Name: development of an alpha-synuclein based rat model for parkinson's disease via stereotactic injection of a recombinant adeno-associated viral vector
Uploaded: 2016-02-28T16:00:00
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Les auteurs remercient Joris Van Asselberghs et Ann Van Santvoort pour leur excellente assistance technique. La recherche a été financée par l&#39;IWT-Vlaanderen (IWT SBO / 80020), le FWO Vlaanderen (G.0768.10), par le programme CE-FP6 &#39;DiMI&#39; (LSHB-CT-2005-512146), le projet FP7 MEFOPA RTD (SANTÉ -2009 à 241791), le programme FP7 &#39;inmind&#39; (SANTÉ-F2-2011-278850), la KU Leuven (IOF-KP / 07/001, OT / 08 / 052A, IMIR PF / 10/017), et le Fondation MJFox (validation Cible 2010). A. Van der Perren et C. Casteels sont un des boursiers postdoctoraux du Fonds flamand de la recherche scientifique. K. Van Laere est un compagnon clinique principal du Fonds flamand de la recherche scientifique.

Toutes les expériences sur les animaux sont effectuées conformément aux Communautés européennes Directive du Conseil du 24 Novembre 1986 (86/609 / CEE) et approuvés par le Comité de bioéthique de l&#39;Université de Louvain (Belgique). 1. AAV recombinant Production et purification Remarque: la production du vecteur rAAV et la purification a été effectuée par le Leuven vecteur viral de base (LVVC) comme décrit précédemment 17. <ol><li> En bref, transfecter subconfluent faible (...

<ol>
	<li>Magen, I., Chesselet, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+mouse+models+of+Parkinson's+disease+The+state+of+the+art.">Genetic mouse models of Parkinson's disease The state of the art.</a> Prog Brain Res. 183, 53-87 (2010).</li><li>Masliah, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dopaminergic+loss+and+inclusion+body+formation+in+alpha-synuclein+mice:+implications+for+neurodegenerative+disorders.">Dopaminergic loss and inclusion body formation in alpha-synuclein mice: implications for neurodegenerative disorders.</a> Science. 287, 1265-1269 (2000).</li><li>Freichel, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-dependent+cognitive+decline+and+amygdala+pathology+in+alpha-synuclein+transgenic+mice.">Age-dependent cognitive decline and amygdala pathology in alpha-synuclein transgenic mice.</a> Neurobiol Aging. 28, 1421-1435 (2007).</li><li>Fleming, S. M., Fernagut, P. O., Chesselet, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+mouse+models+of+parkinsonism:+strengths+and+limitations.">Genetic mouse models of parkinsonism: strengths and limitations.</a> NeuroRx. 2, 495-503 (2005).</li><li>Kahle, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+insolubility+of+alpha-synuclein+in+human+Lewy+body+diseases+is+recapitulated+in+a+transgenic+mouse+model.">Selective insolubility of alpha-synuclein in human Lewy body diseases is recapitulated in a transgenic mouse model.</a> Am J Pathol. 159, 2215-2225 (2001).</li><li>Chesselet, M. 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P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=rAAV-mediated+nigral+human+parkin+over-expression+partially+ameliorates+motor+deficits+via+enhanced+dopamine+neurotransmission+in+a+rat+model+of+Parkinson's+disease.">rAAV-mediated nigral human parkin over-expression partially ameliorates motor deficits via enhanced dopamine neurotransmission in a rat model of Parkinson's disease.</a> Exp Neurol. 207, 289-301 (2007).</li><li>Vercammen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parkin+protects+against+neurotoxicity+in+the+6-hydroxydopamine+rat+model+for+Parkinson's+disease.">Parkin protects against neurotoxicity in the 6-hydroxydopamine rat model for Parkinson's disease.</a> Mol Ther. 14, 716-723 (2006).</li><li>Winklhofer, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+parkin+protein+as+a+therapeutic+target+in+Parkinson's+disease.">The parkin protein as a therapeutic target in Parkinson's disease.</a> Expert opinion on therapeutic targets. 11, 1543-1552 (2007).</li><li>Kirik, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parkinson-like+neurodegeneration+induced+by+targeted+overexpression+of+alpha-synuclein+in+the+nigrostriatal+system.">Parkinson-like neurodegeneration induced by targeted overexpression of alpha-synuclein in the nigrostriatal system.</a> J Neurosci. 22, 2780-2791 (2002).</li><li>Kirik, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nigrostriatal+alpha-synucleinopathy+induced+by+viral+vector-mediated+overexpression+of+human+alpha-synuclein:+a+new+primate+model+of+Parkinson's+disease.">Nigrostriatal alpha-synucleinopathy induced by viral vector-mediated overexpression of human alpha-synuclein: a new primate model of Parkinson's disease.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100, 2884-2889 (2003).</li><li>Lauwers, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropathology+and+neurodegeneration+in+rodent+brain+induced+by+lentiviral+vector-mediated+overexpression+of+alpha-synuclein.">Neuropathology and neurodegeneration in rodent brain induced by lentiviral vector-mediated overexpression of alpha-synuclein.</a> Brain pathology. 13, 364-372 (2003).</li><li>Klein, R. L., King, M. A., Hamby, M. E., Meyer, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dopaminergic+cell+loss+induced+by+human+A30P+alpha-synuclein+gene+transfer+to+the+rat+substantia+nigra.">Dopaminergic cell loss induced by human A30P alpha-synuclein gene transfer to the rat substantia nigra.</a> Hum Gene Ther. 13, 605-612 (2002).</li><li>Vander Perren, A., Van den Haute, C., Baekelandt, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viral+Vector-Based+Models+of+Parkinson's+Disease.">Viral Vector-Based Models of Parkinson's Disease.</a> Curr Top Beh Neurosci. , (2014).</li><li>Van der Perren, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Longitudinal+follow-up+and+characterization+of+a+robust+rat+model+for+Parkinson's+disease+based+on+overexpression+of+alpha-synuclein+with+adeno-associated+viral+vectors.">Longitudinal follow-up and characterization of a robust rat model for Parkinson's disease based on overexpression of alpha-synuclein with adeno-associated viral vectors.</a> Neurobiol Aging. , (2014).</li><li>Van der Perren, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+and+stable+transduction+of+dopaminergic+neurons+in+rat+substantia+nigra+by+rAAV++2/1,+2/2,+2/5,+2/6.2,+2/7,+2/8+and+2/9.">Efficient and stable transduction of dopaminergic neurons in rat substantia nigra by rAAV 2/1, 2/2, 2/5, 2/6.2, 2/7, 2/8 and 2/9.</a> Gene Ther. , (2011).</li><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke,+cortical+ablation,+parkinsonism+and+spinal+cord+injury.">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39, 777-787 (2000).</li><li>Soueid, J., Nokkari, A., Makoukji, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Techniques+and+Methods+of+Animal+Brain+Surgery:+Perfusion,+Brain+Removal,+and+Histological+Techniques.+Brain+Neurotrauma:+Molecular,+Neuropsychological,+and+Rehabilitation+Aspects.">Techniques and Methods of Animal Brain Surgery: Perfusion, Brain Removal, and Histological Techniques. Brain Neurotrauma: Molecular, Neuropsychological, and Rehabilitation Aspects.</a> Frontiers in Neuroengineering. , (2015).</li><li>Dale, G. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationships+between+Lewy+bodies+and+pale+bodies+in+Parkinson's+disease.">Relationships between Lewy bodies and pale bodies in Parkinson's disease.</a> Acta Neuropathol. 83, 525-529 (1992).</li><li>Dawson, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurobiology+of+flies+and+mice.">Neurobiology of flies and mice.</a> Science. 288, 631-632 (2000).</li><li>Dawson, T., Mandir, A., Lee, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+PD:+pieces+of+the+same+puzzle?.">Animal models of PD: pieces of the same puzzle?.</a> Neuron. 35, 219-222 (2002).</li><li>LeVine, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+beta-sheet+amyloid+fibril+structures+with+thioflavin+T.">Quantification of beta-sheet amyloid fibril structures with thioflavin T.</a> Methods Enzymol. 309, 274-284 (1999).</li><li>Oliveras-Salva, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=rAAV2/7+vector-mediated+overexpression+of+alpha-synuclein+in+mouse+substantia+nigra+induces+protein+aggregation+and+progressive+dose-dependent+neurodegeneration.">rAAV2/7 vector-mediated overexpression of alpha-synuclein in mouse substantia nigra induces protein aggregation and progressive dose-dependent neurodegeneration.</a> Mol Neurodegener. 8, (2013).</li></ol>

Il y a plusieurs étapes critiques dans le protocole. Le titre du vecteur, ainsi que la pureté du vecteur influence directement le résultat phénotypique du modèle. Les titres de vecteur excessifs ou lots de vecteurs insuffisamment purifiés peuvent entraîner une toxicité non spécifique. Par conséquent, l&#39;utilisation de lots de vecteurs de haute qualité et des vecteurs de contrôle appropriés est indispensable. En outre, le positionnement exact de la tête du rat dans le cadre stéréotaxique et une déterm...

Pour étudier la physiopathologie de PD et de développer de nouvelles stratégies thérapeutiques, il y a un besoin urgent de modèles animaux qui ressemblent étroitement les symptômes neuropathologie, physiologie et moteur de PD humaine. La valeur prédictive plus élevée, mieux nous pouvons traduire de nouvelles thérapies de modèles animaux pour les patients. La découverte de l&#39;alpha-synucléine (α-SYN) comme premier gène PARK en 1997 a conduit au développement des premiers modèles pharmacodynamiques génétiques. Beaucoup de souris transgéniques surexprimant humain de type sauvage (WT) ou mutant (A30P, A53T) α-SYN ont été générés au cours de la dernière décennie. Les niveaux d&#39;α-SYN surexpression se sont révélés être crucial dans le développement de la pathologie. Aussi la souche de souris, la présence ou l&#39; absence de endogène α-SYN et si la longueur totale ou une forme tronquée est exprimée, joue un rôle (examen détaillé par Magen et Chesselet 1). La surexpression à la fois de type sauvage et des mutants de plusieurs cliniques humains et# 945; SYN chez des souris transgéniques induit l&#39; accumulation pathologique de α-SYN et un dysfonctionnement neuronal 2-6. Cependant, jusqu&#39;à ce que les modèles les plus maintenant transgéniques de souris α-SYN échoué à afficher une perte de cellules dopaminergiques claire et des déficits comportementaux dopamine-dépendante. Cet obstacle a été surmonté par le ciblage direct de la substantia nigra (SN) avec des vecteurs viraux surexprimant α-SYN. Les vecteurs viraux sont dérivés de virus qui peuvent infecter des cellules facilement, d&#39;introduire du matériel génétique dans leur génome hôte et la force de la cellule hôte de répliquer le génome viral afin de produire de nouvelles particules virales. Les virus peuvent être modifiés pour des vecteurs non répliquants viraux qui conservent leur capacité à pénétrer dans les cellules et introduire des gènes. En supprimant des parties du génome viral et de les remplacer par des gènes d&#39;intérêt, l&#39;application du vecteur résultera en une seule infection ronde sans se répliquer dans la cellule hôte, désigné comme «transduction». vecteurs viraux cun être utilisé pour les deux surexpression et le silençage génique. Le transgène exprimé peut être une protéine rapporteur (par exemple des protéines vert fluorescent ou la luciférase de luciole) 7, une protéine thérapeutique pour des applications de thérapie génique 8-10 ou, comme nous allons nous concentrer dans ce papier, une protéine liée à la maladie utilisé pour la modélisation de la maladie 11 -14. la livraison de gènes médiée par un vecteur viral constitue un autre moyen d&#39;exprimer des transgènes dans le SNC avec plusieurs avantages. Utilisation de la prestation de transgène locale, des régions cérébrales spécifiques peuvent être ciblés. En outre, l&#39;expression du transgène peut être induite à l&#39;âge adulte pour diminuer le risque de mécanismes de compensation au cours du développement. En outre, les modèles peuvent être créés en différentes espèces et souches. Et enfin, les différents transgènes peuvent facilement être combinés. En utilisant des vecteurs viraux, des niveaux élevés d&#39;expression du transgène peut être atteint, ce qui peut être crucial puisque l&#39;apparition et la gravité de la maladie dépendent souvent du niveau de OVEREXPression. Plusieurs systèmes de vecteurs à base de virus ont été développés. Le choix du système de vecteur dépend de la taille du gène d&#39;intérêt, la durée requise de l&#39;expression génique, la cellule cible et des problèmes de biosécurité. Pour un transfert de gène stable dans le cerveau, lentivirus (LV) et du virus adéno-associé recombinant (rAAV) des vecteurs sont maintenant considérés comme des systèmes de vecteurs de choix car ils conduisent à une expression de gène efficace et à long terme dans le cerveau des rongeurs. Pour le ciblage spécifique des neurones dopaminergiques (DN) de la SN, vecteurs rAAV ont progressivement surpassés vecteurs LV en raison de leurs titres plus élevés et l&#39;efficacité de transduction de DN. Les modèles de rongeurs à base meilleures α-SYN actuellement disponibles ont été élaborées à partir d&#39; une approche combinée en utilisant les nouveaux sérotypes d&#39;AAV (rAAV 1, 5, 6, 7, 8) et optimisé des constructions de vecteur, des titres, et la pureté 15,16. Le titre du vecteur, ainsi que la pureté du vecteur influence directementle résultat phénotypique du modèle. Les titres de vecteur excessifs ou lots de vecteurs insuffisamment purifiés peuvent entraîner une toxicité non spécifique. Par conséquent, les vecteurs de contrôle appropriés sont indispensables. investissement de temps considérable dans la production de vecteur, upscaling, et les procédures de purification virale ont également révélé essentiel pour obtenir des lots de vecteurs reproductibles et de qualité.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1484">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:391px;">Female 8 weeks old Wistar rats</td>
			<td style="width:227px;">Janvier</td>
			<td style="width:187px;">/</td>
			<td style="width:681px;">200-250 g</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Ketamine (Nimatek)</td>
			<td>Eurovet animal health</td>
			<td>804132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Medetomidine (Dormitor)</td>
			<td>Orion-Pharma/ Janssen Animal Health</td>
			<td>1070-499</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">&#160;Local anesthetic for scalp and ears: Xyloca&#239;ne 2% gel</td>
			<td>Astrazeneca</td>
			<td>0137-547</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Terramycine</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>0132-472</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Bupr&#233;norphine (Vetergesic)</td>
			<td>Ecuphar</td>
			<td>2623-627</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Jodium 1% isopropanol</td>
			<td>VWR</td>
			<td>0484-0100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">stereotactic head frame</td>
			<td>Stoeling</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Hamilton Syringe (30 gauge -20mm -pst 2)</td>
			<td>Hamilton/ Filter Service</td>
			<td>7803-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">atipamezole (Antisedan)</td>
			<td>Orion-Pharma/Elanco</td>
			<td>1300-185</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">rAAV A53T &#945;-SYN vector</td>
			<td>LVVC, KU Leuven</td>
			<td>/</td>
			<td>https://gbiomed.kuleuven.be/english/research/50000715/laboratory-of-molecular-virology-and-gene-therapy/lvvc/</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">sodium pentobarbital (Nembutal)</td>
			<td>Ceva Sant&#233;</td>
			<td>0059-444</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">microtome</td>
			<td>Microm</td>
			<td>HM650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">rabbit polyclonal synuclein Ab</td>
			<td>Chemicon</td>
			<td>5038</td>
			<td>1:5000</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">rabbit polyclonal TH Ab</td>
			<td>Chemicon</td>
			<td>152</td>
			<td>1:1000</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Lutetium oxyorthosilicate detector-based FOCUS 220 tomograph</td>
			<td>Siemens/ Concorde Microsystems</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">radioligand: 18F-FECT</td>
			<td>In house</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">L-dopa: Prolopa 125</td>
			<td>Roche</td>
			<td></td>
			<td>6mg/kg i.p.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">DMEM, Glutamax</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>N&#176; 31331-093</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Foetal bovine serum</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>N&#176; 10270-106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">25 kD linear polyethylenimine (PEI)</td>
			<td>Polysciences</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">OptiPrep Density Gradient Medium: Iodixanol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D1556-250ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Optimen</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>N&#176; 51985-026</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Paxinos 1 watston steretactic atlas, fourth Edition</td>
			<td>Elsevier</td>
			<td>/</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

development of an alpha-synuclein based rat model for parkinson's disease via stereotactic injection of a recombinant adeno-associated viral vector

Afin d&#39;étudier les voies moléculaires de la maladie de Parkinson (PD) et de développer de nouvelles stratégies thérapeutiques, les chercheurs scientifiques reposent sur des modèles animaux. L&#39;identification des gènes PD-associé a conduit à l&#39;élaboration de modèles PD génétiques. La plupart des modèles transgéniques de souris α-SYN développer progressivement la pathologie α-SYN, mais ne parviennent pas à afficher une perte de cellules dopaminergiques claire et des déficits comportementaux dopamine-dépendante. Cet obstacle a été surmonté par le ciblage direct de la substantia nigra avec des vecteurs viraux surexprimant les gènes PD-associés. la livraison de gènes local en utilisant des vecteurs viraux fournit un moyen attrayant pour exprimer des transgènes dans le système nerveux central. Des régions cérébrales spécifiques peuvent être ciblés (par exemple , le locus niger), l&#39; expression peut être induite dans le cadre des adultes et des niveaux d&#39;expression élevés peuvent être atteints. En outre, des systèmes de vecteurs différents en fonction de différents virus peuvent être utilisés. Le protocole décrit toutes les étapes cruciales pour effectuer un vecteur virall&#39;injection dans la substance noire de rat pour développer un modèle animal vecteur viral à base d&#39;alpha-synucléine dans la maladie de Parkinson.

Le schéma d&#39; ensemble de l&#39;expérience est représenté sur la figure 1 surexpression de rAAV 07/02 à médiation A53T α-SYN induit des déficits moteurs dopamine-dépendante. Pour examiner si le niveau d&#39;α-SYN surexpression est suffisante pour induire une déficience motrice chez les rats, nous avons soumis les rats à l&#39;épreuve du ...

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Development of an Alpha-synuclein Based Rat Model for Parkinson's Disease via Stereotactic Injection of a Recombinant Adeno-associated Viral Vector

Élaboration d&#39;un modèle de rat à base alpha-synucléine pour la maladie de Parkinson par injection stéréotaxique d&#39;un vecteur viral adéno-associé recombinant

This manuscript describes how viral vector-mediated local gene delivery provides an attractive way to express transgenes in the central nervous system. The protocol outlines all crucial steps to perform a viral vector injection in the substantia nigra of the rat to develop a viral vector-based animal model for Parkinson's disease.

In order to study the molecular pathways of Parkinson&#39;s disease (PD) and to develop novel therapeutic strategies, scientific investigators rely on ...

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Intraductal Injection of LPS as a Mouse Model of Mastitis: Signaling Visualized via an NF-ÃƒÅ½Ã‚ÂºB Reporter Transgenic

Injection intra-canalaire de LPS comme un modèle de souris de la mammite: signalisation visualisée via un transgénique NF-kB Reporter

Animal models of human disease are necessary in order to rigorously study stages of disease progression and associated mechanisms, and ultimately, as ...

A Possible Zebrafish Model of Polycystic Kidney Disease: Knockdown of wnt5a Causes Cysts in Zebrafish Kidneys

A Possible Zebrafish Model of Polycystic Kidney Disease: Knockdown of wnt5a Causes Cysts in Zebrafish Kidneys

Un modèle de poisson zèbre possible de la maladie polykystique des reins: Knockdown de<em&gt; Wnt5a</em&gt; Causes kystes chez le poisson zèbre reins

Polycystic kidney disease (PKD) is one of the most common causes of end-stage kidney disease, a devastating disease for which there is no cure. The ...

Using Adeno-associated Virus as a Tool to Study Retinal Barriers in Disease

Utilisant le virus adéno-associé comme un outil pour étudier les obstacles dans la maladie de la rétine

M&#252;ller cells are the principal glial cells of the retina. Their end-feet form the limits of the retina at the outer and inner limiting membranes ...

Intrarenal Injection of Escherichia coli in a Rat Model of Pyelonephritis

Intrarenal Injection of Escherichia coli in a Rat Model of Pyelonephritis

Injection Intrarénale de<em&gt; Escherichia coli</em&gt; Dans un modèle de rat de pyélonéphrite

Pyelonephritis is a bacterial infection of the kidney and is most commonly caused by Escherichia coli. Recurrent infections can cause significant renal ...

Development of a Direct Pulp-capping Model for the Evaluation of Pulpal Wound Healing and Reparative Dentin Formation in Mice

Élaboration d&#39;un modèle de coiffage pulpaire direct pour l&#39;évaluation des pulpaire Wound Healing et Formation reconstructrice Dentin chez la souris

Dental pulp is a vital organ of a tooth fully protected by enamel and dentin. When the pulp is exposed due to cariogenic or iatrogenic injuries, it is ...

Development of Recombinant Proteins to Treat Chronic Pain

Développement de protéines recombinantes pour traiter la douleur chronique

Chronic pain is difficult to treat and new approaches to resolve persistent pain are urgently needed. Anti-inflammatory cytokines are promising candidates ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Mesure de la contractilité isométrique de l’artère mésentérique de souris à l’aide de fil myographie

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...