Name: demonstration of the rat ischemic skin wound model
Uploaded: 2015-04-01T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model at JoVE.com

The authors would like to acknowledge funding support from the University of South Florida, Department of Surgery (Mack Wu, MD, PhD).

OBS: Godkännande för alla förfaranden djur presenteras nedan erhölls från University of South Florida Animal Care kommittén (IACUC) och följa alla krav i djurskyddslagen och vägledningen för vård och användning av försöksdjur. 1. Beredning av silikon Lakan och kirurgiska instrument <ol><li> Förskuma remsor (10.5 cm x 3.0 cm) av icke-förstärkt 0.01 tjocklek, medicinsk silikon plåt och sterilisera genom att använda en autoklav. </li><li> Rengör och sterilisera lämpliga ki...

<ol>
	<li>Ansell, D. M., Holden, K. A., Hardman, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+wound+repair:+Are+they+cutting+it.">Animal models of wound repair: Are they cutting it.</a> Experimental dermatology. 21 (8), 581-585 (2012).</li><li>Dorsett-Martin, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+models+of+skin+wound+healing:+a+review.">Rat models of skin wound healing: a review.</a> Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 12 (6), 591-599 (2003).</li><li>Davidson, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+wound+repair.">Animal models for wound repair.</a> Arch Dermatol Res. 290 (S1-11), (1998).</li><li>Finn, G., Magnus, S. A., Tonny, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+for+use+in+wound+healing+research:+A+survey+focusing+on+in+vitro+and+in+vivo+adult+soft+tissue).">Models for use in wound healing research: A survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue).</a> Wound Repair and Regeneration. 8, (2000).</li><li>Gould, L. J., Leong, M., Sonstein, J., Wilson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+and+validation+of+an+ischemic+wound+model.">Optimization and validation of an ischemic wound model.</a> Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 13 (6), 576-582 (2004).</li><li>Loots, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+cellular+infiltrate+and+extracellular+matrix+of+chronic+diabetic+and+venous+ulcers+versus+acute+wounds.">Differences in cellular infiltrate and extracellular matrix of chronic diabetic and venous ulcers versus acute wounds.</a> The Journal of investigative dermatology. 111 (5), 850-857 (1998).</li><li>Schwartz, D. A., Lindblad, W. J., Rees, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+collagen+metabolism+and+delayed+healing+in+a+novel+model+of+ischemic+wounds.">Altered collagen metabolism and delayed healing in a novel model of ischemic wounds.</a> Wound Repair Regen. 3 (2), 204-212 (1995).</li><li>Chen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+and+mechanistic+validation+of+delayed+healing+rat+wounds+as+a+model+for+human+chronic+wounds.">Molecular and mechanistic validation of delayed healing rat wounds as a model for human chronic wounds.</a> Wound Repair and Regeneration. 7, (1999).</li><li>Zhang, Q., Chang, Q., Cox, R. A., Gong, X., Gould, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperbaric+oxygen+attenuates+apoptosis+and+decreases+inflammation+in+an+ischemic+wound+model.">Hyperbaric oxygen attenuates apoptosis and decreases inflammation in an ischemic wound model.</a> The Journal of investigative dermatology. 128 (8), 2102-2112 (2008).</li><li>Zhang, Q., Gould, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperbaric+oxygen+reduces+matrix+metalloproteinases+in+ischemic+wounds+through+a+redox-dependent+mechanism.">Hyperbaric oxygen reduces matrix metalloproteinases in ischemic wounds through a redox-dependent mechanism.</a> The Journal of investigative dermatology. 134 (1), 237-246 (2013).</li><li>Moor, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consequences+of+age+on+ischemic+wound+healing+in+rats:+altered+antioxidant+activity+and+delayed+wound+closure.">Consequences of age on ischemic wound healing in rats: altered antioxidant activity and delayed wound closure.</a> Age (Dordrecht, Netherlands). 36 (2), 733-748 (2014).</li><li>Roy, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+preclinical+model+of+chronic+ischemic+wound).">Characterization of a preclinical model of chronic ischemic wound).</a> Physiological genomics. 37 (3), 211-224 (2009).</li><li>Biswas, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia+inducible+microRNA+210+attenuates+keratinocyte+proliferation+and+impairs+closure+in+a+murine+model+of+ischemic+wounds.">Hypoxia inducible microRNA 210 attenuates keratinocyte proliferation and impairs closure in a murine model of ischemic wounds.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (15), 6976-6981 (2010).</li><li>Winocour, S., Vorstenbosch, J., Trzeciak, A., Lessard, L., Philip, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD109,+a+novel+TGF-beta+antagonist,+decreases+fibrotic+responses+in+a+hypoxic+wound+model.">CD109, a novel TGF-beta antagonist, decreases fibrotic responses in a hypoxic wound model.</a> Exp Dermatol. 23 (7), 475-479 (2014).</li></ol>

<html> Sårläkning hos råttor har ofta varit föremål för diskussion på grund av deras förmåga att läka infekterade sår och hög interanimal variabilitet 5. En av de ursprungliga målen för modellen under dess utveckling var att minska denna variation. Ändringar av bredden på klaffen, minska antalet sår med specifik placering (centrerad på klaffen med konsekvent kranio-caudal plats) och införande av ett silikonblad har åstadkommit detta mål. Sårläkning genom kontraktion har också minskat oc...

Effektiv läkemedelsutveckling och andra sårläknings terapeutiska kräver lämpliga in vivo-modeller, trots kända problem i att översätta fynd i djurmodeller för att mänskliga terapier en. Vad som följer är en beskrivning av ett detaljerat protokoll för användning av en råttmodell av ischemisk hud sårläkning att undersöka mekanismer som främjar förståelse av patologisk sårläkning. De råttarter, ofta anställda på grund av dess breda tillgänglighet, storlek och foglig naturen används för sårläkning studier eftersom det är tillräckligt stor för att ge en lämplig hudområde för incisional och excisional såra, bildbehandling och vävnadssamling 2. Det bör emellertid tas i noggrant övervägande att huden på en råtta och en människa är olika anatomiskt, med råttor refereras till som lösa skal djur. Denna distinkta karakteristiska möjliggör sårkontraktion, snarare än epitelbildning att väsentligt bidra till stängning av råtthud wounds 2. Dessutom närvaron av en subkutan panniculus carnosus muskeln hos råttor, bidrar till läkning av både kontraktion och kollagenbildning 3,4. Dessa mycket viktiga anatomiska skillnader ansågs i utvecklingen av råttans ischemisk hudsår modell och specifika modifieringar genomfördes för att minska sårkontraktion och minska påverkan av panniculus camosus muskeln 5. I diabetiska fotsår, venösa bensår och trycksår, är helande försenad och dessa sår anses kronisk. Såren kännetecknas av överdriven inflammation, vilket hindrar såret från utvecklas till kommande faser av sårläkning 6. En av de viktigaste faktorerna i utvecklingen av ett kroniskt sår är lokaliserad vävnadsischemi (minskat blodflöde) 5 bidrar till oförmåga att rensa inflammation. Vid den tid under vilken denna modell var att utvecklas och valideras (i 2003-4), Fanns det inga standardiserade djurmodeller som kan ge tillräckligt med vävnad för att testa induktion av angiogenes i såret, ett avgörande skede under normal sårläkning och motivationen för att utveckla denna modell 5. Som sagt, den modell som presenteras här är en modifiering av den ischemiska sår modellen ursprungligen beskrivits av Schwartz et al. 7 och därefter användas i modifierad form av Chen et al. 8 I den modifierade ischemisk såret modell, har förändringar gjorts för att kringgå de ovan nämnda anatomiska egenskaper hos råtta som leder till läkning av kontraktion i stället epithelialization: (1) Två fulla tjocklek excisionssår skapas inom en bipedicled rygg hudfliken och panniculus carnosus muskel avlägsnas från sårbädden genom att dissekera precis ovanför muskeln fascia. (2) Klaffen sig har smalare dimensioner, se till att blodtillförsel är slumpmässig och såren belägna vid mittpunkten av than klaff är ischemisk. (3) Ett silikonarket infogas bakom luckan, förebygga readherence och reperfusion av klaffen från underliggande vävnad. Sårkontraktion är begränsad (inte elimineras) genom att förankra eller suturering fliken till silikonskiktet 5. Modellen har nyligen använts i studier som sträcker sig från hyperbar syrgas effekter på ischemisk sårläkning 9,10 till ischemisk sårläkning i unga kontra åldrade råttor 11 och har visat sig vara en pålitlig modell av långvarig vävnadsischemi. Måtten på bipedicled klaffen har också anpassats till olika råttstammar, däribland Sprague Dawley (11 cm lång och 2 cm bred) och F344-råttor (10,5 cm lång och 3,0-3,5 cm breda) och andra arter, inklusive svin 12 och möss 13,14. Denna video använder F344 inavlade råttstam i demonstrationen av ischemisk hudsår modell. Godkännande för alla förfaranden djur presenteras nedan var fåed från University of South Florida Animal Care kommittén (IACUC) och följa alla krav i djurskyddslagen och vägledningen för vård och användning av försöksdjur.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="605">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:103px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:216px;">Sil-Tec medical grade sheeting</td>
			<td style="width:103px;">Technical Products Inc.</td>
			<td style="width:119px;">500-3</td>
			<td>nonreinforced, 0.01 inches in thickness</td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:216px;">Mini Iris scissors, 8cm, curved, SS</td>
			<td style="width:103px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:119px;">#503671</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ethilon Nylon Sutures</td>
			<td style="width:103px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;">1964G</td>
			<td>black, size 4.0, PC-3 16mm needles (3/8 circle)</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:216px;">Laser Doppler Imager</td>
			<td style="width:103px;">Moor Instruments</td>
			<td style="width:119px;">moorLDI2-IR</td>
			<td>Standard blood flow imager: http://us.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ImageJ</td>
			<td style="width:103px;">NIH</td>
			<td style="width:119px;">free download</td>
			<td>http://rsb.info.nih.gov/ij/</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Mastisol</td>
			<td style="width:103px;">Henry Schein</td>
			<td style="width:119px;">Cat # 7289210</td>
			<td>Fisher Scientific NC9774929</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:216px;">Tegaderm</td>
			<td style="width:103px;">Medical Specialties&#160;</td>
			<td style="width:119px;">3M1624W</td>
			<td>Fisher Scientific NC9922128</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

demonstration of the rat ischemic skin wound model

Benägenheten för kroniska sår hos människor ökar med åldrande, sjukdomstillstånd som diabetes och nedsatt kardiovaskulär funktion, och oförlöst tryck på grund av orörlighet. Djurmodeller har utvecklats som försök att efterlikna dessa villkor i syfte att främja vår förståelse av komplexiteten av kroniska sår. Modellen beskrivs här är en råtta ischemisk hudfliken modell som möjliggör en förlängd minskning av blodflödet vilket resulterar i sår som blir ischemisk och liknar ett kroniskt sår fenotyp (reducerad vaskularisering, ökad inflammation och fördröjd sårtillslutning). Den består av en bipedicled ryggflik med 2 ischemiska sår placerade centralt och 2 icke-ischemiska sår sidled till fliken som kontroller. En roman Utöver detta ischemisk hudfliken modell är placeringen av ett silikonblad under flik som fungerar som en barriär och en skena för att förhindra revaskularisering och minska sammandragning som såren läker. Trots denDebatten om att använda råttor för sårläknings studier på grund av deras helt skilda anatomiska och fysiologiska skillnader jämfört med människor (dvs närvaron av en panniculus carnosus muskel, kort livslängd, ökat antal hårsäckar, och deras förmåga att läka infekterade sår) de ändringar som används i denna modell gör det ett värdefullt alternativ till tidigare utvecklade ischemiska hud klaffmodeller.

Råttan ischemisk sårläkning modell protokoll bör ta cirka 20 minuter per djur om det utförs på ett effektivt sätt. Före applicering av ett förband modellen ska visas som representeras i Figur 1G. Det kommer att vara viktigt att kontrollera att bipedicled klaffen och sår däri är ischemisk. Subkutan syrespänning (PscO 2) i nivå med såren har uppmätts under valideringen av denna modell 5 genom att placera en polarografisk elektrod i den subkutana vävnaden mellan de tv...

Watch this Scientific Journal Video about Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model at JoVE.com

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

Råttan, på grund av sin storlek, tillgänglighet, och ganska fogliga beteende, har använts som en forskningsmodell för många år. Målet med detta protokoll är att utnyttja råttan som en ischemisk hud sårläkning modell för att ge värdefull insikt i patofysiologin av kroniska sår.

Demonstration av Rat Ischemisk hudsår Modell

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

En förenklad teknik för framställning av en ischemisk sårmodell

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work ...

Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat

Endotelin-1 inducerad Middle cerebral artärocklusion modell för ischemisk stroke med laser Doppler Flowmetry Vägledning i råtta

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in ...

Angiogenesis in the Ischemic Rat Lung

Angiogenes i Ischemisk råttlunga

The  adult lung is perfused by both the systemic bronchial artery and the entire  venous return flowing through the pulmonary arteries. In most lung ...

Murine Model of Wound Healing

Murinmodell sårläkning

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model

Helsingfors Rat Mikrodäck Aneurysm Model

Experimental saccular aneurysm models are necessary for testing novel surgical and endovascular treatment options and devices before they are introduced ...

Ischemic Tissue Injury in the Dorsal Skinfold Chamber of the Mouse: A Skin Flap Model to Investigate Acute Persistent Ischemia

Ischemisk Tissue Skada i Dorsal skinfold avdelning Mus: En Skin Flap modell för att undersöka Akut Ihållande Ischemi

Despite profound expertise and advanced surgical techniques, ischemia-induced complications ranging from wound breakdown to extensive tissue necrosis are ...

A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair

En mus Fetal Skin Modell av scarless sårläkning

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs ...

Rat Model of Photochemically-Induced Posterior Ischemic Optic Neuropathy

Rat Model av fotokemiskt inducerad posterior ischemisk optikusneuropati

Posterior Ischemic optic neuropathy (PION) is a sight-devastating disease in clinical practice. However, its pathogenesis and natural history ...

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

En Piglet Modell av neonatal hypoxisk-ischemisk encefalopati

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy (rNAION)

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy rNAION

Den Gnagarmodell av Nonarteritic främre ischemisk optikusneuropati (rNAION)

Nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy (NAION) is a focal ischemic lesion of the optic nerve that affects 1/700 individuals throughout their ...