Name: trabecular meshwork response to pressure elevation in the living human eye
Uploaded: 2015-06-20T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Trabecular Meshwork Response to Pressure Elevation in the Living Human Eye at JoVE.com

Supported in part by National Institute of Health contracts R01-EY13178, and P30-EY08098 (Bethesda, MD), the Eye and Ear Foundation (Pittsburgh, PA), and unrestricted grants from Research to Prevent Blindness (New York, NY).

Ethiek Verklaring: goedkeuring werd verkregen van de Institutional Review Board van de Universiteit van Pittsburgh School of Medicine voor recruitment onderwerp begon. Alle proefpersonen mits schriftelijk toestemming voor deelname aan het onderzoek. 1. Data Acquisition <ol><li> Pressure Elevation <ol><li> Neem basismetingen (IOP en oktober metingen) van indruppelen één druppel van 0,5% proparacaine in het oog. Wacht 3 min voor werkzaamheid. </li><li> Voorzichtig druk uitoefenen om de tijdelijke sclera met de...

<ol>
	<li>Quigley, H. A., Broman, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+number+of+people+with+glaucoma+worldwide+2010+and+2020.">The number of people with glaucoma worldwide 2010 and 2020.</a> The British journal of ophthalmolog. 90, 262-267 (2006).</li><li>Sommer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+intraocular+pressure+and+primary+open+angle+glaucoma+among+white+and+black+Americans.+The+Baltimore+Eye+Survey.">Relationship between intraocular pressure and primary open angle glaucoma among white and black Americans. The Baltimore Eye Survey.</a> Archives of ophthalmolog. 109, 1090-1095 (1991).</li><li>Sommer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Racial+differences+in+the+cause-specific+prevalence+of+blindness+in+east+Baltimore.">Racial differences in the cause-specific prevalence of blindness in east Baltimore.</a> The New England journal of medicin. 325, 1412-1417 (1991).</li><li>Leske, M. C., Connell, A. M., Wu, S. Y., Hyman, L., Schachat, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distribution+of+intraocular+pressure.">Distribution of intraocular pressure.</a> The Barbados Eye Study. Archives of ophthalmolog. 115, 1051-1057 (1997).</li><li>Leske, M. C., Wu, S. Y., Hennis, A., Honkanen, R., Nemesure, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risk+factors+for+incident+open-angle+glaucoma:+the+Barbados+Eye+Studies.">Risk factors for incident open-angle glaucoma: the Barbados Eye Studies.</a> Ophthalmolog. 115, 85-93 (2008).</li><li>Mitchell, P., Lee, A. J., Rochtchina, E., Wang, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Open-angle+glaucoma+and+systemic+hypertension:+the+blue+mountains+eye+study.">Open-angle glaucoma and systemic hypertension: the blue mountains eye study.</a> Journal of glaucom. 13, 319-326 (2004).</li><li>Mitchell, P., Smith, W., Attebo, K., Healey, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+open-angle+glaucoma+in+Australia.+The+Blue+Mountains+Eye+Study.">Prevalence of open-angle glaucoma in Australia. The Blue Mountains Eye Study.</a> Ophthalmolog. 103, 1661-1669 (1996).</li><li>Gabelt, B., Kaufman, P., Kaufman, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Adler's Physiology of the Ey. , 237-289 (2003).</li><li>Grant, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+aqueous+perfusion+in+enucleated+human+eyes).">Experimental aqueous perfusion in enucleated human eyes).</a> Archives of ophthalmolog. 69, 783-801 (1963).</li><li>Jocson, V. L., Sears, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+aqueous+perfusion+in+enucleated+human+eyes.+Results+after+obstruction+of+Schlemm's+canal.">Experimental aqueous perfusion in enucleated human eyes. Results after obstruction of Schlemm's canal.</a> Archives of ophthalmolog. 86, 65-71 (1971).</li><li>Maepea, O., Bill, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressures+in+the+juxtacanalicular+tissue+and+Schlemm's+canal+in+monkeys.">Pressures in the juxtacanalicular tissue and Schlemm's canal in monkeys.</a> Experimental eye researc. 54, 879-883 (1992).</li><li>Johnstone, M. A., Grant, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure-dependent+changes+in+structures+of+the+aqueous+outflow+system+of+human+and+monkey+eyes.">Pressure-dependent changes in structures of the aqueous outflow system of human and monkey eyes.</a> American journal of ophthalmolog. 75, 365-383 (1973).</li><li>Overby, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+mechanobiology+of+Schlemm's+canal+endothelial+cells+in+glaucoma.">Altered mechanobiology of Schlemm's canal endothelial cells in glaucoma.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of Americ. , (2014).</li><li>Allingham, R. R., de Kater, A. W., Ethier, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Schlemm's+canal+and+primary+open+angle+glaucoma:+correlation+between+Schlemm's+canal+dimensions+and+outflow+facility.">Schlemm's canal and primary open angle glaucoma: correlation between Schlemm's canal dimensions and outflow facility.</a> Experimental eye researc. 62, 101-109 (1996).</li><li>Camras, L. J., Stamer, W. D., Epstein, D., Gonzalez, P., Yuan, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+trabecular+meshwork+stiffness+on+outflow+facility+in+normal+human+and+porcine+eyes.">Differential effects of trabecular meshwork stiffness on outflow facility in normal human and porcine eyes.</a> Investigative ophthalmolog., &amp; visual scienc. 53, 5242-5250 (2012).</li><li>Last, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastic+modulus+determination+of+normal+and+glaucomatous+human+trabecular+meshwork.">Elastic modulus determination of normal and glaucomatous human trabecular meshwork.</a> Investigative ophthalmolog., &amp; visual. 52, 2147-2152 (2011).</li><li>Lutjen-Drecoll, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+morphology+of+the+trabecular+meshwork+in+primate+eyes.">Functional morphology of the trabecular meshwork in primate eyes.</a> Progress in retinal and eye researc. 18, 91-119 (1999).</li><li>Li, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pilocarpine-induced+dilation+of+Schlemm's+canal+and+prevention+of+lumen+collapse+at+elevated+intraocular+pressures+in+living+mice+visualized+by+OCT.">Pilocarpine-induced dilation of Schlemm's canal and prevention of lumen collapse at elevated intraocular pressures in living mice visualized by OCT.</a> Investigative ophthalmolog., &amp; visual scienc. 55, 3737-3746 (2014).</li><li>Francis, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphometric+analysis+of+aqueous+humor+outflow+structures+with+spectral-domain+optical+coherence+tomography.">Morphometric analysis of aqueous humor outflow structures with spectral-domain optical coherence tomography.</a> Investigative ophthalmolog., &amp; visual. 53, 5198-5207 (2012).</li><li>Kagemann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+visualization+of+aqueous+humor+outflow+structures+in-situ+in+humans.">3D visualization of aqueous humor outflow structures in-situ in humans.</a> Experimental eye researc. 93, 308-315 (2011).</li><li>Kagemann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+assessment+of+Schlemm's+canal+by+spectral-domain+optical+coherence+tomography.">Identification and assessment of Schlemm's canal by spectral-domain optical coherence tomography.</a> Investigative ophthalmolog., &amp; visual. 51, 4054-4059 (2010).</li><li>Kagemann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IOP+Elevation+Reduces+Schlemm's+Canal+Cross-sectional+Area.">IOP Elevation Reduces Schlemm's Canal Cross-sectional Area.</a> Investigative ophthalmolog &amp; visual scienc. , (2014).</li></ol>

Deze techniek maakt gebruik van niet-invasieve observatie van de mechanische respons van zacht weefsel SC instorten kwantificeren. Toekomstige werkzaamheden met behulp van menselijke kadaver ogen nodig is om weefsel doorbuigingen kalibreren werkelijke weefsel stijfheid na dissectie. Maar, deze studies dezelfde beperkingen van eerdere uitstroom modellen lijden; bepaald dat de bijdragen van levend spier weefsel spanning niet aanwezig zal zijn. Verdere kalibratie in een levend zoogdier oogmodel kan kalibratie van beeldvorm...

Glaucoom is wereldwijd de tweede belangrijkste oorzaak van onomkeerbare blindheid 1. Verhoogde intraoculaire druk (IOP) een belangrijke causale risicofactor voor de aanwezigheid en progressie van glaucoom 2-7. &#160; IOP wordt geregeld door het evenwicht tussen de vorming en de uitstroom van waterige humor 8. De locaties van de grootste uitstroomweerstand de juxtacanicular weefsel en de binnenwand van het kanaal van Schlemm (SC), het raakvlak tussen SC en het trabeculaire netwerk (TM) 9-11. Hoewel TM stijfheid kan bijdragen tot het voorkomen van SC ineenstorting tegenover IOP verhoging, Overby et al. 12 onlangs aangetoond dat genexpressie in glaucoom wordt veranderd, resulterend in verhoogde SC endotheliale verstijving, belemmeren de vorming van poriën, wat leidt tot verhoging van IOP 13 ogen met glaucoom. TM morfologie en stijfheid correleren met uitstroom faciliteit 14,15, met de nadruk thij nodig heeft om zijn biomechanische eigenschappen te meten. Atomic force microscopie metingen van de TM vertonen verhoogde stijfheid in ogen geschonken door glaucoompatiënten (81 kPa) in vergelijking met de ogen van donoren zonder glaucoom (4,0 kPa) 16, maar deze metingen zijn uitgevoerd ontleed ex vivo weefsel. De achterste TM is verankerd in de ciliaire spier via anterior pezen van de longitudinale spiercellen die voegen in de buitenste gelamelleerde en cribiform TM 17. Spieractiviteit Ciliaire (CM) kan TM tautness verhogen, het nabootsen van een verhoogde stijfheid TM 17. Het vermogen om veranderingen waarnemen in resistentie tegen SC instorting veroorzaakt door verstoringen van glad spierweefsel is aangetoond in een diermodel 18. We hebben de mogelijkheid om niet-invasief imago van de primaire waterige humor uitstroom systeem in levende menselijke ogen distale tot en met SC gebruik spectrale domeinnaam optical coherence tomography (OCT) toonden &lt;sup&gt; 19-21. Met deze techniek, hebben we de mogelijkheid om de morfometrische reactie van de TM en SC acute IOP hoogte 22 kwantificeren aangetoond. Het algemene doel van de hierin beschreven werkwijze is de reactie van de morfometrische levende uitstroomkanaal acute IOP verhoging in levend weefsel in situ gekwantificeerd. Deze techniek heeft het voordeel dat het onderzoek van de TM onder fysiologische condities, die bijdragen zowel contractiele vezels activiteit in de TM en CM te TM stijfheid omvat, vergeleken met gepubliceerde metingen in ontleed weefsel. De grondgedachte achter het toepassen van deze techniek aan de waarneming van de mechanische TM reactie is dat het ons anders niet beschikbaar inzicht in het mechanisch gedrag van de TM, waarvan we weten nu direct worden gekoppeld aan uitstroom weerstand en IOP regulering 13. Om de bijdrage van contractiele weefsel stijfheid, een coho onderscheidenrt van de proefpersonen werd onderzocht zonder en met onderdrukking van gladde spieractiviteit door toediening van tropicamide.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectral Domain OCT</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Cirrus</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging Workstation</td>
			<td>Apple</td>
			<td>iMac</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmodynamometer</td>
			<td colspan="3">(Baillairt Matalene Ophthalmodynamometer, Surgical instruments CO., Inc. New York, NY)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image Processing Program</td>
			<td>rsb.info.nih.gov/ij</td>
			<td>ImageJ, FIJI</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

trabecular meshwork response to pressure elevation in the living human eye

De mechanische eigenschappen van het trabeculaire netwerk (TM) gekoppeld aan uitstroomweerstand en intraoculaire druk (IOP) regulering. De grondgedachte achter deze techniek is de directe waarneming van de mechanische reactie van de TM acute IOP hoogte. Voorafgaand aan het scannen, IOP wordt gemeten op baseline en tijdens de IOP hoogte. De limbus wordt gescand door spectrale domein optische coherentie tomografie op baseline en tijdens de IOP elevatie (ophthalmodynamometer (ODM) toegepast bij 30 g kracht). Scans worden verwerkt om visualisatie van de waterige humor uitstroom traject met behulp ImageJ verbeteren. Vasculaire monumenten worden gebruikt om overeenkomstige locaties in baseline en IOP hoogte scan volumes te identificeren. Schlemm kanaal (SC) dwarsdoorsnedeoppervlak (SC-CSA) en SC lengte van anterior naar posterior langs zijn lengteas worden handmatig gemeten op 10 locaties binnen 1 mm segment van SC. Mean binnen naar buiten wandafstand (korte lengte-as) wordt berekend als het oppervlak van SC gedeeld door delange lengte-as. Om de bijdrage van aangrenzende weefsels naar het effect IOP verhogingen onderzocht worden metingen herhaald zonder en met gladde spierrelaxatie met instillatie van tropicamide. TM migratie naar SC wordt tegengegaan door TM stijfheid, maar wordt versterkt door de ondersteuning van haar gehechtheid aan aangrenzende gladde spieren in het corpus ciliare. Deze techniek is de eerste die de levende humane TM reactie op drukverhoging in situ onder fysiologische omstandigheden in het menselijk oog te meten.

Met deze data acquisitie en beeldanalyse technieken worden de effecten van kleine en grote veranderingen in IOP op uitstroomkanaal morfologische parameters zoals SC dwarsdoorsnede verkregen (Figuur 1). We kunnen zien dat hoge niveaus van IOP toename produceren een waarneembare ineenstorting van SC, vertegenwoordigd door een sterke daling van de dwarsdoorsnede. Het oog lijkt te kunnen kleine stijgingen in IOP accommoderen, zoals blijkt uit het ontbreken van verandering in SC-CSA (figuur 1).</stro...

Watch this Scientific Journal Video about Trabecular Meshwork Response to Pressure Elevation in the Living Human Eye at JoVE.com

Trabecular Meshwork Response to Pressure Elevation in the Living Human Eye

Trabeculaire netwerk (TM) migratie in het kanaal van Schlemm ruimte kan worden geïnduceerd door acute drukverhoging door ophthalmodynamometer en geobserveerd door spectrale domein optische coherentie tomografie. Het doel van deze methode is het morfometrisch reactie van de levende uitstroomkanaal acute drukverhoging in levend weefsel in situ gekwantificeerd.

Trabekelsysteem reactie op druk Hoogte in de Living Human Eye

The mechanical characteristics of the trabecular meshwork (TM) are linked to outflow resistance and intraocular pressure (IOP) regulation. The rationale ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Epidural Intracranial Pressure Measurement in Rats Using a Fiber-optic Pressure Transducer

Epidurale intracraniale druk meting in ratten met behulp van een Fiber-optic Pressure Transducer

Elevated intracranial pressure (ICP) is a significant problem in several forms of ischemic brain injury including stroke, traumatic brain injury and ...

Subretinal Injection of Gene Therapy Vectors and Stem Cells in the Perinatal Mouse Eye

Subretinale Injectie van gentherapievectoren en stamcellen in de Mouse Eye

The loss of sight affects approximately 3.4 million people in the United States and is expected to increase in the upcoming years.1 Recently, gene therapy ...

Development of an Audio-based Virtual Gaming Environment to Assist with Navigation Skills in the Blind

Ontwikkeling van een Audio-based Virtual Gaming Milieu om te helpen met Navigatie Vaardigheden in het Blind

Audio-based Environment Simulator (AbES) is virtual environment software designed to improve real world navigation skills in the blind. Using only audio ...

Assessing Myogenic Response and Vasoactivity In Resistance Mesenteric Arteries Using Pressure Myography

Het beoordelen Myogene Response en vasoactiviteit In Resistance Mesenteriale slagaders behulp Pressure myography

Small resistance arteries constrict and dilate respectively in response to increased or decreased intraluminal pressure; this phenomenon known as myogenic ...

Heterotopic Mucosal Engrafting Procedure for Direct Drug Delivery to the Brain in Mice

Heterotope Mucosal engrafting Procedure voor Direct Drug Delivery naar de hersenen in Muizen

Delivery of therapeutics into the brain is impeded by the presence of the blood-brain barrier (BBB) which restricts the passage of polar and high ...

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

Intra-uteriene Telemetrie naar Mouse Contractiele druk te meten<em&gt; In Vivo</em

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. ...

Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect

Hartkatheterisatie in Muizen bij de Pressure Volume Relationship Meet: Onderzoek naar de Bowditch Effect

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these ...

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

Een muismodel van retinale ischemie-reperfusie letsel door misbruik van intra-oculaire druk

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

Precision Implementation of Minimal Erythema Dose (MED) Testing to Assess Individual Variation in Human Inflammatory Response

Precision Implementation of Minimal Erythema Dose MED Testing to Assess Individual Variation in Human Inflammatory Response

Nauwkeurige implementatie van minimale erytheem dosis (MED) testen om individuele variatie in menselijke ontstekingsreactie te beoordelen

Minimal erythema dose (MED) testing is frequently used in clinical settings for determining the smallest amount of ultraviolet (UV) irradiation necessary ...

Characterization of a Novel Human Organotypic Retinal Culture Technique

Karakterisering van een nieuwe menselijke organotypische retinale cultuurtechniek

Previous human organotypic retinal culture (HORC) models have utilized detached retinas; however, without the structural support conferred by retinal ...