Name: demonstration of the rat ischemic skin wound model
Uploaded: 2015-04-01T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model at JoVE.com

The authors would like to acknowledge funding support from the University of South Florida, Department of Surgery (Mack Wu, MD, PhD).

MERK: Godkjenning for alle dyre prosedyrer som presenteres nedenfor er hentet fra University of South Florida Animal Care Committee (IACUC) og overholde alle krav i dyrevernloven og Guide for Care og bruk av forsøksdyr. 1. Utarbeidelse av silikon Ark og kirurgiske instrumenter <ol><li> Precut strimler (10,5 cm x 3,0 cm) av uarmert 0,01 tykkelse, medisinsk silikon sheeting og sterilisere ved hjelp av en autoklav. </li><li> Rense og sterilisere egnede kirurgiske instrumenter (saks, pinsett ...

<ol>
	<li>Ansell, D. M., Holden, K. A., Hardman, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+wound+repair:+Are+they+cutting+it.">Animal models of wound repair: Are they cutting it.</a> Experimental dermatology. 21 (8), 581-585 (2012).</li><li>Dorsett-Martin, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+models+of+skin+wound+healing:+a+review.">Rat models of skin wound healing: a review.</a> Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 12 (6), 591-599 (2003).</li><li>Davidson, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+wound+repair.">Animal models for wound repair.</a> Arch Dermatol Res. 290 (S1-11), (1998).</li><li>Finn, G., Magnus, S. A., Tonny, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+for+use+in+wound+healing+research:+A+survey+focusing+on+in+vitro+and+in+vivo+adult+soft+tissue).">Models for use in wound healing research: A survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue).</a> Wound Repair and Regeneration. 8, (2000).</li><li>Gould, L. J., Leong, M., Sonstein, J., Wilson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+and+validation+of+an+ischemic+wound+model.">Optimization and validation of an ischemic wound model.</a> Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 13 (6), 576-582 (2004).</li><li>Loots, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+cellular+infiltrate+and+extracellular+matrix+of+chronic+diabetic+and+venous+ulcers+versus+acute+wounds.">Differences in cellular infiltrate and extracellular matrix of chronic diabetic and venous ulcers versus acute wounds.</a> The Journal of investigative dermatology. 111 (5), 850-857 (1998).</li><li>Schwartz, D. A., Lindblad, W. J., Rees, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+collagen+metabolism+and+delayed+healing+in+a+novel+model+of+ischemic+wounds.">Altered collagen metabolism and delayed healing in a novel model of ischemic wounds.</a> Wound Repair Regen. 3 (2), 204-212 (1995).</li><li>Chen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+and+mechanistic+validation+of+delayed+healing+rat+wounds+as+a+model+for+human+chronic+wounds.">Molecular and mechanistic validation of delayed healing rat wounds as a model for human chronic wounds.</a> Wound Repair and Regeneration. 7, (1999).</li><li>Zhang, Q., Chang, Q., Cox, R. A., Gong, X., Gould, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperbaric+oxygen+attenuates+apoptosis+and+decreases+inflammation+in+an+ischemic+wound+model.">Hyperbaric oxygen attenuates apoptosis and decreases inflammation in an ischemic wound model.</a> The Journal of investigative dermatology. 128 (8), 2102-2112 (2008).</li><li>Zhang, Q., Gould, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperbaric+oxygen+reduces+matrix+metalloproteinases+in+ischemic+wounds+through+a+redox-dependent+mechanism.">Hyperbaric oxygen reduces matrix metalloproteinases in ischemic wounds through a redox-dependent mechanism.</a> The Journal of investigative dermatology. 134 (1), 237-246 (2013).</li><li>Moor, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consequences+of+age+on+ischemic+wound+healing+in+rats:+altered+antioxidant+activity+and+delayed+wound+closure.">Consequences of age on ischemic wound healing in rats: altered antioxidant activity and delayed wound closure.</a> Age (Dordrecht, Netherlands). 36 (2), 733-748 (2014).</li><li>Roy, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+preclinical+model+of+chronic+ischemic+wound).">Characterization of a preclinical model of chronic ischemic wound).</a> Physiological genomics. 37 (3), 211-224 (2009).</li><li>Biswas, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia+inducible+microRNA+210+attenuates+keratinocyte+proliferation+and+impairs+closure+in+a+murine+model+of+ischemic+wounds.">Hypoxia inducible microRNA 210 attenuates keratinocyte proliferation and impairs closure in a murine model of ischemic wounds.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (15), 6976-6981 (2010).</li><li>Winocour, S., Vorstenbosch, J., Trzeciak, A., Lessard, L., Philip, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD109,+a+novel+TGF-beta+antagonist,+decreases+fibrotic+responses+in+a+hypoxic+wound+model.">CD109, a novel TGF-beta antagonist, decreases fibrotic responses in a hypoxic wound model.</a> Exp Dermatol. 23 (7), 475-479 (2014).</li></ol>

<html> Sårtilheling hos rotter har ofte vært gjenstand for debatt på grunn av deres evne til å helbrede infiserte sår og høy grad av interanimal variabilitet 5. En av de opprinnelige målene i modellen under utviklingen var å redusere denne variasjonen. Modifikasjoner til bredden av klaffen, redusere antall sår med spesiell plassering (sentrert på klaff med konsistent cranio-caudal plassering) og innføring av en silikonplate har oppnådd dette målet. Sårtilheling ved sammentrekning har også blitt ...

Effektiv utvikling av legemidler og andre sårtilheling therapeutics kreve egnet in vivo-modeller, til tross for kjente problemer i sette funn i dyremodeller til menneskelige behandlinger en. Det som følger er en beskrivelse av en detaljert protokoll for anvendelse av en rottemodell for iskemisk hud sårheling å undersøke mekanismer som ytterligere forståelse av patologisk sårheling. Rotte arter, ofte ansatt på grunn av sin bred tilgjengelighet, størrelse og føyelig natur brukes for sårtilheling studier som det er stor nok til å gi et egnet hudområde for operasjonssåret og excisional såret, bildebehandling og vev samling 2. Men det bør tas i nøye overveielse at huden av en rotte og et menneske er forskjellige anatomisk, med rotter blir referert til som løs-skinned dyr. Denne distinkte karakteristiske tillater såret sammentrekning, snarere enn epithelialization å bidra vesentlig til stenging av rotte hud wounds to. I tillegg er tilstedeværelsen av en subkutan panniculus carnosus muskelen hos rotter, bidrar til helbredelse av både sammentrekning og kollagendannelse 3,4. Disse meget viktige anatomiske forskjeller ble vurdert i utviklingen av ischemisk rottemodell sår hud og spesifikke modifikasjoner ble gjennomført for å redusere såret kontraksjon og redusere innflytelsen av panniculus carnosus muskel 5. I diabetiske fotsår, venøse leggsår, og trykksår, er healing forsinket og disse sårene anses kronisk. Sårene er preget av overdreven betennelse, som hindrer såret fra framdrift til de neste fasene av sår reparasjon seks. En av de viktigste faktorer i utviklingen av kronisk sår er lokalisert vevsischemi (redusert blodstrøm) 5 bidrar til den manglende evne til å fjerne inflammasjon. På den tiden denne modellen ble utviklet og validert (i 2003-4), Var det ingen standardiserte dyremodeller som kan gi nok vev til å teste induksjon av angiogenese i såret seng, en viktig fase under normal healing sår og motivasjon for å utvikle denne modellen fem. Når det er sagt, er modellen som presenteres her er en modifikasjon av den ischemiske såret modellen opprinnelig beskrevet av Schwartz et al. 7 og senere brukt i modifisert form av Chen et al. 8 I den modifiserte iskemisk såret modellen, er det gjort endringer for å omgå de nevnte anatomiske karakteristika for rotte som fører til helbredelse ved sammentrekning i stedet epithelialization: (1) To fulle tykkelse Excisional sår er skapt i et bipedicled rygghuden klaff og den panniculus carnosus muskel er fjernet fra sårflaten ved dissekere like over muskel fascia. (2) Klaffen selv har flere smale dimensjoner, som sikrer at blodtilførselen er tilfeldig og sårene som ligger på midtpunktet av than klaff er iskemiske. (3) Et silikonplate er satt inn under klaffen, hindrer readherence og reperfusjon av klaffen fra underliggende vev. Sår sammentrekning er begrenset (ikke eliminert) ved forankring eller sy klaffen til silikon ark 5. Modellen har nylig blitt brukt i studier som spenner fra hyperbar oksygen effekter på iskemisk sårheling 9,10 til iskemisk sårtilheling i ung versus eldre rotter 11 og har vist seg å være en pålitelig modell av langvarig vevsischemi. Dimensjonene på bipedicled klaff har også blitt tilpasset til forskjellige rottestammer, inkludert Sprague Dawley (11 cm lang med 2 cm bred) og F344-rotter (10,5 cm lang og 3,0 til 3,5 cm bred) og andre arter, inkludert svine 12 og mus 13,14. Denne videoen benytter F344 innavlet rotte belastning i demonstrasjonen av iskemisk hud såret modell. Godkjenning for alle dyre prosedyrer som presenteres nedenfor var fåed fra University of South Florida Animal Care Committee (IACUC) og overholde alle krav i dyrevernloven og Guide for Pleie og bruk av forsøksdyr.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="605">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:103px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:216px;">Sil-Tec medical grade sheeting</td>
			<td style="width:103px;">Technical Products Inc.</td>
			<td style="width:119px;">500-3</td>
			<td>nonreinforced, 0.01 inches in thickness</td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:216px;">Mini Iris scissors, 8cm, curved, SS</td>
			<td style="width:103px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:119px;">#503671</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ethilon Nylon Sutures</td>
			<td style="width:103px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;">1964G</td>
			<td>black, size 4.0, PC-3 16mm needles (3/8 circle)</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:216px;">Laser Doppler Imager</td>
			<td style="width:103px;">Moor Instruments</td>
			<td style="width:119px;">moorLDI2-IR</td>
			<td>Standard blood flow imager: http://us.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ImageJ</td>
			<td style="width:103px;">NIH</td>
			<td style="width:119px;">free download</td>
			<td>http://rsb.info.nih.gov/ij/</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Mastisol</td>
			<td style="width:103px;">Henry Schein</td>
			<td style="width:119px;">Cat # 7289210</td>
			<td>Fisher Scientific NC9774929</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:216px;">Tegaderm</td>
			<td style="width:103px;">Medical Specialties&#160;</td>
			<td style="width:119px;">3M1624W</td>
			<td>Fisher Scientific NC9922128</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

demonstration of the rat ischemic skin wound model

Tilbøyelighet for kroniske sår hos mennesker øker med aldring, sykdomstilstander som diabetes og nedsatt hjertefunksjon, og unrelieved press på grunn av immobilitet. Dyremodeller har blitt utviklet som forsøk på å etterligne disse betingelser i den hensikt å fremme forståelsen av kompleksiteten av kroniske sår. Modellen er beskrevet her er en rotte iskemisk hud klaff modell som tillater en langvarig reduksjon av blodstrøm som resulterer i sår som blir iskemisk og ligner en kronisk sår fenotype (redusert vaskularisering, økt betennelse og forsinket lukking av sår). Den består av en bipedicled dorsal klaff med to iskemiske sår plassert sentralt og to ikke-iskemiske sår lateralt for klaffen som kontroller. En ny tillegg til dette iskemisk hud klaff modellen er plasseringen av en silikonplate under klaffen som fungerer som en barriere, og en skinne for å hindre revaskularisering og redusere kontraksjon som sår gror. Til tross for detdebatt om å bruke rotter for sårheling studier på grunn av deres ganske distinkte anatomiske og fysiologiske forskjeller sammenlignet med mennesker (dvs. tilstedeværelse av en panniculus carnosus muskel, kort levetid, økt antall hårsekker, og deres evne til å helbrede infiserte sår) modifikasjonene ansatt i denne modellen gjør det til en verdifull alternativ til tidligere utviklede iskemiske hud klaff modeller.

Rotte iskemisk sårtilheling modell protokollen bør ta ca 20 min per dyr hvis det utføres effektivt. Før påføring av en dressing modellen skal vises som representert i figur 1G. Det vil være viktig å kontrollere at bipedicled klaff og sår der er iskemisk. Subkutan oksygentensjon (PscO 2) på nivå med de sår har blitt målt under valideringen av modellen 5 ved å plassere en polarografisk elektrode i det subkutane vevet mellom de to iskemiske sår. PscO to verdi...

Watch this Scientific Journal Video about Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model at JoVE.com

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

Rotte, på grunn av sin størrelse, tilgjengelighet og heller føyelig oppførsel, har blitt benyttet som et forskningsmodellen i mange år. Målet med denne protokollen er å utnytte den rotte som en iskemisk hud sårtilheling modell for å gi verdifull innsikt i patofysiologien av kroniske sår.

Demonstrasjon av Rat iskemisk Skin Wound Model

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

En Forenklet teknikk for produksjon av en iskemisk sår modell

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work ...

Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat

Endotelin-1 Induced Middle Cerebral arterieokklusjon Modell for iskemisk slag med laser Doppler Flowmetry Veiledning i Rat

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in ...

Angiogenesis in the Ischemic Rat Lung

Angiogenese i den ischemiske rottelunger

The  adult lung is perfused by both the systemic bronchial artery and the entire  venous return flowing through the pulmonary arteries. In most lung ...

Murine Model of Wound Healing

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model

The Helsinki Rat Mikrosidewall aneurisme Model

Experimental saccular aneurysm models are necessary for testing novel surgical and endovascular treatment options and devices before they are introduced ...

Ischemic Tissue Injury in the Dorsal Skinfold Chamber of the Mouse: A Skin Flap Model to Investigate Acute Persistent Ischemia

Iskemisk skade på kroppsvev i Dorsal skinfold Chamber of Mouse: A Skin Flap modell for å undersøke Akutt Vedvarende Ischemia

Despite profound expertise and advanced surgical techniques, ischemia-induced complications ranging from wound breakdown to extensive tissue necrosis are ...

A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair

A Mouse Fetal Skin Modell av scarless Wound Repair

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs ...

Rat Model of Photochemically-Induced Posterior Ischemic Optic Neuropathy

Rat Modell av fotokjemisk-Induced posterior iskemisk optikusnevropati

Posterior Ischemic optic neuropathy (PION) is a sight-devastating disease in clinical practice. However, its pathogenesis and natural history ...

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

En Nasse Nøff Model of Neonatal hypoksisk-iskemisk encefalopati

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy (rNAION)

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy rNAION

Den gnager Model of Nonarteritic iskemisk fremre optikusnevropati (rNAION)

Nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy (NAION) is a focal ischemic lesion of the optic nerve that affects 1/700 individuals throughout their ...