Name: demonstration of the rat ischemic skin wound model
Uploaded: 2015-04-01T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model at JoVE.com

The authors would like to acknowledge funding support from the University of South Florida, Department of Surgery (Mack Wu, MD, PhD).

BEMÆRK: Godkendelse af alle dyreforsøg præsenteres nedenfor blev opnået fra University of South Florida Animal Care Udvalg (IACUC) og overholde alle krav i dyreværnsloven og vejledningen for pasning og anvendelse af forsøgsdyr. 1. Fremstilling af silikone Plader og kirurgiske instrumenter <ol><li> Forskåret strimler (10,5 cm x 3,0 cm) af ikke-forstærket 0,01 tykkelse, medicinsk silikone presenningen og sterilisere ved hjælp af en autoklave. </li><li> Rens og sterilisere egnede kir...

<ol>
	<li>Ansell, D. M., Holden, K. A., Hardman, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+wound+repair:+Are+they+cutting+it.">Animal models of wound repair: Are they cutting it.</a> Experimental dermatology. 21 (8), 581-585 (2012).</li><li>Dorsett-Martin, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+models+of+skin+wound+healing:+a+review.">Rat models of skin wound healing: a review.</a> Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 12 (6), 591-599 (2003).</li><li>Davidson, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+wound+repair.">Animal models for wound repair.</a> Arch Dermatol Res. 290 (S1-11), (1998).</li><li>Finn, G., Magnus, S. A., Tonny, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+for+use+in+wound+healing+research:+A+survey+focusing+on+in+vitro+and+in+vivo+adult+soft+tissue).">Models for use in wound healing research: A survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue).</a> Wound Repair and Regeneration. 8, (2000).</li><li>Gould, L. J., Leong, M., Sonstein, J., Wilson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+and+validation+of+an+ischemic+wound+model.">Optimization and validation of an ischemic wound model.</a> Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 13 (6), 576-582 (2004).</li><li>Loots, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+cellular+infiltrate+and+extracellular+matrix+of+chronic+diabetic+and+venous+ulcers+versus+acute+wounds.">Differences in cellular infiltrate and extracellular matrix of chronic diabetic and venous ulcers versus acute wounds.</a> The Journal of investigative dermatology. 111 (5), 850-857 (1998).</li><li>Schwartz, D. A., Lindblad, W. J., Rees, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+collagen+metabolism+and+delayed+healing+in+a+novel+model+of+ischemic+wounds.">Altered collagen metabolism and delayed healing in a novel model of ischemic wounds.</a> Wound Repair Regen. 3 (2), 204-212 (1995).</li><li>Chen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+and+mechanistic+validation+of+delayed+healing+rat+wounds+as+a+model+for+human+chronic+wounds.">Molecular and mechanistic validation of delayed healing rat wounds as a model for human chronic wounds.</a> Wound Repair and Regeneration. 7, (1999).</li><li>Zhang, Q., Chang, Q., Cox, R. A., Gong, X., Gould, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperbaric+oxygen+attenuates+apoptosis+and+decreases+inflammation+in+an+ischemic+wound+model.">Hyperbaric oxygen attenuates apoptosis and decreases inflammation in an ischemic wound model.</a> The Journal of investigative dermatology. 128 (8), 2102-2112 (2008).</li><li>Zhang, Q., Gould, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperbaric+oxygen+reduces+matrix+metalloproteinases+in+ischemic+wounds+through+a+redox-dependent+mechanism.">Hyperbaric oxygen reduces matrix metalloproteinases in ischemic wounds through a redox-dependent mechanism.</a> The Journal of investigative dermatology. 134 (1), 237-246 (2013).</li><li>Moor, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consequences+of+age+on+ischemic+wound+healing+in+rats:+altered+antioxidant+activity+and+delayed+wound+closure.">Consequences of age on ischemic wound healing in rats: altered antioxidant activity and delayed wound closure.</a> Age (Dordrecht, Netherlands). 36 (2), 733-748 (2014).</li><li>Roy, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+preclinical+model+of+chronic+ischemic+wound).">Characterization of a preclinical model of chronic ischemic wound).</a> Physiological genomics. 37 (3), 211-224 (2009).</li><li>Biswas, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia+inducible+microRNA+210+attenuates+keratinocyte+proliferation+and+impairs+closure+in+a+murine+model+of+ischemic+wounds.">Hypoxia inducible microRNA 210 attenuates keratinocyte proliferation and impairs closure in a murine model of ischemic wounds.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (15), 6976-6981 (2010).</li><li>Winocour, S., Vorstenbosch, J., Trzeciak, A., Lessard, L., Philip, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD109,+a+novel+TGF-beta+antagonist,+decreases+fibrotic+responses+in+a+hypoxic+wound+model.">CD109, a novel TGF-beta antagonist, decreases fibrotic responses in a hypoxic wound model.</a> Exp Dermatol. 23 (7), 475-479 (2014).</li></ol>

<html> Sårheling hos rotter har ofte været genstand for debat på grund af deres evne til at helbrede inficerede sår og høje interanimal variabilitet 5. En af de oprindelige mål af modellen under udviklingen var at mindske denne variation. Ændringer i bredden af ​​klappen, hvilket reducerer antallet af sår med specifik placering (centreret på flappen med konsekvent kranio-caudale placering) og indførelse af et silicone ark har opnået dette mål. Sårheling ved sammentrækning er også blevet redu...

Effektiv lægemiddeludvikling og andre sårhelende lægemidler kræver passende in vivo modeller, på trods af kendte problemer med at oversætte fund i dyremodeller for humane terapier 1. Det følgende er en beskrivelse af en detaljeret protokol for anvendelse af en rottemodel for iskæmisk hud sårheling at undersøge mekanismer, der yderligere forståelse af patologiske sårheling. De rotte arter, ofte er ansat på grund af sin brede tilgængelighed, størrelse og føjelig naturen bruges til sårheling undersøgelser, da det er stort nok til at give et passende hudområde til incisional og excisional såret, billedbehandling og væv kollektion 2. Det skal dog tages i nøje overvejelse, at huden på en rotte og en menneskelig er forskellige anatomisk, med rotter benævnes løs-flået dyr. Denne særskilte egenskab giver mulighed for sår sammentrækning, snarere end epitelialisering at bidrage væsentligt til lukning af rottehud wounds 2. Derudover er tilstedeværelsen af en subkutan panniculus carnosus muskulatur i rotter, bidrager til heling af både kontraktion og kollagen formation 3,4. Disse meget vigtige anatomiske forskelle blev anset for udviklingen af rotte iskæmisk hudsår model og specifikke modifikationer blev gennemført for at mindske sår sammentrækning og reducere indflydelsen af panniculus carnosus muskulatur 5. Hos diabetiske fodsår, venøse bensår og tryksår, er healing forsinket, og disse sår betragtes kronisk. Sårene er kendetegnet ved overdreven inflammation, som forhindrer såret udvikler sig og de ​​næste faser i sårheling 6. En af de vigtigste faktorer i udviklingen af en kronisk sår er lokaliseret væv iskæmi (reduceret blodstrømning) 5 bidrager til den manglende evne til at fjerne betændelse. På det tidspunkt, hvor denne model blev udviklet og valideret (i 2003-4), Var der ingen standardiserede dyremodeller, der kunne give nok væv til at teste induktion af angiogenese i såret, et afgørende tidspunkt under normal sårheling og motivationen for at udvikle denne model 5. Det er sagt, model præsenteres her er en modifikation af den iskæmiske sår model oprindeligt beskrevet af Schwartz et al. 7 og efterfølgende anvendes i modificeret form af Chen et al. 8 I den modificerede iskæmisk sår model er der foretaget ændringer for at omgå de ovenfor nævnte anatomiske karakteristika af rotte, der fører til helbredelse ved sammentrækning stedet epitelialisering: (1) To fuld tykkelse Excisionssår er skabt inden for en bipedicled flap dorsale hud og panniculus carnosus muskulatur fjernes fra såret ved dissekering lige over muskelfascie. (2) flap selv har mere smalle dimensioner, der sikrer, at blodforsyningen er tilfældig og sår placeret ved midtpunktet af than klap er iskæmisk. (3) En silicone ark indsættes under klappen, forebygge readherence og reperfusion af klappen fra det underliggende væv. Sår sammentrækning er begrænset (ikke elimineres) ved at forankre eller suturering klappen til silikone ark 5. Modellen er for nylig blevet anvendt i undersøgelser spænder fra oxygenovertrykskramper virkninger på iskæmisk sårheling 9,10 til iskæmisk sårheling hos unge versus ældre rotter 11 og har vist sig at være en pålidelig model for langvarig vævsiskæmi. Dimensionerne af bipedicled flap er også blevet tilpasset til forskellige rottestammer, herunder Sprague Dawley (11 cm lang og 2 cm bred) og F344-rotter (10,5 cm lang med 3,0-3,5 cm bred) og andre arter, herunder svin 12 og mus 13,14. Denne video udnytter F344 indavlede rotte stamme i demonstrationen af ​​den iskæmiske hudsår model. Godkendelse af alle dyreforsøg præsenteres nedenfor var fåed fra University of South Florida Animal Care Udvalg (IACUC) og overholde alle krav i dyreværnsloven og vejledningen for pleje og anvendelse af forsøgsdyr.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="605">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:103px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:216px;">Sil-Tec medical grade sheeting</td>
			<td style="width:103px;">Technical Products Inc.</td>
			<td style="width:119px;">500-3</td>
			<td>nonreinforced, 0.01 inches in thickness</td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:216px;">Mini Iris scissors, 8cm, curved, SS</td>
			<td style="width:103px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:119px;">#503671</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ethilon Nylon Sutures</td>
			<td style="width:103px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;">1964G</td>
			<td>black, size 4.0, PC-3 16mm needles (3/8 circle)</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:216px;">Laser Doppler Imager</td>
			<td style="width:103px;">Moor Instruments</td>
			<td style="width:119px;">moorLDI2-IR</td>
			<td>Standard blood flow imager: http://us.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ImageJ</td>
			<td style="width:103px;">NIH</td>
			<td style="width:119px;">free download</td>
			<td>http://rsb.info.nih.gov/ij/</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Mastisol</td>
			<td style="width:103px;">Henry Schein</td>
			<td style="width:119px;">Cat # 7289210</td>
			<td>Fisher Scientific NC9774929</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:216px;">Tegaderm</td>
			<td style="width:103px;">Medical Specialties&#160;</td>
			<td style="width:119px;">3M1624W</td>
			<td>Fisher Scientific NC9922128</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

demonstration of the rat ischemic skin wound model

Tilbøjeligheden til kroniske sår hos mennesker stiger med aldring, sygdomstilstande såsom diabetes og nedsat kardiovaskulær funktion og unrelieved pres på grund af immobilitet. Animal modeller er blevet udviklet, forsøg på at efterligne disse forhold med henblik på at fremme vores forståelse af kompleksiteten af ​​kroniske sår. Den beskrevne model er en rotte iskæmisk hudlap model, der tillader en forlænget reduktion af blodstrømmen resulterer i sår, der bliver iskæmisk og ligner et kronisk sår fænotype (reduceret vaskularisering, øget inflammation og forsinket sårlukning). Den består af en bipedicled dorsal klap med 2 iskæmiske sår placeret centralt og 2 ikke-iskæmiske sår lateralt i forhold til klappen som kontroller. En ny tilføjelse til dette iskæmisk hudlap model er placeringen af ​​en silikone ark under klappen, der fungerer som en barriere og en skinne for at forhindre revaskularisering og mindske sammentrækning som sår heles. Trodsdebat anvendelse rotter til sårheling undersøgelser på grund af deres helt forskellige anatomiske og fysiologiske forskelle i forhold til mennesker (dvs. tilstedeværelsen af en panniculus carnosus muskulatur, kort levetid, øget antal hårsække, og deres evne til at helbrede inficerede sår) ændringerne anvendes i denne model gør det et værdifuldt alternativ til tidligere udviklede iskæmisk hud flap-modeller.

Rotten iskæmisk sårheling model protokol bør tage ca. 20 min per dyr, hvis det sker effektivt. Før påføring af en bandage modellen skal vises som vist i figur 1G. Det vil være vigtigt at kontrollere, at bipedicled klap og sår deri er iskæmisk. Subkutan oxygenspændingen (PSCo 2) på niveau med sårene er blevet målt under validering af denne model 5 ved at placere en polarografisk elektrode i det subkutane væv mellem de to iskæmiske sår. PSCo 2 værdier var ...

Watch this Scientific Journal Video about Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model at JoVE.com

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

Rotter på grund af sin størrelse, tilgængelighed og snarere føjelige adfærd er blevet anvendt som et forsknings- model for mange år. Målet med denne protokol er at udnytte rotten i en iskæmisk hud sårheling model til at give værdifuld indsigt i patofysiologien af ​​kroniske sår.

Demonstration af Rat iskæmisk hudsår Model

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

En forenklet teknik til at producere et iskæmisk sår model

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work ...

Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat

Endothelin-1-induceret mellem-cerebral arterieokklusion Model for iskæmisk slagtilfælde med laser-doppler-flowmetri Vejledning i Rat

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in ...

Angiogenesis in the Ischemic Rat Lung

Angiogenese i den iskæmiske rottelunge

The  adult lung is perfused by both the systemic bronchial artery and the entire  venous return flowing through the pulmonary arteries. In most lung ...

Murine Model of Wound Healing

Musemodel af Sårheling

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model

Helsinki Rat Microsurgical Sidewall aneurisme Model

Experimental saccular aneurysm models are necessary for testing novel surgical and endovascular treatment options and devices before they are introduced ...

Ischemic Tissue Injury in the Dorsal Skinfold Chamber of the Mouse: A Skin Flap Model to Investigate Acute Persistent Ischemia

Iskæmisk væv skade i Dorsal hudfolden Afdeling Mus: En hudlap modellen til Akut Persistent Iskæmi

Despite profound expertise and advanced surgical techniques, ischemia-induced complications ranging from wound breakdown to extensive tissue necrosis are ...

A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair

En mus Føtal Skin Model af scarless sårheling

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs ...

Rat Model of Photochemically-Induced Posterior Ischemic Optic Neuropathy

Rotte model af fotokemisk-induceret posterior iskæmisk opticusneuropati

Posterior Ischemic optic neuropathy (PION) is a sight-devastating disease in clinical practice. However, its pathogenesis and natural history ...

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

En Grisling Model for Neonatal Hypoksisk-iskæmisk encephalopati

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy (rNAION)

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy rNAION

Den gnaver Model of Nonarteritic anterior iskæmisk opticusneuropati (rNAION)

Nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy (NAION) is a focal ischemic lesion of the optic nerve that affects 1/700 individuals throughout their ...