Name: silencing of brca2 to identify novel brca2-regulated biological functions in cultured human cells
Uploaded: 2015-08-12T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Silencing of BRCA2 to Identify Novel BRCA2-regulated Biological Functions in Cultured Human Cells at JoVE.com

This work was supported by FIRB-Merit grants RBNE08YFN3_005 and RBNE08HWLZ_012, and the Italian Ministry of Economy and Finance to the CNR for the Project &#8220;FaReBio di Qualit&#224;&#8221;.

1. إعداد الحلول سيرنا <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> و resuspend 5 نانومول من مخلوط (السيطرة) و 5 نانومول من BRCA2 سيرنا الكريات المجففة في 100 ميكرولتر من ريبونوكلياز خالية من المياه (تركيز سيرنا النهائي: 50 ميكرومتر). هذا هو مخزون سيرنا ويجب تخزينها في -20 ?...

<ol>
	<li>Thorslund, T., West, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BRCA2:+a+universal+recombinase+regulator.">BRCA2: a universal recombinase regulator.</a> Oncogene. 26, 7720-7730 (2007).</li><li>Yoshida, K., Miki, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+BRCA1+and+BRCA2+as+regulators+of+DNA+repair,+transcription,+and+cell+cycle+in+response+to+DNA+damage.">Role of BRCA1 and BRCA2 as regulators of DNA repair, transcription, and cell cycle in response to DNA damage.</a> Cancer Sci. 95, 866-871 (2004).</li><li>Martin, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Germline+mutations+in+BRCA1+and+BRCA2+in+breast-ovarian+families+from+a+breast+cancer+risk+evaluation+clinic.">Germline mutations in BRCA1 and BRCA2 in breast-ovarian families from a breast cancer risk evaluation clinic.</a> J Clin Oncol. 19, 2247-2253 (2001).</li><li>Castro, E., Eeles, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+BRCA1+and+BRCA2+in+prostate+cancer.">The role of BRCA1 and BRCA2 in prostate cancer.</a> Asian J Androl. 14, 409-414 (2012).</li><li>Vencken, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemosensitivity+and+outcome+of+BRCA1-+and+BRCA2-associated+ovarian+cancer+patients+after+first-line+chemotherapy+compared+with+sporadic+ovarian+cancer+patients.">Chemosensitivity and outcome of BRCA1- and BRCA2-associated ovarian cancer patients after first-line chemotherapy compared with sporadic ovarian cancer patients.</a> Ann Oncol. 22, 1346-1352 (2011).</li><li>Farmer, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+the+DNA+repair+defect+in+BRCA+mutant+cells+as+a+therapeutic+strategy.">Targeting the DNA repair defect in BRCA mutant cells as a therapeutic strategy.</a> Nature. 434, 917-921 (2005).</li><li>Arbini, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+DNA+depletion+sensitizes+cancer+cells+to+PARP+inhibitors+by+translational+and+post-translational+repression+of+BRCA2.">Mitochondrial DNA depletion sensitizes cancer cells to PARP inhibitors by translational and post-translational repression of BRCA2.</a> Oncogenesis. 2, e82 (2013).</li><li>Yang, F., Guo, X., Yang, G., Rosen, D. G., Liu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AURKA+and+BRCA2+expression+highly+correlate+with+prognosis+of+endometrioid+ovarian+carcinoma.">AURKA and BRCA2 expression highly correlate with prognosis of endometrioid ovarian carcinoma.</a> Mod Pathol. 24, 836-845 (2011).</li><li>Guaragnella, N., Marra, E., Galli, A., Moro, L., Giannattasio, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silencing+of+BRCA2+decreases+anoikis+and+its+heterologous+expression+sensitizes+yeast+cells+to+acetic+acid-induced+programmed+cell+death.">Silencing of BRCA2 decreases anoikis and its heterologous expression sensitizes yeast cells to acetic acid-induced programmed cell death.</a> Apoptosis. 19, 1330-1341 (2014).</li><li>Mahato, R. I., Rolland, A., Tomlinson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cationic+lipid-based+gene+delivery+systems:+pharmaceutical+perspectives.">Cationic lipid-based gene delivery systems: pharmaceutical perspectives.</a> Pharm Res. 14, 853-859 (1997).</li><li>Su, L. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+BRCA2:+temperature+sensitivity+of+detection+and+cell-cycle+regulated+expression.">Characterization of BRCA2: temperature sensitivity of detection and cell-cycle regulated expression.</a> Oncogene. 17, 2377-2381 (1998).</li><li>Laemmli, U. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cleavage+of+structural+proteins+during+the+assembly+of+the+head+of+bacteriophage+T4.">Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4.</a> Nature. 227, 680-685 (1970).</li><li>Towbin, H., Staehelin, T., Gordon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophoretic+transfer+of+proteins+from+polyacrylamide+gels+to+nitrocellulose+sheets:+procedure+and+some+applications.">Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 76, 4350-4354 (1979).</li><li>Burnette, W. N. '. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term='Western+blotting':+electrophoretic+transfer+of+proteins+from+sodium+dodecyl+sulfate--polyacrylamide+gels+to+unmodified+nitrocellulose+and+radiographic+detection+with+antibody+and+radioiodinated+protein+A.">'Western blotting': electrophoretic transfer of proteins from sodium dodecyl sulfate--polyacrylamide gels to unmodified nitrocellulose and radiographic detection with antibody and radioiodinated protein A.</a> Anal Biochem. 112, 195-203 (1981).</li><li>Hunter, F. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+targeting+of+hypoxia+and+homologous+recombination+repair+dysfunction+in+triple-negative+breast+cancer.">Dual targeting of hypoxia and homologous recombination repair dysfunction in triple-negative breast cancer.</a> Mol Cancer Ther. , (2014).</li><li>Drew, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+potential+of+poly(ADP-ribose)+polymerase+inhibitor+AG014699+in+human+cancers+with+mutated+or+methylated+BRCA1+or+BRCA2.">Therapeutic potential of poly(ADP-ribose) polymerase inhibitor AG014699 in human cancers with mutated or methylated BRCA1 or BRCA2.</a> J Natl Cancer Inst. 103, 334-346 (2011).</li><li>Bryant, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specific+killing+of+BRCA2-deficient+tumours+with+inhibitors+of+poly(ADP-ribose)+polymerase.">Specific killing of BRCA2-deficient tumours with inhibitors of poly(ADP-ribose) polymerase.</a> Nature. 434, 913-917 (2005).</li><li>Ihnen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+potential+of+the+poly(ADP-ribose)+polymerase+inhibitor+rucaparib+for+the+treatment+of+sporadic+human+ovarian+cancer.">Therapeutic potential of the poly(ADP-ribose) polymerase inhibitor rucaparib for the treatment of sporadic human ovarian cancer.</a> Mol Cancer Ther. 12, 1002-1015 (2013).</li><li>Jeong, J. H., Jo, A., Park, P., Lee, H., Lee, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brca2+Deficiency+Leads+to+T+Cell+Loss+and+Immune+Dysfunction.">Brca2 Deficiency Leads to T Cell Loss and Immune Dysfunction.</a> Mol Cells. , (2015).</li></ol>

بسبب الطفرات سلالة الجرثومية من الرصاص BRCA2 الجينات إلى زيادة خطر عدة أنواع من السرطان، بما في ذلك الذكور والإناث سرطان الثدي وسرطان المبيض وسرطان البروستاتا، وسرطان البنكرياس، وسرطان الجلد 3،4، وقد أجريت العديد من الدراسات لفهم الوظيفة البيولوجية من البر...

بترميز الجين BRCA2 (سرطان الثدي قابلية الجينات 2) لبروتين القامع الورم الذي يلعب دورا حاسما في إصلاح DNA فواصل مزدوج الجديلة من خلال تنظيم وظيفة الانزيم recombinase Rad51 1. كما تم المتورطين BRCA2 في التشكيل النسخ والسيطرة في الخلية دورة 2. الطفرات سلالة الجرثومية في الجين BRCA2 تحفز الحساسية جسمية مهيمنة لسرطان الثدي وسرطان المبيض لدى النساء وسرطان البروستاتا لدى الرجال، فضلا عن الاستعداد لأنواع السرطان الأخرى 3،4. ومع ذلك، على الرغم من زيادة خطر في الاصابة بسرطان، والطفرات BRCA2 التي تقمع أو الحد من وظيفة BRCA2 قد تجعل الخلايا السرطانية أكثر عرضة لعوامل العلاج الكيميائي الذي يسبب التلف في الحمض النووي 07/05. السرطان متفرقة يحمل انخفاض معدل الطفرات BRCA2 (&lt;3٪) على الرغم من انخفاض مستويات البروتين BRCA2 قد تم الكشف عنها في بعض أنواع السرطان، مما يشير إلى أن البروتين BRCA2قد يتم فقدان أثناء تكون الأورام في أمراض السرطان متفرقة خلال آليات غير طفري ​​التي تعتمد على 7،8. وبالتالي، فمن المهم أن نفهم بشكل كامل وظائف BRCA2 في سياق بيولوجيا السرطان وكذلك في إعدادات البيولوجية الأخرى. أداة قوية تستخدم لتحديد وظائف جديدة من الجينات في خلايا الثدييات هي لإسكات تعبيرها. وكمثال على ذلك، فقد أدت إسكات التعبير BRCA2 في مجموعة متنوعة من الخلايا الظهارية الطبيعية مؤخرا إلى تحديد وظيفة جديدة للBRCA2 كمنظم للمقاومة anoikis، خطوة هامة خلال الاستحواذ على الخلايا السرطانية الغازية والمتنقل قدرة 9. لا يمكن أن يتحقق الجينات إسكات عن طريق إدخال في الخلايا إما صغير التدخل (سي) RNA أو دبوس الشعر القصير (ش) جزيئات الحمض النووي الريبي استهداف جين معين. رجولية عالية من سيرنا وسهولة الاستخدام جعله أداة تفضيلية لإسكات التجارب التي تهدف إلى اكتساب رؤى جديدة في العمليات البيولوجية الهامة لالثانية لتحديد أهداف علاجية جديدة. ومع ذلك، ضربة قاضية كفاءة في التعبير الجيني قد لا تكون قابلة للتحقيق بسهولة لجميع الجينات وربما يكون متغير بدرجة كبيرة اعتمادا على نوع من الخلايا. بسبب انخفاض في مستويات البروتين داخل الخلايا هو النمط الظاهري الأكثر ملاءمة قيد التحقيق، لا بد من تحديد إسكات الجينات التي immunoblotting تحليل للمنتج الجين. مع هذا الصدد، يقدم البروتين BRCA2 تحديا آخر: كونه بروتين كبير (حوالي 390 كيلو دالتون)، والصعوبات التقنية موجودة لتحليل الكيمياء الحيوية التقليدية، بما في ذلك immunoblotting. نحن هنا التقرير بروتوكول الأمثل لإسكات الفعال للBRCA2 في خطوط الخلايا الظهارية الإنسان وللكشف السريع والناجح من البروتين BRCA2 ضربة قاضية من قبل immunoblotting التحليل.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>BRCA2 siRNA</td>
			<td>Dharmacon</td>
			<td>L-003462-00</td>
			<td>SMARTpool: ON-TARGETplus BRCA2 siRNA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ctrl siRNA</td>
			<td>Dharmacon</td>
			<td>&#160;D-001810-10-05</td>
			<td>ON-TARGETplus Non-targeting Pool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine RNAiMAX Reagent&#160;</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td><a href="http://www.lifetechnologies.com/order/catalog/product/13778075">13778075</a></td>
			<td>Transfection Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OPTI-MEM I Reduced Serum Medium</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>31985-070</td>
			<td>Medium for transfection procedure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NuPAGE Tris-Acetate 3-8% 1,5 mm Gel precast</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>EA0378</td>
			<td>Gel for protein electrophoresis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NuPAGE LDS Sample buffer&#160;</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>NP0007</td>
			<td>Reagent for protein electrophoresis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NuPAGE Sample Reducing agent (10x)</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>NP0004</td>
			<td>Reagent for protein electrophoresis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NuPAGE Antioxidant</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>NP0005</td>
			<td>Reagent for protein electrophoresis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HiMark Pre-stained protein standard</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>LC5699</td>
			<td>Prestained marker for gel electrophoresis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>XCell SureLoc Mini-Cell&#160; System</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>EI0002</td>
			<td>Equipment for protein electrophoresis/transfer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NuPAGE Tris-Acetate SDS Running Buffer</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>LA0041</td>
			<td>Reagent for Western blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVDF membrane</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>IPVH00010</td>
			<td>Reagent for Western blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NuPAGE Transfer Buffer</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>NP0006-1</td>
			<td>Reagent for Western blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BRCA2 H-300 rabbit polyclonal antibody</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>sc-8326</td>
			<td>1:300 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beta-tubulin monoclonal antibody</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T4026-100UL</td>
			<td>1:1000 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Skim Milk powder</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>70166</td>
			<td>Reagent for Western blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween-20</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P1379</td>
			<td>Reagent for Western blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperSignal West Pico/Femto Chemiluminescent Substrate</td>
			<td>Pierce Thermo Scientific</td>
			<td>34080/34096</td>
			<td>Chemiluminescence system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PNT1A cells</td>
			<td>SIGMA Aldrich (for ECACC)</td>
			<td>95012614</td>
			<td>PNT1A human, normal prostate epithelium immortalized with SV40</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nthy cells</td>
			<td>SIGMA Aldrich (for ECACC)</td>
			<td>90011609</td>
			<td>Nthy-ori 3-1 Cell Line human, thyroid follicular epithelial cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Proliferation Kit I (MTT)</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11465007001</td>
			<td>Kit for cell proliferation assays</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

silencing of brca2 to identify novel brca2-regulated biological functions in cultured human cells

إسكات الكابتة للورم البروتين BRCA2 وكشف من خلال التحليلات الكيميائية الحيوية التقليدية تمثل تحديا تقنيا كبيرا نظرا لحجم كبير من البروتين البشري BRCA2 (حوالي 390 كيلو دالتون). نفيدكم التعديلات ترنسفكأيشن وimmunoblotting بروتوكولات سيرنا القياسية لإسكات BRCA2 البشري وكشف الذاتية البروتين BRCA2، على التوالي، في خطوط الخلايا الظهارية الإنسان. وتشمل الخطوات الرئيسية لسيرنا ارتفاع نسبة ترنسفكأيشن الكاشف لواثنين من الجولات اللاحقة من سيرنا ترنسفكأيشن داخل نفس التجربة. باستخدام هذه وغيرها من التعديلات على بروتوكول قياسي نحن باستمرار تحقيق أكثر من 70٪ إسكات الجينات BRCA2 البشري كما تقرره immunoblotting التحليل مع أضداد BRCA2. بالإضافة إلى ذلك، تمسخ من الخلية لست] في 55 ° C بدلا من التقليدية 70-100 ° C والتحسينات التقنية الأخرى من الإجراء immunoblotting السماح الكشف عن البروتين BRCA2 سليمة حتى WHأون كميات قليلة جدا من بدء المواد المتاحة أو عندما تكون مستويات بروتين تعبير BRCA2 منخفضة جدا. إسكات الفعال للBRCA2 في الخلايا البشرية يقدم استراتيجية ثمينة لتعطيل وظيفة BRCA2 في الخلايا مع BRCA2 سليمة، بما في ذلك الخلايا السرطانية، لدراسة المسارات الجزيئية الجديدة والوظائف الخلوية التي قد تتأثر طفرات BRCA2 المسببة للأمراض في الأورام. وينبغي أن يكون التكيف هذا البروتوكول لإسكات وتحليل البروتينات الأخرى كبيرة &quot;مثل BRCA2 كفاءة تحقيقه بسهولة.

قبل الشروع في / الفحص البيولوجي والكيمياء الحيوية لدراسة تأثير BRCA2 إسكات على وظائف الخلية، فإن الخطوة الأولى هي لتأكيد خصوصية إسكات باستخدام سيرنا المخفوق (عدم استهداف سيرنا) جنبا إلى جنب مع BRCA2 سيرنا (الشكل 1A ). من المهم إجراء الجولة الثانية من سيرنا ترن?...

Watch this Scientific Journal Video about Silencing of BRCA2 to Identify Novel BRCA2-regulated Biological Functions in Cultured Human Cells at JoVE.com

Silencing of BRCA2 to Identify Novel BRCA2-regulated Biological Functions in Cultured Human Cells

Gene silencing by siRNA represents a convenient experimental strategy to analyze BRCA2-dependent biological functions with immediate implications to better understand cancer biology. A method to efficiently silence BRCA2, along with the experimental procedure to detect and quantify changes in BRCA2 protein expression by immunoblotting in human cell lines, is presented.

إسكات<em&gt; BRCA2</em&gt; من التعرف على رواية الوظائف البيولوجية التنظيم BRCA2 في الخلايا البشرية المستزرعة

Silencing of the tumor suppressor protein BRCA2 and its detection by conventional biochemical analyses represent a great technical challenge owing to the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Silencing of BRCA2 to Identify Novel BRCA2-regulated Biological Functions in Cultured Human Cells

Live Imaging of Dense-core Vesicles in Primary Cultured Hippocampal Neurons

يعيش تصوير الكثيفة الأساسية الحويصلات في الخلايا العصبية الأولية الحصين مثقف

Observing and characterizing dynamic cellular processes can yield important information about cellular activity that cannot be gained from static images.  ...

Isolation of Ribosome Bound Nascent Polypeptides in vitro to Identify Translational Pause Sites Along mRNA

Isolation of Ribosome Bound Nascent Polypeptides in vitro to Identify Translational Pause Sites Along mRNA

عزلة البروتينية ريبوسوم الوليدة منضم<em&gt; في المختبر</em&gt; لتحديد المواقع وقفة بالحركة على طول مرنا

The rate of translational elongation is non-uniform. mRNA secondary structure, codon usage and mRNA associated proteins may alter ribosome movement on the ...

A Quantitative Assay to Study Protein:DNA Interactions, Discover Transcriptional Regulators of Gene Expression, and Identify Novel Anti-tumor Agents

A الكمي الفحص لدراسة البروتين: تفاعلات الحمض النووي، اكتشاف المنظمين الترانسكربتي التعبير الجيني، وتحديد رواية وكلاء المضادة للورم

Many DNA-binding assays such as electrophoretic mobility shift assays (EMSA), chemiluminescent assays, chromatin immunoprecipitation (ChIP)-based assays, ...

Visualization of Endoplasmic Reticulum Subdomains in Cultured Cells

تصور هيولي باطني شبكية النطاقات الفرعية في الخلايا المستزرعة

The lipids and proteins in eukaryotic cells are continuously exchanged between cell compartments, although these retain their distinctive composition and ...

Capture Compound Mass Spectrometry - A Powerful Tool to Identify Novel c-di-GMP Effector Proteins

التقاط الطيف الكتلي - أداة قوية لتحديد رواية ج-دي-GMP المستجيب البروتينات

Considerable progress has been made during the last decade towards the identification and characterization of enzymes involved in the synthesis ...

siRNA Screening to Identify Ubiquitin and Ubiquitin-like System Regulators of Biological Pathways in Cultured Mammalian Cells

سيرنا فحص لتحديد اليوبيكويتين واليوبيكويتين مثل المنظمين نظام مقررات تمهيدية البيولوجية في خلايا الثدييات مثقف

Post-translational modification of proteins with ubiquitin and ubiquitin-like molecules (UBLs) is emerging as a dynamic cellular signaling network that ...

Nephrotoxin Microinjection in Zebrafish to Model Acute Kidney Injury

سم كلوي حقن مكروي في الزرد لنموذج قصور كلوي حاد

The kidneys are susceptible to harm from exposure to chemicals they filter from the bloodstream. This can lead to organ injury associated with a rapid ...

High-resolution Time-lapse Imaging and Automated Analysis of Microtubule Dynamics in Living Human Umbilical Vein Endothelial Cells

عالية الدقة التصوير الوقت الفاصل بين وتحليل الآلي للأنيبيب حيوية في المعيشة السري الإنسان خلايا الوريد غشائي

The physiological process by which new vasculature forms from existing vasculature requires specific signaling events that trigger morphological changes ...

A Graphical User Interface for Software-assisted Tracking of Protein Concentration in Dynamic Cellular Protrusions

واجهة المستخدم الرسومية لتتبع بمساعدة برنامج تركيز البروتين في النتوءات الخلوية الديناميكية

Filopodia are dynamic, finger-like cellular protrusions associated with migration and cell-cell communication. In order to better understand the complex ...

Glucose Uptake Measurement and Response to Insulin Stimulation in In Vitro Cultured Human Primary Myotubes

Glucose Uptake Measurement and Response to Insulin Stimulation in In Vitro Cultured Human Primary Myotubes

قياس امتصاص الجلوكوز والاستجابة لتحفيز الأنسولين في<em&gt; في المختبر</em&gt; مثقف الإنسان ميوتوبيس الابتدائية

Skeletal muscle is the largest glucose deposit in mammals and largely contributes to glucose homeostasis. Assessment of insulin sensitivity of muscle ...