantat

Here we present a method for long-term time-lapse imaging of live embryonic mouse cochlear explants. The developmental program responsible for building ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Multiple-mouse Neuroanatomical Magnetic Resonance Imaging

Flera-mus neuroanatomiska Magnetic Resonance Imaging

The field of mouse phenotyping with magnetic resonance imaging (MRI) is rapidly growing, motivated by the need for improved tools for characterizing and ...

Time-lapse Live Imaging of Clonally Related Neural Progenitor Cells in the Developing Zebrafish Forebrain

Time-lapse Live avbildning av kloner som är närbesläktade neurala stamceller i utvecklingsländerna Zebrafish framhjärnan

Precise patterns of division, migration and differentiation of neural progenitor cells are crucial for proper brain development and function1,2. To ...

A Polished and Reinforced Thinned-skull Window for Long-term Imaging of the Mouse Brain

En polerad och förstärkt Gallrad-skalle Fönster för långsiktig Imaging för mus Brain

In vivo imaging of cortical function requires optical access to the brain without disruption of the intracranial environment. We present a method to form ...

Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Acute Slices of the Adult Mouse Forebrain

Time-lapse avbildning av Neuroblast Migration i akuta skivor av vuxen mus framhjärnan

There is a substantial body of evidence indicating that new functional neurons are constitutively generated from an endogenous pool of neural stem cells ...

In vivo Postnatal Electroporation and Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Mouse Acute Brain Slices

In vivo Postnatal Electroporation and Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Mouse Acute Brain Slices

In vivo Postnatal elektroporation och Time-lapse avbildning av neuroblast migration i mus Akut hjärnan skivor

The subventricular zone (SVZ) is one of the main neurogenic niches in the postnatal brain. Here, neural progenitors proliferate and give rise to ...

Agarose Microchambers for Long-term Calcium Imaging of Caenorhabditis elegans

Agarose Microchambers for Long-term Calcium Imaging of Caenorhabditis elegans

Agarose Microchambers för Långsiktig Kalcium Imaging av<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Behavior is controlled by the nervous system. Calcium imaging is a straightforward method in the transparent nematode Caenorhabditis elegans to measure ...

Time-lapse Confocal Imaging of Migrating Neurons in Organotypic Slice Culture of Embryonic Mouse Brain Using In Utero Electroporation

Time-lapse Confocal Imaging of Migrating Neurons in Organotypic Slice Culture of Embryonic Mouse Brain Using In Utero Electroporation

Time-lapse-konfokalbildning av migrerande neuroner i organotypisk skivkultur av embryonalt mushinne<em&gt; I Utero</em&gt; Elektroporation

In utero electroporation is a rapid and powerful approach to study the process of radial migration in the cerebral cortex of developing mouse embryos. It ...

Generation and Long-term Maintenance of Nerve-free Hydra

Generation and Long-term Maintenance of Nerve-free Hydra

Generering och långvarigt underhåll av nervfria<em&gt; Hydra</em

The interstitial cell lineage of Hydra includes multipotent stem cells, and their derivatives: gland cells, nematocytes, germ cells, and nerve cells. The ...

Assessment of Long-term Depression Induction in Adult Cerebellar Slices

Bedömning av långvarig depression induktion hos vuxna cerebellär skivor

Synaptic plasticity provides a mechanism for learning and memory. For cerebellar motor learning, long-term depression (LTD) of synaptic transmissions from ...

Long-Term, Serum-Free Cultivation of Organotypic Mouse Retina Explants with Intact Retinal Pigment Epithelium

Långsiktig, serumfri odling av organotypiska musreta explanter med intakt retinalpigmentepitetel

In ophthalmic research, there is a strong need for in vitro models of the neuroretina. Here, we present a detailed protocol for organotypic culturing of ...