Name: indirect immunofluorescence on frozen sections of mouse mammary gland
Uploaded: 2015-12-01T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Indirect Immunofluorescence on Frozen Sections of Mouse Mammary Gland at JoVE.com

Авторы благодарны основной изображений объекта ИНРА MIMA2 (INRA, UMR1198, Жуи-ан-Жоза) и сотрудникам аппарата IERP (UE 0907, ИНРА, Жуи-ан-Жоза) для ухода за животными и удобствам. Мы хотели бы также поблагодарить IH Mather, MC Невилл и С. Туз за предоставление нам очень полезную antibodie.

Мышей CD1 были выведены на INRA (UE0907 IERP, Жуи-ан-Жоза, Франция). Все этические аспекты ухода за животными соблюдены соответствующих руководящих принципов и требований лицензирования, установленными французского министерства сельского хозяйства. Процедуры, используемые были утверждены мес...

IHC является относительно простой и прямой экспериментальный метод локализации антигена в срезах тканей, которые в первую очередь зависит специфический эпитоп-антитело взаимодействий. Хотя большое количество протоколов используются для локализации белка на IIF, сердечник из этих проц?...

Молочная железа является нетипичным млекопитающих экзокринной орган, основной функцией которого является производство молока, чтобы кормить новорожденных. Развитие ткани молочной железы происходит главным образом после родов и характеризуется уникального процесса, в котором эпителий вторжению в окружающую строму. Эта ткань подвергается много изменений (рост, дифференцировку и регрессия), особенно во время взрослой жизни, одновременно с изменениями в репродуктивного статуса (рисунок 1). В дополнение к общей морфологии ткани, пропорции различных типов клеток, а также их расположение в молочной железе резко изменяются в течение развития 1-5. Во время эмбрионального жизни, молочной эпителия происходит от молочных линий молоко, которое определяется небольшим утолщением и стратификации эктодермы, между передними и задними конечностями с каждой стороны от средней линии вокруг эмбрионального день 10,5 (E10.5) (рис 1А ).На E11.5, молокопровод распадается на отдельные плакодах, которые симметрично расположены вдоль линии молочной молоко воспроизводимых местах, и окружающие мезенхимы начинает конденсироваться. Плакод начинают все глубже в дерму и молочной мезенхимы организует в концентрических слоев вокруг молочной зародыше (E12.5-E14.5). По E15.5, молочной эпителий, начинает размножаться и удлиненные, чтобы сформировать первичную росток, который толкает через молочной мезенхимы к жировой ткани. Основной росток развивает полый просвет с отверстием для кожи, отмеченной формирования соска оболочки. На E18.5, то удлиняя канал превратился в жировой ткани и имеет разветвленную в небольшой arborized системы протоков охватила в жировой ткани. Разработка, по существу, арестован и в зачаточном состоянии молочной железы остается морфогенетически покоя до наступления половой зрелости. В мужской эмбрион, активация рецепторов андрогенов приводит к дегенерации почек, которые исчезаютпо E15.5. По E18, молочной развития не перестает до полового созревания 6-9. При рождении, молочной железы таит в себе элементарное систему протоков, что продлевает и филиалы медленно (изометрической роста). В начале полового созревания, сферические структуры, расположенные на кончиках протоков называют концевой почки (TEBS), образуются из внешнего слоя клеток рака простаты и многослойной внутреннего ядра клеток (клеток тела). Эти структуры являются весьма пролиферативного и проникнуть в окружающую ткань стромы в ответ на гормональные сигналы. Распространение в результатах TEBS в протоковой удлинения, в сочетании с морфогенеза ветвления. Этот процесс приводит к созданию основного эпителиального arborized сети, исходящей из соска (рис 1B, период полового созревания). В ~ 10-12 недель после рождения, когда эпителий вторглись весь жировой ткани, ее расширение прекращается и TEBS исчезают. Развитие протоков затем подвергается динамические изменения, т.е. успехуве пролиферацию и регресс эпителиальных клеток в соответствии с эстрального цикла 10 (Рис 1В, взрослых). С самого начала беременности, молочной ткани подвергается существенный рост и морфологические изменения, чтобы подготовиться к лактации. Молочная эпителия интенсивно пролиферируют и дифференцируются, что ведет к сильно разветвленного тубуло-альвеолярного сети. Одновременно, эпителиальных клеток молочной железы (МИК) поляризованы и способны синтезировать и секретировать молочные продукты. МИК организовать в многочисленных альвеолярных структур (ацинусов), которые окружены сократительных клеток миоэпителиальных и включены в строме, состоящей из соединительной ткани и жировой, кровеносных сосудов и нервных окончаний (Фигура 1В, беременность). Кроме того, базальные сторона MECs находится в тесном контакте с базальной мембраной (внеклеточного матрикса), и взаимодействие между этими двумя организациями плотно регулировать как морфогенез и секреторную функцию молочной железыры эпителий 11-13. Все эти процессы опираются на действия различных экологических киев, из которых наиболее важными являются hormones14, паракринных факторов и внеклеточного матрикса. Например, прогестерон вызывает обширный боковой ветвления 15 и alveologenesis, что, в сочетании с пролактина (PRL) 16,17, продвигает и поддерживает дифференцировку альвеол. В дополнение к стероидам и PRL18, цитокинов и сигнальных путей, связанных с развитием (Wnt и Notch сигнальными путями) также участвуют в молочной приверженности клонов и развития 19-21. В конце беременности, просвета МИК начинают производить богатой белком молока, известный как молозиво в просвете альвеол. Кроме того, прогестерон действует на эпителиальной проницаемости и так как плотные соединения остаются открытыми, молозиво также в материнском кровотоке. После родов, то Mammarу эпителий занимает почти всю молочную железу и объема имеет высокую степень организации (рисунок 2, эпителия молочной железы). Молоко производящих единиц, а именно альвеолы ​​(Рисунок 2, альвеолы), формируются монослоя поляризованных эпителиальных молочных секреторных клеток (MESCs), с их апикальной плазматической мембраны разграничения просвет. Альвеолы ​​организовать себя на дольки, которые сгруппированы в долях, связанных с каналами, которые истощают молоко с внешним среде (рис 2, доли). Лактации происходит, т.е.., MESCs начинают секретировать обильные количества молока, в первую очередь вызвано снижением плацентарных гормонов (главным образом прогестерон) (фиг.1В, лактации). Гены молочного белка активируются в определенном временном время хода в диапазоне от беременности лактации 9,22,23, главным образом, в ответ на PRL гипофиза, опубликованном в момент кормления грудью. Одновременно, контакты между MESCs и внеклеточного матрикса как стимулировать молочный белок SYNThesis через сигналы, которые передаются через взаимодействий между клеточными интегринов и ламинином 24,25, подавляющих апоптоз и в MESCs 26,27. Эти сигнальные пути приводит к активации молочного белка промоторов генов 28 через активацию факторов транскрипции конкретного 29. Межклеточных контактов также важны для некоторых аспектов дифференцировки, включая создание верхушечного полярности и векторной секреции молочных продуктов. Плотные соединения быстро закрыть после начала лактации и MESCs мелко организовать поглощение молекул из крови, а также синтеза, транспорта и секреции молочных компонентов, в ответ на потребности в питании новорожденных. Во время сосания, сокращение миоэпителиальных клеток, окружающих альвеолы ​​происходит в ответ на окситоцина и приводит к выделению молока по протокам и в соске. Молоко представляет собой сложную жидкость, которая содержит белки (в основномказеин), сахара (в основном лактозы), липиды и минеральные вещества, а также биологически активные молекулы, такие как иммуноглобулины (IgA), факторов роста и гормонов. Казеины синтезируются, собраны в супрамолекулярных структур, а именно казеин мицеллы, транспортируемые вдоль секреторного пути, а затем выпущен экзоцитоза, то есть сплав казеина, содержащего секреторные везикулы (КА) с апикальной мембране мЭСК (рисунок 2). Внутриклеточного транспорта зависит от материальных обменов между мембранных отсеков и включает в себя Растворимый N-этилмалеимид-Чувствительный Fusion (NSF) Приложение белка (SNAP) рецепторов (SNARE) 30,31. Семья SNARE белки подразделяется на везикулярного SNAREs (V-ловушки), присутствующих в мембране везикул и целевых SNAREs (т-ловушки), локализованные на целевых мембран. По сжать через их биспиральных доменов, V и Т-SNAREs собрать с образованием высокостабильный четыре спиралей комплекс, называют йе SNARE комплекс. Этот комплекс способствует сочетание двух противоположных липидного бислоя постепенно привести их в непосредственной близости 30,32. Впоследствии, Малый комплексы диссоциируют на NSF аденозинтрифосфатазы и его адаптер белка SNAP и малого белки возвращают обратно в купе происхождения 33. Интересно, что каждый белок SNARE преимущественно проживает в различных клеточных отсеках и малого спаривания может внести свой ​​вклад в специфичность внутриклеточных событий термоядерных 34. Предыдущие исследования показывают, что, по крайней мере Синаптосомальное-ассоциированный белок 23 (SNAP23) и везикул-ассоциированный мембранный белок 8 (VAMP8) и syntaxins (STX) -7 -12 и играют важную роль в казеина экзоцитоза 35,36. Эти белки были также обнаружены в ассоциации с липидной фракции молока, т.е. молоко жировых шариков (МФГС) 37. В настоящее время преобладает модель постулирует, что цитоплазматические капли липидов (CLDs) образуются в результате накопления нейтральной лipids (главным образом триглицериды и эфиры стеринов) и холестерин, полученный от материнской диете между двумя листовок эндоплазматическая сеть (ЭР) мембраны 38-41. Большие CLDs формируются, по крайней мере частично, путем слияния меньших CLDs во время транспортировки в апикальной стороне MESCs где они будут освобождены, как MFGS (1-10 мкм в диаметре) почкованием, будучи enwrapped по MESC апикальной мембране 40-42. Кормление грудью прекращается через щенки отнимают и MESCs постепенно умирают путем апоптоза, что приводит к регрессии ткани молочной железы обратно в пубертатном состоянии (рис 1B, инволюция). Иммунофлуоресценции (ИФ) является общим аналитическая лаборатория метод используется практически во всех аспектах биологии, и в научных исследованиях и в клинической диагностике. Если методы могут быть выполнены на срезах тканей (иммуногистохимия, IHC) или (иммуноцитохимия, ICC) Образцы клеток. Этот мощный подход основан на использовании fluorescent-меченые антитела, которые специфически связываются (прямо или косвенно) к интересующему антигену, таким образом позволяя визуализацию его распределение в тканях через флуоресцентной микроскопии. Флуоресцентных сигналов во многом зависит от качества и концентрации антител и надлежащей обработки образца. Простой непрямой иммунофлюоресценции (IIF) протокол представлен для обнаружения молочные продукты (казеин и МФГС) и белков, участвующих в секреции молочных продуктов (butyrophilin (btn1), Малый белки) на замороженных участках молочной железы мыши ткани (рисунок 3). Хотя этот протокол обеспечивает полный обзор IHC, начиная от сбора ткани для изображения после лечения, важно и дополнительных шагов, а также некоторых технических рекомендаций также представлены и обсуждены.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:756px;" width="755">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Dissection</td>
			<td style="width:155px;">Company</td>
			<td style="width:127px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:236px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Pins</td>
			<td style="width:155px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Ethanol</td>
			<td style="width:155px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Scissors</td>
			<td style="width:155px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Scalpel and adapted blades</td>
			<td style="width:155px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Ice</td>
			<td style="width:155px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Towel paper</td>
			<td style="width:155px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Tissue sample preparation</td>
			<td style="width:155px;">Company</td>
			<td style="width:127px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Phosphate Buffered Saline (pH7.4)</td>
			<td style="width:155px;">Sigma</td>
			<td>P-3813</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:239px;">Paraformaldehyde (PFA, 32% EM grade, 100 ml)</td>
			<td style="width:155px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>15714-S</td>
			<td>personnal protection equipment required WARNING: this product will expose you to Formaldehyde Gas, a chemical known to cause cancer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">OCT compound/Tissue Tek</td>
			<td style="width:155px;">Sakura</td>
			<td>4583</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sucrose (D-saccharose)</td>
			<td style="width:155px;">VWR</td>
			<td>27480.294</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Plastic molds</td>
			<td style="width:155px;">Dominique Dutscher</td>
			<td>39910</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Liquid nitrogen</td>
			<td style="width:155px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Cryostat/sample support</td>
			<td style="width:155px;">Leica&#160;</td>
			<td>CM3050S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Razor blades (SEC35)</td>
			<td style="width:155px;">Thermo Scientific</td>
			<td>152200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Slide box</td>
			<td style="width:155px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:239px;">Glass slides Superfrost/Superfrost Ultra Plus</td>
			<td style="width:155px;">Thermo Scientific</td>
			<td>10143560W90/1014356190</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Brushes</td>
			<td style="width:155px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">IHC</td>
			<td style="width:155px;">Company</td>
			<td style="width:127px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Super Pap Pen</td>
			<td style="width:155px;">Sigma</td>
			<td>Z377821-1EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Permanent marker (black)</td>
			<td style="width:155px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:239px;">50 mM NH4Cl in PBS</td>
			<td style="width:155px;">Sigma</td>
			<td>A-0171</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">0.1 M glycine in PBS</td>
			<td style="width:155px;">VWR</td>
			<td>24403.367</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:239px;">Antigen Retrieval solution: Tris 100 mM 5% urea pH9.6</td>
			<td style="width:155px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Heater (up to 100&#176;C)</td>
			<td style="width:155px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Bovine Serum Albumin (BSA)</td>
			<td style="width:155px;">Sigma</td>
			<td>A7906-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:239px;">Vectashield (anti-fading mounting medium) without DAPI/with DAPI</td>
			<td style="width:155px;">Vector Laboratories</td>
			<td>H-1000/H-1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:239px;">Glass coverslips 22x50mm (microscopy grade)</td>
			<td style="width:155px;">VWR</td>
			<td>CORN2980-225</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Nail polish</td>
			<td style="width:155px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Primary antibodies</td>
			<td style="width:155px;">Company</td>
			<td style="width:127px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="105">
			<td height="105" style="height:105px;width:239px;">Rabbit anti-mouse caseins (#7781; 1:50 dilution)</td>
			<td style="width:155px;">generously gifted by M.C. Neville (University of Colorado Health Sciences 
			Center, USA)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:239px;">Mouse anti-cytokeratin 8 (CK8, clone 1E8, 1:50 dilution)</td>
			<td style="width:155px;">Biolegend (Covance)</td>
			<td>MMS-162P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:239px;">Mouse anti-cytokeratin 14 (CK14, cloneLL002, 1:50 dilution)</td>
			<td style="width:155px;">Thermo Scientific</td>
			<td>MS-115-P0/P1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="126">
			<td height="126" style="height:126px;width:239px;">Rabbit anti-butyrophilin (1:300 dilution)</td>
			<td style="width:155px;">generously gifted by I.H. Mather (Department of Animal and Avian Sciences University of Maryland College Park, USA)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="105">
			<td height="105" style="height:105px;width:239px;">Rabbit anti-Stx6 (1:50 dilution)</td>
			<td style="width:155px;">generously gifted S. Tooze 
			(Cancer Research UK, London Research Institute, London, UK)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Rabbit anti-VAMP4 (1:50 dilution)</td>
			<td style="width:155px;">Abcam</td>
			<td>ab3348</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Secondary antibodies</td>
			<td style="width:155px;">Company</td>
			<td style="width:127px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:239px;">Rhodamine-conjugated goat anti-rabbit IgG (H + L) (1:300 dilution)</td>
			<td style="width:155px;">Jackson ImmunoResearch Laboratories</td>
			<td>111-025-003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Counterstains</td>
			<td style="width:155px;">Company</td>
			<td style="width:127px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:239px;">Bodipy 493/503</td>
			<td style="width:155px;">Life Technologies (Molecular Probes)</td>
			<td>D-3922</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:239px;">DAPI (4-6-diamidino-2-phenylindole)</td>
			<td style="width:155px;">Life Technologies (Molecular Probes)</td>
			<td>D-1306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Observation/Image capture</td>
			<td style="width:155px;">Company</td>
			<td style="width:127px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="147">
			<td height="147" style="height:147px;width:239px;">conventional fluorescence microscope</td>
			<td style="width:155px;">Leica Leitz DMRB 
			microscope</td>
			<td></td>
			<td style="width:236px;">Standard filters for FITC, Rhodamine 
			and DAPI emissions,&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; &#215;63 oil-immersion objective (NA 1.3), DP50 imaging camera (Olympus), Cell&#710;F software (Olympus)</td>
		</tr>
		<tr height="147">
			<td height="147" style="height:147px;width:239px;">Laser Scanning Microscope (confocal microscopy)</td>
			<td style="width:155px;">Zeiss LSM 
			510 microscope</td>
			<td></td>
			<td style="width:236px;">Plan-Apochromat &#215;63 oil-immersion objective (NA 1.4),&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; CLSM 510 software,&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; Confocal facilities, MIMA2 Platform, INRA Jouy-en-Josas, France, http://mima2.jouy.inra.fr/mima2)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Image treatment</td>
			<td style="width:155px;">Company</td>
			<td style="width:127px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ImageJ 1.49k software</td>
			<td style="width:155px;"></td>
			<td></td>
			<td>Free software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

indirect immunofluorescence on frozen sections of mouse mammary gland

Непрямой иммунофлуоресценции используется для обнаружения и определения местоположения интерес белков в ткани. Протокол, представленные здесь описывает полное и простой способ для иммунной обнаружения белков, мышь лактирующих молочную железу, принимаемых в качестве примера. Протокол для подготовки образцов ткани, особенно в отношении рассечение молочной железы мыши, ткани фиксации и замороженной ткани срезов, подробно. Стандартный протокол для выполнения непрямой иммунофлюоресценции, в том числе дополнительного шага поиска антигена, также представлены. Наблюдение меченых срезов, а также получение изображений и пост-обработки также заявил. Эта процедура дает полный обзор, из коллекции тканей животных в клеточной локализации белка. Хотя это общий способ может быть применен к другим образцов ткани, она должна быть приспособлена к каждой ткани / первичным антителом пару изучены.

Молочная железа является подкожная железа, расположенная вдоль вентральной структуры как грудной клетки и брюшной полости у грызунов. Расположение пяти пар желез мыши во время беременности показано на рисунке 4. Морфология молочной железы резко меняется в своем разви?...

Watch this Scientific Journal Video about Indirect Immunofluorescence on Frozen Sections of Mouse Mammary Gland at JoVE.com

Indirect Immunofluorescence on Frozen Sections of Mouse Mammary Gland

Косвенным протокол иммунофлюоресценции описано в этой статье позволяет обнаруживать и локализовать белков в молочной железе мыши. Полный метод ее подготовки молочных желез образцы, для выполнения иммуногистохимии, чтобы изображение на срезах тканей с помощью флуоресцентной микроскопии, и, чтобы восстановить изображение.

Непрямой иммунофлюоресценции на замороженные Разделы молочной железы мыши

Indirect immunofluorescence is used to detect and locate proteins of interest in a tissue. The protocol presented here describes a complete and simple ...

Research

JoVE Journal

Biology

Immunohistochemistry on Paraffin Sections of Mouse Epidermis Using Fluorescent Antibodies

Иммуногистохимии на парафиновых срезах Мыши Эпидермис Использование флуоресцентных антител

In the epidermis, immunohistochemistry is an efficient means of localizing specific proteins to their relative expression compartment; namely the basal, ...

Mouse Mammary Epithelial Cells form Mammospheres During Lactogenic Differentiation

Мышь эпителиальных клеток молочной форме Mammospheres Во лактогенный Дифференциация

A phenotypic measure commonly used to determine the degree of lactogenic differentiation in mouse mammary epithelial cell cultures is the formation of ...

Mammary Epithelial Transplant Procedure

Молочные Эпителиальные Процедура трансплантации

This article describes and compares the fat pad clearance procedure developed by DeOme KB et al.1 and the sparing procedure developed by Brill B et al.2, ...

Changes in Mammary Gland Morphology and Breast Cancer Risk in Rats

Изменения в молочной железы Морфология и риск рака молочной железы у крыс

Studies in rodent models of breast cancer show that exposures to dietary/hormonal factors during the in utero and pubertal periods, when the mammary gland ...

Paraffin-Embedded and Frozen Sections of Drosophila Adult Muscles

Paraffin-Embedded and Frozen Sections of Drosophila Adult Muscles

Парафин и замороженные Разделы Drosophila Мышцы взрослых

The molecular characterization of muscular dystrophies and myopathies in humans has revealed the complexity of muscle disease and genetic analysis of ...

Isolation of Mouse Salivary Gland Stem Cells

Выделение мышью слюнных желез стволовых клеток

Mature salivary glands of both human and mouse origin comprise a minimum of five cell types, each of which facilitates the production and excretion of ...

Evaluation of Mammary Gland Development and Function in Mouse Models

Оценка молочной железы развития и функции в моделях мыши

The human mammary gland is composed of 15-20 lobes that secrete milk into a branching duct system opening at the nipple. Those lobes are themselves ...

Single Cell Transcriptional Profiling of Adult Mouse Cardiomyocytes

Single Cell транскрипции Профилирование взрослых кардиомиоцитов мышь

While numerous studies have examined gene expression changes from homogenates of heart tissue, this prevents studying the inherent stochastic variation ...

Intraductal Injection for Localized Drug Delivery to the Mouse Mammary Gland

Внутрипротоковый впрыска для локализованной доставки лекарств к молочной железы мыши

Herein we describe a protocol to deliver various reagents to the mouse mammary gland via intraductal injections. Localized drug delivery and knock-down of ...

Effect of Male Accessory Gland Products on Egg Laying in Gastropod Molluscs

Влияние Мужской аксессуар железы Продукты на откладки яиц в брюхоногих моллюсков

In internally fertilizing animals, seminal fluid is usually added to the spermatozoa, together forming the semen or ejaculate. Besides nourishing and ...