Hibridização in situ (WMISH) é uma técnica comum usada para visualizar a localização de RNAs expressos em embriões. Nesse processo, as sondas RNA produzidas sinteticamente são primeiro complementarmente ligadas, ou "hibridizadas", às transcrições dos genes-alvo. A imunohistoquímica ou fluorescência é então usada para detectar esses híbridos de RNA, revelando padrões espaciais e temporais de expressão genética. Ao contrário das técnicas tradicionais de hibridização in situ, que requerem seções de tecido fino cujas imagens precisarão ser remontadas computacionalmente, a técnica de montagem total permite que padrões de expressão genética sejam avaliados sobre todo o embrião ou estrutura.
Este vídeo introduzirá os conceitos básicos de coloração de montagem inteira e detalhar as principais etapas processuais, incluindo projeto e produção da sonda, fixação e coloração de embriões e detecção de sinal pós-hibridização. Os espectadores aprenderão sobre como os biólogos do desenvolvimento estão aplicando OMISH aos estudos atuais de pesquisa.
Hibridização in situ é uma técnica poderosa que permite aos cientistas entender a base molecular do desenvolvimento embrionário. "Montaria inteira" indica que todo o embrião será usado, não apenas uma fatia de tecido. " In situ" é uma frase em latim que significa "em posição". E, finalmente, "hibridização" refere-se à vinculação complementar de uma molécula de RNA produzida sinteticamente a uma transcrição mRNA dentro da célula de um organismo.
Este vídeo demonstrará o proc...
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