Name: immunohistochemical visualization of hippocampal neuron activity after spatial learning in a mouse model of neurodevelopmental disorders
Uploaded: 2015-05-12T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Immunohistochemical Visualization of Hippocampal Neuron Activity After Spatial Learning in a Mouse Model of Neurodevelopmental Disorders at JoVE.com

نود أن نشكر الموظفين الإداريين من CIBIO (جامعة ترينتو) ومعهد علم الأعصاب CNR للحصول على المساعدة. ويدعم جيوفاني بروفنزانو التي كتبها زمالة ما بعد الدكتوراه من FONDAZIONE فيرونيسى (ميلان الايطالي). وقد تم تمويل هذا العمل من قبل الوزارة الإيطالية للجامعة والبحث (PRIN 2008 منحة # 200894SYW2_002 وPRIN 2010-2011 منحة # 2010N8PBAA_002 إلى YB)، جامعة ترينتو (CIBIO بدء منحة لYB) ومؤسسة تيليثون (منحة # GGP13034 ل YB).

وأجريت جميع التجارب بما يتفق مع توجيهات الاتحاد الأوروبي 2010/63 / الاتحاد الأوروبي وتمت الموافقة من قبل وزارة الصحة الإيطالية. 1. رعاية الحيوان والإسكان والعلاج <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أداء جميع البروتوكو?...

<ol>
	<li>Castren, E., Elgersma, Y., Maffei, L., Hagerman, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+neurodevelopmental+disorders+in+adulthood.">Treatment of neurodevelopmental disorders in adulthood.</a> The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 32, 14074-14079 (2012).</li><li>Ehninger, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversal+of+learning+deficits+in+a+Tsc2+/-+mouse+model+of+tuberous+sclerosis.">Reversal of learning deficits in a Tsc2+/- mouse model of tuberous sclerosis.</a> Nature medicine. 14, 843-848 (2008).</li><li>West, A. E., Greenberg, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+activity-regulated+gene+transcription+in+synapse+development+and+cognitive+function.">Neuronal activity-regulated gene transcription in synapse development and cognitive function.</a> Cold Spring Harbor perspectives in biology. 3, (2011).</li><li>Goorden, S. M., van Woerden, G. M., van der Weerd, L., Cheadle, J. P., Elgersma, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cognitive+deficits+in+Tsc1+/-+mice+in+the+absence+of+cerebral+lesions+and+seizures.">Cognitive deficits in Tsc1+/- mice in the absence of cerebral lesions and seizures.</a> Annals of neurology. 62, 648-655 (2007).</li><li>Cui, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurofibromin+regulation+of+ERK+signaling+modulates+GABA+release+and+learning.">Neurofibromin regulation of ERK signaling modulates GABA release and learning.</a> Cell. 135, 549-560 (2008).</li><li>Brielmaier, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autism-relevant+social+abnormalities+and+cognitive+deficits+in+engrailed-2+knockout+mice.">Autism-relevant social abnormalities and cognitive deficits in engrailed-2 knockout mice.</a> PloS one. 7, e40914 (2012).</li><li>Provenzano, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampal+dysregulation+of+neurofibromin-dependent+pathways+is+associated+with+impaired+spatial+learning+in+engrailed+2+knock-out+mice.">Hippocampal dysregulation of neurofibromin-dependent pathways is associated with impaired spatial learning in engrailed 2 knock-out mice.</a> The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 34, 13281-13288 (2014).</li><li>Morgan, J. I., Curran, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stimulus-transcription+coupling+in+neurons:+role+of+cellular+immediate-early+genes.">Stimulus-transcription coupling in neurons: role of cellular immediate-early genes.</a> Trends in neurosciences. 12, 459-462 (1989).</li><li>Steward, O., Schuman, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+synthesis+at+synaptic+sites+on+dendrites.">Protein synthesis at synaptic sites on dendrites.</a> Annual review of neuroscience. 24, 299-325 (2001).</li><li>Gutmann, D. H., Parada, L. F., Silva, A. J., Ratner, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurofibromatosis+type+1:+modeling+CNS+dysfunction.">Neurofibromatosis type 1: modeling CNS dysfunction.</a> The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 32, 14087-14093 (2012).</li><li>Costa, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+for+the+learning+deficits+in+a+mouse+model+of+neurofibromatosis+type+1.">Mechanism for the learning deficits in a mouse model of neurofibromatosis type 1.</a> Nature. 415, 526-530 (2002).</li><li>Silva, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+for+the+learning+and+memory+deficits+associated+with+neurofibromatosis+type.">A mouse model for the learning and memory deficits associated with neurofibromatosis type.</a> I. Nature. 15, 281-284 (1997).</li><li>Morris, R. G., Garrud, P., Rawlins, J. N., O'Keefe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Place+navigation+impaired+in+rats+with+hippocampal+lesions.">Place navigation impaired in rats with hippocampal lesions.</a> Nature. 297, 681-683 (1982).</li><li>Praag, H., Kempermann, G., Gage, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Running+increases+cell+proliferation+and+neurogenesis+in+the+adult+mouse+dentate+gyrus.">Running increases cell proliferation and neurogenesis in the adult mouse dentate gyrus.</a> Nature. 2, 266-270 (1999).</li><li>Adams, J. P., Sweatt, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+psychology:+roles+for+the+ERK+MAP+kinase+cascade+in+memory.">Molecular psychology: roles for the ERK MAP kinase cascade in memory.</a> Annual review of pharmacology and toxicology. 42, 135-163 (2002).</li><li>Di Cristo, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirement+of+ERK+activation+for+visual+cortical+plasticity.">Requirement of ERK activation for visual cortical plasticity.</a> Science. 292, 2337-2340 (2001).</li><li>Satoh, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ERK2+contributes+to+the+control+of+social+behaviors+in+mice.">ERK2 contributes to the control of social behaviors in mice.</a> The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 31, 11953-11967 (2011).</li><li>Sgado, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+GABAergic+neurons+in+the+hippocampus+and+cerebral+cortex+of+Engrailed-2+null+mutant+mice:+implications+for+autism+spectrum+disorders.">Loss of GABAergic neurons in the hippocampus and cerebral cortex of Engrailed-2 null mutant mice: implications for autism spectrum disorders.</a> Experimental neurology. 247, 496-505 (2013).</li><li>Sgado, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptome+profiling+in+engrailed-2+mutant+mice+reveals+common+molecular+pathways+associated+with+autism+spectrum+disorders.">Transcriptome profiling in engrailed-2 mutant mice reveals common molecular pathways associated with autism spectrum disorders.</a> Molecular autism. 4, 51 (2013).</li><li>Cheh, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=En2+knockout+mice+display+neurobehavioral+and+neurochemical+alterations+relevant+to+autism+spectrum+disorder.">En2 knockout mice display neurobehavioral and neurochemical alterations relevant to autism spectrum disorder.</a> Brain research. 1116, 166-176 (2006).</li><li>Dawson, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+the+broader+phenotype+of+autism:+genetic,+brain,+and+behavioral+perspectives.">Defining the broader phenotype of autism: genetic, brain, and behavioral perspectives.</a> Development and psychopathology. 14, 581-611 (2002).</li><li>Gage, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole+animal+perfusion+fixation+for+rodents.">Whole animal perfusion fixation for rodents.</a> J Vis Exp. (65), (2012).</li><li>Maei, H. R., Zaslavsky, K., Teixeira, C. M., Frankland, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+is+the+Most+Sensitive+Measure+of+Water+Maze+Probe+Test+Performance.">What is the Most Sensitive Measure of Water Maze Probe Test Performance.</a> Frontiers in integrative neuroscience. 3, 4 (2009).</li><li>Guzowski, J. F., Setlow, B., Wagner, E. K., McGaugh, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experience-dependent+gene+expression+in+the+rat+hippocampus+after+spatial+learning:+a+comparison+of+the+immediate-early+genes+Arc,+c-fos+and+zif268.">Experience-dependent gene expression in the rat hippocampus after spatial learning: a comparison of the immediate-early genes Arc, c-fos and zif268.</a> The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 21, 5089-5098 (2001).</li></ol>

هنا، ونحن نقدم بروتوكول المناعية رفع معنوياته للكشف عن تنشيط الخلايا العصبية التالية MWM في En2 - / - الفئران، نموذج الفأر من الاضطرابات العصبية النمائية. تم الكشف عن انخفاض مستويات رفع معنوياته في الحقل الفرعي CA3 من En2 - / - المسوخ مقارنة WT. بشكل مختلف عن ما لوحظ...

وتشمل الاضطرابات العصبية النمائية مجموعة واسعة وغير متجانسة من الاضطرابات مثل متلازمة داون، متلازمة X الهش (FXS)، متلازمة ريت، الورم العصبي الليفي، التصلب درني وASD، والتي تشعر بالانزعاج تطوير ونضوج الجهاز العصبي المركزي (CNS) في وقت مبكر خلال فترة ما قبل الولادة 1. ويمكن لهذه الاختلالات التنموية الدماغ يسبب عميقة، تأثير مدى الحياة على وظيفة الحركة واللغة والتعلم وعملية الذاكرة. هناك عدد هائل من العوامل الوراثية والبيئية قد تورطت في التسبب في اضطرابات النمو العصبي خلال السنوات القليلة الماضية 2،3. حتى لو الآليات الجزيئية الكامنة وراء النمط الظاهري السريرية لا تزال مجهولة، فإن النتائج المذكورة أعلاه قد سمحت تطوير عدة نماذج الماوس من هذه الاضطرابات. وقد تم تحديد العجز في التعلم والذاكرة في عدد من هذه النماذج الماوس مثل TSC1 +/-، TSC2 +/-،NF1 +/- وEn2 - / - الفئران 2،4-7. تحديا هاما في مجال اضطرابات النمو العصبي هو تحديد العمليات الخلوية والجزيئية الكامنة والذاكرة والتعلم اختلال وظيفي. يمكن مسارات الإشارات اختيار تفعيلها خلال التعلم أو الذاكرة لحث على نسخ من جينات معينة وتؤدي في نهاية المطاف إلى دي نوفو تخليق البروتين. وبفعل الجينات المباشرة في وقت مبكر (IEGs) تفعيل والتي تعتمد على البروتين التعديلات متشابك بسرعة في الخلايا العصبية في الدماغ ردا على نشاط الخلايا العصبية والتدريب السلوكي 8،9. وقد ارتبطت العجز في مسارات الإشارات التي تنطوي على neurofibromin مع ضعف في التعلم في الاضطرابات العصبية النمائية. Neurofibromin هو نتاج الجين NF1، الذي يسبب نوع الورم العصبي الليفي 1، متلازمة وراثية معقدة تتميز أورام الجهاز العصبي، والتأخير السلوكية والحركية، وديسا المعرفي الطفرةbilities 10. متخالف الفئران لNF1 حذف يقتصر على الخلايا العصبية المثبطة تظهر عجز في المرحلة المبكرة من التقوية على المدى الطويل (LTP)، وكذلك التعلم المكاني للخطر في MWM 5،11،12. ومن المثير للاهتمام، ونقص NF1 في هذا النموذج الماوس يؤدي إلى تفعيل أكثر من رأس الإشارات في interneurons المثبطة أثناء التعلم، مما أدى إلى زيادة الفسفرة ERK وأخيرا في تعزيز الشاذ الإفراج GABA من هذه الخلايا العصبية 5. وبناء على هذه النتائج، والتصور من نشاط الخلايا العصبية بعد المهام السلوكية يمثل وسيلة لإعادة بناء الدوائر المحددة المعنية في الأمراض العصبية النمائية. بروتوكول المناعية الموصوفة هنا يهدف إلى تقييم وقياس مستويات ERK الفسفرة الحصين التالية MWM في نموذج الفأر ASD مع العجز المعرفي. ويستخدم على نطاق واسع MWM للتحقيق الحصين التعلم المكاني يعتمد والذاكرة في القوارض 13،14 </sتصل&gt;. قررنا استخدام ERK الفسفرة كما قراءات الجزيئية التعلم قرن آمون التي تعتمد على المهمة، منذ ظهر ERK أن يكون لها دورا أساسيا في التعلم والذاكرة تشكيل 15. وعلاوة على ذلك، فإن مسار ERK ضروري لتعتمد على خبرة ليونة في القشرة البصرية تطوير 16. أخيرا، الفئران التي تفتقر إلى واحد من اثنين ERK وإيسفورمس (ERK2) في المعرض CNS ملحوظ الشذوذ في السلوك المعرفي والعاطفي والاجتماعي 17، مشيرا إلى أن ERK إشارات قد تلعب دورا حاسما في التسبب في اضطرابات النمو العصبي مثل ASD. كنا Engrailed 2 بالضربة القاضية (En2 - / -) الفئران كنموذج للاضطرابات النمو العصبي. En2 - / - أظهرت الفئران الخصائص التشريحية والسلوكية &quot;ASD تشبه&quot;، بما في ذلك فقدان interneurons الدماغ الأمامي 18، خفضت التعبير عن الجينات المرتبطة ASD-19، وانخفضت مؤانسة، والمرونة الإدراكية ضعف 6،7،20. learni المكانينانوغرام وعيوب الذاكرة، مثل تلك الحالات المكتشفة في MWM، هي قوية خصوصا في En2 - / - الفئران 6،7 و قد تكون ذات صلة إدراكيا لوحظت في مرضى ASD 21. وعلاوة على ذلك، أظهرنا أن التعلم المكاني ضعف في MWM يرتبط مع انخفاض التعبير neurofibromin وزيادة مستويات رفع معنوياته في نقير En2 - / - الفئران البالغة 7. هنا نقدم بروتوكول مفصلة لتوصيف المناعى لرفع معنوياته بعد MWM في هذا النموذج الماوس ASD.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>EthoVision XT 8</td>
			<td>Noldus Information Technology</td>
			<td></td>
			<td>This software platform is not a requirement &#8211; there are many other behavioral softwares on the market.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tempera Paint</td>
			<td>Giotto - Fila Group Company</td>
			<td></td>
			<td>White and liquid, non toxic. Used to prepare opaque water in the Morris water maze.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vibratome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>VT1200</td>
			<td>Equivalent models from other companies can be used.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 well plate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>CLS3524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100% ethanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A406-20</td>
			<td>Used to make ethanol gradient for dehydration prior to slide mounting.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>VWR</td>
			<td>66004-950</td>
			<td>Toxic - to be used under hood. Change xylene every month depending on use.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Azide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>&#160;S2002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P3813-10PAK</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ddH2O</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma&#160;</td>
			<td>T-8787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;Hydrogen Peroxide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H1009-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal Goat Serum</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>G9023-10ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ABC kit Vectastain&#160;</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>PK-6100</td>
			<td>Add in a volume of 5 ml of PBS 2 drops of reagent A, mix and then add 2 drops of reagent B and mix.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB peroxidase substrate</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>SK-4100</td>
			<td>Add in a volume of 5 ml ddH2O: 2 drops of buffer stock solution and mix; 4 drops of DAB and mix; 2 drops of H2O2 and mix.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pERK antibody</td>
			<td>Cell Signaling Technologies&#160;</td>
			<td>4370</td>
			<td>Dilution 1:500</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotinylated Goat Anti-Rabbit IgG Antibody</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>BA-1000&#160;</td>
			<td>Dilution 1:250</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperFrost Slides&#160;</td>
			<td>Carl Roth</td>
			<td>1879</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslips</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>12-548-B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPX</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>317616</td>
			<td>Mounting medium for slides. Equivalent mounting medium can be used.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>&#160;Zeiss&#160;</td>
			<td>Axio Imager.M2</td>
			<td>Equivalent microscope can be used.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adobe Photoshop</td>
			<td>Adobe Systems, San Jose, CA</td>
			<td></td>
			<td>To assemble images.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image J software</td>
			<td>National Institute of Health</td>
			<td></td>
			<td>Free software can be downloaded at http://rsb.info.nih.gov/ij/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SigmaPlot 11.0</td>
			<td>Systat Software Inc. (USA)</td>
			<td></td>
			<td>Equivalent softwares for statistical analysis can be used.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prism 6</td>
			<td>GraphPad Software, Inc. (La Jolla, CA, USA)</td>
			<td></td>
			<td>Equivalent softwares for statistical analysis can be used.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

immunohistochemical visualization of hippocampal neuron activity after spatial learning in a mouse model of neurodevelopmental disorders

تحريض فسفرته كيناز الخلية التنظيم (بيرك) هو قراءات الجزيئية الموثوقة التي تعتمد على التعلم تنشيط الخلايا العصبية. هنا، نحن تصف بروتوكول المناعية رفع معنوياته لدراسة الملف الشخصى تنشيط الخلايا العصبية قرن آمون بعد التعرض لمهمة التعلم المكاني في نموذج الفأر تتميز العجز المعرفي من أصل النمو العصبي. على وجه التحديد، وكنا المناعية رفع معنوياته لدراسة تفعيل الخلايا العصبية التالية موريس المياه متاهة (MWM، وهي مهمة التعلم المعتمد على الحصين الكلاسيكية) في Engrailed-2 بالضربة القاضية (En2 - / -) الفئران، وهذا نموذج من اضطرابات طيف التوحد (ASD). بالمقارنة مع النوع البري (WT) الضوابط، En2 - / - أظهرت الفئران عجز التعلم المكاني كبيرة في MWM. بعد MWM، تم الكشف عن اختلافات كبيرة في عدد الخلايا العصبية رفع معنوياته إيجابية في الحقول الفرعية الحصين محددة من En2 - / - الفئران، بالمقارنة مع الحيوانات WT. وبالتالي، يمكن لدينا بروتوكول كشف بقوة الاختلافات فيالخلايا العصبية رفع معنوياته الإيجابية المرتبطة ضعف التعلم المعتمد على الحصين في نموذج الفأر من ASD. بشكل أعم، لدينا بروتوكول يمكن تطبيقها على التحقيق في الملف الشخصى تفعيل الخلايا العصبية قرن آمون في كلا النموذجين الماوس وراثية أو الدوائية تتميز العجز المعرفي.

وقد تم تصميم بروتوكول صفها هنا للتصور، من خلال المناعية، والتعبير عن علامة معينة من نشاط الخلايا العصبية الحصين بعد MWM في نموذج الفأر من الاضطرابات العصبية النمائية. وقد تم نقل كل البيانات التجريبية المبينة في هذا القانون من عملنا مؤخرا 7. استخدمت الحصول عليها ?...

Watch this Scientific Journal Video about Immunohistochemical Visualization of Hippocampal Neuron Activity After Spatial Learning in a Mouse Model of Neurodevelopmental Disorders at JoVE.com

Immunohistochemical Visualization of Hippocampal Neuron Activity After Spatial Learning in a Mouse Model of Neurodevelopmental Disorders

وصفنا بروتوكول المناعية لدراسة الملف الشخصى تنشيط الخلايا العصبية قرن آمون بعد التعرض لمهمة التعلم المكاني في نموذج الفأر تتميز العجز المعرفي من أصل النمو العصبي. ويمكن تطبيق هذا البروتوكول لكلا النموذجين الماوس وراثية أو الدوائية تتميز العجز المعرفي.

التصور المناعى من الحصين العصبية آخر بعد المكانية التعلم في نموذج الفأر من الاضطرابات العصبية النمائية

Induction of phosphorylated extracellular-regulated kinase (pERK) is a reliable molecular readout of learning-dependent neuronal activation. Here, we ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Fluorescence Recovery After Photobleaching (FRAP) of Fluorescence Tagged Proteins in Dendritic Spines of Cultured Hippocampal Neurons

Fluorescence Recovery After Photobleaching FRAP of Fluorescence Tagged Proteins in Dendritic Spines of Cultured Hippocampal Neurons

مضان الانتعاش بعد Photobleaching (FRAP) من البروتينات المرتبطة دلاليا الإسفار في العمود الفقري شجيري الخلايا العصبية الحصين مثقف

FRAP has been used to quantify the mobility of GFP-tagged proteins. Using a strong excitation laser, the fluorescence of a GFP-tagged protein is bleached ...

Using MazeSuite and Functional Near Infrared Spectroscopy to Study Learning in Spatial Navigation

باستخدام MazeSuite والوظيفية الأدنى مطياف الأشعة تحت الحمراء لدراسة التعلم في الملاحة المكانية

MazeSuite is a complete toolset to prepare, present and analyze navigational and spatial experiments1. MazeSuite can be used to design and edit adapted ...

Hippocampal Insulin Microinjection and In vivo Microdialysis During Spatial Memory Testing

Hippocampal Insulin Microinjection and In vivo Microdialysis During Spatial Memory Testing

الحصين حقن مكروي الأنسولين و<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; Microdialysis أثناء اختبار الذاكرة المكانية

Glucose metabolism is a useful marker for local neural activity, forming the basis of methods such as 2-deoxyglucose and functional magnetic resonance ...

Quantitative Analysis of Climbing Defects in a Drosophila Model of Neurodegenerative Disorders

التحليل الكمي من العيوب تسلق في نموذج ذبابة الفاكهة من الاضطرابات العصبية

Locomotive defects resulting from neurodegenerative disorders can be a late onset symptom of disease, following years of subclinical degeneration, and ...

Sex Differences in Mouse Hippocampal Astrocytes after In-Vitro Ischemia

Sex Differences in Mouse Hippocampal Astrocytes after In-Vitro Ischemia

الفروق بين الجنسين في ماوس الحصين النجمية بعد<em&gt; في المختبر</em&gt; نقص التروية

Astrogliosis following hypoxia/ischemia (HI)-related brain injury plays a role in increased morbidity and mortality in neonates. Recent clinical studies ...

A Simplified Method for Ultra-Low Density, Long-Term Primary Hippocampal Neuron Culture

والطريقة المبسطة للفائقة منخفضة الكثافة، طويل الأجل الابتدائية الحصين العصبية الثقافة

Culturing primary hippocampal neurons in vitro facilitates mechanistic interrogation of many aspects of neuronal development. Dissociated embryonic ...

High Resolution Quantitative Synaptic Proteome Profiling of Mouse Brain Regions After Auditory Discrimination Learning

عالية الدقة الكمية متشابك بروتيوم من التنميط ماوس مناطق الدماغ بعد السمعية التمييز التعلم

The molecular synaptic mechanisms underlying auditory learning and memory remain largely unknown. Here, the workflow of a proteomic study on auditory ...

Low-Density Primary Hippocampal Neuron Culture

منخفض الكثافة الابتدائية الحصين العصبية الثقافة

The ability to probe the structure and physiology of individual nerve cells in culture is crucial to the study of neurobiology, and allows for flexibility ...

Assessing Spatial Learning and Memory in Small Squamate Reptiles

تقييم التعلم المكاني والذاكرة في Squamate الزواحف الصغيرة

Clinical research has leveraged a variety of paradigms to assess cognitive decline, commonly targeting spatial learning and memory abilities. However, ...

The Use of Trace Eyeblink Classical Conditioning to Assess Hippocampal Dysfunction in a Rat Model of Fetal Alcohol Spectrum Disorders

استخدام الاشراط الكلاسيكي اييبلينك تتبع لتقييم هيبوكامبال الخلل في نموذج الفئران من اضطرابات طيف الكحول الجنيني

Neonatal rats were administered a relatively high concentration of ethyl alcohol (11.9% v/v) during postnatal days 4-9, a time when the fetal brain ...